南充地區(qū)女性高危型HPV感染及其導(dǎo)致的宮頸病變現(xiàn)狀分析

明春艷，黃開來，趙茂吉，趙 佳，王 嬌，杜利君

(川北醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院/南充市中心醫(yī)院1.檢驗(yàn)科；2.耳鼻咽喉科，四川 南充637000)

宮頸癌是常見的女性三大惡性腫瘤之一，其極高的病死率給全世界造成了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，尤其是低收入國(guó)家。據(jù)報(bào)道，全球每年死于宮頸癌者超過27萬，其中88%發(fā)生于發(fā)展中國(guó)家；據(jù)預(yù)測(cè)，到2030年這一比例將高達(dá)到98%[1,2]。人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)屬于乳頭瘤空泡病毒A屬，為小雙鏈DNA病毒[3]。大量研究報(bào)道高危型HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4)與宮頸癌前病變及宮頸癌有密切的聯(lián)系[4,5]，持續(xù)性感染HPV 5～10年可能會(huì)導(dǎo)致宮頸癌前病變的發(fā)生[6]。因此，開展HPV 篩查與隨訪對(duì)宮頸癌的防控具有重要意義。目前，針對(duì)高危型別HPV設(shè)計(jì)的預(yù)防性疫苗已在多個(gè)國(guó)家開展免疫計(jì)劃，可對(duì)HPV的感染起到一定的預(yù)防作用。我國(guó)已批準(zhǔn)三種疫苗上市：二價(jià)疫苗針對(duì)HPV16、18型；四價(jià)疫苗針對(duì)HPV16、18、6、11型；九價(jià)疫苗針對(duì)HPV6、11、16、18、31、33、45、52、58型[7]。目前國(guó)內(nèi)針對(duì)HPV病毒開展了部分區(qū)域性或系統(tǒng)性的流行病學(xué)研究，有學(xué)者認(rèn)為HPV感染存在地區(qū)亞型、種族和年齡分布的特異性[8]，這提示對(duì)于疫苗的實(shí)際應(yīng)用，應(yīng)考慮該地區(qū)HPV亞型及年齡因素。本研究旨在明確南充地區(qū)女性感染HPV的常見類型、感染率及其高發(fā)年齡段，為該地區(qū)宮頸癌的防控和HPV疫苗的預(yù)防接種工作提供理論依據(jù)和科學(xué)指導(dǎo)。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2018年1月至2020年5月在南充市中心醫(yī)院門診、健康體檢、住院部就診，進(jìn)行高危型HPV型別篩查的受試者為研究對(duì)象，共11 202例，所有研究對(duì)象均知情且同意。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者3天內(nèi)無用藥、性生活、陰道沖洗，并處于非月經(jīng)期及妊娠期。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1標(biāo)本采集及保存

消毒外陰后，以擴(kuò)陰器擴(kuò)張陰道，無菌棉球拭去過多的宮頸口分泌物后，輕柔旋轉(zhuǎn)5周宮頸取樣器刷，收集宮頸脫落細(xì)胞，然后立即將標(biāo)本放入專用保存液中，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 HPV分型檢測(cè)

DNA提取：取待測(cè)標(biāo)本1mL，采用高危型HPV分型核酸測(cè)定試劑盒(上海之江生物科技股份有限公司)對(duì)15種HPV亞型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、66、82)進(jìn)行檢測(cè)，DNA提取步驟遵照試劑盒(熒光PCR法)使用說明書進(jìn)行，同時(shí)加入陰性、陽性對(duì)照。

PCR擴(kuò)增：采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(SLAN-96P)，根據(jù)說明書，配制PCR mix及反應(yīng)體系(HPV核酸熒光PCR檢測(cè)混合液36μL，DNA標(biāo)本、陰性、陽性對(duì)照各4μL)，PCR反應(yīng)條件為94℃ 2min，93℃ 10s，62℃ 31s共40次循環(huán)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用WPS office 2020表格軟件對(duì)調(diào)查數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)(n)或百分率(%)表示，對(duì)HPV陽性檢出率、高危型HPV亞型分布、高危型HPV感染年齡分布、主要HPV感染亞型的年齡分布、HPV感染陽性宮頸癌及癌前病變情況進(jìn)行描述性研究。

2 結(jié)果

2.1 HPV陽性檢出率

研究共納入研究對(duì)象11 202例，年齡范圍為14～92歲，平均年齡(41.9±10.7)歲。其中，HPV陽性患者共2 248例，陽性檢出率為20.1%。陽性患者以HPV單一感染為主，共1 723例(76.6%)，其余依次為雙重感染404例(18.0%)、三重感染88例(3.9%)、四重感染22例(1.0%)和五重及以上感染11例(0.5%)。

2.2 高危型HPV亞型分布特點(diǎn)

在2 248例高危型HPV陽性感染者中，感染率前五位的亞型分別為52型(22.4%)、16型(13.6%)、58型(12.0%)、51型(8.8%)和39型(8.2%)。在單一感染和二重感染者中，感染率前五位的亞型同上所述；在三重及以上感染患者中，前五位的亞型分別為52型(15.5%)、16型(10.4%)、58型(10.2%)、56型(8.2%)、39型(7.5%)和51型(7.5%)，詳見表1?？梢姡瑔我慌c多重HPV感染患者中，前五位感染亞型基本相同，即52型、16型、58型、51型和39型；此外，三重及以上感染患者中HPV 56型也較多見。

表1 HPV亞型在單一及多重感染患者中的分布情況[n(%)]

2.3 高危型HPV感染的年齡分布特點(diǎn)

根據(jù)研究對(duì)象的年齡分布情況，將其分為<20歲、20～29歲、30～39歲、40～49歲、50～59歲和≥60歲6個(gè)年齡段。研究發(fā)現(xiàn)，陽性檢出率最高的年齡段為≥60歲(30.6%)，其次為<20歲(23.3%)和50～59歲(22.0%)。此外，≥60歲者三重及以上感染率明顯高于年齡較低者，詳見表2。

表2 不同年齡段HPV感染分布情況[n(%)]

2.4 主要HPV感染亞型的年齡分布特點(diǎn)

感染前五位的各HPV亞型在不同年齡段的分布情況如表3所示，可見40～49歲年齡組的婦女各HPV主要亞型的感染率明顯高于其他年齡組。

表3 HPV52、16、58、51、39亞型在各年齡階段的分布情況(%)

2.5 HPV感染陽性宮頸癌及癌前病變隨訪

本研究對(duì)2 248例陽性患者展開了為期近三年的隨訪(2018年1月至2020年12月)，追蹤其宮頸癌及癌前病變的發(fā)病情況，發(fā)現(xiàn)陽性患者中有162例被確診為宮頸癌及癌前病變：宮頸癌60例，宮頸上皮肉瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅲ27例，CINⅡ-Ⅲ39例，CINⅡ30例，CINⅠ6例。確診者以單一HPV感染為主(121例，74.7%)，其次為雙重感染(33例，20.4%)和三重感染及以上(8例，4.9%)；確診者的年齡分布以40～49歲為主(64例，39.5%)，其次為50～59歲(45例，27.8%)、≥60歲(30例，18.5%)、30～39歲(21例，13.0%)、20～29歲者(2例，1.2%)，<20歲無確診。確診者的HPV感染亞型主要為16型(82例，50.6%)，其次為58型(37例，22.8%)和52型(32例，19.8%)，其余亞型均不超過11例(6.8%)。

3 討論

3.1 HPV感染率比較

不同地區(qū)和人群的HPV感染率有所不同，據(jù)報(bào)道感染率范圍為1.4%～30.6%，如上海地區(qū)為23.43%[9]，山東地區(qū)為29.38%[10]，陜西地區(qū)為28.84%[11]。本研究分析了南充地區(qū)共11 202例受試者，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)HPV陽性患者2 248例，陽性檢出率為20.1%，基本與我國(guó)南部地區(qū)人群高危型HPV感染率21.12%持平[12]。對(duì)比既往研究，趙佳等人[13]針對(duì)南充地區(qū)3 762例門診及體檢患者的HPV檢出率報(bào)道為17.5%；鄧健康等人[14]發(fā)現(xiàn)川東北四個(gè)地區(qū)1 193例生殖道感染患者的HPV感染率為49.12%。這可能與研究者所選取的研究對(duì)象類型不同有關(guān)，趙佳只選取了門診及體檢的患者，而鄧健康選取了有生殖道感染的患者。本研究選取了門診、住院及體檢的受試者為研究對(duì)象，代表了不同年齡段、不同健康與疾病狀態(tài)的人群，從而更真實(shí)地反映地方性HPV的感染率。關(guān)于感染類型，本研究發(fā)現(xiàn)HPV感染主要為單一感染，與大多數(shù)地區(qū)的研究發(fā)現(xiàn)較一致，但也有部分地區(qū)以多重感染為主，如新疆庫爾勒地區(qū)[15]，這反映了HPV感染可能存在一定的種族和地域差異。

3.2 HPV主要感染亞型比較

本研究顯示，南充地區(qū)感染HPV前五位的亞型分別是52、16、58、51和39型?；仡櫧迥甑南嚓P(guān)研究，趙佳等人[13]認(rèn)為南充地區(qū)的主要HPV感染亞型為52、58、16、51和39型；吳海燕等人[16]發(fā)現(xiàn)成都地區(qū)HPV感染以52、58、16、53型為主；楊惠霞等人[17]發(fā)現(xiàn)北京HPV16、52、58、51和66型感染較多見。關(guān)于五年以前的相關(guān)研究，鄧健康[14]等人發(fā)現(xiàn)川東北地區(qū)HPV16亞型感染率較高；Steinau及Peng等人[18-19]的研究表明全世界范圍以HPV16、18型為主；李峰[20]報(bào)道福州地區(qū)以HPV16、18、31型感染為主。由此可見，HPV主要感染亞型隨時(shí)間發(fā)生了一定變化，同時(shí)呈現(xiàn)出一定的地域特征，這反映了動(dòng)態(tài)性研究地域HPV感染的重要性。

3.3 HPV感染高發(fā)年齡比較

本研究發(fā)現(xiàn)HPV感染的高發(fā)年齡段為≥60歲和<20歲，與裴蘊(yùn)鋒等人[21]報(bào)道的HPV感染率隨年齡呈“V”型分布較為一致。但不同地區(qū)的研究報(bào)道也有所不同：鄧健康等人[14]發(fā)現(xiàn)川東北地區(qū)HPV高危型感染人群中41～50歲占比最高；Qian等人[22]發(fā)現(xiàn)HPV感染在20～24歲人群多見，而Holt等人[23]則發(fā)現(xiàn)40～49歲HPV感染率較高。

3.4 本市HPV感染防控重點(diǎn)

本研究顯示，南充地區(qū)HPV陽性感染的高發(fā)年齡段為≥60歲和<20歲，而主要感染亞型的高發(fā)年齡段為40～49歲，提示本市HPV感染的重點(diǎn)防控工作需要兼顧總陽性感染及主要感染亞型的高發(fā)年齡段；另一方面，主要感染亞型的結(jié)果將為本市宮頸癌疫苗種類的選取提供一定的指導(dǎo)作用。

有研究認(rèn)為，HPV感染到發(fā)展為宮頸癌約需要10年時(shí)間[13]。本研究在探究HPV感染率的同時(shí)，隨訪了2 248例陽性患者近三年來宮頸癌及癌前病變的發(fā)病情況，發(fā)現(xiàn)有7.2%的HPV陽性感染者被確診為宮頸癌及癌前病變，一定程度上說明本市婦女對(duì)HPV感染危害的認(rèn)知和重視程度不夠，部分患者出現(xiàn)了癥狀才就醫(yī)，此時(shí)宮頸可能已出現(xiàn)不同程度的病變。本市確診為宮頸癌及癌前病變的患者主要分布在≥40歲人群，尤以40～49歲者居多，這與HPV主要感染亞型的高發(fā)年齡段結(jié)果相一致。既往研究表明，75.6%的宮頸癌是由高危型HPV16亞型持續(xù)性感染引起的，且HPV16、18、52及58型對(duì)中國(guó)女性有特異性致癌作用[24-25]。本研究發(fā)現(xiàn)，南充地區(qū)確診宮頸癌及癌前病變的主要HPV感染亞型為16、58和52型，為加強(qiáng)本市高危HPV亞型感染的防控工作提供了理論指導(dǎo)和依據(jù)。