邁瑞CAL-8000 血細(xì)胞分析流水線的性能驗(yàn)證

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南京市職業(yè)病防治院 （江蘇南京 210042）

自動(dòng)化流水線是近年來(lái)臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)涌現(xiàn)的新技術(shù)，其應(yīng)用極大地提高了檢驗(yàn)工作的效率與質(zhì)量。為了保證檢驗(yàn)儀器正常、準(zhǔn)確地出具檢驗(yàn)報(bào)告，除需定期對(duì)檢驗(yàn)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)外，針對(duì)以下情況，還需對(duì)儀器進(jìn)行性能驗(yàn)證[1]：（1）使用新的檢測(cè)試劑或系統(tǒng)；（2）更換檢測(cè)試劑或系統(tǒng)；（3）檢測(cè)試劑或系統(tǒng)出現(xiàn)重大改變，如儀器故障維修后、試劑制備用原材料來(lái)源改變等。本實(shí)驗(yàn)室于2020年12月新引進(jìn)了一臺(tái)深圳邁瑞CAL-8000血細(xì)胞分析流水線，為保證出具檢驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與可信性，現(xiàn)依照原中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒發(fā)的WS/T 406-2012《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)流水線中BC-6800Plus1（以下簡(jiǎn)稱P1）和BC-6800Plus2（以下簡(jiǎn)稱P2）兩臺(tái)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的本底計(jì)數(shù)、攜帶污染率、批內(nèi)精密度、日間精密度、線性范圍、正確度、不同吸樣模式的結(jié)果可比性、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果的可比性、參考區(qū)間9個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)內(nèi)容包括白細(xì)胞（white blood cell，WBC）、紅細(xì)胞（red blood cell，RBC）、血紅蛋白（hemoglobin，HGB）、血細(xì)胞比容（haematocrit，HCT）、血小板（platelet，PLT）、平均紅細(xì)胞體積（mean corpuscular volume，MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC），現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 樣本與試劑

取2021年1—2月本院患者的新鮮乙二胺四乙酸二鉀（ethylenediamine tetraacetic acid dipotassium salt，EDTA-K2）抗凝血及配套深圳邁瑞低、中值質(zhì)控物（批號(hào)：MB0121AL，MB0121AN）。

1.2 儀器與試劑

深圳邁瑞B(yǎng)C-6800Plus全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑DS稀釋液（批號(hào)：2020111204），M-68P DR稀釋液（批號(hào)：2020110904），M-68P LH溶血?jiǎng)ㄅ?hào)：2020110319），M-68P LN溶血?jiǎng)ㄅ?hào)：2020111814），M-68P LD溶血?jiǎng)ㄅ?hào)：2020110315），M-68P FN染色液（批號(hào)：2020120802），M-68P FD染色液（批號(hào)：2020120402），M-68P FR染色液（批號(hào)：2020120304）；日本SYSMEX XT-4000i血細(xì)胞分析儀及配套試劑PK-30L（批號(hào)：G0061），F(xiàn)FS-800A白細(xì)胞分類染色液（批號(hào)：A0020），SLS-220A血紅蛋白溶血素（批號(hào)：A0005），F(xiàn)FD-200A白細(xì)胞分類溶血素（批號(hào)：R0514），F(xiàn)BA-200A嗜堿性粒細(xì)胞溶血素（批號(hào)：R0506）；日本SYSMEX XT-4000i血細(xì)胞分析儀配套質(zhì)控物（批號(hào)：03270810，03270811）。

1.3 各項(xiàng)目的驗(yàn)證方法

1.3.1 本底計(jì)數(shù)

血細(xì)胞分析儀P1與P2正常開機(jī)進(jìn)行自動(dòng)沖洗維護(hù)后，以稀釋液作為空白樣本分別對(duì)P1與P2進(jìn)行連續(xù)3次的空白計(jì)數(shù)，3次結(jié)果的最大值不應(yīng)超過規(guī)定的判定標(biāo)準(zhǔn)，以此評(píng)價(jià)儀器開機(jī)的狀態(tài)是否可以正常進(jìn)行樣本檢測(cè)。

1.3.2 攜帶污染率

取高濃度血液樣本，混合均勻后采用手動(dòng)進(jìn)樣模式連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度血液樣本，混合均勻后采用手動(dòng)進(jìn)樣模式連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為L(zhǎng)1、L2、L3；按公式攜帶污染率（%）=（L1-L3）/（H3-L3）×100%計(jì)算攜帶污染率，要求各參數(shù)的攜帶污染率均在機(jī)型標(biāo)示的范圍內(nèi)（各參數(shù)的攜帶污染率均≤1.0%），若未達(dá)到要求，則不能繼續(xù)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，須售后服務(wù)工程師檢修合格后，方可重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3.3 批內(nèi)精密度

根據(jù)WS/T 406-2012文件，取低、中、高3個(gè)水平的新鮮血，連續(xù)重復(fù)測(cè)定11次，對(duì)后10次結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算變異系數(shù)（coefficient of variance，CV）。

1.3.4 日間精密度

分別對(duì)2021年1—2月P1和P2兩臺(tái)儀器的各20份低值質(zhì)控結(jié)果和中值質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行分析，以CV作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

1.3.5 線性范圍

取1份接近預(yù)期上限的高值全血樣本（H），分別按100%、80%、60%、40%、20%、10%的比例進(jìn)行稀釋，對(duì)每個(gè)稀釋度重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算平均值；將實(shí)測(cè)值與理論值作比較（偏離應(yīng)＜10%），得到y(tǒng)=ax+ b，驗(yàn)證線性范圍。

1.3.6 正確度

根據(jù)WS/T 406-2012文件，至少使用10份檢測(cè)結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的新鮮血樣本，對(duì)每份樣本重復(fù)檢測(cè)2次，計(jì)算20次及以上檢測(cè)結(jié)果的平均值，并以本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部規(guī)范操作檢測(cè)系統(tǒng)（使用配套試劑、用配套校準(zhǔn)物定期進(jìn)行儀器校準(zhǔn)、儀器性能良好、規(guī)范地開展室內(nèi)質(zhì)量控制、參加室間質(zhì)量評(píng)價(jià)成績(jī)優(yōu)良、檢測(cè)程序規(guī)范、人員經(jīng)過良好培訓(xùn)的檢測(cè)系統(tǒng)）SYSMEX XT-4000i 為靶機(jī)，所測(cè)定平均值為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算偏倚。

1.3.7 不同吸樣模式的結(jié)果可比性

取5份臨床樣本，分別以自動(dòng)全血模式和開放全血模式對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，即每份樣本均檢測(cè)2次，并分別計(jì)算兩種模式下檢測(cè)結(jié)果平均值間的相對(duì)偏差。

1.3.8 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果的可比性

準(zhǔn)備20份新鮮血樣本，濃度應(yīng)符合WS/T 406-2012規(guī)定，并確保整個(gè)實(shí)驗(yàn)在樣本老化前完成；在基準(zhǔn)儀器和比對(duì)儀器上對(duì)以上樣本進(jìn)行檢測(cè)，以基準(zhǔn)儀器的測(cè)定結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算相對(duì)偏差，每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的相對(duì)偏差符合要求的比例為≥80%。

1.3.9 參考區(qū)間

分別收集20份健康男性和20份健康女性的樣本，連續(xù)上機(jī)進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定后所有參數(shù)中超出參考區(qū)間范圍的個(gè)數(shù)應(yīng)不超過2個(gè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用Microsoft Office Excel 2007對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。

2 結(jié)果

2.1 本底計(jì)數(shù)

兩臺(tái)儀器各參數(shù)的本底計(jì)數(shù)均在判定標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，滿足判定標(biāo)準(zhǔn)，見表1。

表1 本底計(jì)數(shù)驗(yàn)證結(jié)果

2.2 批內(nèi)精密度

兩臺(tái)儀器各參數(shù)低、中、高值的CV均滿足判定標(biāo)準(zhǔn)，見表2。

表2 批內(nèi)精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.3 攜帶污染率

兩臺(tái)儀器各參數(shù)的攜帶污染率均在機(jī)型規(guī)定的范圍內(nèi)，見表3。

表3 攜帶污染率驗(yàn)證結(jié)果

2.4 日間精密度

分別對(duì)兩臺(tái)儀器各20份的低值質(zhì)控結(jié)果和中值質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行記錄總結(jié)，發(fā)現(xiàn)其CV均在規(guī)定的范圍內(nèi)，見表4。

表4 日間精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.5 線性范圍

根據(jù)WS/T 406-2012規(guī)定，線性范圍驗(yàn)證中a應(yīng)在（1±0.05）范圍內(nèi)，r2應(yīng)≥0.950，本次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，P1和P2兩臺(tái)儀器的a及r2均在WS/T 406-2012規(guī)定的范圍內(nèi)，兩臺(tái)儀器的線性范圍驗(yàn)證通過，見表5。

表5 線性范圍驗(yàn)證結(jié)果

2.6 正確度

P1和P2兩臺(tái)儀器與靶機(jī)SYSMEX XT-4000i 的偏倚均在規(guī)定的范圍內(nèi)，驗(yàn)證參數(shù)均合格，見表6。范圍的樣本份數(shù)均在要求的≥80%范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格，見表8。

表6 正確度驗(yàn)證結(jié)果

表8 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果的可比性驗(yàn)證結(jié)果

2.7 不同吸樣模式的結(jié)果可比性

兩臺(tái)儀器不同模式下吸樣結(jié)果的相對(duì)偏差均在規(guī)定的范圍內(nèi)，驗(yàn)證合格，見表7。

表7 不同吸樣模式的結(jié)果可比性驗(yàn)證結(jié)果

2.8 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果的可比性

以SYSMEX XT-4000i 為基準(zhǔn)儀器測(cè)定20份樣本，計(jì)算P1和P2兩臺(tái)儀器與基準(zhǔn)儀器的相對(duì)偏差，各參數(shù)相對(duì)偏差所要求符合的范圍為：WBC ≤7.5%，RBC ≤3.0%，HGB ≤3.5%，HCT ≤3.5%，MCV ≤3.5%，MCH ≤3.5%，MCHC ≤3.5%，PLT ≤12.5%。本次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，符合相對(duì)偏差規(guī)定

2.9 參考區(qū)間

驗(yàn)證P1和P2兩臺(tái)儀器所有提供參考范圍的報(bào)告參數(shù)，發(fā)現(xiàn)所有參數(shù)中超出參考區(qū)間范圍的個(gè)數(shù)均不超過2個(gè)，驗(yàn)證通過，見表9。

表9 參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

3 討論

邁瑞B(yǎng)C-6800Plus 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀通過采用半導(dǎo)體激光散射結(jié)合熒光染色技術(shù)的多維分析技術(shù)（SF-Cube 2.0）[2]，以及白系WNB 和紅系ERP雙通道進(jìn)行檢測(cè)[3]，檢測(cè)速度可高達(dá)400次/h，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的SYSMEX XT-4000i 100次/h[4]，極大地提高了血細(xì)胞檢測(cè)的工作效率。在PLT 檢測(cè)方面，邁瑞B(yǎng)C-6800Plus 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀不僅可通過RET 通道解決EDTA 依賴性PLT 聚集帶來(lái)的假性PLT 減少，還可通過高效熒光染料、反射光抑制技術(shù)與硅光電信增管的結(jié)合，提高PLT 的分辨檢出率[5-6]，避免了RBC 碎片、小RBC、WBC碎片對(duì)PLT 結(jié)果的影響。有研究表明，邁瑞B(yǎng)C 系列血細(xì)胞分析儀在網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)方面，為貧血的分類提供了必要的臨床參考[7]。對(duì)于瘧原蟲的檢測(cè)，邁瑞B(yǎng)C 系列血細(xì)胞分析儀均優(yōu)于其他同類品牌，在瘧疾流行學(xué)調(diào)查中有較高的應(yīng)用價(jià)值[8-9]。在邁瑞B(yǎng)C 系列血細(xì)胞分析儀提供的散點(diǎn)圖與形態(tài)學(xué)信息界面，我們可直觀地看到異常細(xì)胞提示信息，在臨床血液病患者中有較高的應(yīng)用價(jià)值[10-11]。

通過本次性能驗(yàn)證，我們發(fā)現(xiàn)兩臺(tái)BC-6800Plus 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的本底計(jì)數(shù)（P1、P2的本底計(jì)數(shù)均為0）符合要求；攜帶污染率（P1、P2的攜帶污染率均低于要求的1.0%），符合要求；批內(nèi)精密度（各參數(shù)P1批內(nèi)CV% 0～2.93，P2批內(nèi)CV% 0.08～3.42）均滿足各參數(shù)的判定標(biāo)準(zhǔn)；日間精密度（各參數(shù)P1批間CV% 0.63～4.15，P2批間CV% 0.61～3.98）均滿足各參數(shù)的判定標(biāo)準(zhǔn)；線性范圍驗(yàn)證中各參數(shù)（WBC 中值、WBC 高值、RBC、HGB、HCT、PLT 中值、PLT 高值）的a均在規(guī)定的（1±0.05）范圍內(nèi)，r2均＞0.950，可報(bào)告范圍寬；正確度（各參數(shù)P1偏倚CV% -1.27～5.86，P2偏倚CV% -1.89～4.85）均在規(guī)定的偏倚范圍內(nèi)；自動(dòng)進(jìn)樣與開放進(jìn)樣結(jié)果的可比性（各參數(shù)P1相對(duì)偏差% 0.29～4.10，P2相對(duì)偏差% 0.12～2.40）均低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的相對(duì)偏差要求；實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果的可比性（P1、P2各參數(shù)滿足相對(duì)偏差要求的樣本份數(shù)為17～20）符合相對(duì)偏差規(guī)定范圍的樣本份數(shù)均在要求的≥80%范圍內(nèi)；兩臺(tái)儀器均滿足參考區(qū)間的R 為0.90～1.00，符合所要求的R ≥0.90?？傊黜?xiàng)結(jié)果均顯示兩臺(tái)儀器符合臨床應(yīng)用要求。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)室新引進(jìn)的邁瑞CAL-8000血細(xì)胞分析流水線的各項(xiàng)指標(biāo)均符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，在檢測(cè)速度與線性寬度等方面優(yōu)于文獻(xiàn)[12-15]報(bào)道的同類其他品牌，更好地保證了檢測(cè)質(zhì)量，滿足了臨床需求，同時(shí)縮短了檢測(cè)時(shí)間，提高了工作效率。