血清胰島素樣生長(zhǎng)因子1、白介素17、白介素23水平與新生兒缺氧缺血性腦病患兒疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后的關(guān)系研究

盧艷輝，劉振奎，王雅莉，高嬌嬌，曹燕玲，孫喜斌，王艷飛，郭衛(wèi)平

新生兒缺氧缺血性腦?。╤ypoxic ischemic encephalopathy，HIE）是由母胎或新生兒疾病等多種原因?qū)е碌男律鷥耗X組織缺血缺氧性損傷，其發(fā)病率約為0.86%，但致死率高達(dá)20%～25%；此外，治療后患兒可能存在神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，嚴(yán)重影響患兒的生長(zhǎng)發(fā)育［1-3］。目前，CT、MRI等影像學(xué)檢查對(duì)新生兒HIE的診斷和預(yù)后預(yù)測(cè)具有較高價(jià)值，但存在動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)困難、新生兒HIE早期臨床癥狀不明顯、漏診率高等局限性。既往研究表明，白介素（interleukin，IL）-17/IL-23炎癥軸與慢性阻塞性肺疾病繼發(fā)肺部感染、腦出血繼發(fā)性炎癥損傷有關(guān)［4-5］，但其與新生兒HIE的關(guān)系尚不清楚。本研究旨在探討血清胰島素樣生長(zhǎng)因子1（insulin-like growth factor 1，IGF-1）、IL-17、IL-23水平與新生兒HIE患兒疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2019年7月至2021年7月河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院兒內(nèi)科收治的新生兒HIE 87例作為研究對(duì)象，均符合新生兒HIE的診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］，參照改良的Sarnat標(biāo)準(zhǔn)判斷疾病嚴(yán)重程度，并將患兒分為輕-中度組（n=52）和重度組（n=35）；另選擇同期本院正常足月新生兒87例作為對(duì)照組。三組胎齡、性別、出生體質(zhì)量、體溫、心率及分娩方式比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。本研究經(jīng)河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)（批準(zhǔn)編號(hào)：W2022008），三組新生兒家屬均對(duì)本研究知情同意。1.2 新生兒HIE患兒的納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）足月單胎；（2）母親為初產(chǎn)婦，既往體健；（3）出生6 h內(nèi)經(jīng)CT及MRI檢查證實(shí)為新生兒HIE；（4）出生后60 min內(nèi)臍動(dòng)脈血pH值＜7，出生體質(zhì)量為2～4 kg；（5）出生后10 min Apgar評(píng)分≤5分。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）母親妊娠前存在宮內(nèi)感染、嚴(yán)重貧血、高危妊娠等情況；（2）伴有先天性腦部發(fā)育不良、膽紅素腦病、顱內(nèi)出血；（3）因持續(xù)性肺動(dòng)脈高壓、產(chǎn)傷等多種原因引起抽搐；（4）中途轉(zhuǎn)院。

表1 三組一般資料比較Table 1 Comparison of general data among the three groups

1.3 治療方法 參考《2018昆士蘭臨床指南：缺氧缺血性腦病》，所有患兒出生6 h內(nèi)給予吸氧、維持生命體征、糾正水電解質(zhì)紊亂等常規(guī)對(duì)癥支持治療及亞低溫治療，亞低溫治療措施具體如下：患兒平躺在紅外線輻射臺(tái)上，鼻咽部和肛門處放置溫度計(jì)，采用特制的冰帽裹住患兒頭部，使鼻咽部溫度為33 ℃，肛溫為34 ℃，低溫治療維持72 h［6］。治療結(jié)束后，通過(guò)紅外線輻射使體溫以0.5 ℃/h速度復(fù)溫，維持6 h。治療期間每小時(shí)監(jiān)測(cè)血壓、體溫、尿量，治療結(jié)束后行神經(jīng)系統(tǒng)檢査，臨床醫(yī)師可根據(jù)患兒具體情況使用奧拉西坦、單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉、胞二磷膽堿等常規(guī)藥物治療。

1.4 觀察指標(biāo) （1）血清IGF-1、IL-17、IL-23水平。所有患兒及正常足月新生兒于入組1 d內(nèi)空腹采血5 ml，3 000 r/min離心5 min（離心半徑為12.5 cm），留取血清，于-20 ℃冰箱中保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清IGF-1、IL-17、IL-23水平，均由醫(yī)院檢驗(yàn)科醫(yī)師嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。（2）預(yù)后情況。本研究將死亡、放棄治療后死亡定義為預(yù)后不良。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，兩組間比較采用成組t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以相對(duì)數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。新生兒HIE患兒血清IGF-1、IL-17、IL-23水平與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系采用Spearman秩相關(guān)分析；繪制ROC曲線以評(píng)價(jià)血清IGF-1、IL-17、IL-23水平及三者聯(lián)合對(duì)新生兒HIE患兒預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值，AUC比較采用Delong檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清IGF-1、IL-17、IL-23水平比較 三組血清IGF-1、IL-17、IL-23水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；輕-中度組和重度組血清IGF-1水平低于對(duì)照組，血清IL-17、IL-23水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；重度組血清IGF-1水平低于輕-中度組，血清IL-17、IL-23水平高于輕-中度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 三組血清IGF-1、IL-17、IL-23水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of IGF-1，IL-17 and IL-23 among the three groups

表2 三組血清IGF-1、IL-17、IL-23水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of IGF-1，IL-17 and IL-23 among the three groups

注：IGF-1=胰島素樣生長(zhǎng)因子1，IL=白介素；a表示與對(duì)照組比較，P＜0.05；b表示與輕-中度組比較，P＜0.05

組別 例數(shù) IGF-1（μg/L） IL-17（ng/L） IL-23（ng/L）對(duì)照組 87 73.17±10.65 36.85±5.37 29.05±5.71輕-中度組 52 41.66±7.13a 67.83±13.76a 56.87±10.13a重度組 35 21.05±4.69ab 107.85±23.91ab 103.85±23.03ab F值 507.954 351.828 462.821 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 新生兒HIE患兒血清IGF-1、IL-17、IL-23水平與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性 Spearman秩相關(guān)分析結(jié)果顯示，新生兒HIE患兒血清IGF-1水平與疾病嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)（rs=-0.572，P＜0.001），血清IL-17、IL-23水平與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（rs值分別為0.511、0.558，P值均＜0.05）。

2.3 不同預(yù)后患兒血清IGF-1、IL-17、IL-23水平比較87例患兒中，預(yù)后不良23例。預(yù)后良好患兒血清IGF-1水平高于預(yù)后不良患兒，血清IL-17、IL-23水平低于預(yù)后不良患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 不同預(yù)后患兒血清IGF-1、IL-17、IL-23水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum levels of IGF-1，IL-17 and IL-23 in children with different prognosis

表3 不同預(yù)后患兒血清IGF-1、IL-17、IL-23水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum levels of IGF-1，IL-17 and IL-23 in children with different prognosis

預(yù)后 例數(shù) IGF-1（μg/L） IL-17（ng/L） IL-23（ng/L）不良 23 18.75±5.19 125.67±21.33 110.75±21.80良好 64 40.83±8.53 73.38±12.65 60.06±8.59 t值 11.638 13.990 15.642 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.4 血清IGF-1、IL-17、IL-23水平及三者聯(lián)合對(duì)HIE患兒預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清IGF-1水平預(yù)測(cè)新生兒HIE患兒預(yù)后的AUC為0.785〔95%CI（0.715，0.943）〕，血清IL-17水平預(yù)測(cè)新生兒HIE患兒預(yù)后的AUC為0.655〔95%CI（0.513，0.794）〕，血清IL-23水平預(yù)測(cè)新生兒HIE患兒預(yù)后的AUC為0.710〔95%CI（0.583，0.857）〕，三者聯(lián)合預(yù)測(cè)新生兒HIE患兒預(yù)后的AUC為0.895〔95%CI（0.835，0.971）〕。三者聯(lián)合預(yù)測(cè)新生兒HIE患兒預(yù)后的AUC分別大于血清IGF-1、IL-17、IL-23水平單獨(dú)預(yù)測(cè)新生兒HIE患兒預(yù)后的AUC，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z值分別為-2.377、-2.478、-2.421，P值均＜0.05），見(jiàn)表4、圖1。

表4 血清IGF-1、IL-17、IL-23水平及三者聯(lián)合對(duì)新生兒HIE患兒預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值Table 4 Value of serum IGF-1，IL-17，IL-23 levels and their combination in predicting prognosis of children with neonatal HIE

圖1 血清IGF-1、IL-17、IL-23水平及三者聯(lián)合預(yù)測(cè)HIE患兒預(yù)后的ROC曲線Figure 1 ROC curve of serum levels of IGF-1，IL-17，IL-23 and their combination for predicting the prognosis of children with neonatal HIE

3 討論

新生兒HIE致病機(jī)制復(fù)雜，可能與再灌注損傷、細(xì)胞能量代謝、神經(jīng)元壞死或凋亡、血流動(dòng)力學(xué)改變、膠質(zhì)細(xì)胞激活有關(guān)，嚴(yán)重者甚至導(dǎo)致患兒死亡［7］。現(xiàn)有研究表明，促炎因子是導(dǎo)致HIE患兒神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要途徑，缺血腦組織可激活小膠質(zhì)細(xì)胞，促進(jìn)腫瘤壞死因子、IL-6等多種炎性因子分泌，進(jìn)一步損傷受損的神經(jīng)元，造成不可逆轉(zhuǎn)的神經(jīng)損傷，進(jìn)而對(duì)患兒預(yù)后產(chǎn)生不良影響［8-9］。因此，早期干預(yù)新生兒HIE對(duì)減少其神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥具有重要意義。

IGF-1是一種有4個(gè)結(jié)構(gòu)域的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，可調(diào)控機(jī)體糖原和蛋白質(zhì)合成、脂質(zhì)分解、細(xì)胞增殖等多種生理功能，其通過(guò)特定的受體轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及信號(hào)通路而促進(jìn)相關(guān)神經(jīng)蛋白酶表達(dá)，使神經(jīng)元增殖，激活星形膠質(zhì)細(xì)胞，抑制興奮性氨基酸神經(jīng)毒性，進(jìn)而起到修復(fù)受損神經(jīng)元的作用；同時(shí)，其還能調(diào)節(jié)腦血流量，促進(jìn)缺血壞死腦組織血管新生，具有神經(jīng)保護(hù)作用［10-12］。本研究結(jié)果顯示，輕-中度組和重度組血清IGF-1水平低于對(duì)照組，重度組血清IGF-1水平高于輕-中度組；且新生兒HIE患兒血清IGF-1水平與疾病嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)。分析其原因可能為：新生兒HIE疾病嚴(yán)重程度越重，則患兒腦組織損傷越嚴(yán)重，機(jī)體在應(yīng)激狀態(tài)下促使IGF-1聚集到受損腦組織并進(jìn)行積極修復(fù)，進(jìn)而使血清IGF-1水平下降。

研究表明，IL-23/IL-17炎癥軸在腦出血、腦梗死及多重耐藥感染患者中呈高表達(dá)，其能反映疾病感染狀態(tài)及轉(zhuǎn)歸情況［13-14］。IL-17是輔助性T細(xì)胞17（T helper cell 17，Th17）分泌的炎癥微調(diào)因子，可促進(jìn)中性粒細(xì)胞成熟，激活下游炎癥因子共同參與HIE的發(fā)生、發(fā)展［15］；其可反映腦膠質(zhì)瘤、急性腦梗死等腦損傷患者的炎癥狀態(tài)，是部分腦損傷患者早期診斷和預(yù)后預(yù)測(cè)的有效指標(biāo)［16-17］。IL-23能促使Th17分泌IL-17，形成免疫級(jí)聯(lián)效應(yīng)，與IL-17一同加劇新生兒HIE患兒缺血腦組織炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致患兒神經(jīng)系統(tǒng)損傷加重［18-19］。本研究結(jié)果顯示，輕-中度組和重度組血清IL-17、IL-23水平高于對(duì)照組，重度組血清IL-17、IL-23水平高于輕-中度組；且新生兒HIE患兒血清IL-17、IL-23水平與疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)；表明血清IL-17、IL-23水平越高則新生兒HIE患兒疾病嚴(yán)重程度越重，可能原因?yàn)椋耗X組織缺血缺氧破壞了血-腦脊液屏障，使小膠質(zhì)細(xì)胞外溢，促使Th17、中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞進(jìn)入缺血腦組織，釋放更多的IL-17，同時(shí)IL-23表達(dá)增高，協(xié)同IL-17進(jìn)一步加劇患兒炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致神經(jīng)元進(jìn)一步凋亡，進(jìn)而加重患兒病情。

本研究患兒經(jīng)積極治療后仍有23例（占26.4%）預(yù)后不良，與李花等［20］（21.8%）、王俊姬等［21］（25.0%）研究結(jié)果相似，表明新生兒HIE患兒死亡風(fēng)險(xiǎn)較高。本研究結(jié)果顯示，預(yù)后良好患兒血清IGF-1水平高于預(yù)后不良患兒，血清IL-17、IL-23水平低于預(yù)后不良患兒，且三者聯(lián)合預(yù)測(cè)新生兒HIE患兒預(yù)后的AUC分別大于血清IGF-1、IL-17、IL-23水平單獨(dú)預(yù)測(cè)新生兒HIE患兒預(yù)后的AUC，表明三者聯(lián)合對(duì)新生兒HIE患兒預(yù)后具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值，且IL-23/IL-17炎癥軸可能成為新生兒HIE的治療靶點(diǎn)。

綜上所述，血清IGF-1水平與新生兒HIE患兒疾病嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，血清IL-17、IL-23水平與新生兒HIE患兒疾病嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，且三者聯(lián)合對(duì)新生兒HIE患兒預(yù)后具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。

作者貢獻(xiàn)：盧艷輝進(jìn)行文章的構(gòu)思與設(shè)計(jì)，論文的撰寫與修訂；劉振奎進(jìn)行研究的實(shí)施與可行性分析，負(fù)責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校；高嬌嬌、曹燕玲、孫喜斌、郭衛(wèi)平進(jìn)行資料收集；王雅莉、王艷飛進(jìn)行資料整理、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理；盧艷輝、劉振奎對(duì)文章整體負(fù)責(zé)、監(jiān)督管理。

本文無(wú)利益沖突。