抗核抗體，抗CCP抗體和RF聯(lián)合檢查對類風濕關(guān)節(jié)炎診斷價值研究

李建軍

(濮陽市油田總醫(yī)院 醫(yī)學檢驗科，河南 濮陽 457001)

類風濕關(guān)節(jié)炎屬于風濕免疫科常見疾病，以女性患者多見，好發(fā)于40～60歲，是一種以炎性滑膜炎為典型的特征的慢性系統(tǒng)性疾病，其具體病因尚未有統(tǒng)一定論，患病者在癥狀表現(xiàn)上多以手部和足部小關(guān)節(jié)出現(xiàn)多關(guān)節(jié)、對稱性、侵襲性關(guān)節(jié)炎癥，部分患者甚至會累及關(guān)節(jié)外器官，導致關(guān)節(jié)畸形或者活動功能受限，嚴重影響患者的生活質(zhì)量，危及其身體健康，因此早期診斷和治療對改善患者預后意義重大。既往臨床對于類風濕關(guān)節(jié)炎患者的診斷主要以患者的臨床表現(xiàn)、X線片的改變以及血清類風濕因子(RF)陽性為依據(jù)，而隨著臨床研究的深入，在2012年抗環(huán)瓜氨酸肽(CCP)抗體被納入類風濕關(guān)節(jié)炎患者的診斷標準，進一步提高臨床診斷的特異性和敏感性。而經(jīng)臨床研究發(fā)現(xiàn)，類風濕關(guān)節(jié)炎作為一種自身免疫性疾病，患者機體內(nèi)除RF外同樣存在其他多種自身抗體，如抗核抗體(ANA)，該抗體一直被視為類風濕關(guān)節(jié)炎患者早期即可出現(xiàn)特異性抗體。然而，隨著臨床研究的深入，逐漸有專家學者發(fā)現(xiàn)，RF、抗CCP抗體和ANA在除類風濕關(guān)節(jié)炎外的其他自身免疫性疾病中也存在不同程度的陽性率，對于三項指標在類風濕關(guān)節(jié)炎患者的診斷價值始終存在爭議?；诖?，本研究回顧性分析2019年2月至2021年6月間41例類風濕關(guān)節(jié)炎患者、36例非類風濕關(guān)節(jié)炎患者和35例健康體檢的臨床資料，比較三項指標在三類受檢者中的陽性檢出結(jié)果，分析RF、抗CCP抗體和ANA三項指標單獨和聯(lián)合檢測在類風濕關(guān)節(jié)炎患者診斷中的靈敏度和特異度，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析濮陽市油田總醫(yī)院于2019年2月至2021年6月收治的41例類風濕關(guān)節(jié)炎患者的臨床資料，符合《2018中國類風濕關(guān)節(jié)炎診療指南》診斷標準，將其納入觀察1組，組內(nèi)男性11例、女性30例，年齡范圍38～61歲、平均(52.64±5.72)歲，病程3個月～12年、平均(6.04±1.53)年，體重指數(shù)18.5～25.4 kg/m、平均(23.07±0.54) kg/m；另外選擇同時期于本院就診36例非類風濕關(guān)節(jié)炎患者為研究對象，均為非類風濕關(guān)節(jié)炎的自身免疫性疾病患者，納入觀察2組，組內(nèi)男性10例、女性26例，年齡35～62歲、平均(52.85±5.64)歲，體重指數(shù)18.2～25.1 kg/m、平均(22.98±0.61) kg/m，其中系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者5例、干燥綜合征患者7例、混合性結(jié)締組織病患者8例、強直性脊柱炎16例，所有患者的臨床診斷均經(jīng)相關(guān)檢查證實。同時選取35名同時間在本院進行健康體檢，并排除自身免疫性疾病的受檢者進行對照研究，將其納入對照組，組內(nèi)男性9例、女性26例，年齡35～60歲、平均(53.04±5.70)歲，體重指數(shù)18.4～25.2 kg/m、平均(23.01±0.58) kg/m。三組受檢者均排除惡性腫瘤、心腦血管疾病和肝腎功能障礙等疾病，女性患者均排除妊娠期和哺乳期；三組性別、年齡和體重指數(shù)等基礎(chǔ)資料經(jīng)對比提示＞0.05，有分組比較價值。

1.2 方法

所有受檢者均于清晨空腹狀態(tài)下采集靜脈血液5mL，采用賽默飛世爾Thermo高速冷凍離心機 Centrifuge(國械備20161996號；型號：Fresco 21)以每分鐘3 000轉(zhuǎn)的速度離心6 min，分離出血清后置于-20℃的環(huán)境中保存待檢，其中抗CCP抗體的測定采用化學放光法，RF的測定采用速率散射比濁法，ANA的測定采用免疫熒光法；設(shè)備選用雅培C16200全自動生化發(fā)光分析系統(tǒng)。抗-CCP和RF檢測試劑盒均由了美國雅培公司提供，ANA試劑由德國歐蒙生物工程有限公司提供，所有操作均嚴格遵守試劑和設(shè)備操作說明。

1.3 觀察指標

①比較三組三項指標的陽性檢出結(jié)果，其中抗CCP抗體測定結(jié)果以≥5 U/mL為陽性；ANA測定結(jié)果以ANA滴度≥1∶100為陽性；RF測定結(jié)果以≥15 U/mL為陽性。②比較三項指標單獨檢測和聯(lián)合檢測在類風濕關(guān)節(jié)炎患者中陽性結(jié)果，其中聯(lián)合檢測以上述三項指標均為陽性代表聯(lián)合檢測結(jié)果為陽性，若有一項指標檢測結(jié)果為陰性，即代表聯(lián)合檢測結(jié)果為陰性。③采用受試者工作特征曲線(ROC)的線下面積(AUC)評估三項指標單獨和聯(lián)合檢測在類風濕關(guān)節(jié)炎患者中診斷效能，具體包括靈敏度和特異度。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結(jié) 果

2.1 三組患者三項指標陽性檢出結(jié)果比較

對照組ANA檢測陽性率5.71%、抗CCP抗體陽性率2.86%、RF陽性率14.29%；觀察1組ANA檢測陽性率78.05%、抗CCP抗體檢測陽性率85.37%、RF檢測陽性率90.24%；觀察2組ANA檢測陽性率22.22%、抗CCP抗體檢測陽性率19.44%、RF檢測陽性率36.11%，；觀察1組三項指標陽性檢出率均高于對照組和觀察2組，觀察2組三項指標陽性檢出率高于對照組(＜0.05)。見表1。

表1 三組患者三項指標陽性檢出結(jié)果比較[n(%)]

2.2 觀察1組三項指標單獨和聯(lián)合檢測結(jié)果比較

觀察1組ANA檢測陽性率78.05%、抗CCP抗體檢測陽性率85.37%、RF檢測陽性率90.24%、三項指標聯(lián)合檢測陽性率92.68%，四種檢測方式陽性率對比無明顯差異(＞0.05)，見表2。

表2 觀察1組三項指標單獨和聯(lián)合檢測結(jié)果比較[n(%)]

2.3 三項指標單獨檢測和聯(lián)合檢測診斷效能

ANA診斷類風濕關(guān)節(jié)炎的靈敏度75.69%、特異度70.64%、AUC為0.795，抗CCP抗體檢測診斷類風濕關(guān)節(jié)炎的靈敏度76.55%、特異度80.26%、AUC為0.804，RF檢測診斷類風濕關(guān)節(jié)炎的靈敏度70.36%、特異度64.28%、AUC為0.899，三項指標聯(lián)合檢測診斷類風濕關(guān)節(jié)炎的靈敏度89.98%、特異度92.42%、AUC為0.723；聯(lián)合檢測的靈敏度和特異度均高于三項指標單獨檢測的靈敏度和特異度(＜0.05)，詳情表3，ROC曲線見圖1。

圖1 三項指標單獨檢測和聯(lián)合檢測診斷類風濕關(guān)節(jié)炎的ROC曲線

表3 三項指標單獨檢測和聯(lián)合檢測診斷類風濕關(guān)節(jié)炎的診斷效能

3 討 論

類風濕關(guān)節(jié)炎作為一種自身免疫性疾病，主要以累及周圍關(guān)節(jié)的炎癥病變?yōu)榈湫吞攸c，容易導致關(guān)節(jié)的進展性功能障礙和結(jié)構(gòu)破壞；加之患者起病較為隱匿，容易合并皮膚、呼吸系統(tǒng)、肌肉系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)等癥狀表現(xiàn)，一方面增加臨床診斷難度，另一方面會因治療不及時、不徹底而引起關(guān)節(jié)永久性的破壞，影響患者的生活質(zhì)量。經(jīng)臨床研究證實，對類風濕關(guān)節(jié)炎患者進行早期診斷并及時給予抗風濕藥物治療有助于延緩病情進展，防止患者關(guān)節(jié)發(fā)生不可逆的損傷或功能障礙，對改善患者的預后和生存質(zhì)量意義重大。既往，臨床對于類風濕關(guān)節(jié)炎的診斷多結(jié)合患者具體的癥狀表現(xiàn)、影像學檢查和RF檢測結(jié)果，其中常規(guī)的X線片在鑒別早期骨侵蝕病變方面難度較大；CT檢查更適用于患者腕關(guān)節(jié)病變的診斷，對關(guān)節(jié)間隙的分辨能力較為突出；MRI雖然可以清晰的展現(xiàn)滑膜的改變，檢測出早期骨吸收和骨侵蝕改變，但臨床多將其用于類風濕關(guān)節(jié)炎患者的預后評估，而昂貴的檢查價格和對早期病變診斷的不足更限制其臨床應用范圍。RF最為類風濕關(guān)節(jié)炎患者最早發(fā)現(xiàn)的自身抗體，廣泛存在于患者的血清和關(guān)節(jié)液中，對于疾病的診斷具有較高的敏感性，但其并不屬于類風濕關(guān)節(jié)炎患者特有抗體，在其他自身免疫疾病和感染性疾病患者中也可以檢測到，甚至還存在于正常的健康人群和老年人的血清標本中，對于類風濕關(guān)節(jié)炎診斷的特異性較差。對此本研究為進一步提高類風濕關(guān)節(jié)炎患者診斷的準確率，聯(lián)合抗CCP抗體和ANA進行檢測，分析多項抗體聯(lián)合檢測對疾病的診斷價值。

經(jīng)本研究發(fā)現(xiàn)，觀察1組ANA檢測陽性率78.05%、抗CCP抗體檢測陽性率85.37%、RF檢測陽性率90.24%均高于觀察2組(22.22%、19.44%和36.11%)和對照組(5.71%、2.86%和14.29%)(＜0.05)，該研究結(jié)果與馮婧等研究結(jié)果一致，由此表明，三項指標在類風濕關(guān)節(jié)炎患者中存在較高的陽性率，對于疾病的診斷具有一定的意義。其中ANA作為一類抗細胞內(nèi)抗原抗體的總稱，與RF一樣均屬于類風濕關(guān)節(jié)炎患者非特異性自身抗體，它可以通過識別各種細胞核組分，特征性地出現(xiàn)于諸多自身免疫性疾病，其中也包括類風濕關(guān)節(jié)炎患者，而這一特質(zhì)也導致其在非類風濕關(guān)節(jié)炎患者也具備一定的陽性率。

抗CCP抗體作為一種新型血清標志物不僅適用于早期類風濕關(guān)節(jié)炎的臨床診斷，并在鑒別侵蝕性類風濕關(guān)節(jié)炎和非侵蝕性類風濕關(guān)節(jié)炎方面具有較高的敏感性。此外，抗CCP抗體作為環(huán)狀聚絲蛋白的多肽片段，主要以免疫球蛋白G(IgG)型為抗體，經(jīng)任煥民等研究證實，將其用于類風濕關(guān)節(jié)炎患者的診斷主要具備三方面的優(yōu)勢，其一是抗CCP抗體陽性的出現(xiàn)時間要早于類風濕關(guān)節(jié)炎患者臨床癥狀出現(xiàn)的時間，在類風濕關(guān)節(jié)炎患者的早期診斷方面意義顯著；其二是該抗體可用于監(jiān)測類風濕關(guān)節(jié)炎患者的病情進展，判斷患者的病情嚴重程度；其三抗體陽性者經(jīng)影像學檢查的骨破壞程度要明顯嚴重于抗體陰性者，可用于判斷患者的預后情況。與此同時，本研究還發(fā)現(xiàn)，ANA、抗CPP抗體和RF三項指標單獨檢測的陽性率與聯(lián)合檢測的陽性率對比無明顯差異(＞0.05)，但經(jīng)ROC曲線分析顯示，三項指標聯(lián)合檢測的靈敏度和特異度明顯高于單獨檢測的靈敏度和特異度(＜0.05)，該研究結(jié)果與趙嬋媛研究結(jié)果大致相同，由此表明，多項抗體指標聯(lián)合檢測可以進一步提高類風濕關(guān)節(jié)炎患者的診斷效能。究其原因可以發(fā)現(xiàn)，三項指標在單獨檢測時均存在各自的劣勢和不足，其中ANA和RF并非類風濕關(guān)節(jié)炎患者特有的抗體，在其他免疫性疾病和感染疾病中也同樣存在，而抗CCP抗體雖具備較高的特異性，適用于類風濕關(guān)節(jié)炎患者的早期診斷，但鑒于類風濕關(guān)節(jié)炎患者發(fā)病時期的不同，導致抗CCP抗體的濃度也存在一定差異，敏感性相對偏低。另外，更有研究發(fā)現(xiàn)，ANA、抗CCP抗體和RF三項指標之間并無明顯的相關(guān)性，彼此之間無法相互替代，故而聯(lián)合檢測更能提高對類風濕關(guān)節(jié)炎診斷的準確性，減少漏診、誤診現(xiàn)象的發(fā)生。

綜上所述，ANA、抗CCP抗體和RF三項指標在類風濕關(guān)節(jié)炎患者中具有較高的陽性率，通過對三項指標的聯(lián)合檢測可以為疾病的診斷提高更加可靠的依據(jù)，診斷的靈敏度和特異度較高，臨床診斷價值顯著；不僅如此，本研究選取的三項指標取材方便，通過對三項指標的聯(lián)合檢測可以有效彌補單一指標檢測的不足，同時明確ANA、抗CCP抗體和RF三項指標對類風濕關(guān)節(jié)炎患者的診斷價值，可以為各級醫(yī)療單位開展相關(guān)篩查提供簡單易行的方案。

但同樣本研究也存在一定不足之處，受現(xiàn)有條件限制，研究樣本數(shù)量較少，加之研究對象均來自同一家醫(yī)院，樣本的代表性受到一定程度的影響；而本研究作為回顧性單中心研究，可能存在選擇性的偏倚，對于三項指標與類風濕關(guān)節(jié)炎患者病情進展之間的相關(guān)性缺乏深入研究，期待在今后的研究中可以克服上述不足之處，進一步完善研究方案，擴大樣本容量，為提高類風濕關(guān)節(jié)炎患者診斷準確率，幫助患者完善診療方案提供可靠依據(jù)。