輸血檢驗(yàn)中凝聚胺技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值研究

辛葉，韓海心，王波

(南陽(yáng)市中心醫(yī)院 輸血科，河南 南陽(yáng) 473000)

臨床對(duì)患者開(kāi)展救治重要措施之一為輸血，對(duì)出血性疾病患者而言，治療最為重要措施之一為輸血。利用輸血治療后，可及時(shí)補(bǔ)充患者機(jī)體血量維持體內(nèi)血容量，保障患者生命體征維持穩(wěn)定。近些年來(lái)輸血不良反應(yīng)發(fā)生率不斷增多，往往與血型系統(tǒng)不合、免疫性疾病及溶血性疾病等相關(guān)聯(lián)。為此，輸血治療前積極與臨床醫(yī)師溝通，評(píng)估病情及用藥方案，并選擇合理、準(zhǔn)確性、靈敏度高的配血方案，進(jìn)一步提升臨床整體輸血安全性。伴隨著近些年來(lái)，我國(guó)輸血治療技術(shù)不斷發(fā)展成熟，而輸血安全性重視程度逐年提升，為保證輸血治療有效性、安全性，輸血治療開(kāi)戰(zhàn)前，針對(duì)血液治療快速有效檢驗(yàn)尤為重要，通過(guò)交叉配血檢驗(yàn)，可進(jìn)一步降低溶血性反應(yīng)及并發(fā)癥發(fā)生率。當(dāng)前，臨床血液檢驗(yàn)開(kāi)展過(guò)程中，鹽水法、酶法以及凝聚胺技術(shù)較為常見(jiàn)，為進(jìn)一步保障患者輸血安全性，分析血液制品是否符合受血者血型，可降低溶血病、漏診發(fā)生率。當(dāng)前酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)操作中，難度高、檢查時(shí)間長(zhǎng)，造成應(yīng)用受限。資料顯示，凝聚胺法為新型交叉配血方式，可快速檢出IgM、IgG 抗體，同時(shí)在完全I(xiàn)gG 抗體檢測(cè)中，同樣具備良好檢出效果，對(duì)不完全I(xiàn)gG 抗體、特殊IgG 抗體，自身也具備較高檢出率，彌補(bǔ)鹽水法不足之處。本文研究對(duì)本院2020年1月至2021年1月接受輸血檢查患者856 例采取鹽水法、凝聚胺技術(shù)，分析在輸血檢驗(yàn)中效果，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2020年1月至2021年1月收入接受輸血檢查患者總計(jì)856 例，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組各428例，清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血5mL，納入標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)施抽血前全方位開(kāi)展身體健康；所有對(duì)象無(wú)血液系統(tǒng)疾?。粎⑴c對(duì)象不處于妊娠期、哺乳期；所有對(duì)象開(kāi)展檢驗(yàn)前1 個(gè)月內(nèi)未使用會(huì)促使研究結(jié)果產(chǎn)生誤差藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)：心肝腎等重要臟器功能衰竭者；惡性腫瘤、精神疾病。凝聚胺法男女之比：243/185 例，年齡20 ～71 歲，平均(46.85±4.56)歲，鹽水法男女之比：233/195 例，年齡20 ～72 歲，平均(47.52±4.68)歲，兩組一般資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＞0.05)。

1.2 方法

凝聚胺技術(shù)：凝聚胺介質(zhì)試劑( 珠海貝索生物技術(shù)公司)，主側(cè)管加入受試者2 滴血液樣本，血清分離后加入1 滴獻(xiàn)血者紅細(xì)胞懸液，次側(cè)管內(nèi)加入2 滴獻(xiàn)血者血清、1 滴受試者紅細(xì)胞懸液，滴入2 滴凝聚胺，離心倒出上清液，查看是否存在紅細(xì)胞凝聚現(xiàn)象，未出現(xiàn)可再次檢測(cè)。兩個(gè)試管內(nèi)滴入懸浮液2 滴，輕輕搖晃均勻并觀察試管變化，凝聚現(xiàn)象在1 min 之內(nèi)消失結(jié)果陰性，同配血相吻合，如果1 min 內(nèi)未消失表明出現(xiàn)特異性凝集陽(yáng)性結(jié)果，配血不吻合失敗。

鹽水法：取2 mL 受試者血樣，經(jīng)無(wú)菌處理后，將其置入清潔干燥試管內(nèi)，利用基礎(chǔ)方式，及時(shí)分離血清后，試管血樣注入制備5% 紅細(xì)胞生理鹽水懸液。1 滴備用懸液、受試者血清加入主側(cè)管，將1 滴獻(xiàn)血者備用懸液、1滴受試者血清加入次側(cè)管內(nèi)，混合并等待發(fā)生沉淀反應(yīng)，3 min 后觀察凝集結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)比較兩組檢驗(yàn)方式紅細(xì)胞凝聚情況。(2)比較兩組檢驗(yàn)方式各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)，包括陽(yáng)性抗體、準(zhǔn)確率、靈敏度、穩(wěn)定性。穩(wěn)定性：紅細(xì)胞凝集明顯例數(shù)/ 總例數(shù)×100%，檢驗(yàn)準(zhǔn)確率：( 真陽(yáng)性+ 真陰性)/ 總例數(shù)×100%，靈敏度：真陽(yáng)性/( 真陽(yáng)性 + 假陰性)×100%。(3)比較兩種檢驗(yàn)方式檢驗(yàn)時(shí)間。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 兩種檢驗(yàn)方式紅細(xì)胞凝聚情況比較

凝聚胺技術(shù)下紅細(xì)胞凝聚數(shù)量為75(17.52%)例，鹽水法紅細(xì)胞凝聚數(shù)量為20(4.67%)例，相比較鹽水法，凝聚胺技術(shù)具有較高紅細(xì)胞凝聚數(shù)量檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩種檢驗(yàn)方式紅細(xì)胞凝聚情況比較

2.2 兩種檢驗(yàn)方式的檢測(cè)指標(biāo)比較

凝聚胺技術(shù)陽(yáng)性抗體、準(zhǔn)確率、靈敏度、穩(wěn)定性為10.98%、90.19%、96.03%、17.52%，高于鹽水法2.34%、80.84%、83.41%、4.67%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩種檢驗(yàn)方式的檢測(cè)指標(biāo)比較[n(%)]

2.3 兩種檢驗(yàn)方式的檢驗(yàn)時(shí)間比較

凝聚胺技術(shù)檢驗(yàn)時(shí)間低于鹽水法，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.05)。見(jiàn)表3。

表3 兩種檢驗(yàn)方式的檢驗(yàn)時(shí)間比較(±s )單位：min

3 討 論

目前出血性疾病患者在臨床實(shí)施治療開(kāi)展中，最為重要的一項(xiàng)措施為輸血治療，外傷出血、產(chǎn)后大出血、外科術(shù)式出血等群體，輸血治療在其中發(fā)揮著重要價(jià)值。目前輸血治療期間，對(duì)醫(yī)護(hù)人員而言，若結(jié)果提示同一種免疫反應(yīng)時(shí)需加強(qiáng)關(guān)注，當(dāng)輸血治療完成后，此時(shí)患者機(jī)體內(nèi)抗原細(xì)胞被破壞，而輸血期間患者溶血性輸血反應(yīng)發(fā)生率偏高，會(huì)對(duì)患者治療效果造成影響。為此，對(duì)接受輸血治療期間及輸血完畢患者完善患者生命體征監(jiān)測(cè)，一旦輸血完畢后引起輸血反應(yīng)可第一時(shí)間內(nèi)開(kāi)展有效措施。傳統(tǒng)輸血治療為直接輸血，但由于當(dāng)前有多種因素制約，所以即便為相同血型患者進(jìn)行輸血也會(huì)引起異常現(xiàn)象，對(duì)后續(xù)治療療效造成影響，對(duì)患者生命健康造成威脅。為此，伴隨著現(xiàn)代醫(yī)療條件不斷發(fā)展，相關(guān)醫(yī)療人員不僅僅以改善預(yù)后為目的，仍需提高患者輸血治療整體安全性。當(dāng)前輸血治療以全血、成分輸血多見(jiàn)，遵循臨床規(guī)定要求標(biāo)準(zhǔn)開(kāi)展輸血治療，一旦輸血不當(dāng)則會(huì)對(duì)患者后期治療及康復(fù)造成影響。同時(shí)，仍需控制輸血過(guò)程中血液輸入量，若控制不當(dāng)，則會(huì)導(dǎo)致患者各個(gè)重要臟器器官負(fù)擔(dān)程度加重，如心臟、腎臟等，引起內(nèi)臟功能受損。同時(shí)，血流污染會(huì)引起感染性休克，而某些病毒經(jīng)血液輸送后并進(jìn)入機(jī)體內(nèi)，將會(huì)引起一系列傳染性疾病發(fā)生，如肝炎、艾滋病等。輸入血液與患者血型不相符時(shí)，患者極易發(fā)生血液排斥，造成患者生命危險(xiǎn)。因此，交叉配血過(guò)程中，快速、準(zhǔn)確率高檢查方式為臨床患者搶救、治療與預(yù)后具有重要意義，同時(shí)對(duì)醫(yī)學(xué)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。

輸血檢驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用方式眾多，與其他檢測(cè)方式相比較，凝聚胺技術(shù)操作中，具有一定突出優(yōu)勢(shì)，具體操作內(nèi)容如下：(1)凝聚胺技術(shù)實(shí)施期間可提高整體靈敏度，操作期間具有以下特點(diǎn)，如操作簡(jiǎn)單、方便觀察，有效鑒別血型、交叉配血結(jié)果，并及時(shí)篩選抗體，廣泛用于溶血性貧血檢驗(yàn)中具備突出作用。(2)相比較鹽水介質(zhì)實(shí)驗(yàn)法，自身操作中縮短檢驗(yàn)時(shí)間，配血檢出速度、IgG抗體檢出速度快，進(jìn)一步為后期溶血性輸血反應(yīng)發(fā)生做好防范干預(yù)。而對(duì)不完全抗體凝聚胺機(jī)理分析，細(xì)胞凝聚期間中凝聚胺作為不可或缺一部分，一旦紅細(xì)胞與其作用產(chǎn)生反應(yīng)后，若再一次散開(kāi)后，表明為抗原抗體特異性因素，凝聚反映并不產(chǎn)生再次散開(kāi)情況，需引起檢驗(yàn)人員高度重視。但當(dāng)前凝聚胺技術(shù)實(shí)施期間同樣存在一定問(wèn)題，如是否會(huì)影響紅細(xì)胞表面抗體特異性影響檢測(cè)結(jié)果仍需進(jìn)一步深入分析及探討。同時(shí)，實(shí)際操作過(guò)程中，酶法、抗球蛋白實(shí)驗(yàn)法操作步驟繁瑣及操作步驟繁雜，臨床應(yīng)用存在一定不足之處。與鹽水法相比較，凝聚胺技術(shù)實(shí)施過(guò)程中，整體優(yōu)勢(shì)更多，且操作更為簡(jiǎn)便方便，整體步驟更為簡(jiǎn)易化；而鹽水法實(shí)施期間，無(wú)法徹底將不完全抗體檢測(cè)出，為此，檢驗(yàn)操作期間存在一定不足之處，單一采取上述方式下，會(huì)存在一定輸血意外，誘發(fā)嚴(yán)重風(fēng)險(xiǎn)，且操作危險(xiǎn)系數(shù)上升，為此，當(dāng)前多配合其他實(shí)驗(yàn)聯(lián)合應(yīng)用，如抗球蛋白試驗(yàn)法與鹽水法，有效規(guī)避上述情況。

輸血治療作為臨床常見(jiàn)一類措施，當(dāng)前輸血治療前交叉配血試驗(yàn)開(kāi)展作為重要環(huán)節(jié)，而其結(jié)果準(zhǔn)確性往往會(huì)對(duì)輸血安全性造成影響。交叉配血試驗(yàn)將供血者、受血者、紅細(xì)胞混合后進(jìn)行檢測(cè)，預(yù)判是否存在凝集反應(yīng)。而交叉配血開(kāi)展中包含以下兩部分，主側(cè)配血混合供血者、受血者血清，判斷受血者是否有針對(duì)供血者紅細(xì)胞抗體，次側(cè)配血混合供血者血清、受血者紅細(xì)胞，判斷供血者血清是否會(huì)影響受血者紅細(xì)胞抗體，當(dāng)上述檢查開(kāi)展過(guò)程中提示無(wú)凝集，表明配血試驗(yàn)成功。輸血前，實(shí)施溶血性反應(yīng)可預(yù)防、降低溶血性反應(yīng)，使整體輸血安全性提高。但當(dāng)前針對(duì)輸血檢驗(yàn)實(shí)施中，鹽水法操作整體難度偏低、檢驗(yàn)時(shí)間短，但檢出抗體靈敏度偏低，目前被用于ABO 血型檢驗(yàn)中，但當(dāng)前臨床實(shí)踐操作期間，往往應(yīng)用局限性較大，而IgM 作為檢測(cè)抗體，無(wú)法準(zhǔn)確檢測(cè)出IgG 抗體。部分學(xué)者研究報(bào)道顯示，實(shí)施交叉配血試驗(yàn)中，鹽水法應(yīng)用時(shí)間較長(zhǎng)，漏檢率顯著偏高，與臨床實(shí)際需求不符合，目前僅用于初篩。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)特點(diǎn)為抗體檢驗(yàn)靈敏度偏高，但同樣具備較高操作難度，整體檢驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)。但由于凝聚胺技術(shù)準(zhǔn)確性、靈敏高特點(diǎn)依然作為常見(jiàn)一類干預(yù)方式，操作原理利用高價(jià)陽(yáng)離子聚合物正電荷與血清紅細(xì)胞表面唾液酶結(jié)合并中和紅細(xì)胞標(biāo)滿負(fù)電荷，間距縮短后可加快紅細(xì)胞非特異性凝集速度，紅細(xì)胞懸液中和增強(qiáng)抗原反應(yīng)，提升紅細(xì)胞表面抗原檢出后準(zhǔn)確性。同時(shí)，實(shí)施檢驗(yàn)期間加入低離子介質(zhì)、凝聚胺試劑后，提升相對(duì)分子運(yùn)動(dòng)速率。相關(guān)研究提示，當(dāng)前交叉配血實(shí)施期間采取凝聚胺技術(shù)，整體效果顯著，而檢測(cè)期間準(zhǔn)確率、靈敏度偏高，當(dāng)前用于臨床輸血治療中取得可靠配血結(jié)果，降低溶血整體發(fā)生率。

研究指出，采取鹽水法、抗人球蛋白法、凝聚胺法對(duì)全血標(biāo)本開(kāi)展ABO 血型鑒定，結(jié)果顯示，鹽水法、抗人球蛋白法、凝聚胺法鑒定正定型結(jié)果一致，反定型時(shí)期抗體檢出率分別為70.0%、81.7%、91.7%，三種抗體檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，＜0.05。本次研究結(jié)果中，對(duì)南陽(yáng)市中心醫(yī)院收入856 例需要配血患者，分別采取鹽水法、凝聚胺技術(shù)，分析兩種技術(shù)檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)其結(jié)果分析得出：凝聚胺技術(shù)陽(yáng)性抗體、準(zhǔn)確率、靈敏度、穩(wěn)定性為10.98%、90.19%、96.03%、17.52%，高于鹽水法2.34%、80.84%、83.41%、4.67%，＜0.05。凝聚胺法利用凝聚胺轉(zhuǎn)變紅細(xì)胞周圍電荷，進(jìn)而縮短紅細(xì)胞間距使得紅細(xì)胞出現(xiàn)可逆性非特異性凝聚，當(dāng)免疫球蛋白M/IgG 類抗體直接性凝集紅細(xì)胞，檢出不可逆凝集發(fā)生情況。凝聚胺法實(shí)施過(guò)程中，穩(wěn)定性高，加之凝聚胺法整體操作十分簡(jiǎn)便，多次實(shí)施操作中無(wú)需采取額外設(shè)備，其特點(diǎn)適用于急診配血下各項(xiàng)要求。同時(shí)，對(duì)兩種檢測(cè)過(guò)程中所花費(fèi)檢驗(yàn)時(shí)間分析得出，凝聚胺技術(shù)下所應(yīng)用時(shí)間短于鹽水法，臨床整體操作過(guò)程中檢驗(yàn)時(shí)間縮短，進(jìn)一步快速實(shí)施輸血治療并提升臨床治療效果。當(dāng)前研究指出，抗原較弱血型鑒定過(guò)程中凝聚胺法與傳統(tǒng)鹽水法比較，獲取結(jié)果更為直觀可靠，反應(yīng)程度更為清晰，檢出率更高。為此，針對(duì)該類患者，可將凝聚胺法結(jié)合鹽水試管法應(yīng)用，初篩應(yīng)用傳統(tǒng)鹽水法，對(duì)篩查結(jié)果不確定者及無(wú)法辨別者加用凝聚胺法，提高診斷效率同時(shí)縮短時(shí)間，反映血型結(jié)果。但當(dāng)前研究指出，凝聚胺法實(shí)施過(guò)程中會(huì)存在假陽(yáng)性，對(duì)其分析原因得出是與血小板發(fā)生凝聚所致，因此，通過(guò)置換血清實(shí)施配血，相對(duì)應(yīng)離心總速度離心后標(biāo)本會(huì)存在一定問(wèn)題，如抗凝不夠理想、血清標(biāo)本中纖維蛋白原增高等，均是當(dāng)前凝聚胺法出現(xiàn)假陽(yáng)性并造成檢驗(yàn)結(jié)果偏差相關(guān)因素。為此，針對(duì)交叉配血試驗(yàn)中凝聚胺技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中，要求檢驗(yàn)人員及時(shí)利用假凝集清除液清除非特異性凝集，進(jìn)而降低因假陽(yáng)性配血結(jié)果發(fā)生率。報(bào)道顯示，低離子凝聚胺技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中，會(huì)受到維生素C、氯化鉀等藥物因素影響，從而影響結(jié)果并造成誤差，為此，開(kāi)展交叉配血試驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)積極開(kāi)展措施并積極干預(yù)，盡可能避免檢驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)假陽(yáng)性、假陰性的情況。同時(shí)，一項(xiàng)調(diào)查結(jié)果顯示，針對(duì)某院2020年期間試管法血型鑒定錯(cuò)誤有12 例，其中約有40% 以上為檢驗(yàn)人員粗心大意或操作不當(dāng)所致，為此，實(shí)施血型鑒定期間，遵循操作規(guī)程順利完成能獲取準(zhǔn)確血型，保障臨床輸血安全。

綜上所述，凝聚胺技術(shù)應(yīng)用于輸血檢驗(yàn)中整體應(yīng)用效果顯著，相比較鹽水法，凝聚胺技術(shù)特點(diǎn)為靈敏度、檢驗(yàn)準(zhǔn)確率高，實(shí)際操作干預(yù)中，檢驗(yàn)人員操作簡(jiǎn)單，醫(yī)護(hù)人員短時(shí)間內(nèi)可提供準(zhǔn)確檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，進(jìn)一步縮短檢驗(yàn)時(shí)間及溶血性輸血反應(yīng)事件發(fā)生率，值得臨床應(yīng)用。