乳腺癌自動(dòng)乳腺全容積成像表現(xiàn)與生物學(xué)預(yù)后因子的關(guān)系

張凡，葛先立，孫培

河南醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校附屬醫(yī)院超聲科，鄭州 450000

乳腺癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率均較高，多見(jiàn)于40～50歲女性患者。全球每年約140萬(wàn)人被確診為乳腺癌，其中50萬(wàn)人死于乳腺癌[1-2]。近年來(lái)中國(guó)乳腺癌的發(fā)病率逐年升高，早期乳腺癌的檢出率僅為30%，絕大多數(shù)患者延誤了治療的最佳時(shí)機(jī)[3]。因此，早期檢查和診斷對(duì)積極治療乳腺癌具有關(guān)鍵性作用。自動(dòng)乳腺全容積成像（automated breast volume scanner，ABVS）是一種專(zhuān)門(mén)針對(duì)乳腺檢查而設(shè)計(jì)的三維超聲成像技術(shù)，其可以獲得整個(gè)乳腺的橫切面數(shù)據(jù)，并可自動(dòng)重建成三維圖像，進(jìn)而顯示出乳腺腫塊與周?chē)M織的關(guān)系，在乳腺癌的篩查、診斷等方面均具有重要意義[4]。分子生物學(xué)因素決定了腫瘤的形態(tài)及組織病理學(xué)特征，進(jìn)而決定整個(gè)圖像的表現(xiàn)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，人們逐漸發(fā)現(xiàn)雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR）、腫瘤抑制蛋白p53、雌激素誘導(dǎo)蛋白pS2及增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）等可從不同角度反映腫瘤的行為[5]。本研究探討了乳腺癌ABVS表現(xiàn)與生物學(xué)預(yù)后因子ER、PR、p53、pS2及PCNA表達(dá)的關(guān)系，以期為臨床診斷提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年10月至2018年9月河南醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校附屬醫(yī)院收治的乳腺癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)手術(shù)病理確診為原發(fā)性乳腺癌；②術(shù)前均行ABVS檢查；③經(jīng)免疫組化染色獲得ER、PR、p53、pS2、PCNA表達(dá)狀態(tài)；④年齡≥18歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料不完整。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入84例患者，年齡32～75歲，平均（52.0±15.0）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)，所有患者均知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2 ABVS檢查

采用Siemens Acuson S2000自動(dòng)乳腺全容積成像系統(tǒng)及14L5BV探頭進(jìn)行檢查，探頭頻率為5～14 MHz?；颊弑３盅雠P位，完全暴露乳腺，先進(jìn)行二維超聲掃描，觀(guān)察腫瘤的大小和位置，然后再切換至ABVS檢查。選擇相應(yīng)的模式，調(diào)整探頭使之緊密貼于乳腺，鎖定后自動(dòng)進(jìn)行掃描。由兩名具有5年工作經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)師采用雙盲法進(jìn)行圖像分析，若兩名醫(yī)師的分析結(jié)果不一致，則經(jīng)協(xié)商達(dá)成一致。

1.3 ER、PR、 p53、pS 2、PCNA表達(dá)情況的檢測(cè)

乳腺癌組織標(biāo)本均經(jīng)4%甲醛溶液固定，常規(guī)二甲苯石蠟包埋切片，切片厚度為4 μm，然后進(jìn)行常規(guī)蘇木精-伊紅（hematoxylin and eosin，HE）染色和免疫組化染色。采用免疫組化染色Envision二步法檢測(cè)ER、PR、p53、pS2及PCNA表達(dá)情況，切片組織樣本經(jīng)二甲苯脫蠟至水，在pH值為6.0的檸檬酸液中用高壓鍋熱處理10 min，加入一抗，4℃過(guò)夜后滴加二抗，二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色，蘇木精復(fù)染。陰性對(duì)照以磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）代替一抗。所有免疫組化相關(guān)試劑盒均購(gòu)自基因科技（上海）股份有限公司。

1.4 免疫組化結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

ER、PR和p53定位于細(xì)胞核，陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥10%為陽(yáng)性；pS2定位于細(xì)胞質(zhì)，陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞20%為陽(yáng)性；PCNA定位于細(xì)胞核，陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞20%為陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用Kappa一致性檢驗(yàn)分析術(shù)前ABVS表現(xiàn)與術(shù)后病理結(jié)果的一致性；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ABVS表現(xiàn)

本研究納入84例乳腺癌患者，腫塊大小≥2 cm 37例（44.05%），腫塊內(nèi)有鈣化39例（46.43%），腫塊周?chē)忻陶?2例（73.81%），有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移47例（55.95%）。Kappa一致性分析結(jié)果顯示，術(shù)前ABVS表現(xiàn)與術(shù)后病理具有良好一致性（Kappa=0.732）。

2.2 ER、PR、 p53、pS 2及PCNA表達(dá)情況

免疫組化結(jié)果顯示，84例乳腺癌患者中，57例患者ER陽(yáng)性，陽(yáng)性表達(dá)率為67.86%（57/84）；51例患者PR陽(yáng)性，陽(yáng)性表達(dá)率為60.71%（51/84）；51例患者p53陽(yáng)性，陽(yáng)性表達(dá)率為60.71%（51/84）；55例患者pS2陽(yáng)性，陽(yáng)性表達(dá)率為65.48%（55/84）；54例患者PCNA陽(yáng)性，陽(yáng)性表達(dá)率為64.29%（54/84）。

2.3 不同ABVS表現(xiàn)乳腺癌患者ER、PR、 p53、pS 2及PCNA表達(dá)情況的比較

不同腫塊大小乳腺癌患者的ER、PR、p53及pS2陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；腫塊大小≥2 cm乳腺癌患者的PCNA陽(yáng)性表達(dá)率高于腫塊大?。? cm的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.720，P＜0.05）。不同腫塊內(nèi)鈣化情況乳腺癌患者的PCNA陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；有腫塊內(nèi)鈣化乳腺癌患者的ER、PR、p53陽(yáng)性表達(dá)率均高于無(wú)腫塊內(nèi)鈣化的患者，pS2陽(yáng)性表達(dá)率低于無(wú)腫塊內(nèi)鈣化的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=15.988、17.436、5.682、6.489，P＜0.05）。有毛刺征乳腺癌患者的ER、PR、p53、pS2及PCNA陽(yáng)性表達(dá)率均高于無(wú)毛刺征的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.358、39.425、33.303、19.245、10.122，P＜0.05）。不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況乳腺癌患者的ER、PCNA陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳腺癌患者的PR陽(yáng)性表達(dá)率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，p53、pS2陽(yáng)性表達(dá)率均低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.499、14.755、4.870，P＜0.05）。（表1）

表1 不同ABVS表現(xiàn)乳腺癌患者ER、PR、 p53、pS 2及PCNA的表達(dá)情況（ n=84）

3 討論

3.1 ER、PR、 p53、pS 2及PCNA與乳腺癌的關(guān)系

正常的乳腺細(xì)胞中存在ER和PR，雌激素和孕激素通過(guò)ER和PR影響乳腺的增生和分化，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生惡變時(shí)，腫瘤細(xì)胞會(huì)部分或全部保留正常的受體系統(tǒng)，ER會(huì)刺激乳腺管生長(zhǎng)，PR會(huì)刺激乳腺泡生長(zhǎng)[6]。研究表明，ER和PR的表達(dá)對(duì)內(nèi)分泌治療具有關(guān)鍵作用，ER陽(yáng)性或ER和PR均陽(yáng)性的患者內(nèi)分泌治療效果較好，ER陰性患者的化療效果較好[7]。p53是位于17p1的一段外顯子基因，由11個(gè)外顯子構(gòu)成，可直接產(chǎn)生長(zhǎng)度為2.5 kb的mRNA，翻譯為53 kD的核磷酸蛋白[8]。p53可分為野生型和突變型，野生型p53主要參與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而突變型p53不僅失去了抑制腫瘤增殖的功能，還會(huì)促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)，它是迄今為止發(fā)現(xiàn)的與人類(lèi)惡性腫瘤關(guān)系最密切的基因之一，其陽(yáng)性表達(dá)與乳腺癌的復(fù)發(fā)和預(yù)后具有一定的關(guān)系[9]。pS2的表達(dá)受雌激素調(diào)控，其與乳腺癌中ER和PR的表達(dá)密切相關(guān)，可用于預(yù)測(cè)內(nèi)分泌治療效果[10]。PCNA是僅在增殖細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中合成或表達(dá)的一種核內(nèi)多肽，腫瘤患者體內(nèi)的PCNA含量較健康人高，其合成和表達(dá)均與細(xì)胞周期有關(guān)，因此其在腫瘤的良惡性判斷及惡性程度的確定等方面均具有廣泛的應(yīng)用[11]。因此，治療前檢測(cè)ER、PR、p53、pS2及PCNA的表達(dá)水平十分重要。

3.2 乳腺癌 ABVS 表現(xiàn)與 ER、PR、 p53、pS 2及PCNA表達(dá)的關(guān)系

3.2.1 腫塊大小評(píng)估乳腺腫塊的大小可以被廣泛應(yīng)用于診斷和評(píng)定乳腺癌的主要腫瘤區(qū)域，也是診斷和判定其預(yù)后及制訂治療方案的主要依據(jù)之一[12-13]。本研究結(jié)果顯示，腫塊大小≥2 cm 37例，其中ER陽(yáng)性26例（70.27%），PR陽(yáng)性24例（64.86%），p53陽(yáng)性26例（70.27%），pS2陽(yáng)性28例（75.68%），PCNA陽(yáng)性29例（78.38%）；不同腫塊大小乳腺癌患者的ER、PR、p53及pS2陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；腫塊大小≥2 cm乳腺癌患者的PCNA陽(yáng)性表達(dá)率高于腫塊大小＜2 cm的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。刁巖等[14]研究了PCNA表達(dá)與乳腺癌患者腫瘤大小的關(guān)系，結(jié)果表明，腫瘤大小≤2 cm組患者的PCNA陽(yáng)性表達(dá)率低于腫瘤大?。? cm組（P＜0.05），說(shuō)明腫瘤大小與PCNA表達(dá)具有一定關(guān)系，與本研究結(jié)果一致。靳鳳梅等[15]分析了乳腺癌患者中ER、PR表達(dá)與腫塊大小的相關(guān)性，結(jié)果表明，腫塊大小≥2 cm組患者的ER、PR陽(yáng)性表達(dá)率與腫塊大?。? cm組患者相比，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），與本研究結(jié)果大致相同。

3.2.2 腫塊內(nèi)鈣化乳腺中出現(xiàn)鈣化是由于營(yíng)養(yǎng)不良引起鈣鹽沉積，一般以羥基磷灰石和磷酸鈣兩種形式存在，乳腺中鈣化形態(tài)及分布是鑒別乳腺癌惡性程度的重要指標(biāo)[16]。本研究結(jié)果顯示，出現(xiàn)鈣化39例，其中ER陽(yáng)性35例（89.74%），PR陽(yáng)性33例（84.62%），p53陽(yáng)性29例（74.36%），pS2陽(yáng)性20例（51.28%），PCNA陽(yáng)性24例（61.54%）；有腫塊內(nèi)鈣化乳腺癌患者的ER、PR、p53陽(yáng)性表達(dá)率均高于無(wú)腫塊內(nèi)鈣化的患者，pS2陽(yáng)性表達(dá)率低于無(wú)腫塊內(nèi)鈣化的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說(shuō)明腫塊內(nèi)鈣化與乳腺癌的惡性程度有一定的關(guān)系，這對(duì)治療方案的選擇及預(yù)后預(yù)測(cè)具有一定的指導(dǎo)意義。

3.2.3 毛刺征腫瘤的生長(zhǎng)是多中心的，生長(zhǎng)的不平衡性會(huì)導(dǎo)致腫瘤邊緣表現(xiàn)為毛刺、分葉或模糊不清，這就是腫瘤的毛刺征[17]。毛刺征對(duì)乳腺癌具有很高的預(yù)測(cè)價(jià)值，有毛刺征乳腺癌的侵襲性較低。本研究結(jié)果顯示，有毛刺征62例，其中ER陽(yáng)性46例（74.19%），PR陽(yáng)性50例（80.65%），p53陽(yáng)性49例（79.03%），pS2陽(yáng)性49例（79.03%），PCNA陽(yáng)性46例（74.19%）；有毛刺征乳腺癌患者的ER、PR、p53、pS2及PCNA陽(yáng)性表達(dá)率均高于無(wú)毛刺征的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與薛林燕等[18]、黃凌萍和丁潔瓊[19]的研究結(jié)果一致。腫瘤的毛刺征可以限制腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散，因此內(nèi)分泌治療效果較好，預(yù)后也較好。

3.2.4 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是乳腺癌轉(zhuǎn)移的主要途徑，也是直接影響早期乳腺癌患者預(yù)后的一個(gè)重要因素。周才明等[20]研究結(jié)果表明，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與ER、PR及p53表達(dá)無(wú)關(guān)（P＞0.05）。本研究結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移47例，其中ER陽(yáng)性28例（59.57%），PR陽(yáng)性33例（70.21%），p53陽(yáng)性20例（42.55%），pS2陽(yáng)性26例（55.32%），PCNA陽(yáng)性28例（59.57%）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳腺癌患者的PR陽(yáng)性表達(dá)率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，p53、pS2陽(yáng)性表達(dá)率均低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。綜上所述，乳腺癌ABVS表現(xiàn)與ER、PR、p53、pS2及PCNA表達(dá)具有一定的關(guān)系，對(duì)治療方案的制訂和預(yù)測(cè)預(yù)后具有一定的參考價(jià)值。