一例放養(yǎng)雞場馬立克氏病的診斷

周 林，錢 林，王 娜，鮑 娟，鄧位喜，楊泓濤，楊玉能，孫寶盛，經(jīng)有林

（遵義職業(yè)技術(shù)學院，貴州 遵義 563000）

馬立克氏?。∕arek’s disease，MD）是由馬立克氏病病毒（Marek’s disease virus，MDV）引起雞的高度接觸性傳染性腫瘤疾病，通常以感染性腺、肌肉、外周神經(jīng)、虹膜、眼、皮膚及各臟器的單核細胞浸潤和形成腫瘤病灶為特征［1］。1961 年在英國的比格斯建議下定名為馬立克氏?。?］。該病一直受到獸醫(yī)工作者和社會各界的關(guān)注［3］。

1 病原特征

馬立克氏病病原是細胞結(jié)合性皰疹病毒，馬立克氏病病毒在雞體的羽毛囊上皮中形成帶囊膜的完整病毒粒子，直徑為273～400 nm。在組織培養(yǎng)的感染細胞核中可見到直徑為85～100 nm 的六角形病毒顆?；蚝艘職?，偶爾也在細胞漿中見到［4］。不同品種的雞對馬立克氏病的易感性不同，采用馬立克氏病疫苗可有效地控制該病的感染，但其免疫效果受諸多因素的影響。

2 流行病學特點

馬立克氏病一年四季均可發(fā)生，主要危害2～5月齡雞，野雞、鵪鶉、火雞也有發(fā)病，哺乳動物不感染馬立克氏病病毒。病雞和帶毒雞是該病的主要傳染源，患病雞的皮膚和羽毛囊上有大量的病毒，從病雞身上脫落帶毒的皮屑，是主要的傳播因素。該病病毒在自然條件下有較強的抵抗力，雞感染后可以長期排毒，甚至終生帶毒［4］。根據(jù)患雞的不同臨床表現(xiàn)和病變發(fā)生的部位，可分為4 種類型，神經(jīng)型、內(nèi)臟型、眼型和皮膚型，有時病雞呈混合型發(fā)病。

3 病例情況與臨床癥狀

以貴州省正安縣送檢的60 ～90 日齡疑似馬立克氏病病雞為研究對象。部分患雞羽毛蓬松雜亂，雞冠和肉髯蒼白；部分病雞拉白色或黃色稀糞，部分患雞張口呼吸等，部分病雞只出現(xiàn)一側(cè)或兩側(cè)的關(guān)節(jié)腫大，可以站立緩慢行走，但卻搖晃不穩(wěn)（圖1）。

圖1 患病雞腿部情況

4 病理變化

對病雞進行解剖，可見馬立克氏病的主要病理變化，如圖2。

圖2 患病雞內(nèi)臟情況

5 實驗室診斷

根據(jù)病例的臨床表現(xiàn)、病理變化情況綜合判斷，初步診斷為馬立克氏病，確診需實驗室診斷。取病雞肝臟、肌胃、肝臟、腎臟等組織提取樣本檢測DNA。 上 游 引 物5＇ －TACTTCCTATATAGATTGAGACCGT－3＇，下游引物5＇－GAGATCCTCGTAAGGTGTAATATA－3＇。以提取的總DNA 為模板，用多功能梯度PCR 儀擴增。取模板1 μL，2×TaqPCR Master Mix 12.5 μL，上下游引物各1 μL，補足ddH2O 至25 μL。反應(yīng)條件，94 ℃預變性4 min；94 ℃變性45 s，55 ℃退火45 s，72 ℃延伸45 s，共35 個循環(huán)；72 ℃延伸10 min。取7 μL PCR 反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳，在432 bp 處出現(xiàn)特異性條帶（圖3）。該病確診為馬立克氏病。

圖3 馬立克氏病DNA 擴增結(jié)果

6 預防措施

6.1 加強飼養(yǎng)管理

加強飼養(yǎng)管理，禁用發(fā)霉變質(zhì)的飼料，每天清理糞便，定期對雞舍消毒，雞場進出口均設(shè)立消毒區(qū)，飼料中的營養(yǎng)成分要全面，尤其是維生素和微量元素要滿足畜禽的營養(yǎng)需要。

6.2 隔離育雛

雛雞容易被感染，尤其是1 日齡的雛雞。在出殼當天進行馬立克氏病疫苗接種后，將雛雞隔離在清潔并消毒過的圈舍中飼養(yǎng)至少4 周，這可減少雛雞感染馬立克氏病的機會。

6.3 淘汰病雞、無害化處理

在雞場一旦發(fā)現(xiàn)馬立克氏病的疑似病例，立刻將其隔離飼養(yǎng)，經(jīng)確診后，對其做深埋處理，并立即對雞場清潔消毒。

6.4 做好預防

馬立克氏病尚無治療的特效藥物，疫苗接種是預防該病的有效方法。

7 小結(jié)與討論

馬立克氏病是嚴重危害養(yǎng)雞業(yè)健康發(fā)展的病毒性傳染病，具有高度接觸傳染性，病雞和帶毒雞的排泄物、分泌物具有傳染性［5］，可通過直接或間接接觸而感染。馬立克氏病不能垂直傳播，病毒主要經(jīng)空氣傳播由呼吸道侵入體內(nèi)。神經(jīng)系統(tǒng)病變表現(xiàn)為神經(jīng)干增粗，橫紋消失，失去正常顏色，呈黃白色或灰白色，個別的神經(jīng)干水腫、出血，多為單側(cè)病變，可兩側(cè)對比診斷［6］。雞馬立克氏病是危害養(yǎng)雞業(yè)的三大疫病之一，尚無特效藥，所以該病防大于治，養(yǎng)殖戶要制定綜合防控措施。對于該病的預防，養(yǎng)殖戶要加強飼養(yǎng)管理，做好消毒工作，做好免疫接種工作［7］。一旦發(fā)病，要將病死雞無害化處理，并將雞舍嚴格消毒。做好預防工作才能降低馬立克氏病的發(fā)生，實現(xiàn)養(yǎng)雞的較高收益［8］。