雞馬立克氏病的診斷方法與防控建議

梁海英

（山東省臨沂市莒南縣農業(yè)農村局 山東臨沂 276600）

1907年由Josef Marek 首次報道馬立克氏病；1967年，英國和美國的兩個實驗室從接種病雞細胞的細胞培養(yǎng)物中分離出皰疹病毒，隨后用從羽毛囊中提取的病毒進行感染試驗，證實馬立克氏病的病原體是病毒；1985年，有相關研究建立了馬立克氏病腫瘤誘導的淋巴母細胞系，測定了腫瘤細胞的T 細胞特性、細胞溶解期和疾病的免疫抑制期，闡明了暫時性麻痹與馬立克氏病病毒感染的關系，并分離出馬立克病毒。在未開發(fā)出有效疫苗之前，馬立克氏病造成的經濟損失非常慘重，隨后幾年，對馬立克氏病的研究不斷有新發(fā)現，制作出馬立克氏病弱毒疫苗和火雞皰疹病毒（HVT）疫苗，使得免疫接種疫苗成為防控雞馬立克氏病的有效手段。

雞馬立克氏病破壞法氏囊、胸腺、脾臟等免疫器官，可以引起雞只嚴重的免疫抑制，病雞更易繼發(fā)相關疾病，嚴重影響各種預防疫苗的有效性。20世紀70年代初，中國科學家對馬立克氏病的病因學、流行病學、病理學、診斷和控制進行了系統研究，先后研制出凍干火雞皰疹病毒疫苗、1 型減毒疫苗等相關疫苗，并制定了雞馬立克氏病的診斷和監(jiān)測方法，提出了行之有效的綜合防控措施。這些成果的推廣應用，大大減少了雞馬立克氏病帶來的經濟損失。雖然新一代疫苗研究取得重大進展，目前我國馬立克氏病防控工作取得積極成果，但病毒已經在我國廣泛流行，已形成具有一定規(guī)模的流行趨勢，因此在馬立克氏病流行的地區(qū)受疫情的風險仍然很高，且?guī)缀鯖]有減弱的跡象，因此需要建立合理規(guī)范的防治措施，及時做好雞馬立克氏病的免疫工作，制定雞場對雞馬立克氏病的應對策略。

1 雞馬立克氏病病因

馬立克病毒是雞馬立克氏病的病原體，是一種細胞結合性皰疹病毒，其嗜淋巴細胞特性、分子結構以及基因組結構與皰疹病毒相似，同屬于皰疹病毒科中甲型皰疹病毒亞科的馬立克病毒屬。根據馬立克病毒的毒力，可將雞馬立克毒株分為幾種致病類型，主要包括弱馬立克病毒（mMDV）、強毒馬立克病毒（vMDV）、超強馬立克病毒（vvMDV) 和特超強馬立克病毒（vv+MDV)。馬立克病毒的病毒粒子的核衣殼呈六角形，具有包膜，呈圓柱形，典型的皰疹病毒顆粒，通常存在于受感染組織和培養(yǎng)細胞的細胞核膜以及核小泡中，有時也存在于細胞質和細胞外液中。目前已鑒定出三種血清型：Ⅰ型致癌，Ⅱ型非致癌，Ⅲ型火雞皰疹病毒（簡稱HVT）?；痣u皰疹病毒與馬立克病毒具有明顯的不同，火雞皰疹病毒對雞不致病，但可作為預防雞馬立克氏病有效的疫苗。馬立克病毒可以感染細胞中的DNA 結構，并且可以在病毒復制的細胞核中看到線性病毒DNA，并且馬立克病毒基因組末端含有與宿主細胞端粒相似的序列，也進一步證實了病毒DNA 優(yōu)先整合區(qū)域在潛伏感染細胞中靠近宿主細胞DNA 端粒處。

2 雞馬立克氏病流行特點

雞是馬立克氏病最重要的天然宿主，而鵪鶉、火雞和野雞也易感染該疾病。幾乎所有雞，包括觀賞雞、本地品種雞和熱帶叢林雞，都易感并出現腫瘤特征。許多其他鳥類，包括鴨子、麻雀、鷓鴣、鴿子和孔雀，都對馬立克氏病有抵抗力，但接種馬立克氏病毒疫苗的鴨子會產生抗體。研究表明，口腔感染不是重要的傳播途徑。研究表明，被褥中的蜱蟲、蚊子等節(jié)肢動物不能傳播馬立克氏病，馬立克氏病毒也不通過垂直傳播。馬立克氏病感染的病雞是主要傳染源，而禽類之間的直接或間接接觸可以導致病毒通過空氣而傳播。研究發(fā)現，羽囊上皮細胞中復制的馬立克氏病的病毒具有高度傳染性，這使得完整的病毒顆?？梢耘c羽毛以及皮屑一起釋放到環(huán)境中，保持病毒顆粒對外界較強的抵抗力，并幾個月后仍具有傳染性。因此雞馬立克病毒一旦感染了雞群，將會迅速傳播到整個雞群，而不管畜群的免疫狀況如何，從而引起雞只在接觸馬立克病毒后2 周開始排毒，并在4 周達到高峰[1]。大多數感染馬立克氏病的病雞一生都被帶毒，病毒可以不斷地從皮屑脫落的羽囊中釋放出具有傳染性的馬立克病毒，從而導致馬立克氏病傳播難以控制。

3 雞馬立克氏病臨床癥狀

影響雞馬立克氏病發(fā)病率或死亡率的因素很多，可歸因于病原體因素、宿主因素、環(huán)境因素或其他因素。最重要的致病因素是毒株毒力、病毒劑量以及感染途徑。馬立克病毒的毒力可分為有輕型、強毒型、超強毒型和超超強毒型，毒力越強，發(fā)病率越高。但對于特定的毒株，其毒力部分取決于宿主的基因構成。馬立克氏病分為三種不同類型：神經型、內臟型以及眼型。

神經型主要影響周圍神經，癥狀因感染神經部位的不同而異。坐骨神經最常侵害，臨床表現為病雞步態(tài)不穩(wěn)，先是局部癱瘓，后是完全癱瘓，無法站立。當肱神經受到影響時，受影響一側的羽翼導致下垂。如果支配頸部肌肉的神經受到影響，病雞會出現低頭或頭部和頸部扭曲。迷走神經的侵害會導致失音、甲狀腺腫大以及呼吸急促。腹瀉的癥狀通常伴隨著腹神經的損傷，導致病雞經歷進食困難、饑餓、脫水、最后精疲力竭而死亡。

內臟型的臨床特征為急性發(fā)作為主，發(fā)病突然，初期以雞群大量精神疲憊為主。幾天后，一些病雞出現共濟失調，隨后出現單側或雙側肢體麻痹，并出現一些病雞在沒有典型臨床癥狀的情況下死亡，另有許多病雞出現嚴重脫水、營養(yǎng)不良并進入昏迷狀態(tài)。

眼型表現為病雞的視力下降或消失，虹膜失去正常色素沉著，變成同心環(huán)或斑塊，逐漸褪色為彌漫性灰白色，出現不規(guī)則的瞳孔邊緣的癥狀，并出現體重減輕、食欲不振以及腹瀉。馬立克氏病廣泛存在于世界所有家禽養(yǎng)殖國家，根據病程可分為急性型和經典型。馬立克氏病的急性形式的特征在于內臟、肌肉和皮膚的多發(fā)性淋巴瘤的形成，而經典形式的特征在于多發(fā)性神經炎。

4 雞馬立克氏病的診斷方法

馬立克氏病毒傳染性很強，事實上，它在雞群中無處不在。很多人把檢測病毒或者特異性抗體作為馬立克氏病診斷的依據，其實這是一個誤區(qū)。必須根據流行病學、癥狀、病理學和腫瘤特異性標志物等疾病特異性標準進行診斷，而血清學方法和病毒學方法主要用于監(jiān)測雞的感染情況。神經性馬立克氏病的鑒別診斷可根據病雞的特征性癱瘓癥狀和相應周圍神經的病理變化確定[2]。

利用病雞的腫瘤組織、抗凝血或含血液淋巴細胞的懸液作為接種材料，并接種在雞胚成纖維細胞中，待出現蝕斑后收獲蓋片并用冷丙酮固定，然后用單抗作免疫熒光染色進行鑒定。檢測組織中的病毒抗原或核酸用于查明有病毒感染存在。聚合酶鏈反應（PCR）試驗可用來擴增馬立克病毒特異序列，可區(qū)分致弱株和野毒株。然而PCR 的敏感性有時不足以檢測出潛伏感染，因為陽性細胞少，而每個細胞中病毒基因拷貝數較少。因此常用定量PCR 試驗分析感染雞組織中病毒載量，也正成為馬立克病診斷和流行病學研究必不可少的手段[3]。另外抗體檢測雞血清特異抗體可用于監(jiān)測雞群馬立克病毒感染情況、研究病毒發(fā)病機理和監(jiān)控SPF 雞群。常用的有瓊脂擴散試驗、熒光抗體試驗、ELISA 和病毒中和試驗等多種方法。

5 雞馬立克氏病的防控措施

加強雞馬立克氏病的凈化，對雞進行嚴格檢疫，及時淘汰帶毒雞者，對飼養(yǎng)環(huán)境及時消毒，建立健康雞群，培育健康后代。需要根據雞馬立克病毒抗體水平、生產類型和雞的飼養(yǎng)方式制定相應的免疫程序，合理接種雞馬立克氏病相關疫苗，同時監(jiān)測雞體內的抗體水平，才能獲得良好的免疫效果。通過適當的飼養(yǎng)管理，提高雞只的抗病能力。同時可添加益生菌、多種維生素、免疫增強劑、抗氧化補充劑，使雞群更能抵抗疾病。目前的研究發(fā)現，幾乎所有的雞群都會發(fā)生馬立克病毒的強毒感染，而接種疫苗并不能阻止強毒感染，只能阻止強毒感染的致癌作用，因此即使與其他綜合防控措施配合，也未必能達到預期的防控效果。從接種雞馬立克氏病疫苗到得到可靠保護需要一周左右的時間，因此綜合防控應防止孵化和飼養(yǎng)期間的早期感染為目標。使孵化場應遠離禽舍，嚴格消毒，入雛前應徹底清潔消毒，出雛前后用甲醛對輸卵管進行熏蒸消毒，育雛雞舍應遠離其他日齡雞舍。

6 小結

加強飼養(yǎng)管理，預防其他疾病的繼發(fā)感染，提高機體的免疫力是雞馬立克氏病重要的防控措施。另外，可以將現代生物技術與傳統育種技術相結合，要改善飼養(yǎng)條件，加強飼養(yǎng)管理，提高雞的身體機能，及時做好各種疾病的免疫工作，制定禽場馬立克氏病防治策略，做到科學飼養(yǎng)，提高養(yǎng)雞業(yè)的經濟效益。■