丹霞鐵皮石斛保健功能的實(shí)驗(yàn)研究

胡宗禮，黃曉萍，于白音

（韶關(guān)學(xué)院 英東生物與農(nóng)業(yè)學(xué)院，廣東 韶關(guān) 512005）

鐵皮石斛（Dendrobium officinaleKimura et Migo）屬于蘭科石斛屬中多年生草本植物，以莖入藥，性微寒，味甘，具有益胃生津、滋陰清熱等功效. 研究表明，鐵皮石斛主要含石斛多糖、黃酮類、石斛堿等活性成分，具有抗腫瘤、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗衰老、降血糖等作用［1-2］.

丹霞鐵皮石斛是產(chǎn)于廣東省韶關(guān)市仁化縣丹霞山地區(qū)的一個(gè)新品種，前期的研究顯示主要含多糖類成分，生物堿和黃酮類含量較低. 有研究顯示，各地區(qū)鐵皮石斛的成分及其功效存在明顯差異，而這些差異與地理位置、種質(zhì)資源與人工繁育體系有關(guān)［3-4］.

本文通過對丹霞鐵皮石斛的抗疲勞、耐缺氧、抗氧化作用與免疫調(diào)節(jié)等作為指標(biāo)來評價(jià)丹霞鐵皮石斛的作用，為其開發(fā)應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).

1 實(shí)驗(yàn)材料

丹霞鐵皮石斛、廣西鐵皮石斛由韶關(guān)學(xué)院石斛研究基地提供；SOD試劑盒、MDA試劑盒、GSH試劑盒均購于南京建成生物工程研究所；雄性昆明小白鼠購于南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心.

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 受試鐵皮石斛液的制備

干燥的鐵皮石斛經(jīng)粉碎，按料液比（W/V）1∶40加蒸餾水回流煮沸1 h后過濾，丹霞鐵皮石斛濾液分別濃縮為2.5%、5.0%、10.0%，廣西鐵皮石斛濾液濃縮為10.0%，冰箱冷藏保存?zhèn)溆?

2.2 丹霞鐵皮石斛的抗疲勞作用

小白鼠隨機(jī)分配給對照組、丹霞鐵皮石斛不同濃度組和廣西鐵皮石斛組，每組10只. 各組小鼠自由進(jìn)食進(jìn)水，每天上午灌胃給石斛液，劑量為0.02 mL·（g體質(zhì)量）-1，對照組灌胃給予等量生理鹽水，連續(xù)給石斛液20 d；第21 d，小鼠稱重后，腰部固定10%體質(zhì)量的負(fù)荷，然后放進(jìn)水溫30 ℃、水深25 cm的水槽中，記錄從入水開始至鼻腔第一次沉下水面的時(shí)間.

2.3 丹霞鐵皮石斛的耐缺氧作用

實(shí)驗(yàn)分組、給石斛液劑量和時(shí)間同“2.2”. 第21 d，將小鼠單只放進(jìn)裝有10 g鈉石灰的250 mL廣口瓶內(nèi)，蓋上蓋子，密封，觀察并記錄小鼠缺氧死亡的時(shí)間.

2.4 丹霞鐵皮石斛的抗氧化作用

實(shí)驗(yàn)分組、給石斛液劑量和時(shí)間同“2.2”. 游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將小鼠脫臼處死，剖腹，切開腹主動脈取血，離心分離血清，按試劑盒說明書方法測定SOD、MDA及GSH含量.

2.5 丹霞鐵皮石斛對小鼠免疫功能的影響

實(shí)驗(yàn)分組、給石斛液劑量和時(shí)間同“2.2”. 游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將小鼠脫臼處死，稱重，然后取小鼠胸腺和脾臟，用吸水紙吸干胸腺和脾臟表面的水分與血液后稱重，分別計(jì)算胸腺、脾臟等器官指數(shù).

2.6 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)用SPSS 16統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，以P＜0.05為顯著性差異.

3 結(jié)果

3.1 丹霞鐵皮石斛對小鼠游泳時(shí)間的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，丹霞鐵皮石斛能顯著延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間（P＜0.05，P＜0.01），而且呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系，表明丹霞鐵皮石斛有明顯的抗疲勞作用（表1）；同時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，10.0%丹霞鐵皮石斛延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間優(yōu)于10.0%廣西鐵皮石斛，但無顯著性差異（P＞0.05）.

表 1 丹霞鐵皮石斛對小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響（n=10）

3.2 丹霞鐵皮石斛對小鼠耐缺氧的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比，丹霞鐵皮石斛和廣西鐵皮石斛均能明顯延長小鼠在缺氧環(huán)境中的存活時(shí)間（P＜0.05）（丹霞鐵皮石斛與廣西鐵皮石斛無顯著性差異），表明丹霞鐵皮石斛具有良好的耐缺氧作用（表2）.

表 2 丹霞鐵皮石斛對小鼠耐缺氧時(shí)間的影響（n=10）

3.3 丹霞鐵皮石斛對小鼠抗氧化作用的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比，丹霞鐵皮石斛能明顯提高小鼠血清SOD和GSH水平、降低MDA含量（P＜0.05）（但與廣西鐵皮石斛無顯著差異），表明丹霞鐵皮石斛具有良好的抗氧化作用（表3）.

表 3 丹霞鐵皮石斛對小鼠抗氧化水平的影響（n=10）

3.4 丹霞鐵皮石斛對小鼠免疫功能的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，2.5%和5.0%丹霞鐵皮石斛對小鼠胸腺器官指數(shù)和脾臟器官指數(shù)無明顯影響 （P＞0.05），而10.0%的丹霞鐵皮石斛和廣西鐵皮石斛能明顯提高小鼠胸腺器官指數(shù)和脾臟器官指數(shù) （P＜0.05），表明丹霞鐵皮石斛具有增強(qiáng)小鼠免疫功能作用（表4）.

表 4 丹霞鐵皮石斛對小鼠免疫器官指數(shù)的影響（n=10）

4 討論

鐵皮石斛是眾多蘭科植物中重要的藥用植物之一，位列“中華九大仙草”之首，其藥用價(jià)值及保健功效被人們廣泛認(rèn)可. 隨著人們保健意識的增強(qiáng)，以鐵皮石斛為原料開發(fā)的保健品在市場非常暢銷.

鐵皮石斛的主要有效成分包括多糖、黃酮及生物堿. 中藥多糖是從天然中藥中提取的有效成分，是所有生命有機(jī)體的重要組成成分并與維持生命所必需的結(jié)構(gòu)材料，具有廣泛的生物學(xué)活性，如抗腫瘤、增強(qiáng)機(jī)體免疫力［5］、抗衰老［6］、抗氧化［7］、降血糖、降血脂、保護(hù)肝臟、抗炎、抗病毒、調(diào)節(jié)腸道菌群等［8］.

研究表明中藥多糖對腫瘤具有抑制增殖和轉(zhuǎn)移、誘導(dǎo)凋亡等抗腫瘤活性［9］，而腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體免疫功能低下密切相關(guān). 胸腺和脾臟是機(jī)體重要的免疫器官，胸腺主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫，脾臟主要介導(dǎo)體液免疫. 丹霞鐵皮石斛能明顯增加小鼠胸腺和脾臟器官指數(shù)而增加機(jī)體免疫功能，與丹霞鐵皮石斛多糖組分密切有關(guān).

機(jī)體進(jìn)行各項(xiàng)生命活動時(shí)發(fā)生的新陳代謝會連續(xù)不斷生成自由基，而自由基通過介導(dǎo)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)能破壞生物膜，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙，如心腦血管疾病. 黃酮類化合物中的羥基能高效精準(zhǔn)捕捉反應(yīng)鏈中的自由基并終止自由基介導(dǎo)的反應(yīng)，保護(hù)造血干細(xì)胞和促進(jìn)造血系統(tǒng)的修復(fù)功能［10］. 丹霞鐵皮石斛含多種黃酮類成分，能顯著提高小鼠血清抗氧化酶SOD、GSH水平，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的含量，從而提高小鼠抗疲勞和耐缺氧能力.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，丹霞鐵皮石斛作為石斛家族中的一個(gè)新品種，具有良好的保健功效，具有廣闊的開發(fā)前景.