牛結(jié)核病現(xiàn)狀及診斷技術(shù)研究進(jìn)展

馬少飛

（寧夏吳忠市鹽池縣馮記溝鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，寧夏 鹽池 751599）

牛結(jié)核病，對(duì)高產(chǎn)奶牛、使役牛等有極強(qiáng)的感染性。不同年齡?；疾『蟮呐R床表現(xiàn)不同，染病犢牛多表現(xiàn)迅速消瘦、采食量下降，還出現(xiàn)頑固性的下痢。而壯年牛則是結(jié)核病的高發(fā)群體，奶牛染病后會(huì)出現(xiàn)泌乳量下降，且乳汁呈現(xiàn)異常的稀薄狀；而使役牛存在易疲勞、無力，常發(fā)短而干的咳嗽，頻繁且表現(xiàn)痛苦，一些患病牛會(huì)出現(xiàn)突發(fā)性心臟衰竭，嚴(yán)重時(shí)患病牛會(huì)直接猝死?；诖耍＝Y(jié)核病將會(huì)對(duì)牛的生長情況甚至是養(yǎng)殖收益等產(chǎn)生不良影響。此外，牛結(jié)核病具有人畜共患特點(diǎn)，其能夠?qū)︷B(yǎng)殖人員造成感染并導(dǎo)致人類死亡。因此牛肺結(jié)核病已經(jīng)成為世界多個(gè)國家和地區(qū)公認(rèn)的能夠嚴(yán)重危害人畜安全的主要疾病之一。在我國消費(fèi)者對(duì)乳制品以及牛源性食品需求量的增加使越來越多的人投入到養(yǎng)牛行業(yè)中，推動(dòng)了養(yǎng)牛業(yè)的快速發(fā)展。但是養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大也為各類疫病的傳播創(chuàng)設(shè)了條件，如牛結(jié)核病雖然得到了有效控制，但受飼養(yǎng)方式等因素的影響，近幾年該病又呈現(xiàn)出增長趨勢(shì)，所以做好牛結(jié)核病的防控與治療工作，依然是一項(xiàng)重要的公共衛(wèi)生任務(wù)。

1 牛結(jié)核病的現(xiàn)狀

牛結(jié)核病不僅會(huì)對(duì)牛的正常生長發(fā)育及生長性能發(fā)揮產(chǎn)生影響，而且還會(huì)威脅養(yǎng)殖人員的健康，進(jìn)而對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展造成影響，由此，我國公共衛(wèi)生防疫部門始終高度重視對(duì)牛結(jié)核病的防控工作，不斷加強(qiáng)對(duì)牛結(jié)核病的深入研究，以減少人畜共患病的發(fā)生，促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展。

牛結(jié)核病是牛感染牛分枝桿菌和結(jié)核分枝桿菌而發(fā)生的疾病，傳染源非常廣泛，如病人和病?？梢宰鳛閭魅驹矗∨Ｊ侵饕獋魅驹?，其糞便排泄物、分泌物以及被污染的環(huán)境等均可能造成病原體傳播。在牛結(jié)核病盛行的地區(qū)，人類依然飽受該病的危害，因此必須對(duì)該病進(jìn)行有效控制。此外，受養(yǎng)牛貿(mào)易往來的影響，各地區(qū)牛的流動(dòng)日益頻繁，加劇了牛結(jié)核病的傳播范圍。從世衛(wèi)組織所提供的數(shù)據(jù)來看，當(dāng)前全球結(jié)核病每年新增800萬～1000萬人，死亡約300萬人，新發(fā)病人群中有12%的艾滋病患者，另有3.2%的病人存在耐藥性。沒有接受過任何治療的患者，在1年內(nèi)，能有效傳染15個(gè)健康人。自上世紀(jì)80年代以來，全球結(jié)核病病情出現(xiàn)回升，這一現(xiàn)象也引起了世界衛(wèi)生組織的高度重視，但是時(shí)至今日結(jié)核病仍然是威脅人類生命安全的主要疾病之一，這也為全球公共衛(wèi)生事業(yè)工作帶來了一系列的阻礙。

2 傳播途徑與傳染源

2.1 傳播途徑牛結(jié)核病主要通過呼吸道進(jìn)行感染，養(yǎng)殖場(chǎng)中若出現(xiàn)牛結(jié)核病個(gè)例，牛通過呼吸向外界排出的病原體，會(huì)借助空氣中的飛沫或媒介再經(jīng)呼吸道感染養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)其他健康牛，該病的傳染性較強(qiáng)，僅需要少量的牛型結(jié)核分枝桿菌就能夠引起牛患病。此外，牛結(jié)核病也能通過消化道感染，當(dāng)健康牛食用了帶有牛結(jié)核病病原體的飼料或水源后也會(huì)染病。該病不會(huì)通過胎盤或皮膚感染。

2.2 主要傳染源患病動(dòng)物以及帶菌動(dòng)物為傳染源，牛羊等反芻動(dòng)物容易感染結(jié)核型分枝桿菌，以牛的患病幾率最高。研究發(fā)現(xiàn)在狐貍以及獾等野生動(dòng)物的體內(nèi)也存在結(jié)核病原體，若養(yǎng)牛場(chǎng)處于野外，當(dāng)帶病野生動(dòng)物進(jìn)入后，會(huì)通過排泄污染養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境飼料、飼草、飲用水或養(yǎng)殖器具等，當(dāng)牛食用這些被污染的飼料，或養(yǎng)殖人員使用被污染的器具后，養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)的肉牛就會(huì)染病。在眾多家畜中，以牛最易感染牛型結(jié)核分枝桿菌，尤其是奶牛，其次為水牛，最后為黃牛和牦牛等，其他動(dòng)物染病幾率較低，但仍有患病可能。易出現(xiàn)結(jié)核病的動(dòng)物主要有豬、猴、鹿等，羊及馬等患病幾率較低。除此之外，該病具有人畜共患的特點(diǎn)，能對(duì)人類造成影響，且能在動(dòng)物與人類之間相互傳播。

3 人的感染途徑

在養(yǎng)牛場(chǎng)中，感染牛結(jié)核病的牛是人結(jié)核病的主要傳染源，且有相關(guān)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)表明，在發(fā)展中國家10%～15%的肺結(jié)核病人是由牛分枝桿菌導(dǎo)致的，而發(fā)達(dá)國家中僅有1%，截至2019年，世界衛(wèi)生組織估計(jì)全球存在14萬人是由牛分枝桿菌感染致病的，其中有1.14萬人治療無效死亡。人感染牛分枝桿菌的途徑較多：

3.1 養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)的牛感染牛結(jié)核病養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)的牛奶等乳制品存在被污染的風(fēng)險(xiǎn)，當(dāng)這些牛奶進(jìn)入市場(chǎng)后就會(huì)可能導(dǎo)致消費(fèi)者染病，其中兒童由于自身免疫水平較低，患病風(fēng)險(xiǎn)要明顯高于成人。相關(guān)數(shù)據(jù)表明全球15%的結(jié)核病人是通過飲用帶有病原體的牛奶或乳制品被感染的。

3.2 養(yǎng)殖人員感染該病地與牛分枝桿菌菌體同處一個(gè)環(huán)境之中，除了養(yǎng)殖人員，兼職牧民、獸醫(yī)或者擠奶人員都會(huì)受牛分枝桿菌的影響，其主要感染途徑為吸入了患病?；驇Ь？瘸龅娘w沫等。當(dāng)前我國的內(nèi)蒙、新疆以及西藏等牧區(qū)，是我國牛分枝桿菌感染的重災(zāi)區(qū)。以奶牛養(yǎng)殖為例，目前我國奶牛養(yǎng)殖主要包括養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖以及以家庭為單位的個(gè)體養(yǎng)殖戶養(yǎng)殖，在一些中小型養(yǎng)殖場(chǎng)或個(gè)體養(yǎng)殖戶尚未構(gòu)建起安全的公共衛(wèi)生管理體系，極大地提升了患病牛對(duì)養(yǎng)殖人員的感染途徑，患病牛通過打噴嚏會(huì)將病原體排出體外，并對(duì)環(huán)境中的養(yǎng)殖設(shè)施、奶制品等造成污染，當(dāng)牧民引用了帶有病原體的牛奶后就會(huì)導(dǎo)致感染并發(fā)病。

3.3 旅行和移民也是人感染牛分枝桿菌的重要原因，目前一些地區(qū)的奶制品會(huì)使用巴氏殺菌法進(jìn)行處理，通過處理后能夠有效地殺死奶制品中的病原，但是一些國家的奶制品并不會(huì)采用巴氏殺菌法，所以，跨國旅行或者移民人員等均是感染牛分枝桿菌的主要對(duì)象。除此之外，人感染牛分枝桿菌的原因還包括風(fēng)俗文化，如信仰以及養(yǎng)殖的寵物等。

4 流行病學(xué)特點(diǎn)

多年研究表明，結(jié)核病除了會(huì)對(duì)人類造成影響外，還能夠感染多類動(dòng)物，其中結(jié)核病涉及到50多種哺乳類動(dòng)物以及20多種家禽，而牛最易感，在眾多牛的品種中奶牛最易感，其次是水牛、牦牛以及生豬等，羊受到結(jié)核病的影響較輕，野生動(dòng)物對(duì)結(jié)核病的抵抗能力極強(qiáng)，且時(shí)至今日尚未出現(xiàn)野生動(dòng)物患病案例。

分枝桿菌是導(dǎo)致牛染病的主要原因，分枝桿菌是致病源，又可細(xì)分為結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌以及禽分枝桿菌等：顯微鏡下的分枝桿菌多為彎曲狀或平直狀，屬于革蘭氏陽性菌，分枝桿菌菌體對(duì)外界環(huán)境的抵抗能力較強(qiáng)，在陰冷潮濕的環(huán)境下比較活躍，牛在染病后潛伏期存在差異，最長甚至能夠持續(xù)數(shù)年，但是分枝桿菌對(duì)于光和高溫比較敏感，當(dāng)病原體處于高溫環(huán)境下只能夠生存幾個(gè)小時(shí)，且常用的消毒劑即可輕松殺死結(jié)核桿菌病原體。

此外，呼吸道及消化道是牛分枝桿菌的主要傳播途徑。病牛會(huì)通過咳嗽、噴嚏將病原體排出體外，漂浮在空氣飛沫中，健康人畜吸入后可發(fā)生感染和傳播。散養(yǎng)狀態(tài)下的牛，其患病概率為1%～5%。而圈養(yǎng)牛因畜舍通風(fēng)不好，牛與牛接觸緊密，不嚴(yán)加監(jiān)管，極易導(dǎo)致大面積的疫情傳播。

5 診斷方法

5.1 細(xì)菌學(xué)診斷細(xì)菌學(xué)診斷是分枝桿菌診斷的常見方式，主要包括染色法以及培養(yǎng)法等，利用該診斷方式能查明早期傳染源，其中染色法的優(yōu)勢(shì)在于診斷操作簡單，且檢測(cè)材料以及設(shè)備來源比較廣泛。其缺點(diǎn)是，不能準(zhǔn)確鑒別分枝桿菌的類型，特異性不佳。培養(yǎng)法多應(yīng)用于疑似患病牛的檢測(cè)，通過分離細(xì)菌培養(yǎng)，并在鏡下進(jìn)行檢測(cè)，可深入了解牛結(jié)核病的感染情況。而結(jié)核桿菌具有生長緩慢的特性，且會(huì)受種因素影響，因此其陽性率不穩(wěn)定，在實(shí)際應(yīng)用受局限。

5.2 分子學(xué)診斷

5.2.1 PCR技術(shù) 此項(xiàng)診斷技術(shù)具有快速、高度靈敏性及特異性等特點(diǎn)，可縮減病菌檢出時(shí)間，被普遍應(yīng)用于牛結(jié)核病檢測(cè)。使用PCR診斷時(shí)，往往需要價(jià)格高昂的儀器、設(shè)備等，如果操作不標(biāo)準(zhǔn)，會(huì)嚴(yán)重影響最終的檢測(cè)結(jié)果。所以，在使用此技術(shù)檢測(cè)病菌時(shí)，必須保證前期工作的有序進(jìn)行。

5.2.2 DNA探針 通過DNA探針技術(shù)檢測(cè)牛結(jié)核病的核心就是探針，探針類型較多，常見的有cDNA、全染色體核酸等。在診斷過程中，首先將已被隔斷的寡核苷酸進(jìn)行標(biāo)記，隨后與擴(kuò)增產(chǎn)物實(shí)現(xiàn)雜交，進(jìn)而鑒別出相應(yīng)的病原菌，該法也可診斷其余類型的致病菌。

5.3 免疫學(xué)診斷

5.3.1 結(jié)核菌素測(cè)試 我國大部分養(yǎng)殖基地使用的診斷方法為結(jié)核菌素診斷法，該法是世界公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)牛結(jié)核病的一項(xiàng)技術(shù)手段。現(xiàn)階段，國內(nèi)主要是以對(duì)蛋白質(zhì)衍生物進(jìn)行純化為主，診斷耗時(shí)較多、操作難度大，易受到各方面因素影響，無法有效地保證最終檢測(cè)結(jié)果。

5.3.2 間接酶聯(lián)免疫吸附法 該法以抗原抗體之間的特異性反應(yīng)為基礎(chǔ)，當(dāng)前該技術(shù)的應(yīng)用比較普遍，具有靈敏度高以及操作簡單的優(yōu)勢(shì)，但也存在一些缺陷，如病原菌的抗原性較弱，受抗原決定簇的影響，最終會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

6 結(jié)語

隨著民眾生活水平的提高，其關(guān)于乳制品的需求也不斷增加。在推動(dòng)養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大的同時(shí)，也防控牛結(jié)核病的工作變得更加嚴(yán)峻。所以，當(dāng)前必須強(qiáng)化科研力度，通過多種多樣的檢測(cè)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)病菌的深入研究，科學(xué)分析相應(yīng)的病原體，綜合運(yùn)用各項(xiàng)診斷方法，從而保證診斷結(jié)果的可靠性、特異性以及靈敏度，最終使牛結(jié)核病得到有效的防控。