膀胱癌病人癌組織中Dickkopf相關(guān)蛋白2的表達(dá)及與預(yù)后的相關(guān)性

李玉柱 夏連杰

膀胱癌是臨床中常見的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤，其具有多病灶、易復(fù)發(fā)、易轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)，預(yù)后較差，病死率較高[1-2]。Dickkopf相關(guān)蛋白2(DKK2)是近年來新發(fā)現(xiàn)的與膀胱癌緊密相關(guān)的一種癌基因，在細(xì)胞內(nèi)可通過激活拮抗Wnt通路發(fā)揮抑癌活性[3-4]。有研究表明，DKK2表達(dá)與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切[5]。本研究探討膀胱癌病人DKK2的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

對象與方法

一、對象

2016年5月～2018年6月我院收治的行手術(shù)治療的膀胱癌病人86例，其中男54例，女32例；年齡42～76歲，平均年齡(52.75±10.72)歲。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合膀胱癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，并經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診；符合手術(shù)指征并均擬行全膀胱切除治療；術(shù)前未進(jìn)行放療、化療等治療；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：心、肝、腎等重要臟器功能障礙；合并肝癌、胃癌等其他腫瘤疾?。蝗焉锘虿溉槠谂?；合并精神疾病或認(rèn)知功能障礙；合并免疫系統(tǒng)或血液系統(tǒng)疾病。

二、方法

1.DKK2檢測：術(shù)中收集所有研究對象膀胱癌組織及癌旁組織(距癌組織≥5 cm)，并快速進(jìn)行病理檢查。采取免疫組化法對膀胱組織DKK2表達(dá)進(jìn)行檢測，標(biāo)本石蠟包埋后切片，行HE染色和免疫組織化學(xué)染色；染色結(jié)果判斷[7]：陽性細(xì)胞數(shù)得分×染色強(qiáng)度得分≤3分為DKK2表達(dá)陰性，若陽性細(xì)胞數(shù)得分×染色強(qiáng)度得分>3分為DKK2表達(dá)陽性。

2.觀察指標(biāo)：術(shù)后隨訪，截止時(shí)間2021年5月31日，所有膀胱癌病人術(shù)后以門診、電話等多種方式進(jìn)行隨訪，每3個(gè)月1次，以研究對象失訪、死亡或隨訪時(shí)間截止為終點(diǎn)事件。收集影響膀胱癌病人預(yù)后的臨床資料，包括性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)、腫瘤最大徑、吸煙、飲酒、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、脈管侵犯。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié)果

1.膀胱癌組織、癌旁組織中DKK2表達(dá)情況比較見表1。結(jié)果表明，膀胱癌組織DKK2陰性表達(dá)率高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 膀胱癌組織、癌旁組織中DKK2表達(dá)比較

2.癌組織中DKK2表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系見表2。結(jié)果表明，不同性別、年齡、BMI、吸煙、飲酒、腫瘤數(shù)量膀胱癌病人癌組織中DKK2陰性表達(dá)率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；腫瘤最大徑≥3 cm、臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化、脈管侵犯膀胱癌病人癌組織中DKK2陰性表達(dá)率分別高于腫瘤最大徑<3 cm、臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中/高分化、無脈管侵犯病人，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 癌組織中DKK2在不同臨床病理特征中的表達(dá)情況(例，%)

3.影響膀胱癌病人預(yù)后的多因素分析見表3。86例膀胱癌病人術(shù)后隨訪期間共失訪5例，81例病人中19例死亡，病死率23.46%(19/81)；Cox回歸分析顯示，臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、DKK2陰性表達(dá)是影響膀胱癌病人預(yù)后的獨(dú)立影響因素，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表3 影響膀胱癌病人預(yù)后的單因素、多因素分析

4.癌組織中DKK2表達(dá)與膀胱癌病人預(yù)后的關(guān)系見圖1。截止隨訪結(jié)束，DKK2陽性病人失訪1例，剩余18例，其中死亡1例，總存活率為94.44%(17/18)；DKK2陰性病人失訪4例，剩余63例，其中死亡18例，總存活率為71.43%(45/63)。DKK2陽性表達(dá)病人與DKK2陰性表達(dá)病人生存曲線比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.131，P=0.042)。

圖1 膀胱癌組織DKK2陽性表達(dá)、DKK2陰性表達(dá)病人生存曲線

討論

膀胱癌具有浸潤性生長的特征，手術(shù)切除后部分病人會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等，嚴(yán)重影響了病人的預(yù)后[8-9]。有研究表明，膀胱癌細(xì)胞的異常增殖、侵襲致使病灶浸潤性生長的惡性生物學(xué)行為是腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的病理基礎(chǔ)，不利于病灶的徹底清除，直接影響了病人的預(yù)后[10-11]。有研究表明，DKK2表達(dá)與膀胱癌的增殖、侵襲相關(guān)，其參與病灶的生長[12]。

本研究結(jié)果表明，膀胱癌組織DKK2陰性表達(dá)率高于癌旁組織，提示膀胱癌組織DKK2陰性表達(dá)率較高。本研究結(jié)果表明，腫瘤最大徑≥3 cm、臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化、脈管侵犯膀胱癌病人癌組織中DKK2陰性表達(dá)率分別高于腫瘤最大徑<3 cm、臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中/高分化、無脈管侵犯病人，提示DKK2表達(dá)與腫瘤最大徑、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度及脈管侵犯病理特征具有一定的相關(guān)性。DKK2為DKK家族的主要成員之一，其已被證實(shí)與胃癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[13-15]。有研究表明，DKK2表達(dá)水平增加可使膀胱癌細(xì)胞的細(xì)胞周期、增殖及侵襲發(fā)生停滯，對膀胱癌細(xì)胞的生物學(xué)行為具有一定的調(diào)控作用[16]。Cox回歸分析顯示，臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、DKK2陰性表達(dá)率是影響膀胱癌病人預(yù)后的獨(dú)立影響因素，提示在臨床中需逐一對以上危險(xiǎn)因素進(jìn)行防控。癌細(xì)胞的異常增殖是膀胱癌病灶內(nèi)主要的生物學(xué)特征，其增殖過程受多種基因的調(diào)控，其中細(xì)胞周期素D1(CyclinD1)、癌癥myc基因(c-myc)等相關(guān)基因的產(chǎn)物可通過促進(jìn)細(xì)胞周期由G0期向G1期的轉(zhuǎn)化，加速細(xì)胞周期的進(jìn)程，促進(jìn)細(xì)胞的增殖；增殖抑制基因(HSG)對癌細(xì)胞增殖具有抑制作用，可通過阻礙細(xì)胞周期進(jìn)程，致使細(xì)胞增殖發(fā)生停滯[17-19]。拓志勇等[20]研究表明，DKK2與CyclinD1、c-myc的表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)，與p16、HSG的表達(dá)量呈正相關(guān)。因此推測，DKK2表達(dá)可能是通過影響CyclinD1、c-myc等基因的表達(dá)影響癌細(xì)胞的增殖，影響預(yù)后。截止隨訪結(jié)束，DKK2陽性表達(dá)病人生存率高于DKK2陰性表達(dá)病人，提示DKK2陽性表達(dá)膀胱癌病人生存率較高，在臨床中對膀胱癌病人癌組織中DKK2表達(dá)檢測結(jié)果為陰性時(shí)，應(yīng)給予高度警惕。

綜上所述，膀胱癌病人癌組織中DKK2呈異常陰性表達(dá)，DKK2與臨床病理特征及預(yù)后均具有一定的相關(guān)性，其水平檢測對膀胱癌病人預(yù)后評(píng)估具有重要參考價(jià)值。本研究的病例數(shù)較少，隨訪時(shí)間較短，后續(xù)還應(yīng)聯(lián)合多中心擴(kuò)大樣本容量、延長隨訪時(shí)間。