miR-34a 及miR-150 在阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者血清中的表達及臨床意義

趙麗，高靜杰，季宇騰，方崢嶸

1.南通瑞慈醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，江蘇南通 226000；2.南通瑞慈醫(yī)院耳鼻喉科，江蘇南通 226000

臨床中，阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（obstructive sleep apnea hypopnea syndrome, OSAHS）是因上呼吸道反復(fù)阻塞擾亂睡眠中的正常通氣，從而影響患者睡眠質(zhì)量，進而出現(xiàn)注意力不集中、頭痛、精神萎靡等癥狀，對患者神經(jīng)系統(tǒng)功能造成影響，還可能誘發(fā)心腦血管相關(guān)疾病[1-2]。因此，臨床應(yīng)重視OSAHS 的早期篩查，并予以有效干預(yù)治療。既往研究顯示，循環(huán)miRNA 對靶細胞有生物學(xué)影響，其參與多種疾病的發(fā)生進展[3]。有研究報道，miR-34a 與血管內(nèi)皮細胞損傷存在相關(guān)性[4]，miR-150 的 表 達 與ST 段 抬 高 型 心 肌 梗 死（ST-segment elevation myocardial infarction, STEMI）患者預(yù)后有關(guān)[5]。但目前臨床對miR-34a 及miR-150 在OSAHS 中的意義的研究報道較少，因此，本研究選取2020 年4 月—2022 年4 月南通瑞慈醫(yī)院收治的78 例OSAHS 患者，探討miR-34a 及miR-150 在OSAHS 患者血清中的表達及臨床意義?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的78 例OSAHS 患者納入觀察組，按照呼吸暫停低通氣指數(shù)（apnea hypopnea index, AHI）將其分為輕度組（AHI≤10 次/h，22 例）、中度組（10 次/h＜AHI≤20 次/h，39 例）及重度組（AHI＞20 次/h，17 例），另選取同期本院體檢健康者50 名納入對照組。觀察組中男49 例，女29 例；平均年齡（41.78±2.13）歲。對照組中男33 名，女17 名；平均年齡（42.31±3.09）歲，兩組年齡及性別比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會批準，且患者及其家屬知情同意。

1.2 納入與排除標準

納入標準：符合OSAHS 診斷標準[6]者；年齡＞18歲者。

排除標準：合并其他類型睡眠障礙性疾病者；存在呼吸系統(tǒng)疾病者；腦外傷者；惡性腫瘤者；嚴重心腦血管疾病及既往接受耳鼻喉手術(shù)者。

1.3 方法

采用德國SOMNO screen puls PSG+多導(dǎo)睡眠監(jiān)測儀進行睡眠監(jiān)測，監(jiān)測時間為21∶00-07∶00，由專業(yè)醫(yī)師判定分析監(jiān)測結(jié)果，包括：最低血氧飽和度（lowest oxygen saturation, LSpO2）、睡眠呼吸暫停低通氣指數(shù)（apnea hypopnea index, AHI）、氧飽和度＜90%時間占睡眠時間百分比（percentage of sleep time when oxygen saturation is lower than 90%, Ts90%）。于睡眠監(jiān)測結(jié)束后采集空腹靜脈血8 mL，按照試劑盒說明書提取血清RNA，進行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，應(yīng)用實時熒光定量PCR 儀進行逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物擴增。

1.4 觀察指標

①以β-actin 為內(nèi)參，應(yīng)用2-△△CT方法計算miR-34a 及miR-150 的相對表達量；②采用全自動生化分析儀檢測低密度脂蛋白（low density lipoprotein, LDL）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein, HDL）、總膽固醇（total cholesterol, TC）和三酰甘油（triacylglycerol, TG）水平。

1.5 統(tǒng)計方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的計量資料用（±s）表示，組間差異比較采用t檢驗；多組比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD法，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組和對照組實驗室指標比較

兩組LDL、HDL、TC、TG 比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；與對照組比較，觀察組LSpO2較低，AHI 和Ts90%較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 觀察組和對照組實驗室指標比較(±s)

表1 觀察組和對照組實驗室指標比較(±s)

2.2 觀察組和對照組血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較

與對照組比較，觀察組患者血清中miR-34a 的相對表達量較高，miR-150 的相對表達量較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 觀察組和對照組血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較(±s)

表2 觀察組和對照組血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較(±s)

2.3 不同AHI 指數(shù)患者血清miR-34a 及miR-150的相對表達量比較

3 組血清miR-34a 及miR-150 相對表達量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；與輕度組比較，中度組和重度組血清miR-34a 的相對表達量較高，而miR-150 的相對表達量較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；與中度組比較，重度組血清miR-34a 的相對表達量較高，而miR-150 的相對表達量較低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 不同AHI 指數(shù)患者血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較(±s)

表3 不同AHI 指數(shù)患者血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較(±s)

2.4 ROC 曲線分析

由ROC 曲 線 可 知，miR-34a 診 斷OSAHS 的 曲線下 面積為0.815（95%CI:0.721～0.936，P＜0.05），截斷值為3.54，敏感性為95.12%，特異性為83.44%；miR-150 診斷OSAHS 的曲線下面積為0.809（95%CI:0.708～0.914，P＜0.05），截斷值為0.83，敏感性為92.23%，特異性為80.56%，見圖1。

圖1 ROC 曲線分析

3 討論

臨床研究表明，miRNAs 在炎癥反應(yīng)過程中發(fā)揮重要作用，其異常表達與神經(jīng)系統(tǒng)疾病、腦損傷等相關(guān)[7-8]。OSAHS 的發(fā)病過程是一種慢性炎癥過程，其主要特征表現(xiàn)為間歇性低氧（intermittent hypoxia, IH），由于機體內(nèi)低氧循環(huán)發(fā)生，進而誘發(fā)血管內(nèi)皮細胞損傷[9-10]。最近研究顯示，miRNAs 在缺氧所致的組織細胞損傷中發(fā)揮重要作用[11]。因此，本研究探究了miR-34a 及miR-150 與OSAHS 的關(guān)系。既往研究顯示，miR-34a 對心血管疾病、血管內(nèi)皮細胞功能障礙等有調(diào)控作用，其在高血壓、冠心病等患者血清中呈高表達[12-13]。另有研究報道，miR-150 可通過靶向血管內(nèi)皮生長因子調(diào)節(jié)中動脈閉塞大鼠的血管生成及神經(jīng)功能缺損[14]。miR-150 的上調(diào)可通過抑制信號通路，實現(xiàn)抑制炎癥反應(yīng)及血栓形成的作用[15]。

本研究發(fā)現(xiàn)，與對照組比較，觀察組患者血清中miR-34a 的相對表達量（3.67±0.89）較高，而miR-150的相對表達量（0.67±0.15）較低（P＜0.05）。結(jié)果提示，OSAHS 患者血清中miR-34a 呈高表達，miR-150呈低表達。呂欣[16]研究發(fā)現(xiàn)，OSAHS 患者外泌體中miR-34a 的表達顯著上調(diào)，其相對表達量為（3.95±0.73），其可能成為治療OSAHS 患者血管內(nèi)皮損傷的靶點。另有研究報道，miR-34a 的過表達可能對血管壁損傷信號通路有調(diào)節(jié)作用，從而降低炎癥反應(yīng)程度[17]。潘琴艷等[18]研究發(fā)現(xiàn)，miR-150 水平變化與急性腹膜炎伴膿毒癥患者病情嚴重程度有關(guān)。另有研究報道，miR-150 與機體炎癥反應(yīng)、神經(jīng)炎癥損傷等密切相關(guān)[19-20]。由以上研究可知，miR-34a 及miR-150 的表達與多種疾病相關(guān)，且其表達水平與疾病嚴重程度有關(guān)。

進一步分析不同AHI 指數(shù)OSAHS 患者血清miR-34a 及miR-150 的表達發(fā)現(xiàn)，與輕度組比較，中度組和重度組血清miR-34a 表達較高，而miR-150 表達較低；與中度組比較，重度組血清miR-34a 表達較高，而miR-150 表達較低（P＜0.05）。這說明miR-34a 及miR-150 參與OSAHS 的發(fā)生過程，且其表達量隨患者病情加重而發(fā)生變化。分析原因可能為：miR-34a 水平的升高，可能是其對信號通路有促進作用；miR-150 水平的降低，可能是由于其對信號通路的活性有抑制作用，在削弱機體炎性反應(yīng)時出現(xiàn)消耗性降低。因此推測miR-34a 表達上調(diào)及miR-150 的表達下調(diào)可促進OSAHS 患者機體細胞的衰老及凋亡。通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，miR-34a 診斷OSAHS 的曲線下面積為0.815（95%CI:0.721～0.936，P＜0.05），敏感性為95.12%，特異性為83.44%；miR-150 診斷OSAHS 的曲線下面積為0.809（95%CI:0.708～0.914，P＜0.05），敏感性為92.23%，特異性為80.56%。結(jié)果提示，miR-34a 及miR-150 診斷OSAHS 的敏感性及特異性均較高，推測二者或?qū)⒊蔀镺SAHS 臨床診斷的評價指標。

綜上所述，OSAHS 患者血清miR-34a 表達水平升高，而miR-150 表達水平降低，且其表達水平隨患者病情嚴重程度變化而變化，可作為OSAHS 臨床診斷的評價指標。