胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平檢測及臨床意義

韓霜，施育鵬，李亞妮，陳鎮(zhèn)，王小娟，孫力

西安市紅會醫(yī)院消化內(nèi)科1、消化外科2，陜西 西安 710000

胃癌具有臨床癥狀出現(xiàn)晚、進展速度快、生存率低的特點，其死亡率在世界上位居第二。有研究指出，該病在65歲后的人群中發(fā)病呈現(xiàn)明顯升高的趨勢[1]。隨著對胃癌中分子學機制的研究，以及對腫瘤細胞轉(zhuǎn)移、增殖生長過程中的信號轉(zhuǎn)到通路作用機制的不斷深入研究，逐漸認識到該病在發(fā)生和發(fā)展過程中屬于一個多階段、多因素的過程，其中涉及到多種分子、多個基因的水平變化，成為腫瘤靶向治療的研究熱點之一[1-2]。血清甲胎蛋白(AFP)是血液里存在的一項腫瘤標志物，主要用于檢測人體原發(fā)性肝癌，或者生殖腺胚胎癌，如睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等惡性腫瘤疾病[3]。胃癌相關(guān)抗原(MG7-Ag)屬于非特異性表面抗原，在健康人體中的含量很低，孟培等[4]研究發(fā)現(xiàn)血清MG7-Ag 在胃癌患者中的水平高于身體健康的人體。分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)在細胞內(nèi)的異位表達能抑制多種腫瘤細胞的增殖，但有時能在促凋亡因子存在時誘發(fā)凋亡，從而決定細胞的分化、增殖、遷移或癌變等特性[5]。胸苷激酶-1(TK1)是細胞增殖標志物，可以監(jiān)測細胞異常增殖的速度。適用于體檢和癌前病變評估等，可以預(yù)估預(yù)后生存率、預(yù)測復(fù)發(fā)風險率、評估癌變進程的風險度等。胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)主要由胃底腺的主細胞和黏液頸細胞分泌。胃萎縮時會改變蛋白酶原的分泌，因此PGⅠ可作為胃黏膜萎縮的可靠指標[6]。本研究旨在探討胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平及其臨床意義，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析西安市紅會醫(yī)院消化外科2018年8月至2019年8月收治的110例胃癌患者(觀察組)的臨床資料。納入標準：①患者在胃鏡下病理取到胃癌細胞，并經(jīng)臨床病理學檢測符合胃癌的診斷標準[7]；②患者出現(xiàn)胃癌相關(guān)的上腹痛、脹氣、上消化道穿孔、消化道出血、消化道梗阻等胃癌相關(guān)的臨床表現(xiàn)；③腫瘤標記物血清癌胚抗原(CEA)及AFP升高；④患者年齡為50～80歲。排除標準：①血液系統(tǒng)疾病；②乳腺癌、前列腺癌、肺癌等惡性腫瘤疾??；③酗酒、抽煙、熬夜等不良生活習慣；④心功能、肝功能、肺功能及腎功能障礙。選取同期在我院接受體檢的健康人群85例作為對照組。兩組受檢者的一般資料比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有可比性，見表1。本研究經(jīng)我院醫(yī)學倫理委員會批準。

表1 兩組受檢者的一般資料比較()

表1 兩組受檢者的一般資料比較()

組別 例數(shù) 男/女(例)年齡(歲)BMI(kg/m2)觀察組對照組χ2/t值P值110 85 54/56 42/43 0.002 0.965 68.51±1.12 68.40±1.08 0.691 0.491 25.90±2.05 25.78±2.14 0.398 0.691

1.2 觀察指標與檢測方法 (1)比較兩組受檢者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平。兩組受檢者采集靜脈血6 mL，通過離心機在3 000 r/min的狀態(tài)下進行離心并分離，提取上層血清液在-80℃的冷凍箱中待檢。采用放射免疫分析法檢測血清AFP、PGⅠ水平，采用酶聯(lián)免疫法檢測MG7-Ag、DKK1 水平，采用增強化學發(fā)光法檢測血清TK1 水平；以上檢測所需的試劑盒由南京歐凱生物科技有限公司提供。(2)比較不同胃癌患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平。(3)分析胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平與TNM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。

1.3 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS18.0 軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析。計量資料符合正態(tài)分布，以均數(shù)±標準差()表示，組間比較采用配對樣本t檢驗，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，采用Spearman 相關(guān)性分析法分析胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平與TNM分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢者的血清 AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PG Ⅰ水平比較 觀察組患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1水平明顯高于對照組，PGⅠ水平明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 兩組受檢者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較()

表2 兩組受檢者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較()

組別觀察組對照組t值P值例數(shù)110 85 AFP(ng/mL)24.89±3.71 5.40±0.85 47.455 0.001 MG7-Ag(U/mL)7.16±3.05 2.33±0.60 14.379 0.001 DKK1(ng/mL)5.12±1.10 3.05±0.48 16.192 0.001 TK1(pmol/mL)100.85±20.30 70.00±13.90 12.001 0.001 PGⅠ(ng/mL)40.10±7.18 50.57±9.66 8.682 0.001

2.2 不同胃癌患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較 TNM 分期高、腫瘤直徑大、發(fā)生血管浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平明顯升高，PGⅠ水平明顯降低，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 不同胃癌患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較()

表3 不同胃癌患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較()

臨床病理參數(shù)TNM分期例數(shù)63 47腫瘤直徑(cm)分類Ⅰ～Ⅱ級Ⅲ～Ⅳ級t值P值≤3＞3 t值P值65 45血管浸潤程度有無t值50 60 P值淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有無t值48 62 P值A(chǔ)FP(ng/mL)22.15±3.80 28.92±5.17 7.919 0.001 23.47±4.02 27.65±5.23 4.735 0.001 28.58±5.50 22.69±3.17 7.017 0.001 28.70±5.62 22.98±3.84 6.333 0.001 MG7-Ag(U/mL)6.84±2.79 8.98±3.70 3.460 0.001 6.82±2.16 9.63±3.45 5.251 0.001 9.18±2.08 6.94±1.21 7.038 0.001 9.30±2.15 6.89±1.11 7.618 0.001 DKK1(ng/mL)4.50±1.10 5.25±0.97 3.718 0.001 4.48±1.03 5.21±0.79 4.006 0.001 5.43±0.68 4.24±1.05 6.896 0.001 5.46±0.81 4.42±1.00 5.866 0.001 TK1(pmol/mL)97.85±14.52 123.70±10.35 10.389 0.001 98.02±13.79 110.12±15.04 4.360 0.001 120.56±11.07 94.60±12.28 11.541 0.001 120.05±12.19 97.41±10.35 10.526 0.001 PGⅠ(ng/mL)42.95±5.77 36.98±4.50 5.881 0.001 43.18±6.15 38.05±5.28 4.552 0.001 35.52±5.74 45.79±6.16 8.979 0.001 34.69±5.18 45.03±6.73 8.811 0.001

2.3 胃 癌 患 者 血 清 AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平與TNM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性 將TNM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移作為因變量，將血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PG Ⅰ指標作為自變量，經(jīng)Spearman 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1水平與TNM分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)(P＜0.05)，血清PGⅠ水平與NM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈負相關(guān)(P＜0.05)，見表4。

表4 胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平與TNM分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

3 討論

胃癌的發(fā)生是多因素、多階段、多步驟的結(jié)果，主要受環(huán)境因素和遺傳因素兩大方面的影響。環(huán)境因素包括生活的環(huán)境、飲食、工作環(huán)境，甚至身心環(huán)境，都是導致胃癌產(chǎn)生的因素。胃癌也是有遺傳傾向的疾病，具有一定的遺傳性[8-9]。目前胃癌的治療方法在早期可通過胃鏡進行微創(chuàng)治療，約90%以上的患者可痊愈；進展期胃癌以手術(shù)治療為主。根據(jù)患者的病情，可進行3～4個周期的新輔助化療后進行手術(shù)治療，術(shù)后繼續(xù)進行化療；晚期胃癌可進行化療、靶向治療、生物學治療等[10]。因此在臨床中需要腫瘤標記物和相關(guān)血清因子的水平檢測為病情的發(fā)展以及臨床的治療提供參考依據(jù)。

血清AFP在正常人血清中的含量低于20 μg/L，干細胞發(fā)生癌變時，隨著病情急劇惡化，AFP 含量會迅速增高[11]。MG7-Ag是主要存在于細胞表面的中性糖蛋白抗原，能夠被胃癌單克隆抗體所識別，當胃部組織發(fā)生癌變，在癌變因子的刺激下，MG7-Ag 會大量合成與分泌，并傳播到人體血液中。因此在胃癌的臨床診斷和預(yù)警具有重要價值[12]。DKK1在細胞內(nèi)合成通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體運送到細胞膜，再分泌到細胞外；發(fā)揮作用的蛋白質(zhì)能在細胞的增殖、遷移中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，且在肝癌、宮頸癌及胃癌的癌變中發(fā)揮關(guān)鍵作用。TK1 在發(fā)生細胞過度增殖時的活性含量遠超過正常水平，能作為一種有效的腫瘤標志物來監(jiān)測惡性腫瘤的增殖活性、腫瘤細胞的動態(tài)變化、腫瘤細胞的增長速率，臨床治療可根據(jù)TK1數(shù)據(jù)定制合適患者的治療方案[13]。PGⅠ是由胃底主細胞和壁細胞分泌的，PGⅠ表達水平增高時，多提示胃黏膜分泌功能增強，胃黏膜損傷、炎癥、糜爛、消化性潰瘍的風險增加。而當PGⅠ表達水平降低時，多提示胃黏膜分泌功能下降，胃黏膜萎縮、腸上皮化生、異型增生、不典型增生的風險增加[14]。本次研究結(jié)果顯示，患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1 水平均明顯高于對照組，PGⅠ水平明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。且TNM 分期越高、腫瘤直徑越大、發(fā)生血管血管浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1水平升高、PGⅠ水平降低。通過分析是患者機體受癌變影響，在癌細胞脫落進入血管后，隨血流到其他部位繼續(xù)生長，進入血管系統(tǒng)的腫瘤細胞常與纖維蛋白及血小板共同黏聚成團，破壞鄰近正常組織、器官，并繼續(xù)生長。T淋巴細胞亞群及NK殺傷細胞均被破壞，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1可以通過分化、增殖、遷移在人體中得到進一步的表達。伴隨TNM分期的變化以及腫瘤直徑的變大會直接加劇腫瘤浸潤超過固有肌層，侵犯漿膜，直接影響PGⅠ的合成[15-16]。本研究經(jīng)Spearman 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1 水平與 TNM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈正相關(guān)，血清PGⅠ水平與NM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均呈負相關(guān)。顯示血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ直接影響胃癌的病情進程，可能與血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1的協(xié)同作用對PGⅠ的水平表達具有抑制作用。本研究的不足之處在于未分析手術(shù)和化療對胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平的影響，因此有待加大研究范圍，強化和深入該研究方案的臨床價值。

綜上所述，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1 在胃癌患者中的表達水平明顯升高，PGⅠ明顯降低，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ的聯(lián)合檢測可為胃癌的臨床治療以及病情的評估提供參考價值。