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    商品榮昌豬與大約克豬、雜交豬肌肉揮發(fā)性化合物構(gòu)成差異分析

    2022-04-01 01:27:26景紹紅張曉春歐秀瓊胡占云
    豬業(yè)科學(xué) 2022年3期
    關(guān)鍵詞:大約克榮昌揮發(fā)性

    景紹紅,張曉春,李 星,歐秀瓊,胡占云

    (重慶市畜牧科學(xué)院,重慶市肉質(zhì)評價(jià)與加工工程技術(shù)研究中心,重慶 榮昌 402460)

    0 引言

    榮昌豬是世界八大、我國三大優(yōu)良地方豬種之一,以原產(chǎn)重慶市榮昌區(qū)而得名。榮昌豬具有肌內(nèi)脂肪含量高和肉質(zhì)優(yōu)良的優(yōu)點(diǎn),其生鮮肉是市場上的高端分割肉產(chǎn)品。然而,商品榮昌豬出欄量一直存在缺口,大量外種豬肉冒充榮昌豬肉充斥市場并高價(jià)銷售,嚴(yán)重影響了榮昌當(dāng)?shù)刎i品牌價(jià)值的打造和提升。因此,業(yè)內(nèi)亟需一種有效、便捷的鑒別榮昌豬肉與其他豬肉的方法,而開發(fā)基于肌肉揮發(fā)性化合物差異的無損鑒別方法是其中一個(gè)重要的手段,但目前關(guān)于商品榮昌豬與外種豬及其他土雜豬肌肉揮發(fā)性化合物的差異研究還未見有報(bào)道。

    肌肉揮發(fā)性化合物易受宰前與宰后多種因素影響,目前通過肌肉揮發(fā)性化合物的差異來鑒別肌肉源于哪個(gè)豬種的研究報(bào)道較少,特別是針對我國地方豬種、外種豬以及一些雜交品種。Lu 等人對比分析了5 種我國地方豬(藍(lán)塘豬、大花白豬、萊蕪豬、榮昌豬與通城豬)與洋三元(杜洛克×長白×約克夏)豬肉熟制(130℃,45 min)后肌肉揮發(fā)性香味物質(zhì)組成,發(fā)現(xiàn)不同品種的熟制豬肉揮發(fā)性化合物組成顯著不同。楊俊杰比較了安慶六白豬、皖南花豬、定遠(yuǎn)黑豬3 個(gè)品種地方豬與杜洛克豬豬肉在特定熟制條件下?lián)]發(fā)性物質(zhì)的差異,并采用主成分分析法對4 種豬肉的風(fēng)味成分差異進(jìn)行了分析,發(fā)現(xiàn)3 種地方豬與杜洛克豬豬肉揮發(fā)性風(fēng)味成分差異顯著。陳國順對各種當(dāng)?shù)赝岭s豬肉的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行了對比分析后發(fā)現(xiàn),不同品種雜交后的豬肉揮發(fā)性物質(zhì)存在差異且樣品的處理溫度也會(huì)對最終揮發(fā)性化合物有一定影響。以上這些研究主要針對熟制后的豬肉產(chǎn)品,而加熱處理后肌肉的揮發(fā)性化合物會(huì)變得復(fù)雜多樣,并不利于對比分析,不適合實(shí)時(shí)無損檢測。郭遼樸、孟令軍比較分析了PIC 豬、榮昌乳豬與體重20 kg 榮昌豬不同部位豬肉的揮發(fā)性物質(zhì),發(fā)現(xiàn)豬的品種、體重及采樣部位對豬肉揮發(fā)性物質(zhì)的種類及相對含量均有一定影響,但他們只對體重10~20 kg 的、脂肪還未沉積完全的小體重榮昌豬作了研究,對于脂肪沉積完成的、作為市場消費(fèi)主力的商品榮昌豬(體重>100 kg)卻未涉及。肌內(nèi)脂肪是豬肉揮發(fā)性化合物形成的主要源頭,脂肪沉積完成的豬其肌肉具有更加穩(wěn)定的揮發(fā)性物質(zhì)組成。因此,本試驗(yàn)針對榮昌本地市場主流的、未經(jīng)加工的商品榮昌豬、大約克豬與雜交豬的肌肉作為試驗(yàn)對象,在確保宰前飼養(yǎng)條件與宰后樣品處理?xiàng)l件一致的前提下,對其肌肉揮發(fā)性化合物進(jìn)行對比分析,以確定它們是否存在差異。

    1 材料、設(shè)備與方法

    1.1 材料與設(shè)備

    商品榮昌豬、大約克豬、雜交豬(榮昌當(dāng)?shù)赝岭s豬),委托重慶市種豬場飼養(yǎng);50/30um DVB/car/pdms固相微萃取萃取頭;DB-WAX,30M×0.25MM×0.25 um 色譜柱;SCION SQ 456GC 氣質(zhì)聯(lián)用儀,BRUK ER,USA。

    1.2 方法

    1.2.1 樣品采集

    選擇達(dá)到出欄標(biāo)準(zhǔn)、體重在110~125 kg 的榮昌豬、大約克豬及雜交豬各9 頭。試驗(yàn)豬的飼養(yǎng)采用相同的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)、管理、飼養(yǎng)環(huán)境及飼養(yǎng)方式,所有豬只統(tǒng)一于凌晨4:00 在標(biāo)準(zhǔn)化屠宰場集中屠宰分割,采集背最長肌作為待測樣品,樣品放置于16~20℃的環(huán)境中冷卻排酸6 h后置于-20℃條件下速凍,3 d 后取出測定。

    1.2.2 樣品的處理與揮發(fā)性物質(zhì)的提取與測定

    首先,將肉樣解凍,去除筋、膜及表面脂肪,打碎。豬肉樣品揮發(fā)性物質(zhì)的提取與測定采用頂空固相微萃取+氣質(zhì)聯(lián)用法(HS-SPME-GC-MS)。取5 g 打碎的樣品置于20 mL 樣品瓶中,將老化后的萃取頭插入樣品瓶頂空部分,于40℃條件下吸附30 min,吸附后的萃取頭取出后插入氣相色譜進(jìn)樣口,于250℃條件下解吸3 min,同時(shí)啟動(dòng)氣質(zhì)聯(lián)用儀器采集數(shù)據(jù)。

    色譜條件:載氣He 流速0.8 mL/min;接口溫度250℃;升溫程序:40℃保持3 min,以5 ℃/min升至90℃,以10℃/min 升至230℃,保持7 min;

    質(zhì)譜條件:設(shè)備SCION SQ 456-GC(BRUKER,USA);EI 源:發(fā)射電流80 μA,電子轟擊能量70 eV,傳輸線溫度250℃,離子源溫度200℃,探測器電壓1 000 V,質(zhì)量掃描范圍33~450 amu。

    1.2.3 揮發(fā)性物質(zhì)的選擇及相對含量的計(jì)算

    物質(zhì)的定性利用檢索譜庫nist2011,Wiley8 檢索;利用計(jì)算峰面積的方法最終以歸一化百分含量來表示每種揮發(fā)性化合物在揮發(fā)體系中的相對含量。每個(gè)豬種肌肉樣本選取9 個(gè)重復(fù)共同含有的且剔除已知的個(gè)別外源物(甲苯、乙苯、苯乙烯、二甲苯與丙苯等苯系物)后剩余物質(zhì)作為該品種豬肉的揮發(fā)性化合物,然后折算得出每種化合物在揮發(fā)體系中的相對含量。

    1.2.4 數(shù)據(jù)的對比分析

    以揮發(fā)性化合物的相對含量為變量,采用主成分分析(PCA)法以確定樣品間是否存在差異。在確定存在差異的前提下,采用配對設(shè)計(jì)的樣本平均數(shù)t檢驗(yàn)法,取代同一化合物組間直接比較法,對3 組樣本的各類揮發(fā)性化合物構(gòu)成進(jìn)行對比分析,以盡量消除組內(nèi)個(gè)體差異造成的系統(tǒng)誤差。主成分分析程序采用SIMCA 14.1 編寫。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 GC-MS 測定與分析結(jié)果

    圖1a、圖1b、圖1c 依次為榮昌豬、大約克豬與雜交豬肌肉揮發(fā)性化合物的典型GC-MS 圖。

    圖1a 榮昌豬肌肉揮發(fā)性化合物的GC-MS 圖

    圖1b 大約克豬肌肉揮發(fā)性化合物的GC-MS 圖

    圖1c 雜交豬肌肉揮發(fā)性化合物的GC-MS 圖

    由圖1 經(jīng)檢索與計(jì)算后發(fā)現(xiàn),榮昌豬、大約克豬與雜交豬肌肉樣本的揮發(fā)性化合物主要為醇、醛酮、酯及少量脂肪烴與2-正戊基呋喃。榮昌豬、大約克豬與雜交豬肌肉樣本分別檢出揮發(fā)性化合物28 種、29 種與28 種,其中榮昌豬未檢出反-2-癸烯醛,雜交豬未檢出庚酸乙酯,其余揮發(fā)性化合物3 組豬肉樣本則完全相同。在各化合物構(gòu)成方面,榮昌豬與大約克豬揮發(fā)性醇類物質(zhì)相對含量最高,其次是醛酮類物質(zhì)與酯類物質(zhì);而雜交豬揮發(fā)性醛酮類物質(zhì)的相對含量最高,醇類物質(zhì)次之。

    2.2 榮昌豬、大約克豬及雜交豬肌肉揮發(fā)性化合物的主成分分析(PCA)

    以檢測到的29 種揮發(fā)性化合物的相對含量為變量進(jìn)行PCA(未檢出的化合物相對含量視為0),發(fā)現(xiàn)特征值大于1 的主成分有2 個(gè),將主成分1 與主成分2 為坐標(biāo)做主成分分析得分散點(diǎn)圖,見圖2。

    圖2 榮昌豬、大約克豬與雜交豬肌肉揮發(fā)性化合物構(gòu)成主成分分析得分散點(diǎn)圖

    從圖2 可以看出,3 組樣本點(diǎn)各自分布在3 個(gè)相對獨(dú)立的區(qū)域,且在主成分1 上有一定的分離趨勢,特別是雜交豬與榮昌豬的分離趨勢更加明顯,這也說明榮昌豬與雜交豬肌肉揮發(fā)性化合物的差異相對較大。但是,大約克豬部分樣本所在區(qū)域與榮昌豬和雜交豬的區(qū)域均存在一定重疊,而且大約克豬的樣本點(diǎn)比較分散,說明大約克豬與榮昌豬以及大約克豬與雜交豬的差異不明顯,且組內(nèi)個(gè)體差異對大約克豬肌肉揮發(fā)性化合物的構(gòu)成影響較大。因此,通過揮發(fā)性物質(zhì)組成的PCA,可以有效區(qū)分榮昌豬與雜交豬的肌肉,但無法區(qū)分榮昌豬與大約克豬的肌肉。

    2.3 榮昌豬、大約克豬及雜交豬肌肉揮發(fā)性化合物的構(gòu)成差異

    為了找到造成3 個(gè)豬種揮發(fā)性化合物差異的主要物質(zhì),同時(shí)消除試驗(yàn)豬個(gè)體差異帶來的系統(tǒng)誤差,試驗(yàn)采用配對設(shè)計(jì)的平均數(shù)t檢驗(yàn)法比較了3 個(gè)豬種肌肉揮發(fā)性化合物的構(gòu)成。3 個(gè)豬種肌肉揮發(fā)性化合物構(gòu)成見表1。

    從表1 可以看出,對于揮發(fā)性醇類化合物,3 個(gè)豬種最大的差別在于2-乙基-1-己醇與正己醇在各自揮發(fā)性醇類物質(zhì)組成中所占的比重,由此不難看出榮昌豬正己醇的占比明顯高于其他2 個(gè)豬種,另外雜交豬2-乙基-1-己醇的占比相較另外2 個(gè)豬種更低。對于醛酮類揮發(fā)性化合物,反-2-癸烯醛在榮昌豬揮發(fā)性醛酮類化合物組成中的占比極低,顯著低于大約克豬與雜交豬(P<0.05),而癸醛的占比要略高于其他2 個(gè)豬種。對于揮發(fā)性酯類化合物,榮昌豬乳酸乙酯的相對含量顯著低于己酸乙酯與癸酸乙酯(P<0.05),而大約克豬與雜交豬這3 種化合物的相對含量差異不顯著(P>0.05)。

    表1 榮昌豬、大約克豬與雜交豬肌肉揮發(fā)性化合物構(gòu)成(n=9)

    3 結(jié)論與討論

    本次試驗(yàn)結(jié)果顯示,榮昌豬、大約克豬與雜交豬肌肉的揮發(fā)性化合物種類與數(shù)量基本一致;榮昌豬肌肉揮發(fā)性化合物的構(gòu)成與雜交豬存在較大差異,但與大約克豬的差異較?。?-乙基-1-己醇、正己醇、反-2-癸烯醛、癸醛與乳酸乙酯在榮昌豬肌肉揮發(fā)體系中的占比,是榮昌豬肌肉區(qū)別于雜交豬肌肉的主要因素;榮昌豬與大約克豬肌肉揮發(fā)性化合物的構(gòu)成差異較小。

    較高的肌內(nèi)脂肪含量和較低的粗蛋白含量是我國地方豬種區(qū)別于外種豬的主要特征。肌內(nèi)脂肪磷脂含量比皮下脂肪高,不飽和脂肪酸的比例(UFA/FSA)也更高,易發(fā)生氧化、水解、脫水及脫羧等反應(yīng)生成小分子的醛、酮、烴、呋喃、醇、酯等揮發(fā)性化合物,因而肌內(nèi)脂肪是產(chǎn)生肌肉揮發(fā)性化合物的主要源頭之一。不同品種的豬肌內(nèi)脂肪及其脂肪酸組成存在顯著不同,因此造成豬肉揮發(fā)性化合物品種間差異極有可能與不同品種豬肉肌內(nèi)脂肪的含量及脂肪酸的組成有關(guān)。

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