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    輸血前Rh血型抗原與不規(guī)則抗體的檢測

    2022-03-31 08:51:24趙學(xué)禮
    安徽醫(yī)專學(xué)報(bào) 2022年1期
    關(guān)鍵詞:懸液血型抗原

    趙學(xué)禮 杜 喆

    ABO血型系統(tǒng)是輸血領(lǐng)域最廣泛也是最重要的血型系統(tǒng),Rh血型系統(tǒng)次之,但Rh血型系統(tǒng)卻是最復(fù)雜的血型系統(tǒng),具有抗原多態(tài)性和免疫原性[1-2]。Rh血型系統(tǒng)有50個(gè)抗原,目前研究發(fā)現(xiàn)與輸血密切相關(guān)的主要有5種,分別是D、C、c、E、e等抗原,這5種抗原組合成18種不同的Rh血型分型。國家標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格規(guī)定Rh系統(tǒng)的D抗原作為輸血前常規(guī)檢查,基本避免了Rh(D)陰性的患者輸Rh(D)陽性的血,因?yàn)镈抗原同型輸血原則,所以近年來關(guān)于抗體D的報(bào)道逐漸減少[3]。由于Rh血型系統(tǒng)的C、c、E、e等抗原目前大多數(shù)采取隨機(jī)輸血原則,導(dǎo)致抗C、抗c、抗E、抗e等抗體產(chǎn)生的報(bào)道時(shí)有發(fā)生,因此臨床輸血Rh血型抗原的檢測和同型輸注應(yīng)該引起重視以保證輸血安全。為了解Rh血型抗原檢測在輸血中的重要性,選擇3200例輸血和備血的住院患者進(jìn)行Rh抗原檢測,另外對45例不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)陽性的輸血患者進(jìn)行不規(guī)則抗體鑒定。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 收集本醫(yī)院2018年1月-2019年10月期間輸血和備血的住院患者3200例,進(jìn)行Rh抗原D、C、c、E、e的檢測,年齡3~82歲,平均年齡(43.56±11.5)歲。另外收集本醫(yī)院2018年1月-2020年7月不規(guī)則抗體篩查陽性的輸血患者45例,進(jìn)行不規(guī)則抗體鑒定,年齡4~78歲,平均年齡(46.7±12.3)歲。

    1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) ①納入標(biāo)準(zhǔn):患者經(jīng)檢查確診,均需要備血或具有臨床輸血治療的指征;患者臨床資料完整;患者精神狀態(tài)正常,能夠配合本研究;患者知情同意并簽署知情同意書。②排除標(biāo)準(zhǔn):門診患者或患者臨床資料不完整;患者2周內(nèi)服用免疫抑制劑、激素類藥物影響檢查結(jié)果的判斷;凝血功能障礙及伴發(fā)其他血液系統(tǒng)疾病的患者;嚴(yán)重心、肝、腎功能不全患者及惡性腫瘤患者。

    1.3 試劑與儀器 本研究使用試劑和儀器包括不規(guī)則抗體鑒定細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥責(zé)任有限公司),Rh血型分型微柱凝膠卡(江陰力博生物技術(shù)有限公司),抗人球蛋白檢測卡(長春博訊生物技術(shù)有限公司),TD—3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)(長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司),F(xiàn)YQ型免疫微柱孵育器(長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司)等。

    1.4 方法

    1.4.1 Rh抗原檢測 ①紅細(xì)胞懸液的制備:將待檢者的血液樣本按3000 rpm、2 min離心制備成紅細(xì)胞樣本,用加樣槍在壓積紅細(xì)胞中層量取10 μL壓積紅細(xì)胞加入至1 mL生理鹽水中,配置成0.8%~1%濃度的紅細(xì)胞懸液,②取Rh血型分型檢測卡(柱凝集法)一卡,進(jìn)行標(biāo)記,1~6孔中加入待檢者0.8%~1%紅細(xì)胞懸液50 μL,將微柱凝膠卡垂直豎立,輕敲混勻加樣槽中的紅細(xì)胞懸液。③即刻使用專用血清學(xué)離心機(jī)離心5 min。④離心結(jié)束后,取出觀察判定結(jié)果,登記結(jié)果。

    1.4.2 不規(guī)則抗體鑒定 將譜細(xì)胞(10套鑒定細(xì)胞)分別配置成濃度為0.8%~1%的紅細(xì)胞懸液;抗人球蛋白檢測卡的十個(gè)凝膠微管標(biāo)號,每個(gè)微管用加樣槍加50 μL配置的紅細(xì)胞懸液,再將分離好的待檢者血漿加入1到10孔微管,每孔50 μL;微柱凝膠卡放入免疫微柱孵育器孵育15 min,即刻使用專用血清學(xué)離心機(jī)離心5 min,讀結(jié)果,對照紅細(xì)胞血型抗體鑒定細(xì)胞反應(yīng)格局表判定抗體。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù),所得計(jì)數(shù)資料[率(%)]做統(tǒng)計(jì)描述。

    2 結(jié) 果

    2.1 Rh血型系統(tǒng)D、C、c、E、e抗原表型分布情況分析 用血清學(xué)方法對3200例樣本進(jìn)行Rh血型系統(tǒng)D、C、c、E、e抗原檢測。Rh血型CcEe抗原陽性率:C抗原陽性率90.00%,c抗原陽性率55.19%,E抗原陽性率46.19%,e抗原陽性率93%。見表1。

    表1 3200例樣本Rh血型系統(tǒng)抗原分布 例(%)

    2.2 不規(guī)則抗體鑒定結(jié)果分析 對45例不規(guī)則抗體陽性的患者進(jìn)行不規(guī)則抗體鑒定,Rh血型系統(tǒng)抗體檢出率分別為:抗E(35.56%),抗D(8.89%),抗c(4.44%),抗Ec(8.89%),抗e(2.22%),其中抗E檢出率最高。初步解釋為人群Rh(E)血型抗原陰性率較高,隨機(jī)輸入含Rh(E)血型抗原的血可能性大容易產(chǎn)生抗體。結(jié)果見表2。

    表2 不規(guī)則抗體鑒定分布情況分析 例(%)

    3 討 論

    隨著社會的迅猛發(fā)展,醫(yī)療技術(shù)的不斷提升,輸血技術(shù)在臨床疾病治療方面獲得了廣泛的應(yīng)用和發(fā)展,尤其在急重癥患者的急救和治療方面發(fā)揮了極大的作用。血型抗體分天然抗體和免疫抗體,免疫抗體產(chǎn)生的特點(diǎn)是首次受到外界抗原刺激產(chǎn)生少量抗體,當(dāng)再次碰到以往接觸過的同種抗原時(shí),機(jī)體針對該抗原產(chǎn)生比初次更為強(qiáng)烈和迅速的免疫反應(yīng),并產(chǎn)生大量的抗體[4-5]。Rh血型系統(tǒng)抗體屬于免疫抗體,其主要通過輸血或者妊娠刺激產(chǎn)生[6],臨床上此系統(tǒng)抗體較容易引起輸血反應(yīng)或新生兒溶血病。目前越來越多的患者不規(guī)則抗體陽性引起交叉配血不合,說明輸血前只常規(guī)進(jìn)行ABO和RhD檢測是不夠的,還應(yīng)對患者進(jìn)行Rh血型抗原CcEe檢測,施行Rh血型抗原相合輸血原則。

    本研究中,3200例住院患者Rh血型抗原陽性率分布如下:D抗原陽性率(99.56%),C抗原陽性率90.00%,c抗原陽性率55.19%,E抗原陽性率46.19%,e抗原陽性率93%。E、e、C、c四種抗原中E抗原陽性率最低為46.19%,c抗原陽性率略高于E抗原陽性率,為55.19%,這與陽志勇等[3]報(bào)道的基本一致。目前,D抗原已經(jīng)是輸血前常規(guī)檢查,Rh(D)陰性患者基本都實(shí)行同型輸注或自體輸血,特別是反復(fù)輸血的RhD陰性患者和需要輸血的RhD陰性女性更重視RhD同型輸注。E、e、C、c等抗原的陽性率明顯低于D抗原陽性率,隨機(jī)輸血時(shí)更容易產(chǎn)生抗體,如果輸血前只進(jìn)行D抗原檢測,那么終將會給輸血帶來困擾。目前,國內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院對E抗原和c抗原都是采用隨機(jī)輸血原則,不對E和c等抗原進(jìn)行特別甄別。本院統(tǒng)計(jì)的E抗原、c抗原陽性率大概都在50%左右,E抗原和c抗原陰性的患者隨機(jī)輸血時(shí)輸入含有對應(yīng)抗原的概率較大,邱芳等[7]報(bào)道E抗原和/或C抗原陰性患者隨機(jī)輸血輸入對應(yīng)抗原陽性血液概率是45.82%;文獻(xiàn)報(bào)道[8],Rh血型系統(tǒng)中,抗原的強(qiáng)弱順序依次為D、E、c等,可知E、c抗原陰性患者采用隨機(jī)輸血的方式時(shí)產(chǎn)生抗E和抗c的可能性很高[9],這與Gupta K P等[9]和陽志勇等[3]的報(bào)道一致。e抗原陽性率(93%)和C抗原陽性率(90%)都比E和c的陽性率高很多,關(guān)于其抗體的報(bào)道就比后者少。由此可得患者輸血前應(yīng)進(jìn)行E、e、C、c等抗原檢測,尤其是Rh(E),Rh(c)的同型輸血更值得被關(guān)注。

    本研究中45例患者不規(guī)則抗體鑒定結(jié)果中Rh系統(tǒng)的抗體有27例,占60%。這些患者主要分布在頻繁輸血的科室,由此可以初步判定多次隨機(jī)輸血的患者更容易產(chǎn)生Rh血型系統(tǒng)抗體。45例抗體中抗E占比最高,為35.56%,這證明患者隨機(jī)輸血時(shí)容易產(chǎn)生抗E抗體。如遇到Rh系統(tǒng)抗體陽性輸血患者,配血的困難在于:①庫存量需要足夠大才有可能篩選出合適的血液,耗時(shí)、耗材、耗人力。②有些患者不規(guī)則抗體較弱交叉配血被遺漏,輸血有風(fēng)險(xiǎn)。③對于緊急輸血患者在沒有提前告知的情況下將耽誤輸血時(shí)機(jī)。因?yàn)楸臼醒窘鼛啄暄汗?yīng)持續(xù)緊張,輸血科庫存量少,盲目配血更不可取,所以輸血前對患者和獻(xiàn)血者進(jìn)行Rh血型抗原檢測,輸血時(shí)Rh血型抗原相匹配輸注,從源頭上減少輸血患者Rh血型系統(tǒng)抗體的產(chǎn)生顯得更為重要。

    綜上分析,輸血前進(jìn)行Rh血型抗原檢測具有重要意義。調(diào)查顯示,目前已經(jīng)有少數(shù)醫(yī)院和血站把Rh血型抗原E、e、C、c等作為常規(guī)檢測,由于經(jīng)濟(jì)和醫(yī)療水平限制,全面開展E、e、C、c抗原檢測還需要些時(shí)間??笶和抗c是引起輸血溶血反應(yīng)的重要原因,如果把E抗原和c抗原作為患者血型的常規(guī)檢查,讓Rh(E)、Rh(c)同型輸血,將會減少抗E或抗c的產(chǎn)生,這在輸血中也具有重大意義。隨著醫(yī)療和經(jīng)濟(jì)水平發(fā)展,精準(zhǔn)輸血越來越被重視,Rh血型抗原檢測會在更多的醫(yī)院和血站開展,最終實(shí)現(xiàn)更科學(xué)、更安全的輸血。

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