血清IL-23、TNF-α表達(dá)與潰瘍性結(jié)腸炎患者中醫(yī)辨證分型及病變程度的相關(guān)性

蔣銀芬，周燕

潰瘍性結(jié)腸炎(UC)是一種炎癥性腸病。臨床表現(xiàn)為腹瀉、粘液膿血便、腹痛等。其發(fā)病機(jī)制尚不完全明確，但常見的病因是個(gè)體易感性、腸道菌群及黏膜免疫，這三種病因的相互作用導(dǎo)致UC的發(fā)生[1]。此病多發(fā)于中青年人群，性別差異不明顯。根據(jù)臨床癥狀的不同，中醫(yī)可歸為“痢疾”“腹瀉”等范疇[2]。細(xì)胞因子作為細(xì)胞間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，介導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)。根據(jù)其功能的不同，可分為促炎細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子，如果兩種細(xì)胞因子之間的平衡被打破，UC就會(huì)被觸發(fā)[3]。通過對(duì)不同細(xì)胞因子的檢測(cè)，對(duì)UC的病因逐漸明確和治療提供新的參考[4]。IL-23在UC的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，主要由活化的單核-巨噬細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，其能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞和輔助細(xì)胞產(chǎn)生重組人干擾素γ和IL-12，與炎癥反應(yīng)存在緊密的聯(lián)系[5]。TNF-α與UC的發(fā)生發(fā)展存在緊密的聯(lián)系，與UC的病變程度也有一定關(guān)系，隨著UC的加重其水平會(huì)上升，可作為判斷UC病情的重要指標(biāo)[6]。目前，中醫(yī)學(xué)對(duì)UC的研究主要集中在一些基礎(chǔ)治療和一些常見中醫(yī)辨證的介入治療及發(fā)病機(jī)制方面，而對(duì)中醫(yī)辨證與細(xì)胞因子的相關(guān)性研究較少。本文擬分析了血清中IL-23、TNF-α的表達(dá)與UC患者中醫(yī)辨證分型及病變程度的相關(guān)性，旨在為臨床診斷和治療UC提供一定的參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月—2021年1月我院治療的UC患者90例。其中男41例，平均年齡(45.12±10.22)歲；女49例，平均年齡(46.03±10.14)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《對(duì)我國(guó)炎癥性腸病診治規(guī)范的共識(shí)意見》[7]中UC的西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)符合《潰瘍性結(jié)腸炎中醫(yī)診療共識(shí)意見》[8]中的中醫(yī)辨證分型診斷標(biāo)準(zhǔn)；(3)年齡18～50歲；(4)近1個(gè)月無腸道感染；(5)近1個(gè)月內(nèi)未使用抗菌藥物或益生菌制劑；(6)所有患者自愿參與本次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)UC的其他中醫(yī)辨證分型；(2)合并代謝性疾病；(3)存在嚴(yán)重并發(fā)癥；(4)處于妊娠期或哺乳期；(5)合并肝、腎功能障礙以及造血、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病；(6)精神障礙；(7)病情危重?zé)o法配合研究者。根據(jù)病變程度將所有患者分為輕度、中度和重度，其中輕度患者30例，中度患者40例，重度患者20例；按中醫(yī)辨證分型診斷標(biāo)準(zhǔn)將所有患者分為大腸濕熱證、脾虛濕熱證、肝郁氣滯證、寒熱錯(cuò)雜證、脾腎陽(yáng)虛證，分別為20例、28例、19例、11例、12例。選取同期健康檢查者20例作為對(duì)照組，各組性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 IL-23、TNF-α檢測(cè)：清晨空腹采集所有研究對(duì)象肘靜脈血5 mL，室溫下靜置10 min，3 000 r/min離心10 min。取上清液置于-80℃冰箱冷凍備測(cè)，嚴(yán)格按酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)試劑盒說明書操作，對(duì)血清IL-23、TNF-α水平進(jìn)行檢測(cè)。病變程度分級(jí)：其中包括輕度、中度和重度。中醫(yī)辨證分型：中醫(yī)辨證分型的確診需兩位副主任以上職稱的中醫(yī)師同時(shí)進(jìn)行確認(rèn)。

1.3 觀察指標(biāo) (1)血清IL-23、TNF-α水平。比較不同疾病嚴(yán)重程度、不同中醫(yī)辨證分型患者及對(duì)照組人群的IL-23、TNF-α水平；(2)采用線性回歸分析血清IL-23、TNF-α水平對(duì)UC疾病嚴(yán)重程度和中醫(yī)辨證分型的影響。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)照組和病變程度不同的UC患者血清IL-23、TNF-α表達(dá)水平比較 對(duì)照組和不同病變程度的UC患者血清中IL-23、TNF-α表達(dá)水平比較結(jié)果顯示：對(duì)照組<輕度<中度<重度，組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 對(duì)照組和病變程度不同的UC患者血清IL-23、TNF-α表達(dá)水平比較

2.2 對(duì)照組和中醫(yī)辨證分型不同的UC患者血清中IL-23、TNF-α表達(dá)水平比較 對(duì)照組和中醫(yī)辨證分型不同的UC患者血清中IL-23、TNF-α表達(dá)水平呈現(xiàn)：大腸濕熱證>脾虛濕熱證>寒熱錯(cuò)雜證>肝郁氣滯證>脾腎陽(yáng)虛證>對(duì)照組，組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表2 對(duì)照組和中醫(yī)辨證分型不同的UC患者血清中IL-23、TNF-α表達(dá)水平比較

2.3 血清IL-23、TNF-α表達(dá)與UC患者中醫(yī)辨證分型的多元線性回歸分析 以中醫(yī)辨證分型(定義“大腸濕熱證”=1，“脾虛濕熱證”=2，“肝郁氣滯證”=3，“寒熱錯(cuò)雜證”=4，“脾腎陽(yáng)虛證”=5)作為因變量，將不同中醫(yī)辨證分型UC患者的血清中IL-23、TNF-α表達(dá)水平作為自變量，納入多元線性回歸模型，結(jié)果顯示，中醫(yī)辨證分型受血清IL-23、TNF-α表達(dá)水平的影響(P<0.005)。見表3。

表3 血清IL-23、TNF-α表達(dá)與UC患者中醫(yī)辨證分型的多元線性回歸分析

2.4 血清IL-23、TNF-α表達(dá)與UC患者病變程度的多元線性回歸分析 以病變程度(定義“輕度”=1，“中度”=2，“重度”=3)作為因變量，將不同病變程度UC患者的血清中IL-23、TNF-α表達(dá)水平作為自變量，納入多元線性回歸模型，結(jié)果顯示，病變程度受血清IL-23、TNF-α表達(dá)水平的影響(P<0.005)。見表4。

表4 血清IL-23、TNF-α的表達(dá)與UC患者病變程度的多元線性回歸分析

3 討論

UC是一種病因不明的非特異性炎癥性腸病，病變位于大腸內(nèi)，呈連續(xù)彌漫分布，累及直腸和乙狀結(jié)腸，顯示逆行進(jìn)展，嚴(yán)重者會(huì)波及整個(gè)結(jié)腸，易復(fù)發(fā)，長(zhǎng)期治療效果欠佳[8]。中毒性巨結(jié)腸、癌變、出血、穿孔、潰瘍性結(jié)腸炎、腸梗阻等并發(fā)癥的發(fā)生率較高，對(duì)患者的健康和生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響[9]。近年來，隨著對(duì)該病認(rèn)識(shí)的深入和檢測(cè)技術(shù)水平的不斷提高，國(guó)內(nèi)UC的檢出率也呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)，具體病因并不清楚。目前，研究人員一致認(rèn)為，該病是感染、環(huán)境、遺傳、免疫等多種因素共同作用的結(jié)果，在環(huán)境和腸道菌群的影響下，遺傳易感人群腸黏膜屏障發(fā)生故障，從而引發(fā)病變[10]。UC是全球最難治的疾病之一，UC的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，可能與上述因素有關(guān)，腸道免疫系統(tǒng)紊亂是其內(nèi)在病機(jī)[11]。

細(xì)胞因子在腸炎的發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用。目前已有實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞介素參與了UC的發(fā)病機(jī)制，可作為判斷UC療效和預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)[12]。TNF-α是腫瘤壞死因子家族的核心成員，其參與了腸黏膜的炎癥反應(yīng)，在UC的發(fā)生發(fā)展中起到一定的作用。在腸道菌群的共同作用下，腸黏膜固有層的巨噬細(xì)胞被激活，釋放出大量的TNF-α， 其以自分泌和旁分泌的方式在UC患者的腸黏膜中發(fā)揮重要作用[13]。IL-23是白細(xì)胞介素12的一個(gè)分子家族，參與了UC的發(fā)病機(jī)制[14]。血清IL-23的表達(dá)水平與UC的病程和病變程度密切相關(guān)[15]。IL-23作為炎癥反應(yīng)介質(zhì)，介導(dǎo)UC患者結(jié)腸黏膜的病變，誘發(fā)結(jié)腸黏膜炎癥反應(yīng)，引起腹痛、腹瀉、粘液膿血便等癥狀，對(duì)UC的發(fā)病機(jī)制有很大影響。IL-23還能促進(jìn)輔助性T淋巴細(xì)胞Thl7細(xì)胞的擴(kuò)增，分泌白細(xì)胞介素-l7，此細(xì)胞因子具有較強(qiáng)的募集能力和嗜中性粒細(xì)胞活化功能，在許多自身免疫性疾病中起著重要作用[16]。對(duì)UC患者血清中的TNF-α、IL-23水平進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)與中醫(yī)辨證分型診斷相結(jié)合，可預(yù)測(cè)中醫(yī)治療方案和效果，對(duì)提高醫(yī)院的診斷和治療水平，同時(shí)對(duì)研發(fā)UC對(duì)應(yīng)的新型中藥制劑提供新的思路和參考意見。

本文研究結(jié)果顯示，不同病變程度的UC患者血清中IL-23、TNF-α表達(dá)水平比較存在差異性，提示血清IL-23、TNF-α表達(dá)水平對(duì)判斷UC患者病變程度具有一定的臨床價(jià)值。在中醫(yī)辨證分型方面，中醫(yī)辨證分型不同的UC患者血清IL-23、TNF-α表達(dá)水平比較存在差異性，提示血清中IL-23、TNF-α表達(dá)水平對(duì)判斷UC患者中醫(yī)辨證分型同樣具有一定的臨床意義。線性回歸分析發(fā)現(xiàn)，血清IL-23、TNF-α的表達(dá)影響UC患者中醫(yī)辨證分型及病變程度，有學(xué)者推測(cè)IL-23是通過先激活先天免疫系統(tǒng)，后者再激活、誘導(dǎo)腸道局部的T淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)，從而引發(fā)UC[17]；IL-23可激活UC患者腸黏膜上皮間淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞，促使其分泌相對(duì)應(yīng)的致炎細(xì)胞因子，對(duì)炎癥反應(yīng)起到調(diào)節(jié)作用，同時(shí)通過抑制轉(zhuǎn)錄因子Foxp3調(diào)節(jié)性T細(xì)胞來促進(jìn)腸炎的發(fā)生[18]。另外，有研究[19]報(bào)道細(xì)胞凋亡也參與了UC的發(fā)病機(jī)制，對(duì)組織損傷和免疫系統(tǒng)紊亂產(chǎn)生較大的影響，TNF-α可誘導(dǎo)結(jié)腸上皮細(xì)胞凋亡，UC患者的腸黏膜巨噬細(xì)胞合成大量的TNF-α,從而誘導(dǎo)結(jié)腸上皮細(xì)胞凋亡的發(fā)生。根據(jù)病情從輕到重的排列順序，IL-23、TNF-α表達(dá)水平隨之遞增，且根據(jù)大腸濕熱證、脾虛濕熱證、寒熱錯(cuò)雜證、肝郁脾虛證、脾腎陽(yáng)虛證的排列順序，L-23、TNF-α表達(dá)水平隨之遞減。由此可見，根據(jù)中醫(yī)辨證分型可間接地判斷病變程度，根據(jù)IL-23、TNF-α的表達(dá)水平也可反之佐證中醫(yī)辨證分型的確立，對(duì)診治UC具有一定的臨床指導(dǎo)價(jià)值。

綜上所述，不同病變程度和中醫(yī)辨證分型的UC患者血清中IL-23、TNF-α表達(dá)水平不同，血清中IL-23、TNF-α的表達(dá)影響UC患者中醫(yī)辨證分型及病變程度。