微柱凝膠技術(shù)交叉輸血對臨床輸血安全性的影響

曾燕嬌（江西省尋烏縣人民醫(yī)院,江西 贛州 342200）

輸血治療是救治患者的特殊措施，可以快速提高患者紅細胞及血紅蛋白含量[1]，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于臨床治療。但輸血的異源性也會導(dǎo)致患者出現(xiàn)類似過敏、發(fā)熱、溶血等反應(yīng)[2-3]。因此輸血前應(yīng)對患者進行血型鑒定、抗體篩選、交叉配血等關(guān)鍵措施，以避免發(fā)生輸血不良反應(yīng)[4]。目前常用的抗體篩查和交叉配血方法有鹽水法、凝聚胺法等，但風險較大，輸血不良反應(yīng)較多。隨著交叉配血的應(yīng)用和發(fā)展，微柱凝膠技術(shù)的優(yōu)勢逐漸顯現(xiàn)，其避免了傳統(tǒng)交叉配血的弊端，且安全性、靈敏性大大提高[5]，但臨床上該方法對臨床輸血的安全性尚未達到共識。因此，本研究通過選取2019年5月-2021年5月在本院收治的68例易發(fā)生交叉配血不合的患者，分析本院需要輸血的患者采用凝聚胺法和微柱凝膠法進行不規(guī)則抗體篩查和交叉配血實驗，比較這些檢查方法對結(jié)果的影響，以期了解微柱凝膠技術(shù)對交叉輸血對臨床輸血安全性的影響，以提高臨床輸血有效率。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年5月-2021年5月在本院收治的68例易發(fā)生交叉配血不合的患者，男39例，女29例，年齡16-76歲，平均（47.34±9.31）歲，其中白血病18例，淋巴瘤9例，自身免疫系統(tǒng)疾病10例，貧血15例，其他16例。納入標準：①所有納入患者均符合輸血治療指征[6]，需要接受臨床輸血治療；②患者及家屬了解研究目的并知情同意；③存在臨床反復(fù)輸血、腫瘤、貧血或其他易發(fā)生交叉配血不合的患者；④存在凝聚胺法和微柱凝膠技術(shù)交叉配血適應(yīng)證。排除標準：①心功能不全；②急性肺水腫；③高血壓；④真性紅細胞增多癥；⑤既往有嚴重輸血反應(yīng)史。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會通過。

1.2 檢測方法 （1）采集所有患者靜脈血標本3ml，置于4℃環(huán)境中儲存待檢，所有標本檢測在2h內(nèi)完成。所有納入患者同時采用抗體篩選（鑒定），采用微柱凝膠法和凝聚胺法進行不規(guī)則抗體篩查和交叉配血實驗。（2）抗體篩選（鑒定）：取三支試管，分別標記①、②、③，各加入患者血清2滴，再分別加入篩選細胞2滴，混勻，37℃孵育1h，離心15s。輕輕懸浮細胞，觀察凝集結(jié)果并記錄。依據(jù)譜細胞數(shù)量取相應(yīng)數(shù)目試管，分別標記序號，各加入患者血清2滴，再分別加入譜細胞2滴，混勻，37℃孵育1h，離心15s。輕輕懸浮細胞，觀察凝集結(jié)果并記錄。（3）不規(guī)則抗體篩查和交叉配血實驗：①凝聚胺法：首先取潔凈試管2支，一支標記為主側(cè)，向其中加入受血者的血清和獻血者的紅細胞懸液，另一支標記為次側(cè)，向其中加入獻血者的血清和受血者的紅細胞懸液。向主側(cè)和次側(cè)兩支試管中均加入0.65ml低離子介質(zhì)，混勻，再加1滴凝聚胺混勻，離心（3500r/min，15s），倒掉上清液，輕輕搖動試管，凝集1min后在光學(xué)顯微鏡下觀察，若無凝集則為紅細胞抗原抗體結(jié)合，反之則為配血結(jié)果不合。②微柱凝膠法：先將供（受）血標本制備0.5%紅細胞低離子介質(zhì)懸液，取出Coombs配血卡，放于離心機離心15min，加100μl紅細胞懸液，次側(cè)加供（受）者血清或血漿各50μl，將檢測卡置于溫度為37℃環(huán)境下反應(yīng)15min，離心（轉(zhuǎn)速1500r/min，時間3min），若經(jīng)肉眼可觀察到紅細胞全部沉積于膠底則表示陰性，其他情況均為陽性。

1.3 觀察指標

1.3.1 不規(guī)則抗體篩查和配血情況 所有患者采用微柱凝膠技術(shù)和凝聚胺法進行不規(guī)則抗體篩查和檢測交叉配血不合情況，比較兩組患者篩查結(jié)果和交叉配血不合結(jié)果。

1.3.2 抗體鑒定 所有患者進行抗體鑒定，比較兩組方法檢測交叉配血不合的靈敏度和對各不規(guī)則抗體（抗-M、抗-E、抗-D、抗-S、抗-K、抗-C）的檢出率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS21.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析所有數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗比較組間差異，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 抗體篩選（鑒定）結(jié)果 68例患者經(jīng)抗體篩選（鑒定）結(jié)果顯示，交叉配血不合者56例（82.35%），不規(guī)則抗體36例（52.94%）。

2.2 微柱凝膠法和凝聚胺法交叉配血檢查結(jié)果比較 微柱凝膠法檢出交叉配血不合檢出率為73.53%（50/68），高于凝聚胺法檢測交叉配血不合檢出率57.35%（39/68）（P＜0.05）。

2.3 微柱凝膠法和凝聚胺法抗體篩查陽性結(jié)果分析 經(jīng)抗體鑒定，確診交叉配血不合者56例。微柱凝膠法檢出交叉配血不合者50例（89.29%），其中不規(guī)則抗體36例（64.29%），自身抗體14例（25.00%）；凝聚胺法檢出交叉配血不合者39例（69.64%），其中不規(guī)則抗體24例（42.86%），自身抗體15例（26.79%）。微柱凝膠法檢測交叉配血不合抗體陽性檢出率為89.29%，高于凝聚胺法檢測的69.64%（P＜0.05）。見表1。

表1 微柱凝膠法和凝聚胺法抗體篩查陽性結(jié)果分析[n(%)]

2.4 36例不規(guī)則抗體者用微柱凝膠法和凝聚胺法篩查陽性分型結(jié)果分析 經(jīng)抗體鑒定，不規(guī)則抗體為36例，微柱凝膠法檢測不規(guī)則抗體篩查中抗-M抗體（30.56%）、抗-E抗體（38.89%）和抗-C抗體（8.33%）陽性率分型比凝聚胺法的22.22%、16.67%、5.56%高。見表2。

3 討論

輸血是臨床常用的通過靜脈輸注全血和成分血以補充血容量，改善貧血，增加機體抵抗力的治療方法[7-8]。但輸血存在過敏、溶血、發(fā)熱等諸多不良反應(yīng)[9]，臨床輸血的安全性、有效性是判斷輸血能否成功救治患者的標準[10]。在血型鑒定的基礎(chǔ)上，通過交叉配血進一步證實受血者和供血者之間不存在血型不合的抗原-抗體反應(yīng)，以保證受血者輸血安全[11]。交叉配血兩側(cè)均無凝集反應(yīng)，為配血相合，方可輸血。因而交叉配血決定臨床輸血的可行性，能夠有效保證受血者的輸血安全，避免輸血意外情況的發(fā)生。因此，輸血前交叉配血實驗對臨床輸血安全具有重要意義。

凝聚胺法在臨床上操作簡便快捷，檢測所需成本低，在需緊急輸血情況下具有優(yōu)勢，但存在較高的漏檢率[12-13]。而微柱凝膠技術(shù)結(jié)合了離心和免疫反應(yīng)技術(shù)[14]，漏檢率低于凝聚胺法，結(jié)果更加可靠。本研究結(jié)果顯示，微柱凝膠法不規(guī)則抗體檢出率和交叉配血不合檢出率高于凝聚胺法，提示微柱凝膠技術(shù)相比于凝聚胺法檢查結(jié)果更加準確，安全性更高。分析本研究中的結(jié)果變化，可能與凝聚胺法檢測結(jié)果不直觀，且易受肝素、藥物等影響，導(dǎo)致誤差有關(guān)[15]。而微柱凝膠技術(shù)結(jié)合生物化學(xué)凝膠過濾技術(shù)、離心技術(shù)與免疫化學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的原理，結(jié)果穩(wěn)定，易于觀察，且受混雜因素影響較小。既往研究顯示，微柱凝膠技術(shù)交叉配血的不合檢出率高于凝聚胺法，能檢測到弱的抗原抗體反應(yīng)，并正確指導(dǎo)臨床選擇合適的輸血方案[16]，本研究結(jié)果與其部分一致，提示通過微柱凝膠技術(shù)用于交叉配血具有檢測影響因素少、結(jié)果準確等特點。

本研究結(jié)果顯示，微柱凝膠法檢測交叉配血不合抗體陽性檢出率為89.29%，高于凝聚胺法檢測的69.64%，且對抗-M抗體、抗-E抗體和抗-C抗體的靈敏度更高，提示微柱凝膠法相比凝聚胺法有更多弱陽性檢出，靈敏度更高，誤差更少。微柱凝膠法是在注有凝膠的微孔里，通過離心，將其血液中的紅細胞特異性抗體是否形成復(fù)合物浮于膠體表面而進行判定[17]。既往研究顯示，微柱凝膠技術(shù)更加標準化，重復(fù)性更高，誤差更小[18]，與本研究結(jié)果部分一致，分析其原因可能是運用了微柱凝膠抗人球蛋白法進行交叉配血[19]，提示微柱凝膠技術(shù)可以提高輸血的有效性和安全性，保證患者安全用血。本研究結(jié)果顯示，微柱凝膠法配血成功率高于微聚胺法配血成功率，說明微柱凝膠法臨床輸血安全高于微聚胺法。

綜上所述，微柱凝膠技術(shù)交叉輸血可以提高交叉配血不合檢出率。交叉配血不合的靈敏度較高，且臨床輸血安全性更高，治療效果更佳，本研究僅觀察了微柱凝膠技術(shù)及凝聚胺法兩種方式單獨檢測交叉輸血的靈敏度和安全性，兩種方式聯(lián)合使用的靈敏度及準確率尚需進一步深入研究。