MRI多模態(tài)成像在UTMD聯(lián)合CA-(Q-D-lip)精確示蹤和治療膠質(zhì)瘤中的價(jià)值*

鄭漢朋，趙應(yīng)征，周海生，呂金純，吳愛(ài)琴，陳 棋，趙雅萍，許崇永△

(1.樂(lè)清市人民醫(yī)院放射科，浙江溫州 325600；2.溫州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，浙江溫州 325000；3.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院放射科，浙江溫州 325027)

膠質(zhì)瘤占顱內(nèi)腫瘤的40%～50%[1]，侵襲性生長(zhǎng)是其生物學(xué)特征之一，這使得膠質(zhì)瘤與正常腦組織邊界不清[2]。所以，膠質(zhì)瘤邊界的準(zhǔn)確識(shí)別是保證手術(shù)成功、防止復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素[3]。量子點(diǎn)(quantum dots，QDs)作為一種納米熒光標(biāo)記探針，熒光信號(hào)強(qiáng)，穩(wěn)定性好，已用于標(biāo)記特定細(xì)胞和組織[4-5]。國(guó)內(nèi)外多個(gè)研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用脂質(zhì)體包載水溶性QDs可提高其物理穩(wěn)定性，保留QDs熒光特性，并極大降低生物毒性；若再對(duì)納米載體進(jìn)行靶向修飾，有望用于腫瘤在體內(nèi)的示蹤[5-7]。

最新研究發(fā)現(xiàn)，L19及其衍生物可以特異性地與細(xì)胞外基質(zhì)成分中的纖連蛋白結(jié)合，實(shí)現(xiàn)膠質(zhì)瘤靶向示蹤和藥物遞送[8]?；谝延形墨I(xiàn)[8-9]報(bào)道，本研究選用纖連蛋白靶向肽——氨基酸短肽(Cys-Arg-Glu-Lys-Ala，CA)作為靶向配基，將其修飾到藥劑輔料聚乙二醇(PEG)-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)上，制備包載水溶性QDs新型脂質(zhì)體，并加載多西紫杉醇(docetaxe，DTX)抗腫瘤藥物[簡(jiǎn)寫(xiě)為CA-(Q-D-lip)]，經(jīng)鼠尾靜脈給藥后，超聲腦部定位，利用超聲靶向微泡爆破技術(shù)(ultrasound targeted micro-bubble destruction，UTMD)可逆性開(kāi)放血腦屏障，遞送QDs納米粒突破血腦屏障入腦，實(shí)現(xiàn)膠質(zhì)瘤高效靶向治療及特異性示蹤，有效地將“QDs高效示蹤技術(shù)”“腫瘤靶向納米粒制劑技術(shù)”和“UTMD開(kāi)放血腦屏障介導(dǎo)技術(shù)”三者有機(jī)結(jié)合，充分發(fā)揮新材料、新制劑和超聲介導(dǎo)手段等多學(xué)科團(tuán)隊(duì)(MDT)技術(shù)優(yōu)勢(shì)，解決膠質(zhì)瘤術(shù)中邊界定位難、轉(zhuǎn)移灶容易遺漏的技術(shù)瓶頸，為提高膠質(zhì)瘤藥物治療效果和提升手術(shù)質(zhì)量而探索一種安全有效的新方法。

磁共振成像(MRI)多模態(tài)成像已成為腫瘤早期診斷和療效監(jiān)測(cè)的重要影像學(xué)檢查方法之一[10]。通過(guò)灌注成像(perfusion weighted imaging，PWI)評(píng)價(jià)膠質(zhì)瘤微循環(huán)的分布特點(diǎn)，擴(kuò)散加權(quán)成像(diffusion weighted imaging，DWI)反映水分子擴(kuò)散能力大小；通過(guò)體素內(nèi)不相干運(yùn)動(dòng)(intra-voxel incoherent motion，IVIM)的擴(kuò)散敏感因子(b)值調(diào)整來(lái)反映單純水分子擴(kuò)散或微循環(huán)灌注，擴(kuò)散峰度成像(diffusion kurtosis imaging，DKI)來(lái)反映水分子擴(kuò)散的不均質(zhì)性和受限程度[11]。本研究應(yīng)用MRI多模態(tài)成像及QDs熒光示蹤探討CA-(Q-D-lip)+UTMD精確示蹤和靶向治療膠質(zhì)瘤的效果及可行性，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1試劑

10%水合氯醛、水溶性QDs購(gòu)于武漢佳緣量子點(diǎn)科技發(fā)展有限公司；DSPE、纖連蛋白靶向肽修飾PEG-DSPE、DTX溶液、膽固醇、二氯甲烷購(gòu)于上海生物生命科技有限公司；釓噴替酸葡胺(Gd-DTPA)購(gòu)于美國(guó)Berlex Laboratory公司。

1.1.2儀器

使用Malvern Zetasizer Nano ZS900 納米粒徑電位分析儀，檢測(cè)新型脂質(zhì)體CA-(Q-D-lip)粒徑大小及δ電位。使用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)包載后量子點(diǎn)CA-(Q-D-lip)熒光特征有無(wú)變化和QDs包封率。采用高效液相色譜儀(HPLC，日立L-2400，配備紫外線檢測(cè)器，日本東京)檢測(cè)DTX的包封率及脂質(zhì)體穩(wěn)定性。iCAN 9傅立葉紅外光譜儀(天津市能譜科技有限公司)證實(shí)CA是否成功修飾至脂質(zhì)體上。使用腦立體定位儀(KOPF900，美國(guó)David KOPF儀器公司)固定大鼠頭部。使用UTMD(西門(mén)子Acuson Sequoia 512C系統(tǒng))治療。使用高分辨率老鼠掃描專用線圈(3.0T，8通道，內(nèi)徑7 cm，GE Discovery MRI 750，上海辰光醫(yī)療科技股份有限公司)進(jìn)行MRI掃描。采用小動(dòng)物光學(xué)成像系統(tǒng)(美國(guó)CRI公司)掃描采集熒光圖像。

1.1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選用SD雄性大鼠80只(上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司)，體重220～360 g，分為對(duì)照組和4個(gè)不同治療組{QDs溶液+超聲爆破治療組(Q-D+UTMD組)、空白脂質(zhì)體+超聲爆破治療組(Blank lip+UTMD組)、QDs脂質(zhì)體+超聲爆破治療組(Q-D-lip+UTMD組)和纖連蛋白靶向肽修飾的QDs脂質(zhì)體+超聲爆破治療組[CA-(Q-D-lip)+UTMD組]}，每組16只。大鼠全部操作、處置及手術(shù)都遵循動(dòng)物福利和倫理原則，并通過(guò)溫州醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物保護(hù)和應(yīng)用委員會(huì)檢查和批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1CA-(Q-D-lip)制備

選用纖連蛋白作為靶向位點(diǎn)，將CA修飾到藥劑輔料PEG-DSPE上，運(yùn)用自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)脂質(zhì)體制備方法包載水溶性QDs，將脂質(zhì)體膜成分——DSPE、纖連蛋白靶向肽修飾PEG-DSPE及DTX溶液與膽固醇按比例加入二氯甲烷中，37 ℃攪拌溶解備用。將水溶性QDs溶液滴入溶有膜成分的二氯甲烷中，超聲分散3 min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去二氯甲烷。超聲分散脂質(zhì)體即得到CA-(Q-D-lip)，同法制備不含CA或水溶性QDs的脂質(zhì)體。

1.2.2大鼠C6膠質(zhì)瘤造模

(1)大鼠固定與切口選擇：0.3 mL/100 g體重劑量的10%水合氯醛腹腔注射麻醉；在腦立體定位儀上固定大鼠頭部；(2)大鼠鉆孔：按照大腦立體定位解剖圖譜，選擇大鼠右側(cè)尾狀核為注射靶點(diǎn)；(3)大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞接種：抽取細(xì)胞懸液10 μL(細(xì)胞數(shù)約1×106個(gè))緩慢注入鼠腦尾狀核，使用無(wú)菌骨蠟封堵鉆骨孔。對(duì)照組則以等體積細(xì)胞培養(yǎng)液替換1×106個(gè)/10 μL的C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞懸液。

1.2.3給藥方式及檢測(cè)時(shí)間

SD大鼠接種C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞后第7天開(kāi)始各組定期給藥，給藥方式均采用鼠尾靜脈注射，注射劑量為1 mL (含QDs 50 nmol，DTX劑量為5 mg/kg)；超聲微泡劑量：200 毫克/只(300 μL/kg，1 108～5 108個(gè)微泡/毫升)，二者加入溶液中混合使用即可。每次給藥后，立即行UTMD治療，14 MHz，線性陣列傳感器放置在腫瘤細(xì)胞植入及對(duì)側(cè)大腦半球的頭骨上。除對(duì)照組外，超聲換能器參數(shù)設(shè)置如下：脈沖重復(fù)頻率1 Hz，聲波時(shí)間60 s，爆破時(shí)間10 ms，聲功率3 W。治療組于7、11、14、18、21、25、28 d給藥，28 d內(nèi)共接受7次給藥。各組給藥后7、14、21、28 d進(jìn)行體內(nèi)膠質(zhì)瘤MRI(常規(guī)、動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描及多b值擴(kuò)散加權(quán)成像)及熒光成像(本研究2例建模失敗)。

1.2.4MRI常規(guī)平掃及動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描

經(jīng)腹腔注入10%水合氯醛(0.3 mL/100 g體重)麻醉劑，俯臥位固定于高分辨率大鼠掃描專用線圈，頭先進(jìn)，背朝上，用小毛毯遮蓋大鼠進(jìn)行保暖，避免MRI掃描過(guò)程中頭部運(yùn)動(dòng)偽影。MRI檢查序列：橫斷及冠狀面T1WI及T2WI，T1WI動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描。檢查參數(shù)：T1WI重復(fù)時(shí)間(repetition time，TR)500 ms，回波時(shí)間(echo time，TE)12 ms，矩陣192×192，激勵(lì)次數(shù)(number of excitation，NEX)為2次；T2WI TR 4 000 ms，TE 96 ms，矩陣224×320，NEX為3次；層厚2.0 mm，層間距0.2 mm，視野(field of view，F(xiàn)OV)81 mm×90 mm；動(dòng)態(tài)增強(qiáng)采用Ax LAVA-xvDYN方案，層厚2 mm，120圈/層塊，翻轉(zhuǎn)角12°，NEX為1次，F(xiàn)OV 80 mm×80 mm，矩陣160×160，采用4.5號(hào)兒科頭皮針經(jīng)鼠尾靜脈手動(dòng)推注釓噴替酸葡胺，4 s內(nèi)完成，注射劑量0.4 mmol/kg，造影劑注射完成后即行掃描，總共掃描時(shí)間為6 min 2 s。

1.2.5多b值擴(kuò)散加權(quán)成像

MRI增強(qiáng)檢查前先行DWI掃描，采取OAx eDWI MB=7 Head方案，第2次掃描定位后，采取自旋回波-回波平面成像(SE-EPI)序列，針對(duì)SD大鼠行全腦擴(kuò)散加權(quán)成像檢查。掃描參數(shù)：TE minimum，TR 2 000 ms，層厚3 mm，層間距0 mm，矩陣160×192，F(xiàn)OV 80 mm×100 mm；b值分別采用0、30、100、200、400、1 000、1 500 s/mm2，NEX為6次，掃描時(shí)間4 min 16 s，評(píng)價(jià)不同數(shù)學(xué)擴(kuò)散模型[表觀彌散系數(shù)(ADC)單指數(shù)模型、IVIM雙指數(shù)模型及DKI模型]參數(shù)的診斷效果，初步確定上述模型中最好及最穩(wěn)定的擴(kuò)散模型：(1)ADC單指數(shù)模型：ADC=ln(S0/S1)/(b1-b0)，b值取30、100、200、400及1 000 s/mm2；(2)IVIM雙指數(shù)模型：Sb=S0[(1-f)×e(-bD)+f×e[-b(D+D*)]，f值為灌注分?jǐn)?shù)，D值為真性擴(kuò)散系數(shù)(ADC-slow)，D*值為假性擴(kuò)散系數(shù)(ADC-fast)，b值取30、100、200、400及1 000 s/mm2；(3)DKI模型：Si=S0×exp(-bi×Dapp+bi2×Dapp2×Kapp/6)，Kapp為平均峰度，無(wú)單位；Dapp值指非高斯分布矯正過(guò)ADC值;b值取30、100、200、400、1 000、1 500 s/mm2。

1.2.6MRI數(shù)據(jù)測(cè)量及分析

(1)計(jì)算增強(qiáng)MRI后腫瘤體積：確定強(qiáng)化膠質(zhì)瘤的最大橫斷面與冠狀面，測(cè)定最大左右徑(W)，前后徑(L)和上下徑(H)，數(shù)值帶入公式體積=(W×L×H×π×4/3)×1/8，單位為mm3；(2)依據(jù)時(shí)間-信號(hào)強(qiáng)度曲線(TIC)特征，計(jì)算出不同組早期相對(duì)信號(hào)強(qiáng)化率(relative signal enhancement ratio in arterial phase，ARSER)，ARSER=(SIpost30-SIpre)/SIpre×100%，SIpost30為ROI增強(qiáng)30 s時(shí)信號(hào)強(qiáng)度，SIpre為相應(yīng)ROI增強(qiáng)前(平掃)信號(hào)強(qiáng)度；增強(qiáng)掃描0～<33 s定為早期，33～198 s定為中晚期；膠質(zhì)瘤強(qiáng)化峰值時(shí)間為注藥后198 s內(nèi)，TIC到達(dá)最高強(qiáng)化峰值所需時(shí)間；(3)分析不同數(shù)學(xué)擴(kuò)散模型的評(píng)價(jià)效能：通過(guò)Mitalytics軟件(新加坡)，基于Matlab及C語(yǔ)言對(duì)圖像進(jìn)行后處理，對(duì)每只鼠腦的DWI圖像進(jìn)行ROI手動(dòng)選取，選擇膠質(zhì)瘤邊緣實(shí)質(zhì)部分、病灶周圍正常組織和對(duì)側(cè)正常組織分別測(cè)量，獲取b值-信號(hào)強(qiáng)度參數(shù)圖和參數(shù)結(jié)果，并采用不同數(shù)學(xué)擴(kuò)散模型進(jìn)行圖像擬合。質(zhì)量控制：DWI定位線垂直于大鼠脊柱，從大鼠眼球后緣開(kāi)始掃描，選最清楚圖像進(jìn)行分析，ROI選取腫瘤實(shí)質(zhì)部分，面積盡可能大，盡量避開(kāi)大血管、脈絡(luò)叢、腫瘤壞死、出血及偽影區(qū)域，見(jiàn)圖1。

A：IVIM測(cè)量;B：DKI測(cè)量。

1.2.7熒光成像

完成MRI檢查后，采用小動(dòng)物光學(xué)成像系統(tǒng)掃描并采集熒光圖像。紅色液晶濾光片大小為500～700 nm。通過(guò)QDs分布對(duì)熒光圖像進(jìn)行分析，觀察熒光聚集度、靶向肽脂質(zhì)體的靶向性，測(cè)量熒光面積及腫瘤體積。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠C6膠質(zhì)瘤體積變化情況

對(duì)照組、Q-D+UTMD組、Blank lip+UTMD組、Q-D-lip+UTMD組腫瘤體積隨時(shí)間延長(zhǎng)，不斷增大，CA-(Q-D-lip)+UTMD組腫瘤體積在第14、21天逐漸增大[(12.41±5.84)mm3vs.(40.12±21.09)mm3vs.(62.41±31.21)mm3]，第28天腫瘤開(kāi)始縮小[(19.46±7.46)mm3]，見(jiàn)圖2。

圖2 各組大鼠C6膠質(zhì)瘤不同時(shí)間體積變化(MRI-T1WI橫斷增強(qiáng))

造模后第7、14天各組腫瘤體積類似，第21、28天對(duì)照組腫瘤體積增長(zhǎng)最明顯[(324.21±34.43)mm3vs.(641.36±63.44)mm3]，對(duì)照組與各治療組腫瘤體積比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)圖3。

a:P<0.05，與對(duì)照組比較。

2.2 各組大鼠C6膠質(zhì)瘤時(shí)間-信號(hào)強(qiáng)度比較

對(duì)照組、Q-D+UTMD組、Blank lip+UTMD組及Q-D-lip+UTMD組腫瘤實(shí)質(zhì)部分MRI平掃信號(hào)強(qiáng)度隨時(shí)間變化逐漸升高；CA-(Q-D-lip)+UTMD組腫瘤信號(hào)強(qiáng)度整體上隨時(shí)間呈上升趨勢(shì)，第14、21天腫瘤信號(hào)強(qiáng)度變化不明顯，第28天腫瘤信號(hào)強(qiáng)度降低，CA-(Q-D-lip)+UTMD組信號(hào)強(qiáng)度低于其他4組，見(jiàn)圖4。不同時(shí)間(第14、21、28天)不同組間大鼠C6膠質(zhì)瘤TIC比較，各組ARSER-cut off時(shí)間(截?cái)嘀?在28～33 s，動(dòng)脈期明顯強(qiáng)化，ARSER>60%，中晚期在較高信號(hào)強(qiáng)度基礎(chǔ)上持續(xù)強(qiáng)化，強(qiáng)化峰值時(shí)間>198 s，曲線以上升趨勢(shì)為主，見(jiàn)圖5。

圖4 各組大鼠C6膠質(zhì)瘤時(shí)間-信號(hào)強(qiáng)度比較

A：第14天；B：第21天；C：第28天。

2.3 各組大鼠C6膠質(zhì)瘤不同數(shù)學(xué)模型參數(shù)隨時(shí)間變化趨勢(shì)

第14、21天Q-D-lip+UTMD組及CA-(Q-D-lip)+UTMD組ADC值逐步升高，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；第28天僅CA-(Q-D-lip)+UTMD組與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。對(duì)照組及Blank lip+UTMD組D值隨時(shí)間明顯下降，CA-(Q-D-lip)+UTMD組D值隨時(shí)間明顯上升。對(duì)照組、Q-D+UTMD組、Blank lip+UTMD組及Q-D-lip+UTMD組D*值隨時(shí)間呈上升趨勢(shì)，CA-(Q-D-lip)+UTMD組隨時(shí)間呈下降趨勢(shì)。對(duì)照組f 值隨時(shí)間明顯上升，Q-D+UTMD組、Blank lip+UTMD組、Q-D-lip+UTMD組f 值隨時(shí)間緩慢上升。對(duì)照組、Q-D+UTMD組、Blank lip+UTMD組及Q-D-lip+UTMD組Dapp值隨時(shí)間呈下降趨勢(shì)，CA-(Q-D-lip)+UTMD組隨時(shí)間呈上升趨勢(shì)。對(duì)照組、Q-D+UTMD組、Blank lip+UTMD組及Q-D-lip+UTMD組Kapp值隨時(shí)間呈上升趨勢(shì)， CA-(Q-D-lip)+UTMD組隨時(shí)間呈緩慢下降趨勢(shì)，見(jiàn)圖6。

A：DWI模型ADC值；B：IVIM模型D值；C：IVIM模型D*值；D：IVIM模型f值；E：DKI模型Dapp值；F：DKI模型Kapp值；a:P<0.05,與對(duì)照組比較。

2.4 造模后第7天各組C6膠質(zhì)瘤熒光示蹤及靶向性研究

造模后第7天，熒光監(jiān)測(cè)各組QDs在大鼠膠質(zhì)瘤中分布，對(duì)照組及Blank lip+UTMD組無(wú)QDs累積，Q-D+UTMD組、Q-D-lip+UTMD組及CA-(Q-D-lip)+UTMD組出現(xiàn)QDs累積，且逐漸遞增，見(jiàn)圖7。

圖7 造模后第7天熒光監(jiān)測(cè)結(jié)果

3 討 論

膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見(jiàn)惡性腫瘤，嚴(yán)重?fù)p害了腦功能，致殘率及復(fù)發(fā)率均較高[1,3]。其治療包括手術(shù)、化療及放療，術(shù)前精準(zhǔn)定位是確保膠質(zhì)瘤手術(shù)完整切除的重要因素。本研究利用UTMD可逆性開(kāi)放大腦血腦屏障，靶向遞送CA-(Q-D-lip)入腦，實(shí)現(xiàn)膠質(zhì)瘤特異性示蹤及高效靶向治療，提高了藥物治療效果，改善了預(yù)后，防止了復(fù)發(fā)。

UTMD為一種物理學(xué)效應(yīng)，其以微泡作為藥物載體，經(jīng)外周靜脈抵達(dá)靶目標(biāo)并蓄積，采用低頻率與一定強(qiáng)度超聲照射，微泡可發(fā)生慣性空化效應(yīng)(UC)[12-13]。UC效應(yīng)可使包裹在微泡內(nèi)的藥物在體內(nèi)精準(zhǔn)釋放，促進(jìn)藥物滲入靶組織，從而加速腫瘤細(xì)胞壞死，且明顯降低藥物的毒副作用，為腫瘤靶向治療提供了一種新策略[14]。本研究除CA-(Q-D-lip)+UTMD組外，腫瘤體積隨時(shí)間增加不斷增大，Q-D+UTMD組及Q-D-lip+UTMD組腫瘤第28天出現(xiàn)液化壞死，提示DTX發(fā)揮了治療作用；MRI增強(qiáng)能很好地顯示膠質(zhì)瘤體積動(dòng)態(tài)變化、形態(tài)、血供及內(nèi)部結(jié)構(gòu)改變(液化、出血及壞死等)，能直觀、多角度評(píng)估腫瘤靶向藥物治療效果。本研究CA-(Q-D-lip)+UTMD組腫瘤體積在第14、21天增大，第28天開(kāi)始縮小，表明CA-(Q-D-lip)+UTMD組治療效果最佳，大鼠C6膠質(zhì)瘤造模后第21、28天腫瘤體積以對(duì)照組增長(zhǎng)最明顯。說(shuō)明CA-(Q-D-lip)和UTMD組合能充分發(fā)揮最大協(xié)同治療作用，利用UTMD可逆性開(kāi)放血腦屏障，遞送CA-(Q-D-lip)入腦，高效靶向治療。

MRI-PWI是一種功能成像技術(shù)，較直觀地展示正常腦組織和膠質(zhì)瘤組織血流動(dòng)力學(xué)變化，間接地評(píng)價(jià)腫瘤血管成熟度[15]，可用于評(píng)價(jià)大鼠C6膠質(zhì)瘤放化療及抗血管生成藥物療效評(píng)價(jià)及預(yù)后判定等，具有良好的臨床應(yīng)用前景[16]。本研究對(duì)照組、Q-D+UTMD組、Blank lip+UTMD組及Q-D-lip+UTMD組腫瘤實(shí)質(zhì)部分MRI平掃信號(hào)強(qiáng)度隨時(shí)間變化逐漸增高，說(shuō)明腫瘤隨著體積增長(zhǎng)，細(xì)胞數(shù)目增多，內(nèi)部結(jié)構(gòu)更加致密；本研究CA-(Q-D-lip)+UTMD組腫瘤信號(hào)強(qiáng)度整體隨時(shí)間呈上升趨勢(shì)，第28天腫瘤信號(hào)強(qiáng)度降低，第21、28天腫瘤體積縮小，腫瘤峰值信號(hào)強(qiáng)度低于對(duì)照組、Q-D+UTMD組、Blank lip+UTMD組及Q-D-lip+UTMD組，也同樣說(shuō)明CA-(Q-D-lip)+UTMD組協(xié)同治療效果最明顯，而對(duì)照組膠質(zhì)瘤細(xì)胞快速繁殖，生長(zhǎng)迅速，實(shí)質(zhì)部分信號(hào)強(qiáng)度上升。

各組腫瘤動(dòng)脈期均明顯強(qiáng)化，ARSER>60%，中晚期基本在較高信號(hào)強(qiáng)度基礎(chǔ)上持續(xù)強(qiáng)化；各組ARSER比較，對(duì)照組、B+lip+UTMD組、Q-D+UTMD組、Q-D-lip+UTMD組、CA-(Q-D-lip)+UTMD組逐漸降低，說(shuō)明腫瘤治療后血流灌注發(fā)生變化，CA-(Q-D-lip)+UTMD組由于lip+UTMD、DTX及CA三者協(xié)同增效作用，腫瘤血流減少，強(qiáng)化幅度降低。

單指數(shù)模型DWI是目前唯一能夠檢測(cè)在體組織于生理和病理狀態(tài)下水分子微觀擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)的方法，間接了解細(xì)胞密度、功能狀態(tài)及微觀結(jié)構(gòu)改變，并已成為臨床MRI檢查的常規(guī)組成部分[17]。在生理和病理改變條件下，病變組織細(xì)胞數(shù)量或體積發(fā)生變化，水分子擴(kuò)散受限，ADC值下降，DWI多呈高信號(hào)。腫瘤級(jí)別越高，細(xì)胞越密集，體積越大，細(xì)胞外間隙越小，水分子自由擴(kuò)散受阻越明顯。CA-(Q-D-lip)+UTMD組隨時(shí)間增加，ADC值較明顯上升，上述結(jié)果表明藥物有效治療后，ADC值增加，靶向治療效果越明顯，ADC值上升越多。LEMKE等[19]研究結(jié)果顯示，DWI能夠反映大鼠膠質(zhì)瘤內(nèi)部組織結(jié)構(gòu)的微觀改變。

單指數(shù)模型DWI不能全面反映生物體內(nèi)復(fù)雜的分子運(yùn)動(dòng)，而IVIM為多b值序列，能同時(shí)反映水分子擴(kuò)散信息和組織微循環(huán)灌注，避免了單指數(shù)模型中微循環(huán)單純水分子擴(kuò)散與灌注相關(guān)擴(kuò)散混淆，數(shù)據(jù)更加可信。應(yīng)用公式：Sb=S0(1-f)×e(-bD)+f ×e[-b×(D+D*)]，S0為b值=0 s/mm2的信號(hào)強(qiáng)度，Sb為b取不同值時(shí)的信號(hào)強(qiáng)度；f 值為灌注分?jǐn)?shù)；D值為ADC-slow，代表單純水分子擴(kuò)散；D*值為ADC-fast[18]。本研究中，各組D值隨時(shí)間變化趨勢(shì)與ADC值變化基本類似，表明CA-(Q-D-lip)+UTMD協(xié)同治療效果好，膠質(zhì)瘤成分及結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，水分子擴(kuò)散受限緩解。D*值指灌注相關(guān)快速擴(kuò)散系數(shù)，體現(xiàn)膠質(zhì)瘤微循環(huán)血流灌注量。對(duì)照組及Blank lip+UTMD組腫瘤在不斷增殖過(guò)程中，膠質(zhì)瘤實(shí)質(zhì)部分微循環(huán)血流灌注變豐富，血供增加，以滿足腫瘤快速增長(zhǎng)需求。f 值代表體素內(nèi)灌注效應(yīng)所占總體擴(kuò)散效應(yīng)的容積百分比。本研究對(duì)照組隨時(shí)間增加f值較明顯上升，CA-(Q-D-lip)+UTMD組整體上隨時(shí)間呈下降趨勢(shì)，與D*值變化趨勢(shì)類似。IVIM采用多b值序列，同時(shí)反映水分子擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)和組織微循環(huán)灌注改變。高b值主要體現(xiàn)的是水分子擴(kuò)散效應(yīng)，要獲得敏感的微循環(huán)灌注信息，建議b值<200 s/mm2[18-19]。IVIM可用于腫瘤病理分級(jí)及臨床分期，治療效果及預(yù)后評(píng)估，協(xié)助臨床制訂治療方案。

受組織內(nèi)部固有生化特性、不同組織細(xì)胞類型等影響，IVIM與DWI在較高b值時(shí)，水分子擴(kuò)散呈非高斯分布[20]。DKI利用峰度值來(lái)檢測(cè)非正態(tài)分布與高斯分布水分子擴(kuò)散位移間的偏離[11]。DKI計(jì)算公式：Si=S0×exp(-bi×Dapp+bi2×Dapp2×Kapp/6)，Dapp值指非高斯分布修正過(guò)的ADC值，Kapp指平均峰度(MK)，無(wú)單位，范圍0～1。Dapp值變化趨勢(shì)反映了腫瘤組織水分子活體擴(kuò)散能力，細(xì)胞構(gòu)成及病理學(xué)分級(jí)。本組Dapp值變化趨勢(shì)整體上與ADC和D值變化趨勢(shì)類似，CA-(Q-D-lip)+UTMD組整體上呈上升趨勢(shì)。Kapp為相同梯度方向上多個(gè)b值的平均值，可視為衡量組織微觀結(jié)構(gòu)復(fù)雜性的一種“度”，在眾多參數(shù)中應(yīng)用最廣泛。CA-(Q-D-lip)+UTMD組整體上隨時(shí)間呈緩慢下降趨勢(shì)。Kapp值越大，表示非正態(tài)分布水分子擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)受限越明顯，ROI內(nèi)組織結(jié)構(gòu)成分越復(fù)雜，并可量化這一偏離[11]。

將治療藥物或成像劑以不同方式負(fù)載到QDs中，擴(kuò)展QDs多功能性，使其具有多模態(tài)成像和治療功能是目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)[1,21]。本研究CA-(Q-D-lip)+UTMD組將靶向配基CA修飾到PEG-DSPE上，實(shí)現(xiàn)靶向特異性示蹤，利用CA-(Q-D-lip)+UTMD技術(shù)可逆性開(kāi)放血腦屏障，實(shí)現(xiàn)高效示蹤，故該組QDs累積量最多，熒光最強(qiáng)。

綜上所述，QDs脂質(zhì)體熒光成像與MRI在分辨率、成像時(shí)間、成像方式、穿透性及生物安全性等方面有著比較大的差別，二者分別用于不同的科學(xué)研究和臨床診斷領(lǐng)域。QDs脂質(zhì)體具有高靈敏度、靶向特異性、生物相容性及快速響應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，不僅可實(shí)時(shí)熒光示蹤腫瘤動(dòng)態(tài)變化，且QDs介導(dǎo)的藥物可靶向遞送，但在圖像分辨率和成像深度等方面存在不足[22-23]。MRI為多參數(shù)成像，組織分辨率高，可獲得完整的三維信息、較好的圖像質(zhì)量和解剖細(xì)節(jié)，但不足之處在于靈敏度低，若二者能有機(jī)地結(jié)合起來(lái)，充分發(fā)揮各自優(yōu)勢(shì)，協(xié)同互補(bǔ)，則能獲得更全面、更準(zhǔn)確的膠質(zhì)瘤示蹤及療效信息。