升氣血口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升研究

摘要：目的：對升氣血口服液現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行提升，對黃芪含量測定方法進(jìn)行改進(jìn)。方法：建立高效液相色譜法測定黃芪中黃芪甲苷含量測定方法。結(jié)果：黃芪含量測定方法系統(tǒng)適用性好，陰性無干擾，重復(fù)性RSD為2.5%，線性相關(guān)系數(shù)r≥0.995，平均回收率為92%。結(jié)論：新建立的黃芪含量測定方法專屬性強(qiáng)，方法準(zhǔn)確，重復(fù)性好，能夠有效控制升氣血口服液的質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：中成藥;黃芪甲苷;質(zhì)量控制;升氣血口服液;高效液相色譜法

【中圖分類號】R27???????????? 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A???????????? 【文章編號】2107-2306（2022）1--02

升氣血口服液是由黨參、黃芪、當(dāng)歸、山茱萸、白術(shù)等13味藥組成的成方制劑，收錄于《國家食品藥品監(jiān)督管理總局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》（WS-5653（B-0653）-2014Z），具有補(bǔ)氣養(yǎng)血功效。用于氣血兩虛所致的體倦乏力，神疲懶言，食欲不振，面色萎黃等癥?，F(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中黃芪含量檢測方法采用薄層掃描法，此方法受展開條件、薄層斑點(diǎn)狀態(tài)、實(shí)驗(yàn)溫濕度條件等多種因素影響，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)重現(xiàn)性差，不能對黃芪含量進(jìn)行有效控制。為了提高檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，更好的控制產(chǎn)品質(zhì)量，故對黃芪含量測定方法進(jìn)行研究，將檢測方法改為液相色譜法。

1? 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1.1試劑與試藥

1.2對照品

1.3供試品

1.4分析儀器

2? 提取方法的選擇

2.1 精密量取本品10ml，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次25ml，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次30ml，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水20ml洗滌，取正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.2 精密量取本品10mL，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次25ml，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次30ml，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水20ml洗滌，取正丁醇液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，放冷，通過D101型大孔吸附樹脂柱（內(nèi)徑為1.5cm，柱高為12cm），以水50ml洗脫，棄去水液，再用40%乙醇30ml洗脫，棄去洗脫液，繼用70%乙醇80ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.3 精密量取本品10ml，用水飽和的正丁醇振搖提取4 次，每次25ml，合并正丁醇液，用2%氫氧化鈉溶液充分洗滌2次，每次30ml，棄去堿液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

3? 流動相的選擇

3.1 乙腈-水（32：68）

3.2 乙腈-水（35：65）

3.3 甲醇-水（82：18）

4? 確定方法

黃芪： 照高效液相色譜法（通則0512）測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)? 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-水（32：68）為流動相;蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。

對照品溶液的制備取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含60ug的溶液，即得。

供試品溶液的制備? 精密量取本品10ml，用水飽和的正丁醇振搖提取4 次，每次25ml，合并正丁醇液，用2%氫氧化鈉溶液充分洗滌2次，每次30ml，棄去堿液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

測定法? 分別精密吸取對照品溶液10μl、30μl與供試品溶液5-10μl，注入液相色譜儀，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，即得。

本品每1ml含黃芪以黃芪甲苷（C41H68O14）計(jì)，不得少于30μg。

5? 方法驗(yàn)證內(nèi)容

5.1 驗(yàn)證范圍和可接受限度

5.2? 驗(yàn)證內(nèi)容

5.2.1 系統(tǒng)適用性及專屬性

照黃芪測定項(xiàng)下色譜條件，精密量取流動相、空白溶劑、陰性樣品、對照品溶液各10μl、供試品溶液，注入液相色譜儀，對照品溶液連續(xù)進(jìn)5針，其它溶液各進(jìn)1針，記錄色譜圖?？瞻兹軇┘瓣幮詷討?yīng)無干擾，供試品溶液在與對照品溶液對應(yīng)保留時(shí)間上有相同色譜峰。對照品溶液連續(xù)進(jìn)6針應(yīng)滿足系統(tǒng)適用性的要求。

空白溶劑及陰性樣無干擾，供試品溶液在與對照品溶液對應(yīng)保留時(shí)間上有相同色譜峰。對照品溶液連續(xù)進(jìn)5針應(yīng)滿足系統(tǒng)適用性的要求。

5.2.2 重復(fù)性

照黃芪測定項(xiàng)下色譜條件，取同一供試品，分別制成6份供試品溶液，各取10μl注入液相色譜儀，測定并計(jì)算含量。其含量值的RSD≤4.0%。

5.2.3 溶液的穩(wěn)定性

照黃芪測定項(xiàng)下色譜條件，取對照品溶液、供試品溶液各一份，分別于0h、4h、8h、12h進(jìn)針10μl，計(jì)算回收率（回收率=各時(shí)間點(diǎn)峰面積/0h峰面積×100%）。對照品溶液、供試品溶液的回收率均應(yīng)在90%-110%之間。

5.2.4 線性

精密稱取黃芪甲苷對照品10mg置10ml容量瓶中，甲醇溶解并稀釋至刻度作為對照品儲備液;分別精密量取上述溶液1.25ml、2.5ml、5ml、7.5ml置10ml量瓶中（最大濃度值0.25mg/ml為對照品原液），加甲醇制成每1ml含黃芪甲苷 0.025mg、0.05mg、0.10mg、0.15mg、0.20mg的系列標(biāo)液;照黃芪測定項(xiàng)下色譜條件，吸取上述系列標(biāo)液各10μl注入液相色譜儀，以測得的峰面積對數(shù)為縱坐標(biāo)，標(biāo)液濃度對數(shù)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，觀察是否成線性，相關(guān)系數(shù)r≥0.995。

5.2.5 準(zhǔn)確度

采用加樣回收法。取已知含量的供試品，分別添加對照品，按黃芪項(xiàng)下色譜條件測定，計(jì)算其回收率應(yīng)為85%-110%，平均回收率應(yīng)為90%～108%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)≤4.0%。

5.2.6 耐用性

按黃芪項(xiàng)下色譜條件測定，選擇兩款不同品牌C18柱，分別按照以下條件試驗(yàn)，對照品溶液、樣品溶液各制備1份，對照品溶液分別進(jìn)10μl、30μl;樣品進(jìn)10μl。計(jì)算不同實(shí)驗(yàn)條件下的含量，RSD≦4.0%。

6? 總結(jié)

本研究對升氣血口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)黃芪含量進(jìn)行了提升，建立的高效液相色譜法含量量測定方法專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，能有效對升氣血口服液的質(zhì)量進(jìn)行控制。

參考文獻(xiàn)：

[1]《國家食品藥品監(jiān)督管理總局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》（WS-5653（B-0653）-2014Z）升氣血口服液。2014國藥標(biāo)字ZB-0614號。

[2]國家藥典會，中華人民共和國藥典：2020年版四部。北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.5

[3]國家藥典會，中華人民共和國藥典：2020年版一部。北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.5

?作者簡介：王艷萍，女，1973年3月，籍貫：吉林省通化市，本科，職稱：高級工程師，研究方向：藥品質(zhì)量控制。