新生兒ABO溶血病檢測結(jié)果分析及臨床意義

黃凱遠(yuǎn)

摘要：目的：分析新生兒ABO溶血?。ˋBO-HDN）檢測結(jié)果并探討其臨床意義。方法：選取2018年1月至2019年12月我院收治的479例疑似新生兒ABO溶血病患兒開展研究，研究對象為O型母親所生產(chǎn)的A型或B型嬰兒，所有患兒均進(jìn)行新生兒溶血三項試驗檢測，并對檢測結(jié)果展開分析。結(jié)果：女嬰ABO-HDN陽性確診率為70.00%，略高于男嬰63.44%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.239，P>0.05）;0～3d日齡的嬰兒ABO-HDN陽性率為70.68%，明顯高于4～7d （58.18%）及>7d（ 35.71%）的嬰兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=22.831，P<0.05）;母嬰血型為O-A組合的嬰兒ABO-HDN陽性率為75.93%，顯著高于O-B組合嬰兒58.17%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=16.696，P<0.05）;抗體釋放試驗陽性率為91.62%高于血清游離抗體試驗79.48%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=20.620，P<0.05）。結(jié)論：ABO-HDN陽性檢出率與新生兒日齡、母嬰血型組合及試驗方法等因素密切相關(guān)，針對上述因素，孕期積極開展預(yù)防措施，可對丈夫為A型、B型或AB型的O型孕婦進(jìn)行產(chǎn)前血清學(xué)檢測等方式排查，盡可能減少ABO-HDN患兒的出生。產(chǎn)后也應(yīng)及早對新生兒行HDN檢測，早發(fā)現(xiàn)早治療，以降低疾病對患兒的危害性。

關(guān)鍵詞：新生兒ABO溶血病;血型;日齡;性別

【中圖分類號】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1673-9026（2022）03--01

新生兒溶血?。℉DN），是指母胎血型不合所致的胎兒或新生兒免疫性溶血性疾病。胎兒遺傳自父親的血型抗原為母親所缺乏，當(dāng)胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母體后，刺激母體產(chǎn)生相應(yīng)的免疫性IgG類抗體，這類抗體可通過胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán)并附著于胎兒紅細(xì)胞表面，產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)，導(dǎo)致紅細(xì)胞被破壞，引發(fā)同種免疫性溶血;其中以ABO血型系統(tǒng)的血型不合引發(fā)的HDN較為常見[1]。新生兒溶血三項試驗，即直接抗人球蛋白試驗（DAT）、紅細(xì)胞致敏抗體釋放試驗與血清游離抗體試驗;其檢測結(jié)果可作為臨床診斷新生兒溶血病的重要指標(biāo)，同時可為后續(xù)治療方案的制定提供一定參考依據(jù)[2]。本研究對我院479例新生兒ABO溶血病檢測結(jié)果進(jìn)行分析，深入探討其臨床意義，內(nèi)容如下。

1.資料與方法

1.1一般資料

選取2018年1月至2019年12月我院479例疑似新生兒ABO溶血病患兒為觀察對象。男女比例為279：200，日齡為0～30d，其中0～3天 382例，4～7天 55例，>7天42例。

1.2方法

（1）標(biāo)本采集：取受檢者靜脈血2ml，血標(biāo)本用EDTA抗凝，標(biāo)明患者信息，送檢。（2）儀器：長春博研提供的TD-3A血型血清學(xué)離心機、FYQ型免疫微柱孵育器。（3）試劑有：長春博迅提供的抗人球蛋白檢測卡、新生兒ABO.RhD血型檢測卡、酸釋放試劑;長春博德提供的抗體篩檢紅細(xì)胞和上海血液提供的ABO血型反定紅細(xì)胞（4）標(biāo)本處理：血標(biāo)本用離心機以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心3min后吸取上層血漿做游離抗體試驗;再用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞四次，最后一次，小心去除上清液，用1支試管留部分上清液做對照試驗;取部分紅細(xì)胞定血型;至少保留洗滌后壓積紅細(xì)胞1ml做抗體釋放試驗。（5）測定：按照操作規(guī)程，借助新生兒ABO、RhD血型檢測卡進(jìn)行ABO、RhD血型鑒定;新生兒溶血病三項試驗，采用微柱凝膠免疫凝集法進(jìn)行檢測。（6）注意事項：儀器設(shè)備定期校準(zhǔn)、做好日常保養(yǎng)及維護，確保儀器在穩(wěn)定條件下使用，實驗過程嚴(yán)格按照SOP操作，并按要求做好質(zhì)量控制，確保結(jié)果可靠。

1.3結(jié)果判定

陽性：細(xì)胞在凝膠表面凝集成一條紅線或散布在凝膠中;陰性：細(xì)胞沉積在管底。雙相：既有陽性結(jié)果，同時也有陰性結(jié)果。溶血：紅細(xì)胞溶解，作為陽性結(jié)果對待。若抗體釋放試驗結(jié)果為陽性或者直抗與游離試驗同時為陽性時即可判定為ABO-HDN;直抗或游離試驗單個陽性時則判定為可疑;三項試驗結(jié)果均為陰性時判定為血清學(xué)試驗未能證實由血型抗體引起HDN[3]。

1.4數(shù)據(jù)處理

運用統(tǒng)計軟件SPSS 21.0，[n（%）]表示計數(shù)資料、行χ2檢驗，P<0.05為差異有意義。

2.結(jié)果

2.1不同性別嬰兒ABO-HDN陽性率

本組479例患兒檢測結(jié)果中陰性133例，可疑29例、確診陽性317例，總確診率為66.18%。女嬰ABO-HDN陽性確診率略高于男嬰（70.00%vs63.44%），差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），詳見表1：

2.2不同日齡嬰兒ABO-HDN陽性率

0～3d日齡的嬰兒ABO-HDN陽性檢出率為70.68%，與4～7d（58.18%）及>7d（35.71%）的嬰兒相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），詳見表2：

2.3不同血型嬰兒ABO-HDN陽性率

母嬰血型為O-A組合的嬰兒ABO-HDN陽性率為75.93%，顯著高于O-B組合嬰兒58.17%（P<0.05），詳見表3：

2.4 ABO-HDN不同試驗陽性率

游離抗體試驗陽性率為（79.48%）低于抗體釋放試驗（91.62%），其中母嬰血型為O-A組合的嬰兒釋放試驗陽性率（75.93%）明顯高于游離試驗（60.65%）（P<0.05）;O-B組合的嬰兒這兩項試驗結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），詳見表4：

3.討論

ABO-HDN主要指母親體內(nèi)免疫性IgG-抗A（B）抗體經(jīng)過胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，導(dǎo)致胎兒紅細(xì)胞致敏或被破壞，引發(fā)溶血[4]。本病始于胎兒時期，可引起胎兒出現(xiàn)水腫、貧血等情況，嚴(yán)重者甚至發(fā)生宮內(nèi)死亡;患兒出生后可有黃疸、貧血、肝脾腫大等癥狀，若治療不及時病程逐漸加重可致核黃疸，并繼發(fā)出現(xiàn)哭納差、驚厥、嗜睡、肌張力減低等神經(jīng)智能方面諸多不良癥狀，甚至可致新生兒死亡，嚴(yán)重危害新生兒身心健康。故積極開展新生兒溶血三項試驗并分析檢測結(jié)果十分必要。

（1）不同性別嬰兒ABO-HDN發(fā)生情況，本研究指出，女嬰ABO-HDN陽性確診率略高于男嬰（70.00%vs63.44%），差異無統(tǒng)計學(xué)意義，這與尹明偉、陳學(xué)軍、曾智[5]等學(xué)者報道中女嬰確診率（74.18%）顯著高于男嬰（66.34%），P<0.001的結(jié)果不一致。但由于該影響因素相關(guān)回顧性分析研究結(jié)論相對較少，結(jié)果缺乏一定驗證，故目前臨床并未將性別納入ABO-HDN的發(fā)病影響因素。

（2）不同日齡嬰兒ABO-HDN檢出情況，0～3d日齡的嬰兒ABO-HDN陽性檢出率明顯高于4～7d及>7d的嬰兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，這表示在溶血早期實行溶血三項檢查對HDN具有更高的靈敏度，及早為新生兒開展新生兒溶血三項試驗可減少漏檢情況的發(fā)生。分析原因可能隨著病程的進(jìn)展，患兒體內(nèi)已致敏的紅細(xì)胞逐漸被破壞而呈下降趨勢，此時機體游離IgG抗體含量也可隨著時間的延長逐漸被消耗而明顯減少，且大多以抗原抗體復(fù)合物形式存在，不具備反應(yīng)原性，從而影響疾病的檢出。臨床也有報道指出，新生兒日齡為ABO-HDN檢出率的獨立因素，且陽性率可隨著日齡的增長而呈下降趨勢[6]。故臨床醫(yī)師針對疑似ABO-HDN的患兒應(yīng)盡早抽取血樣送檢，以提高陽性檢出率，避免延誤治療時機。

（3）不同血型嬰兒ABO-HDN檢出情況，母嬰血型組合為O-A的嬰兒ABO-HDN陽性檢出率顯著高于O-B組合的嬰兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，考慮可能與胎兒紅細(xì)胞上A抗原結(jié)合位點多于B抗原結(jié)合位點有關(guān)，且與B型抗原相比，A型抗原的免疫原性更強，其更容易與IgG抗體發(fā)生結(jié)合，從而誘導(dǎo)機體發(fā)生免疫應(yīng)答。

（4）ABO-HDN不同試驗陽性檢出率，臨床研究發(fā)現(xiàn)，溶血三項試驗可對新生兒溶血病的病情嚴(yán)重程度起到良好的提示作用[7]。本研究中，釋放試驗陽性檢出率顯著高于游離試驗，且 A型嬰兒比B型嬰兒更為顯著，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，這與吳淑華、苗銳[8]等人研究中提出的HDA檢測中釋放試驗陽性率最高（可達(dá)56.13%）的結(jié)論相一致;充分說明釋放試驗在ABO-HDN臨床診斷中具有更高的價值，進(jìn)一步表明A型紅細(xì)胞更容易與血漿中的特異性抗體結(jié)合。釋放試驗與紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗均用于檢測患兒紅細(xì)胞是否因母體IgG類血型抗體滲入而出現(xiàn)致敏現(xiàn)象。但就試驗靈敏度和準(zhǔn)確度而言，何柏霖[9]的研究中也指出釋放試驗的靈敏度和準(zhǔn)確度均比直抗試驗高，因為釋放試驗使用的是濃集紅細(xì)胞，濃度是直抗試驗的數(shù)百乃至上千倍，釋放后收集到的抗體濃度自然也會高很多，故釋放試驗靈敏度高且特異性較強，是臨床目前判斷新生兒是否發(fā)生HDN的重要指標(biāo)。此外，游離試驗主要用于測定患兒血清內(nèi)是否存在游離的血型抗體，若游離與釋放試驗結(jié)果均為陽性說明患兒不僅紅細(xì)胞上有抗體吸附，且血清中也存在諸多游離抗體，提示其病情較為嚴(yán)重，抗體有繼續(xù)致敏紅細(xì)胞的可能;治療后若游離試驗結(jié)果顯示轉(zhuǎn)為陰性，則說明血清內(nèi)無游離抗體，提示患兒預(yù)后良好。但游離試驗用于癥狀相對較輕的HDN患兒診斷中靈敏度較低，故其陽性檢出情況不及釋放試驗。

綜上所述，新生兒溶血三項試驗在ABO-HDN臨床診斷中發(fā)揮重要作用，醫(yī)師應(yīng)對血清學(xué)檢測開展的必要性具有充分認(rèn)知，從而對可疑標(biāo)本及時送檢;早期開展新生兒溶血三項試驗可一定程度上規(guī)避漏診現(xiàn)象，以免影響后續(xù)治療。臨床針對夫婦血型不合的孕婦加強產(chǎn)前血清學(xué)檢測，可降低ABO-HDN患兒出生率;針對母嬰血型組合為O-A、O-B的新生兒及早開展ABO-HDN干預(yù)措施，對改善其生存質(zhì)量具有重要意義。

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