南方根結(jié)線蟲(chóng)與土壤理化性質(zhì)對(duì)不同外源物的響應(yīng)

毛佳， 吳險(xiǎn)平， 王宏寶*， 王曉飛， 高玉俠

(1.江蘇徐淮地區(qū)淮陰農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，江蘇 淮安 223001； 2.淮安市農(nóng)業(yè)科技實(shí)業(yè)總公司，江蘇 淮安 223001；3.淮安市淮安區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，江蘇 淮安 223200)

根結(jié)線蟲(chóng)(Meloidogyneincognita)是危害最嚴(yán)重的植物病原線蟲(chóng)之一，在世界各地廣泛分布，可寄生于3 000多種植物，尤以茄科、葫蘆科和十字花科等植物受害嚴(yán)重[1]。據(jù)估計(jì)，全世界農(nóng)業(yè)生產(chǎn)每年因各類災(zāi)害造成的總損失中，根結(jié)線蟲(chóng)的危害約占到5%左右，多達(dá)500億美元。黃瓜作為我國(guó)重要蔬菜種類，近年來(lái)隨著日光溫室黃瓜栽培面積的逐步擴(kuò)大和復(fù)種指數(shù)的提高，根結(jié)線蟲(chóng)危害日趨嚴(yán)重，并已成為黃瓜生產(chǎn)中的主要障礙，一般危害造成減產(chǎn)20%～30%，嚴(yán)重的達(dá)70%以上，甚至絕收[2-3]。近年來(lái)，由于根結(jié)線蟲(chóng)危害嚴(yán)重，給蔬菜產(chǎn)量造成極大損失，對(duì)當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展帶來(lái)極大影響，有一些關(guān)于中低毒藥劑和生防菌防治根結(jié)線蟲(chóng)病方面的試驗(yàn)報(bào)道[4-8]，然而在氯溴異氰尿酸及植物源材料檳榔粉等方面的報(bào)道較少。為解決生產(chǎn)中根結(jié)線蟲(chóng)病的防治難題，本文通過(guò)不同外源物對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)室內(nèi)活性及盆栽等藥效進(jìn)行測(cè)定，研究了南方根結(jié)線蟲(chóng)與土壤理化性質(zhì)對(duì)不同外源物的響應(yīng)，以期為南方根結(jié)線蟲(chóng)病綜合防控提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

試驗(yàn)供試外源物為40%辛硫磷乳油(連云港立本作物科技有限公司)，1.8%阿維菌素乳油(連云港立本作物科技有限公司)，50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑(南京南農(nóng)科技發(fā)展有限公司)，25%噻蟲(chóng)嗪水分散粒劑(江蘇寶靈化工股份有限公司)，檳榔粉(提取比例15∶1，質(zhì)量比，寶雞市方晟生物開(kāi)發(fā)有限公司)。

1.2 幼蟲(chóng)準(zhǔn)備

在溫室內(nèi)盆栽番茄繁殖南方根結(jié)線蟲(chóng)。將番茄種子播種在育苗床中，20 d后稍顯粗壯時(shí)移為盆栽。接種南方根結(jié)線蟲(chóng)，1個(gè)月后，根部會(huì)產(chǎn)生大量卵囊。將根取出并洗去泥土，用鑷子挑取卵囊置于培養(yǎng)皿中，用0.5%的次氯酸鈉處理3 min，再用無(wú)菌水沖洗3次，置于25 ℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行孵化。3 d左右就會(huì)孵化出大量2齡幼蟲(chóng)(J2)，生物檢測(cè)備用[9]。

1.3 外源物對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)活性試驗(yàn)

各種藥劑分別配制100倍液和150倍液2份母液備用，同時(shí)配置約200條·mL-1的線蟲(chóng)懸浮液備用。用移液槍吸取0.5 mL線蟲(chóng)懸浮液置入5 mL離心管后，各濃度線蟲(chóng)處理液容積統(tǒng)一設(shè)定為2 mL，根據(jù)總?cè)萘糠謩e計(jì)算對(duì)應(yīng)400、600、800、1 200、1 600、2 400倍液所需要的母液量和用水量。配置處理液時(shí)，先將計(jì)算好的用水量加入離心管的線蟲(chóng)懸浮液中，接著加入不同稀釋倍數(shù)所需的母液量。將配置好的不同倍數(shù)處理液搖勻后置于試管架上，在25 ℃黑暗培養(yǎng)箱中分別處理24 h，鏡檢觀察線蟲(chóng)死亡率。鏡檢時(shí)分別將處理液倒入凹面皿中并置于體視顯微鏡下統(tǒng)計(jì)存活狀態(tài)，線蟲(chóng)存活狀態(tài)通過(guò)針刺法測(cè)定，即線蟲(chóng)僵直不動(dòng)為死蟲(chóng)，彎曲蠕動(dòng)狀態(tài)為活蟲(chóng)[10]。試驗(yàn)通過(guò)計(jì)算不同外源物對(duì)線蟲(chóng)的擊倒率(矯正死亡率)來(lái)測(cè)定線蟲(chóng)對(duì)各外源物的敏感性?？瞻讓?duì)照設(shè)為清水組，每個(gè)處理重復(fù)3次，每個(gè)處理的線蟲(chóng)數(shù)量約為100條。

1.4 外源混合物對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)盆栽藥效試驗(yàn)

試驗(yàn)作物：黃瓜，品種為冬美906，由天津德瑞特種業(yè)有限公司生產(chǎn)。將黃瓜種子(盆栽3顆種子)種在透明塑料杯中(口徑10 cm，高15 cm)，每盆土樣重0.5 kg，土壤中每100 g干土中2齡幼蟲(chóng)數(shù)量為38.4條。出苗后保留2株用于試驗(yàn)，待黃瓜苗2葉期進(jìn)行灌根處理，共設(shè)5個(gè)盆栽處理和1個(gè)空白對(duì)照，每個(gè)處理用藥情況見(jiàn)表1，處理期間每2 d澆少許水以保持土壤濕度，處理30 d后觀察統(tǒng)計(jì)根部侵染情況，每個(gè)處理重復(fù)10盆。藥效調(diào)查采用數(shù)根瘤法，每個(gè)處理取5盆統(tǒng)計(jì)根結(jié)(瘤)量，計(jì)算根結(jié)減退率[11]。

表1 各處理不同外源物的混合比例

1.5 土壤理化指標(biāo)測(cè)定

方法1.4中統(tǒng)計(jì)根結(jié)數(shù)量后的盆栽土壤按照不同處理分別混合均勻后自然陰干過(guò)篩、分裝、檢測(cè)，測(cè)定指標(biāo)及測(cè)定方法參照王宏寶等[12-13]報(bào)道的土壤理化指標(biāo)測(cè)定方法，即土壤多酚氧化酶活力測(cè)定采用紫色沒(méi)食子素比色法，土壤脲酶活力采用靛酚藍(lán)比色法，蔗糖酶活力采用3,5-二硝基水楊酸比色法，纖維素酶活力采用蒽酮比色法，土壤有機(jī)質(zhì)采用重鉻酸鉀容量法，全氮采用凱氏定氮法，全磷采用鉬銻抗比色法，pH采用pH計(jì)測(cè)定，每個(gè)指標(biāo)測(cè)定重復(fù)3次。

1.6 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2019和DPS 7.05軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源物對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)J2活性的影響

表2顯示，線蟲(chóng)在氯溴異氰尿酸和阿維菌素不同濃度下時(shí)對(duì)線蟲(chóng)活性高，2種藥劑在稀釋2 400倍液時(shí)擊倒率仍達(dá)70%左右；而噻蟲(chóng)嗪僅在400倍液下對(duì)線蟲(chóng)的擊倒率為97.0%，其他濃度下?lián)舻孤瘦^低；檳榔粉在400～600倍液處理下表現(xiàn)出較好的擊倒率，辛硫磷在800倍液下?lián)舻孤蕿?1.7%，其他濃度處理?yè)舻孤实汀?/p>

表2 不同外源物對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)J2的擊倒率

2.2 各處理對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的盆栽藥效

圖1、圖2顯示，隨著氯溴異氰尿酸含量的增加，根結(jié)線蟲(chóng)侵染引起的根結(jié)數(shù)量逐漸降低，其中，20%和40%的氯溴異氰尿酸混合物處理(圖1中處理4和處理5)后根結(jié)數(shù)量減退率顯著降低，防控效果達(dá)到了68.4%和77.9%(圖2中處理4和處理5)。

1—2.5%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；2—5%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；3—10%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；4—20%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；5—40%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g。圖2 同。圖1 各處理對(duì)黃瓜根部根結(jié)數(shù)量的影響

圖2 各處理對(duì)盆栽黃瓜線蟲(chóng)病的防控效果

2.3 土壤生物酶及理化性質(zhì)對(duì)各處理的響應(yīng)

土壤生物酶對(duì)氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應(yīng)見(jiàn)表3，土壤多酚氧化酶除了處理2有所下降外，其他處理土壤多酚氧化酶與對(duì)照相比，含量均有所提高；土壤纖維素酶變化顯示，處理1、4、5與對(duì)照相比，促進(jìn)了纖維素酶含量的增加，而處理2、3則抑制了土壤纖維素酶含量的增加。土壤脲酶含量變化顯示，不同處理正向促進(jìn)了土壤脲酶含量增加，但各處理與對(duì)照間差異不顯著；土壤蔗糖酶變化顯示，不同處理作用下，土壤蔗糖酶含量均有所增加，其中，處理2、3、4、5對(duì)土壤中蔗糖酶正向促進(jìn)效應(yīng)顯著。

表3 土壤生物酶對(duì)氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應(yīng)

土壤理化性質(zhì)對(duì)氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應(yīng)見(jiàn)表4，氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物促進(jìn)了土壤全磷含量的增加，其中處理1、2、3、4土壤全磷含量與對(duì)照相比顯著增加。土壤pH變化顯示，與對(duì)照相比，混合物處理后，pH有所下降，處理2和處理3達(dá)到顯著性差異，其他處理不顯著。土壤有機(jī)質(zhì)變化顯示，混合物處理后，有機(jī)質(zhì)有所增加，差異不顯著；土壤全氮分析顯示，處理2、4、5與對(duì)照相比差異顯著，即氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物(外源物)施用后對(duì)土壤全氮起到了正向效應(yīng)，表現(xiàn)為土壤全氮含量有所增加。

表4 土壤理化性質(zhì)對(duì)氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應(yīng)

3 小結(jié)與討論

王金柱等[13-14]報(bào)道了50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑對(duì)小麥、大豆、西瓜、生姜等作物土傳病害有較好的防效，且在試驗(yàn)劑量?jī)?nèi)對(duì)作物安全。50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑37.5～45.0 kg·hm-2處理對(duì)小麥紋枯病、小麥根腐病、大豆根腐病、西瓜枯萎病、西瓜蔓枯病、姜瘟病和姜莖基腐病的防效分別為85.7%、64.4%、70.4%、90.0%、80.0%、100.0%和100.0%。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，氯溴異氰尿酸單劑及混配制劑對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)的防控效果明顯，同時(shí)分析了不同比例氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物對(duì)土壤理化性質(zhì)的影響，發(fā)現(xiàn)該混合物施用后對(duì)土壤全氮、全磷、有機(jī)質(zhì)、土壤脲酶、土壤蔗糖酶起到了正向促進(jìn)效應(yīng)，同時(shí)對(duì)土壤pH有一定調(diào)控作用，可以作為一種土壤調(diào)理劑在生產(chǎn)中運(yùn)用。