• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    硬脂酰輔酶A去飽和酶1基因表達(dá)對(duì)草原安格斯牛血液脂肪酸組成的影響

    2022-03-19 14:56:54王圓圓李新淼HESHUOTEMailisi白玉廷包音都古榮·金花呼格吉勒?qǐng)D侯榮倫薛強(qiáng)敖日格勒
    肉類研究 2022年2期
    關(guān)鍵詞:安格斯輔酶基因型

    王圓圓 李新淼 HESHUOTE Mailisi 白玉廷 包音都古榮·金花 呼格吉勒?qǐng)D 侯榮倫 薛強(qiáng) 敖日格勒

    摘 要:研究硬脂酰輔酶A去飽和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)基因表達(dá)對(duì)草原安格斯牛血液脂肪酸組成的影響,采集38 頭平均體質(zhì)量(698±34) kg、48 月齡草原安格斯牛血液樣品,測(cè)定其脂肪酸組成與含量,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測(cè)定SCD1基因表達(dá)量,一代測(cè)序技術(shù)檢測(cè)SCD1基因在C878T位點(diǎn)的突變對(duì)實(shí)驗(yàn)牛血液脂肪酸組成的影響,分析SCD1基因表達(dá)與脂肪酸組成間的相關(guān)性。結(jié)果表明:血液樣品中共測(cè)得36 種主要脂肪酸,飽和脂肪酸(saturated fatty acids,SFA)以棕櫚酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)為主,含量分別達(dá)22.53%和26.95%,單不飽和脂肪酸(monounsaturated fatty acids,MUFA)中油酸(C18:1 n-9c)含量最高(15.09%);由SCD1基因表達(dá)與脂肪酸組成的顯著性分析結(jié)果可知,SCD1基因表達(dá)對(duì)肉豆蔻酸(C14:0)、肉豆蔻油酸(C14:1)、C16:0、棕櫚油酸(C16:1)、C18:0、C18:1 n-9c、亞油酸(C18:2 n-6c)、MUFA和MUFA/SFA以及C14指數(shù)、C18指數(shù)、脂肪酸總不飽和指數(shù)和伸長(zhǎng)指數(shù)均影響顯著;相關(guān)性分析結(jié)果顯示,SCD1基因表達(dá)量與C16:0、C16:1、C18:0、C18:1 n-9c和MUFA含量均呈正相關(guān);SCD1基因在878位點(diǎn)處出現(xiàn)了C/T突變,有CC、TT和CT 3 種基因型,不同基因型與脂肪酸組成之間均無(wú)顯著相關(guān)性。綜上所述,草原安格斯牛血液中的SCD1基因表達(dá)對(duì)其脂肪酸組成具有調(diào)控作用,可作為遺傳標(biāo)記參考基因。

    關(guān)鍵詞:草原安格斯牛;血液脂肪酸組成;硬脂酰輔酶A去飽和酶1基因表達(dá)量;相關(guān)性;硬脂酰輔酶A去飽和酶1基因分型

    Effects of Stearoyl-Coenzyme A Desaturease 1 Gene Expression on Blood Fatty Acid Composition of Pastured Angus Cattle

    WANG Yuanyuan1,2, LI Xinmiao1,2, HESHUOTE Mailisi3, BAI Yuting4, BAOYINDUGURONG·Jinhua1,2,*,

    HUGEJILETU5, HOU Ronglun5, XUE Qiang5, AORIGELE5

    (1.College of Food Science and Engineering, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China; 2.Inner Mongolia Key Laboratory of Biomanufacturing, Hohhot 010018, China; 3.College of Engineering and Applied Sciences, University of Columbia, New York 10027, USA; 4.College of Veterinary, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China;?5.Inner Mongolia Hesige Green Industry Import and Export Co. Ltd., Xilingol 026321, China)

    Abstract: The purpose of this study was to investigate the effect of stearoyl-coenzyme desaturase 1 (SCD1) gene expression on blood fatty acid composition of Angus cattle raised on pasture. Blood samples of 38 pastured Angus cattle with average body mass of (698 ± 34) kg and at the age of 48 months were collected for fatty acid composition and content determination. The expression of the SCD1 gene was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, and the influence of SCD1 gene mutation at C878T on fatty acid composition of blood samples of cattle was detected by first-generation sequencing technology. The correlation between SCD1 gene expression and fatty acid composition was further analyzed. The results showed the presence of 36 main fatty acids in blood samples, with the major saturated fatty acids (SFA) being palmitic acid (C16:0, 22.53%) and stearic acid (C18:0, 26.95%). Oleic acid (C18:1 n-9c) was identified as the most abundant monounsaturated fatty acid (MUFA) (15.09%). The significance analysis indicated that SCD1 gene expression had significant effects on myristic acid (C14:0), myristic acid (C14:1), C16:0, C16:1, C18:0, C18:1 n-9c, linoleic acid (C18:2 n-6c), MUFA and MUFA/SFA ratio as well as C14 index, C18 index, total unsaturation index and elongation index of fatty acids. Additionally, the correlation analysis results suggested that SCD1 gene expression was positively correlated with C16:0, palmitoleic acid (C16:1), C18:0, C18:1 n-9c and MUFA. SCD1 gene exhibited C/T mutation at the 878 site, yielding three genotypes: CC, TT and CT. No significant difference between different genotypes and fatty acid composition was found. Overall, the expression of SCD1 gene in the blood of pastured Angus cattle can regulate its fatty acid composition and thus can be used as a reference gene for genetic markers.

    Keywords: pastured Angus cattle; blood fatty acid composition; stearoyl-coenzyme A desaturase 1 gene expression level; correlation; stearoyl-coenzyme A desaturase 1 genotype

    DOI:10.7506/rlyj1001-8123-20210603-168

    中圖分類號(hào):Q786? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1001-8123(2022)02-0009-06

    引文格式:

    王圓圓, 李新淼, HESHUOTE Mailisi, 等. 硬脂酰輔酶A去飽和酶1基因表達(dá)對(duì)草原安格斯牛血液脂肪酸組成的影響[J]. 肉類研究, 2022, 36(2): 9-14. DOI:10.7506/rlyj1001-8123-20210603-168.? ? http://www.rlyj.net.cn

    WANG Yuanyuan, LI Xinmiao, HESHUOTE Mailisi, et al. Effects of stearoyl-coenzyme a desaturease 1 gene expression on blood fatty acid composition of pastured angus cattle[J]. Meat Research, 2022, 36(2): 9-14. DOI:10.7506/rlyj1001-8123-20210603-168.? ? http://www.rlyj.net.cn

    脂肪酸是動(dòng)物新陳代謝、生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖等生命活動(dòng)所必需的營(yíng)養(yǎng)素和限制性因素,脂肪酸含量與人類健康和疾病密切相關(guān)[1]。硬脂酰輔酶A去飽和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)是脂肪代謝中的關(guān)鍵酶,催化硬脂酰輔酶A和棕櫚酰輔酶A第9、10位碳原子間形成一個(gè)順式雙鍵,將飽和脂肪酸轉(zhuǎn)化為單不飽和脂肪酸(monounsaturated fatty acids,MUFA)[2]。SCD1作為脂肪酸去飽和化的限速酶,其主要底物為棕櫚酰輔酶A和硬脂酰輔酶A,分別將它們轉(zhuǎn)換為棕櫚油酰輔酶A和油?;o酶A[3]。MUFA的主要組成部分包括膜磷脂、甘油三酯、膽固醇脂和酯蠟,上述脂類中飽和脂肪酸(saturated fatty acids,SFA)與MUFA的比例影響脂蛋白代謝、生物膜流動(dòng)性和信號(hào)傳導(dǎo),進(jìn)而影響糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥、肥胖癥等多種疾病[4]。研究表明,SCD1基因也是骨骼肌代謝調(diào)節(jié)的重要組成部分,它影響胰島素敏感性、線粒體脂肪酸氧化和肌纖維中氧化的神經(jīng)酰胺再生[5-6]。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,學(xué)者們關(guān)注高端肉牛繁育中與脂肪代謝相關(guān)的候選基因的研究[7-9],主要以牛的肝臟、脂肪及肌肉組織中與肉質(zhì)相關(guān)SCD1基因多態(tài)性和基因測(cè)序及表達(dá)量為研究焦點(diǎn)。有關(guān)SCD1基因?qū)εQ褐舅岬挠绊懷芯坎欢?,草原安格斯牛SCD1基因表達(dá)對(duì)血液脂肪酸的影響研究鮮有報(bào)道。本研究通過(guò)測(cè)定草原安格斯牛SCD1基因表達(dá)對(duì)血液中脂肪酸組成的影響,分析SCD1基因表達(dá)與脂肪酸之間的相關(guān)性,了解SCD1基因表達(dá)對(duì)血液脂肪酸的調(diào)控作用,為今后草原安格斯牛優(yōu)良遺傳基因的選育及優(yōu)質(zhì)草原安格斯牛數(shù)據(jù)庫(kù)的建立提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    采集平均體質(zhì)量(698±34) kg、48 月齡未妊娠的新西蘭進(jìn)口純種黑安格斯繁殖母牛血液樣品。實(shí)驗(yàn)牛采用6—9月期間草原放牧,10月至翌年5月期間飼喂青貯加干草和全價(jià)料,采用自由運(yùn)動(dòng)的草原飼養(yǎng)模式。清晨4時(shí)放牧前,從500 頭安格斯牛中隨機(jī)抽取38 頭牛的血液樣品,從頸靜脈采血5 mL,放置于含有乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA)抗凝劑的采血管充分搖勻,先提取血液中總RNA,其余全血分裝至無(wú)菌無(wú)酶凍存管中,標(biāo)記,-80 ℃冷凍保存。

    三氟化硼-甲醇溶液(三氟化硼含量50%~65%)? ?美國(guó)Sigma公司;三氯甲烷、氫氧化鈉、氯化鈉、甲醇、無(wú)水乙醇、EDTA、無(wú)水乙酸鈉、硫氰酸鈉、異硫氰酸胍、丙三醇、冰醋酸(均為分析純)、正己烷(色譜純) 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;瓊脂糖?美國(guó)英杰生命技術(shù)有限公司;DNA提取試劑盒、6×DNA Loading Buffer 天根生化科技(北京)有限公司;TB GreenTM Premix EX TaqTM Ⅱ(Tli RNaseH plus)、PrimeScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit、Premix TaqTM(TaKaRa TaqTM Version 2.0 plus dye) 寶生物(大連)工程有限公司;高度去離子甲酰胺、BigDye Terminator試劑盒 美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司;膠回收柱式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)產(chǎn)物純化試劑盒 生工生物工程(上海)股份有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    2720 PCR儀? ? 德國(guó)Thermal Fisher公司;LIGHT CYCLER 480Ⅱ熒光定量PCR儀 瑞士Roche公司;G:BOX EF2全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng) 美國(guó)Syngene公司;NanoDrop? One超微量核酸蛋白測(cè)定儀 美國(guó)Thermo公司;7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國(guó)Agilent公司;YG-96梯度PCR儀 杭州博賽科技有限公司;DYY-8C雙穩(wěn)定時(shí)電泳儀 北京六一儀器廠;BIOSENS-SC-BO5紫外分析儀 蘇州BIO TOP生物技術(shù)服務(wù)有限公司;3730xl DNA Analyzer測(cè)序儀 美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司。

    1.3 方法

    1.3.1 脂肪酸組成與含量測(cè)定

    參照簡(jiǎn)路洋等[10]方法進(jìn)行血液樣品的脂肪酸前處理與含量測(cè)定。使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀及Supelco SPTM-2560氣相毛細(xì)管柱(100 m×0.25 mm,0.2 μm)分析脂肪酸組成與含量。

    1.3.2 SCD1基因表達(dá)水平測(cè)定

    采用TRIzol法提取血液中的總RNA,經(jīng)微量分光光度計(jì)和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)純度和完整性,符合要求后,立即使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行cDNA合成。

    1.3.2.1 總RNA的提取和反轉(zhuǎn)錄成cDNA

    反轉(zhuǎn)錄第1步反應(yīng)體系(10 ?L):1 ?L 50 μmol/L Oligo dT Primer、1 ?L 10 mmol/L dNTP Mixture、2 ?L模板RNA、6 ?L RNase Free dH2O。在PCR儀中65 ℃反應(yīng)5 min后,冰上迅速冷卻。

    反轉(zhuǎn)錄第2步反應(yīng)體系(20 ?L):取上述變性后反應(yīng)液10 ?L,加入4 ?L 5×PrimeScript Ⅱ Buffer、0.5 ?L 40 U/μL RNase Inhibitor、1 ?L 200 U/μL PrimeScript Ⅱ RTase、4.5 ?L RNase Free dH2O;42 ℃、60 min;95 ℃、5 min;使用超微量核酸蛋白測(cè)定儀測(cè)定cDNA樣品A260 nm/A280 nm判斷cDNA純度和濃度,置于-20 ℃冰箱備用。

    1.3.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR

    SCD1基因和內(nèi)參基因引物序列均參考唐慧等[11]設(shè)計(jì)(表1),由生工生物工程(上海)股份有限公司合成,無(wú)菌無(wú)酶水溶解,-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    以cDNA為模板,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)管家基因和目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。每個(gè)樣品重復(fù)3 次, SCD1基因在樣品中的相對(duì)表達(dá)量以2-ΔΔCt表示,并按下式計(jì)算。2-ΔΔCt=(Ct值目的-Ct值內(nèi)參)處理-(Ct值目的-Ct值內(nèi)參)對(duì)照實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)程序:預(yù)變性95 ℃、30 s,95 ℃、5 s,58 ℃、30 s,循環(huán)40 次; 95 ℃、5 s,60 ℃、1 min,95 ℃、5 s,50 ℃、30 s。

    1.3.3 全基因組DNA提取與基因型檢測(cè)

    采用DNA提取試劑盒提取血液全基因組DNA,經(jīng)微量分光光度計(jì)和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)純度和完整性。符合要求后,進(jìn)行PCR擴(kuò)增。反應(yīng)體系:12.5 ?L Premix TaqTM(TaKaRa TaqTM Version 2.0 plus dye)、1 ?L DNA模板、20 ?mol/L上、下游引物各5 ?L,加19.5 ?L滅菌蒸餾水補(bǔ)至25 ?L。PCR反應(yīng)程序:94 ℃變性5 min后進(jìn)行30 個(gè)循環(huán),包括94 ℃變性30 s、56 ℃變性30 s、72 ℃變性1 min、72 ℃變性7 min。參考施雪奎[12]的方法設(shè)計(jì)SCD1基因引物序列(表2),由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

    1.3.4 SCD1基因型檢測(cè)

    使用1.5%瓊脂糖凝膠電泳,取5 ?L PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接點(diǎn)樣,120 V電泳20 min,在凝膠成像儀上觀察擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果,選擇條帶清晰、明亮的樣品,純化后,使用測(cè)序儀進(jìn)行一代測(cè)序。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。數(shù)據(jù)采用Excel軟件進(jìn)行初步整理,利用IBM SPSS Statistics 20.0軟件進(jìn)行LSD方差分析,以P<0.05為顯著性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 總RNA和全基因組DNA瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

    所用RNA和DNA的提取分別采用TRIzol法和試劑盒方法,以1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其降解度。由圖1可知,RNA和DNA無(wú)降解。利用微量分光光度計(jì)測(cè)定38 頭牛血液樣品中RNA和DNA純度和濃度,結(jié)果顯示,A260 nm/A280 nm均為1.7~1.9,質(zhì)量濃度大于50 ng/?L,證明RNA和DNA可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

    2.2 草原安格斯牛血液SCD1基因表達(dá)量對(duì)血液脂肪酸組成的影響

    由表3可知:SFA中以棕櫚酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)為主,含量分別為22.53%和26.95%;MUFA和多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFA)中分別以油酸和亞油酸含量為最高,含量分別達(dá)15.09%和17.88%;MUFA/SFA為0.31;SCD1基因表達(dá)量對(duì)MUFA含量影響顯著(P<0.05),對(duì)C14:0、C14:1和C16:1含量影響均極顯著(P<0.01),對(duì)C16:0、C18:0、C18:1 n-9c、C18:2 n-6c含量和MUFA/SFA及C14指數(shù)(C14:0向C14:1轉(zhuǎn)化的指數(shù))、C18指數(shù)(C18:0向C18:1轉(zhuǎn)化的指數(shù))、脂肪酸總不飽和指數(shù)和伸長(zhǎng)指數(shù)影響均高度顯著(P<0.001),但對(duì)SFA含量和C16指數(shù)(C16:0向C16:1轉(zhuǎn)化的指數(shù))影響不顯著。

    2.3 草原安格斯牛血液SCD1基因表達(dá)量與血液脂肪酸組成的相關(guān)性

    SCD是動(dòng)物體內(nèi)調(diào)控SFA向MUFA轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵酶,主要在以C16:0和C18:0為底物合成C16:1和C18:1的過(guò)程中起重要作用[13-14]。由表7可知:SFA中C16:0和C18:0含量與SCD1基因表達(dá)量之間的相關(guān)系數(shù)分別為0.153和0.178;轉(zhuǎn)化為MUFA的C16:1和C18:1(C18:1 n-9c)含量與SCD1基因表達(dá)量之間的相關(guān)系數(shù)分別為0.134和0.167;MUFA與SCD1基因表達(dá)量之間的相關(guān)系數(shù)為0.166。SCD1基因表達(dá)量與C16:0、C16:1、C18:0、C18:1 n-9c和MUFA含量均呈正相關(guān),上述結(jié)果說(shuō)明SCD1基因表達(dá)對(duì)草原安格斯牛血液脂肪酸有正向調(diào)控作用。

    2.4 草原安格斯牛血液SCD1基因多態(tài)性對(duì)血液脂肪酸組成的影響

    2.4.1 SCD1基因分型結(jié)果

    利用PCR對(duì)草原安格斯牛血液全基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),沒(méi)有非特異性條帶,純化后進(jìn)行一代測(cè)序。

    檢測(cè)38 種PCR產(chǎn)物,得到SCD1基因878位點(diǎn)的多態(tài)性統(tǒng)計(jì)結(jié)果。由表5可知,草原安格斯牛血液SCD1基因中檢測(cè)出的CC、CT和TT 3 種基因型的基因個(gè)體數(shù)分別為28、9和1,CC型基因個(gè)體數(shù)最高,TT型基因個(gè)體數(shù)最少,基因型頻率分別為CC 73.7%、CT 23.7%和TT 2.6%,C和T等位基因頻率分別為85.5%和14.5%。

    2.4.3 SCD1基因多態(tài)性對(duì)血液脂肪酸組成的影響

    由表6可知,含CT型SCD1基因血液的C14:0(0.60%)、C14:1(0.37%)、C18:0(31.16%)含量及伸長(zhǎng)指數(shù)(0.69)均高于CC型,而CC型的C16:0(22.59%)、C16:1(0.50%)、C18:2 n-6c(18.42%)含量及C14指數(shù)(0.39)卻高于CT型,CC型個(gè)體和CT型個(gè)體之間未發(fā)現(xiàn)顯著差異。由于所選群體中TT基因型個(gè)體數(shù)較少,導(dǎo)致分析結(jié)果中出現(xiàn)較大的誤差,因此本統(tǒng)計(jì)結(jié)果認(rèn)為TT型沒(méi)有代表性,不與其他基因型數(shù)據(jù)作比較。

    3 討 論

    3.1 草原安格斯牛血液脂肪酸組成與含量分析

    牛肉中含有大量SFA和MUFA,其中MUFA中油酸含量最高,其次為SFA中的硬脂酸和棕櫚酸等,而PUFA的含量較少[15]。有研究表明,牛肉中富含的硬脂酸、棕櫚酸與油酸能提高高密度脂蛋白膽固醇含量,降低低密度脂蛋白膽固醇含量,從而減少動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生[16]。油酸不僅是牛肉風(fēng)味的重要來(lái)源,也是評(píng)價(jià)牛肉營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的指標(biāo)之一。肌內(nèi)脂肪中MUFA的含量和MUFA/SFA比值與牛肉品質(zhì)成正比,但SFA在血清可轉(zhuǎn)化為膽固醇,可引起動(dòng)脈粥樣硬化,因此,肉中MUFA/SFA比值高,對(duì)人體健康有益[17-18]。本研究中,草原安格斯牛血液脂肪酸中棕櫚酸、硬脂酸及油酸含量很高,分別達(dá)22.53%、26.95%和15.09%,PUFA中亞油酸含量最高,達(dá)17.88%,MUFA/SFA比值為0.31,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高。

    3.2 草原安格斯牛SCD1基因表達(dá)量對(duì)血液脂肪酸的影響

    SCD1是SFA生成MUFA過(guò)程中的限速酶,MUFA的含量對(duì)牛肉的質(zhì)量至關(guān)重要,影響牛肉大理石花紋等級(jí)、深加工性能、脂肪柔軟度以及肉的風(fēng)味等[19],SCD1基因被認(rèn)為是影響牛肉經(jīng)濟(jì)性狀的重要候選基因[20]。伸長(zhǎng)指數(shù)表示從C16到C18的轉(zhuǎn)換,伸長(zhǎng)指數(shù)越高,油酸含量越高,牛肉風(fēng)味越好[21]。本研究中草原安格斯母牛血液中SCD1基因表達(dá)量對(duì)MUFA含量影響顯著(P<0.05),對(duì)C14:0、C14:1和C16:1含量均影響極顯著(P<0.01),對(duì)C16:0、C18:0、C18:1 n-9c、C18:2 n-6c含量、MUFA/SFA、C14指數(shù)、C18指數(shù)、脂肪酸總不飽和指數(shù)和伸長(zhǎng)指數(shù)均影響高度顯著(P<0.001),但對(duì)SFA含量和C16指數(shù)無(wú)顯著影響。因此,SCD1基因?qū)Σ菰哺袼古Q褐舅峤M成有顯著影響,將會(huì)對(duì)草原安格斯牛肉風(fēng)味發(fā)揮重要作用。

    SCD1作為脂肪酸合成路徑中催化SFA去飽和化的關(guān)鍵酶,具有催化SFA的脂酰CoA脫氫的作用,可在其首選底物C16:0和C18:0的第9和第10碳原子間導(dǎo)入氫鍵,分別轉(zhuǎn)化生成MUFA,即C16:1與C18:1,二者是合成膜磷脂、膽固醇酯和三酰甘油的底物,對(duì)肌內(nèi)脂肪沉積、脂肪酸組成等有重要影響[22-23]。唐慧等[11]在不同品種牛(蜀宣花牛、巴山牛和安格斯牛×巴山牛雜交牛)SCD1基因表達(dá)與肌肉脂肪酸組成的關(guān)系研究中得到SCD1基因表達(dá)量分別與MUFA、C16:1和C18:1含量呈正相關(guān)的結(jié)果。SCD1基因可催化油酸的形成[24]。本研究對(duì)草原安格斯母牛SCD1基因表達(dá)與血液中脂肪酸組成和含量進(jìn)行顯著性和相關(guān)性分析,結(jié)果表明,SCD1基因表達(dá)量與C16:0、C16:1、C18:0、C18:1和MUFA含量均呈正相關(guān),說(shuō)明SCD1基因正向調(diào)控草原安格斯牛血液中的脂肪酸組成,對(duì)其具有遺傳效應(yīng),與唐慧等[11]研究結(jié)果一致。

    3.3 草原安格斯牛SCD1基因分型對(duì)血液脂肪酸的影響

    SCD1基因?qū)θ赓|(zhì)性狀有重要作用,近年來(lái),國(guó)內(nèi)外對(duì)該基因在各種牛群體中開(kāi)展了研究。李新淼等[25]研究發(fā)現(xiàn),SCD1基因?qū)εV竞坑幸欢ㄓ绊?。Barton等[26]研究發(fā)現(xiàn),公牛CC和CT基因型個(gè)體SFA含量顯著低于TT基因型個(gè)體,而MUFA含量顯著高于TT基因型個(gè)體。劉自增等[27]通過(guò)對(duì)天祝白牦牛的研究發(fā)現(xiàn),SCD1基因C等位基因個(gè)體的MUFA含量較高,并且對(duì)從SFA到MUFA的去飽和度有不同程度的影響。Jiang等[22]研究發(fā)現(xiàn),SCD1基因與SFA、亞油酸含量顯著相關(guān)。武秀香等[28]對(duì)SCD1基因C878T位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn),CC基因型個(gè)體腸系膜油質(zhì)量與肌內(nèi)脂肪含量均顯著高于TT型個(gè)體(P<0.05),背膘厚極顯著低于TT型個(gè)體(P<0.01)。本研究發(fā)現(xiàn),安格斯牛血液中SCD1基因C878T位點(diǎn)表現(xiàn)出不同的多態(tài)性,檢測(cè)出CC、CT和TT 3 種基因型,其基因型頻率分別為73.7%、23.7%和2.6%,C和T等位基因頻率分別為85.5%和14.5%。草原安格斯母牛中,SCD1基因C878T CC型個(gè)體和CT型個(gè)體血液脂肪酸之間未發(fā)現(xiàn)顯著差異,這與Barton[26]、施雪奎[12]等研究結(jié)果不一致,但與陳龍[29]的研究一致。TT型SCD1基因有助于提高M(jìn)UFA含量,本研究結(jié)果與Taniguchi等[30]研究的日本黑公牛SCD基因型與脂肪酸組成的相關(guān)性結(jié)果不一致,本研究在草原安格斯母牛血液樣品中表現(xiàn)出較低頻率的TT基因型,SCD1基因型對(duì)草原安格斯牛血液脂肪酸的影響不明顯。

    4 結(jié) 論

    綜上所述,草原安格斯牛血液脂肪酸含量豐富,血液SCD1基因表達(dá)量與C16:0、C16:1、C18:0、C18:1和MUFA含量均有正相關(guān)性,與C14:0、C14:1、C16:0、C16:1、C18:0、C18:1、C18:2、MUFA含量和MUFA/SFA及伸長(zhǎng)指數(shù)均顯著相關(guān);在SCD1基因C878T位點(diǎn)處檢測(cè)出CC、CT和TT 3 種基因型,不同基因型對(duì)血液脂肪酸組成無(wú)顯著影響。SCD1基因可為品種牛優(yōu)良遺傳基因的選育及優(yōu)質(zhì)草原安格斯牛數(shù)據(jù)庫(kù)的建立提供科學(xué)的理論依據(jù)。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 李錄明. 蛋氨酸羥基類似物異丙酯對(duì)絨山羊生產(chǎn)性能及哺乳羔羊氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)載體基因表達(dá)的影響[D]. 楊凌: 西北農(nóng)林科技大學(xué), 2018.

    [2] 蔡雨, 李苗, 俞沁瑋, 等. 硬脂酰輔酶A去飽和酶1及其抑制劑在肝脂肪變性中的作用研究進(jìn)展[J]. 臨床合理用藥雜志, 2020, 13(25): 173-175. DOI:10.15887/j.cnki.13-1389/r.2020.25.081.

    [3] 姚大為. 奶山羊硬脂酰輔酶A去飽和酶1基因(SCD1)啟動(dòng)子功能及轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)理研究[D]. 楊凌: 西北農(nóng)林科技大學(xué), 2016.

    [4] MELE M, CONTE G, CASTIGLIONI B, et al. Stearoyl-coenzyme A desat-urase gene polymorphism and milk fatty acid composition in Italian Holsteins[J]. Journal of Dairy Science, 2007, 90(9): 4458-4465. DOI:10.3168/jds.2006-617.

    [5] DOBRZYM A, DOBRZYM P. Stearoyl-CoA desaturase-a new player in skeletal muscle metabolism regulation[J]. Journal of Physiology and Pharmacology, 2006, 57(10): 31-42. DOI:10.1152/jn.00538.2006.

    [6] MOIOLI B, CONTARINI G, AVALLI A, et al. Short communication: effect of stearoyl-coenzyme A desaturase polymorphism on fatty acid composition of milk[J]. Journal of Dairy Science, 2007, 90(7): 3553-3558. DOI:10.3168/jds.2006-855.

    [7] LEE S H, PARK E W, CHO Y M, et al. Lipogenesis gene expres-sion profiling in Longissimus dorsi on the early and late fattening stage of hanwoo[J]. Animal Science and Technology, 2006, 48(3): 345-352.

    [8] 杜學(xué)海. 影響肉牛肌內(nèi)脂肪沉積因素及相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代畜牧獸醫(yī), 2020(12): 54-57.

    [9] 杜新, 羅光彬, 王澤英, 等. 肉牛肌內(nèi)脂肪沉積相關(guān)基因的研究[J]. 現(xiàn)代畜牧獸醫(yī), 2014(7): 50-53.

    [10] 簡(jiǎn)路洋, 王晗, 梁帥, 等. 氫化大豆油對(duì)小鼠肝臟和血液反式脂肪酸含量及脂代謝的影響[J]. 大連工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2019, 38(1): 29-31. DOI:10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2019.0107.

    [11] 唐慧, 王巍, 方東輝, 等. 不同品種牛SCD1基因表達(dá)與肌肉脂肪酸組成的關(guān)系研究[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī), 2018(1): 1-4. DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.02.0261.

    [12] 施雪奎. 肉牛CAPN1、CAST、GHR、SCD1基因多態(tài)性及與胴體、肉質(zhì)性狀的相關(guān)性研究[D]. 揚(yáng)州: 揚(yáng)州大學(xué), 2011.

    [13] KUCHEL H, SIEBERT B D, BOTTEMA C D K, et al. Physical mapping of the stearoyl-CoA desaturase (SCD) locus in sheep[J]. Animal Genetics, 2004, 35: 163. DOI:10.1111/j.1365-2052.2004.01114.x.

    [14] 趙偉明, 吳慧光, 吳江鴻, 等. 基于轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析西門塔爾牛和安格斯牛脂肪沉積相關(guān)基因的差異表達(dá)[J]. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào), 2020, 28(4): 693-701.

    [15] 鄭淑容. 脂肪酸的營(yíng)養(yǎng)功能[J]. 畜禽業(yè), 2012(9): 55-57. DOI:10.3969/j.issn.1006-9577.2007.08.017.

    [16] 板倉(cāng)弘重. 各種脂肪酸的臨床效果比較(硬脂酸、油酸、亞油酸、α-亞麻酸、γ-亞麻酸、花生四烯酸、EPA、DHA、DPA等)[J]. 脂質(zhì), 2009, 20(1): 74-79.

    [17] 郭同軍, 臧長(zhǎng)江, 王連群, 等. 去勢(shì)對(duì)西門塔爾牛牛肉品質(zhì)的影響[J]. 草業(yè)科學(xué), 2017, 34(1): 152-160. DOI:10.11829/j.issn.1001-0629.2016-0212.

    [18] WOOD J D, ENSER M, FISHER A V, et al. Fat deposition, fatty acid composition and meat quality[J]. Meat Science, 2008, 78: 343-358. DOI:10.1016/j.meatsci.2007.07.019.

    [19] 蔡雨, 李苗, 俞沁瑋, 等. 硬脂酰輔酶A去飽和酶1及其抑制劑在肝脂肪變性中的作用研究進(jìn)展[J]. 臨床合理用藥雜志, 2020(25):?173-175. DOI:10.15887/j.cnki.13-1389/r.2020.25.081.

    [20] 王鑫, 李光鵬. 牛肉質(zhì)性狀及其影響因素[J]. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào), 2019, 31(11): 4950-4959. DOI:10.3969/j.issn.1006-267x.2019.11.007.

    [21] HIDEKI O, ATSUKO T, SHOGO H, et al. Effect of SCD and SREBP genotypes on fatty acid composition in adipose tissue of Japanese Black cattle herds[J]. Animal Science of Journal, 2009, 80(3):?225-232. DOI:10.1111/j.1740-0929.2009.00638.x.

    [22] JIANG Z, MICHAL J J, TOBEY D J, et al. Significant associations of stearoyl-CoA desaturase (SCD1) gene with fat deposition and composition in skeletal muscle[J]. Journal of Biological Sciences, 2008, 4(6): 345-351. DOI:10.1016/j.ijbiomac.2007.09.012.

    [23] PAQUETTE A, WANG D, JANKOWSKI M, et al. Effects of ovariectomy on PPAR alpha, SREBP-1c, and SCD1 gene expression in the rat liver[J]. Menopause, 2008, 15: 1169-1175. DOI:10.1097/gme.0b013e31817b8159.

    [24] 張嘉齊, 羅毅皓, 孫萬(wàn)成. 牦牛乳RNA的完整性及其硬脂酰去飽和酶(SCD1)基因表達(dá)分析[J]. 中國(guó)乳品工業(yè), 2018, 46(3): 7-28.

    [25] 李新淼, 王圓圓, HESHUOTE Mailisi, 等. SCD1基因?qū)Ω吆菰曫B(yǎng)純種西門塔爾牛血液脂肪酸組成的影響[J]. 中國(guó)畜牧雜志, 2021, 57(11): 1-5.

    [26] BARTON L, KOTT T, BURES D, et al. The polymorphisms of stearoyl-CoA desaturase (SCD1) and sterol regulatoryelement binding protein-1 (SREBP-1) genes and their association with the fatty acid profile of muscle and subcutaneous fat in Fleckvieh bulls[J]. Meat Science, 2010, 85(1): 15-20. DOI:10.1016/j.meatsci.2009.11.016.

    [27] 劉自增, 閻萍. 天祝白牦牛Leptin和SCD1基因單核苷酸多態(tài)性與肌肉脂肪酸含量的關(guān)聯(lián)性分析[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī), 2011, 38(4): 154-159.

    [28] 武秀香, 施雪奎, 高會(huì)江, 等. 牛SCD1基因C878T位點(diǎn)遺傳多態(tài)性與中國(guó)西門塔爾牛部分脂肪相關(guān)性狀的效應(yīng)分析[J]. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào), 2011, 42(3): 363-368.

    [29] 陳龍. 隴東肉牛A-FABP和SCD1基因多態(tài)性及其與肉質(zhì)性狀的相關(guān)性研究[D]. 蘭州: 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué), 2014.

    [30] TANIGUCHI M, UTSUGI T, OYAMA, K, et al. Genotype of stearoyl-CoA desaturase is associated with fatty acid composition in Japanese Black cattle[J]. Mammalian Genome, 2004, 14(2): 142-148. DOI:10.1016/S0377-2217(97)00084-2.

    收稿日期:2021-06-03

    基金項(xiàng)目:內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2017MS0357);內(nèi)蒙古自治區(qū)院士專家工作站建設(shè)項(xiàng)目(內(nèi)科發(fā)[2018]88號(hào));

    內(nèi)蒙古自治區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目(201803055);內(nèi)蒙古自治區(qū)科技重大專項(xiàng)(內(nèi)財(cái)教[2013]2186號(hào));

    內(nèi)蒙古自治區(qū)“草原英才”專項(xiàng)(內(nèi)組通字[2020]7號(hào));內(nèi)蒙古自治區(qū)科技成果轉(zhuǎn)化專項(xiàng)(2020CG0031);

    內(nèi)蒙古自治區(qū)財(cái)政廳“草原英才”工程專項(xiàng)(內(nèi)財(cái)行[2021]333號(hào))

    第一作者簡(jiǎn)介:王圓圓(1996—)(ORCID: 0000-0002-1039-2162),女,碩士研究生,研究方向?yàn)槭称窓C(jī)能學(xué)。

    E-mail: 1692230812@qq.com

    通信作者簡(jiǎn)介:包音都古榮·金花(1965—)(ORCID: 0000-0001-9863-376X),女,副教授,博士,研究方向?yàn)槭称窓C(jī)能學(xué)。

    E-mail: huajin25@hotmail.com

    猜你喜歡
    安格斯輔酶基因型
    史上最能挨餓的人:斷食382天,減重250斤
    國(guó)家藥監(jiān)局關(guān)于修訂輔酶Q10注射劑說(shuō)明書的公告(2022年第11號(hào))
    中老年保健(2022年4期)2022-08-22 02:58:30
    酋長(zhǎng)的答謝禮
    故事會(huì)(2021年8期)2021-04-16 11:15:54
    安格斯和鴨子
    前列地爾聯(lián)合復(fù)合輔酶治療急性腎損傷的療效探討
    24美元的“冷漠”罰單
    西安地區(qū)育齡婦女MTHFRC677T基因型分布研究
    益腎活血湯聯(lián)合輔酶Q10膠囊治療弱精子癥50例
    BAMBI基因敲除小鼠的繁育、基因型鑒定
    輔酶Q10,還原型的更好
    健康之家(2013年6期)2013-04-29 00:44:03
    亚洲欧美清纯卡通| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲第一电影网av| 亚洲不卡免费看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 一个人看视频在线观看www免费| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产 一区精品| 亚洲自拍偷在线| 在线免费观看的www视频| 久久久精品欧美日韩精品| 色播亚洲综合网| 久99久视频精品免费| 男人狂女人下面高潮的视频| 99热这里只有是精品50| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日本黄色视频三级网站网址| 欧美bdsm另类| 久久久久久大精品| 亚洲va在线va天堂va国产| 好男人在线观看高清免费视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 十八禁国产超污无遮挡网站| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 我的老师免费观看完整版| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 99热只有精品国产| 精品免费久久久久久久清纯| 禁无遮挡网站| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日本黄大片高清| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 观看美女的网站| 欧美色视频一区免费| 晚上一个人看的免费电影| 成人一区二区视频在线观看| 黄色日韩在线| 国产精品无大码| 国内精品美女久久久久久| 国产男靠女视频免费网站| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 男人的好看免费观看在线视频| 久久99热6这里只有精品| 最近最新中文字幕大全电影3| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 嫩草影院精品99| 性插视频无遮挡在线免费观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| 久久精品国产亚洲av天美| 中文字幕av在线有码专区| av天堂中文字幕网| 男女下面进入的视频免费午夜| 国国产精品蜜臀av免费| 好男人在线观看高清免费视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 日韩大尺度精品在线看网址| 在线a可以看的网站| 午夜影院日韩av| 长腿黑丝高跟| 日本欧美国产在线视频| 亚洲成av人片在线播放无| 中文亚洲av片在线观看爽| 日韩欧美精品v在线| 亚洲熟妇熟女久久| 国产片特级美女逼逼视频| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 美女大奶头视频| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲av免费高清在线观看| 一级av片app| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产一区二区三区av在线 | 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国内精品宾馆在线| 国产高清三级在线| 青春草视频在线免费观看| 九九爱精品视频在线观看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产精品免费一区二区三区在线| 精品国产三级普通话版| 高清日韩中文字幕在线| 一个人观看的视频www高清免费观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 中文字幕久久专区| 亚洲中文字幕日韩| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 综合色丁香网| 老司机午夜福利在线观看视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲中文字幕日韩| 国产精品一及| 国产精品日韩av在线免费观看| 黄色视频,在线免费观看| 舔av片在线| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 成人午夜高清在线视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 少妇被粗大猛烈的视频| 欧美bdsm另类| 丰满的人妻完整版| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产精品一及| 国产av不卡久久| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲内射少妇av| 九九热线精品视视频播放| 一个人免费在线观看电影| 一区二区三区四区激情视频 | 欧美3d第一页| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 给我免费播放毛片高清在线观看| 一级黄片播放器| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 丝袜喷水一区| 亚洲性久久影院| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产高清激情床上av| www.色视频.com| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久精品国产自在天天线| 国产一区二区激情短视频| 男女之事视频高清在线观看| 欧美一区二区亚洲| 亚洲性夜色夜夜综合| 最近中文字幕高清免费大全6| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 日本欧美国产在线视频| 少妇人妻精品综合一区二区 | 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 欧美日韩在线观看h| 国产高清激情床上av| 国产精品,欧美在线| 日本精品一区二区三区蜜桃| 久久午夜亚洲精品久久| 啦啦啦韩国在线观看视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 日本 av在线| 69人妻影院| 老女人水多毛片| 黄色一级大片看看| 搡老岳熟女国产| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 午夜激情福利司机影院| 中文字幕av在线有码专区| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲无线在线观看| 久久久久国内视频| 国产单亲对白刺激| 亚洲最大成人中文| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产美女午夜福利| 欧美潮喷喷水| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 精品久久国产蜜桃| 午夜激情福利司机影院| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲成人久久性| 五月玫瑰六月丁香| 在线免费十八禁| 国内精品久久久久精免费| 天天一区二区日本电影三级| 成人国产麻豆网| 丝袜美腿在线中文| 又爽又黄a免费视频| av天堂中文字幕网| 99热只有精品国产| 国产淫片久久久久久久久| 老女人水多毛片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 久久精品国产自在天天线| 午夜亚洲福利在线播放| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲经典国产精华液单| av免费在线看不卡| 99久久精品国产国产毛片| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 美女cb高潮喷水在线观看| 亚洲人成网站高清观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产高清视频在线观看网站| 午夜爱爱视频在线播放| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲第一电影网av| 久久久久国内视频| 熟女人妻精品中文字幕| 精品日产1卡2卡| 国产 一区 欧美 日韩| 日韩 亚洲 欧美在线| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 天堂影院成人在线观看| 午夜日韩欧美国产| h日本视频在线播放| 国产精品综合久久久久久久免费| 91av网一区二区| 日韩三级伦理在线观看| 我要搜黄色片| 国产精华一区二区三区| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲美女搞黄在线观看 | 亚洲一区二区三区色噜噜| 黄片wwwwww| 亚洲精品成人久久久久久| 亚洲精品色激情综合| 日本欧美国产在线视频| 国产午夜精品论理片| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 国产精华一区二区三区| 亚洲三级黄色毛片| 久久热精品热| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲丝袜综合中文字幕| 欧美+亚洲+日韩+国产| 我要搜黄色片| 丝袜喷水一区| 亚洲国产精品合色在线| 精品一区二区三区人妻视频| 国产三级中文精品| 亚洲国产高清在线一区二区三| 久久热精品热| 免费看a级黄色片| 国产精品,欧美在线| av在线天堂中文字幕| 亚洲精品国产av成人精品 | 国产精品野战在线观看| 国产精品不卡视频一区二区| 久久精品夜色国产| 亚洲三级黄色毛片| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲成人av在线免费| 亚洲美女黄片视频| 精品人妻偷拍中文字幕| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 免费观看人在逋| 久99久视频精品免费| 精品久久久久久久久久久久久| 日韩一区二区视频免费看| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 亚洲欧美成人精品一区二区| 又黄又爽又免费观看的视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 两个人的视频大全免费| 99热网站在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 偷拍熟女少妇极品色| 久久国内精品自在自线图片| 精品人妻熟女av久视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲av一区综合| 亚洲av美国av| 亚洲av第一区精品v没综合| 精品欧美国产一区二区三| 校园春色视频在线观看| 中文资源天堂在线| 小说图片视频综合网站| 少妇熟女aⅴ在线视频| 欧美又色又爽又黄视频| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产在视频线在精品| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 看黄色毛片网站| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 欧美中文日本在线观看视频| 免费观看精品视频网站| 国语自产精品视频在线第100页| 欧美又色又爽又黄视频| 久久精品影院6| 99riav亚洲国产免费| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 久久久久免费精品人妻一区二区| 日本-黄色视频高清免费观看| 少妇丰满av| 嫩草影院新地址| 99热6这里只有精品| 少妇的逼水好多| 成人av一区二区三区在线看| 国产私拍福利视频在线观看| 日本一二三区视频观看| 观看免费一级毛片| 亚洲国产精品合色在线| 国产69精品久久久久777片| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 乱码一卡2卡4卡精品| 一个人看的www免费观看视频| 国产男靠女视频免费网站| 久久久精品94久久精品| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 免费人成在线观看视频色| 不卡一级毛片| 久久亚洲精品不卡| 日本a在线网址| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| av在线亚洲专区| 免费看a级黄色片| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲va在线va天堂va国产| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产成人精品久久久久久| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲18禁久久av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 精品一区二区免费观看| 色播亚洲综合网| 国产69精品久久久久777片| 麻豆一二三区av精品| 日本免费一区二区三区高清不卡| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产大屁股一区二区在线视频| 久久热精品热| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产精品电影一区二区三区| 看非洲黑人一级黄片| 99久久精品国产国产毛片| 日韩成人伦理影院| 99热网站在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲av五月六月丁香网| 亚洲精品粉嫩美女一区| 中文字幕免费在线视频6| 两个人的视频大全免费| av视频在线观看入口| 国产精品电影一区二区三区| 国产三级在线视频| 禁无遮挡网站| 不卡视频在线观看欧美| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 在线免费十八禁| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 一个人观看的视频www高清免费观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲精品一区av在线观看| 免费高清视频大片| 午夜福利在线观看吧| 最新在线观看一区二区三区| 日韩欧美在线乱码| 一区二区三区高清视频在线| 美女黄网站色视频| 日韩高清综合在线| 国产一区二区在线av高清观看| 国产成人影院久久av| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产精品不卡视频一区二区| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 久久九九热精品免费| 99热精品在线国产| 日本五十路高清| 亚洲精品久久国产高清桃花| 伦精品一区二区三区| 在线免费观看的www视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 九九在线视频观看精品| 偷拍熟女少妇极品色| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产不卡一卡二| 久久精品夜色国产| 国产精品久久久久久久电影| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 黄色欧美视频在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| 99在线视频只有这里精品首页| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 嫩草影院精品99| 日本一本二区三区精品| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲久久久久久中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 在线播放国产精品三级| 久久鲁丝午夜福利片| 日本色播在线视频| 毛片一级片免费看久久久久| 国产精品久久久久久久久免| 国产成人freesex在线 | 美女黄网站色视频| 最近在线观看免费完整版| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 日本三级黄在线观看| 国产真实伦视频高清在线观看| av女优亚洲男人天堂| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲av熟女| 在线播放无遮挡| 日韩欧美三级三区| 校园春色视频在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 床上黄色一级片| 99久久成人亚洲精品观看| 色在线成人网| 国产成人aa在线观看| 精品熟女少妇av免费看| 成人无遮挡网站| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲丝袜综合中文字幕| 色噜噜av男人的天堂激情| 亚洲四区av| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲精品国产av成人精品 | 在线播放无遮挡| 国产高清视频在线播放一区| 日日啪夜夜撸| 男女之事视频高清在线观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 看十八女毛片水多多多| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 别揉我奶头 嗯啊视频| 国产极品精品免费视频能看的| 久久久久久久午夜电影| 免费看日本二区| 看黄色毛片网站| 日韩中字成人| 日韩高清综合在线| 日韩 亚洲 欧美在线| 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美高清性xxxxhd video| 国产精品久久久久久久电影| 99在线人妻在线中文字幕| 久久九九热精品免费| 少妇的逼水好多| 亚洲精品成人久久久久久| 一个人观看的视频www高清免费观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲欧美日韩卡通动漫| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲18禁久久av| 别揉我奶头 嗯啊视频| 联通29元200g的流量卡| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美日韩国产亚洲二区| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 欧美中文日本在线观看视频| 国产精品久久电影中文字幕| 伦精品一区二区三区| 国产高清视频在线观看网站| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲精品在线观看二区| 欧美色视频一区免费| 高清午夜精品一区二区三区 | 男女视频在线观看网站免费| 久久亚洲国产成人精品v| 精品久久久久久久久av| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲内射少妇av| 久久久久久久久久成人| 成人无遮挡网站| 一区二区三区高清视频在线| 91精品国产九色| 99热网站在线观看| 看黄色毛片网站| 久久6这里有精品| 国产熟女欧美一区二区| 99热6这里只有精品| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲精品国产成人久久av| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲最大成人手机在线| 午夜福利18| 久久久久精品国产欧美久久久| 精品久久久久久久久av| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久久久国内视频| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产一区二区激情短视频| 日本熟妇午夜| 国内精品宾馆在线| 欧美日本亚洲视频在线播放| 午夜久久久久精精品| 国产精品日韩av在线免费观看| 久久鲁丝午夜福利片| 久久九九热精品免费| 免费看a级黄色片| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产精品三级大全| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲成人中文字幕在线播放| 精品久久久久久久久久免费视频| 黄色视频,在线免费观看| 欧美最新免费一区二区三区| 日韩 亚洲 欧美在线| 色噜噜av男人的天堂激情| 国内精品久久久久精免费| 免费观看人在逋| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 一级黄片播放器| 99久久精品热视频| 波多野结衣巨乳人妻| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 一级毛片电影观看 | 国产在视频线在精品| 综合色av麻豆| 黄色日韩在线| 精品无人区乱码1区二区| 婷婷六月久久综合丁香| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 身体一侧抽搐| 欧美成人免费av一区二区三区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 日本熟妇午夜| 亚洲国产精品成人久久小说 | 久久6这里有精品| av在线蜜桃| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 看免费成人av毛片| 精品一区二区三区视频在线| 少妇丰满av| 日韩一区二区视频免费看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久热精品热| 久久久久久久久久久丰满| or卡值多少钱| 插逼视频在线观看| 久久久国产成人精品二区| 亚洲精品色激情综合| 国产探花极品一区二区| 精品一区二区三区视频在线| avwww免费| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产三级在线视频| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲av熟女| 精品人妻偷拍中文字幕| 久久久久久久久久久丰满| 久久久精品欧美日韩精品| 国产熟女欧美一区二区| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲熟妇熟女久久| 国产黄片美女视频| 热99re8久久精品国产| 香蕉av资源在线| 搡老熟女国产l中国老女人| 久久国内精品自在自线图片| 婷婷色综合大香蕉| 啦啦啦韩国在线观看视频| 夜夜爽天天搞| 午夜福利在线在线| 国产在线精品亚洲第一网站| 一区二区三区四区激情视频 | 久久精品综合一区二区三区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 97超视频在线观看视频| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产在线男女| 一边摸一边抽搐一进一小说| av中文乱码字幕在线| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产高清有码在线观看视频| 欧美三级亚洲精品| 亚洲av电影不卡..在线观看| 一级毛片电影观看 | 亚洲性夜色夜夜综合| 免费无遮挡裸体视频| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲av.av天堂| 亚洲无线观看免费| 99久久精品国产国产毛片| 黄片wwwwww| 日韩欧美在线乱码| 国产亚洲av嫩草精品影院| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产av麻豆久久久久久久| 在线观看午夜福利视频| 成人三级黄色视频| 99精品在免费线老司机午夜| 久久午夜福利片| 国产真实伦视频高清在线观看| 欧美潮喷喷水| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲精品日韩av片在线观看| 看片在线看免费视频| 男人的好看免费观看在线视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 在线国产一区二区在线| 亚洲av免费高清在线观看| 精品国产三级普通话版| av在线亚洲专区| 成人av在线播放网站| 高清日韩中文字幕在线| 国内精品一区二区在线观看| 久久人人爽人人片av| 欧美精品国产亚洲| 成人亚洲欧美一区二区av| 99久国产av精品| 九九热线精品视视频播放|