飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)高溫季節(jié)荷斯坦公牛生長(zhǎng)性能、免疫性能和抗氧化性能的影響

張喆萍 李瑞銀 李樹(shù)靜 李建國(guó) 沈宜釗 高艷霞 李 妍 范京惠 謝 鵬 李秋鳳* 曹玉鳳*

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，保定071000；2.河北天和肉牛養(yǎng)殖有限公司，石家莊050200；3.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，保定071000；4.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京100081)

4～9月齡是荷斯坦奶公牛由采食顆粒飼料過(guò)渡到全混合日糧的階段，此階段奶公犢的消化系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等尚未發(fā)育成熟[1]，容易受養(yǎng)殖過(guò)程中環(huán)境、飼料、疾病等因素引起機(jī)體的氧化應(yīng)激損傷。在眾多氧化應(yīng)激源中，高溫環(huán)境造成的熱應(yīng)激是最普遍且難以避免的，高溫季節(jié)下機(jī)體各種生理指標(biāo)、身體機(jī)能、行為等指標(biāo)將發(fā)生一系列的變化，進(jìn)而直接影響動(dòng)物的健康和生產(chǎn)性能[2]。機(jī)體最終能否克服應(yīng)激源造成的危害，取決于刺激的強(qiáng)度與機(jī)體自身的生理狀況[3]。因此，為確保荷斯坦公牛適宜的生長(zhǎng)速度，保證其后續(xù)的生產(chǎn)性能，這就要求為這一階段的荷斯坦公牛提供易吸收、能夠提高免疫力、營(yíng)養(yǎng)均衡的飼糧[4-5]。

我國(guó)近年來(lái)大力開(kāi)展飼料資源開(kāi)發(fā)與利用研究，其中棗粉味道香甜，能增加飼料適口性，提高采食量，棗中富含的紅棗多糖、酚類、皂苷、三萜類化合物、環(huán)磷酸腺苷等活性成分更是天然的抗氧化劑[6]，特別是經(jīng)過(guò)復(fù)合菌發(fā)酵的棗粉更加醇香，易吸收，其促生長(zhǎng)、抗氧化、抗應(yīng)激、提高免疫力的作用更佳[7]。飼糧中添加棗粉在反芻動(dòng)物生產(chǎn)中應(yīng)用研究較少，陳曉校[8]研究發(fā)現(xiàn)，在成年荷斯坦公牛的飼糧中添加10%棗粉能增強(qiáng)瘤胃液及血液總抗氧化能力(T-AOC)，提高粗蛋白質(zhì)消化率和產(chǎn)奶量。冀建軍等[9]在1歲雜交肉牛育肥試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，用15%生物發(fā)酵棗粉替代玉米，其平均日增重(ADG)比對(duì)照組(無(wú)添加)提高了24.37%。棗粉在牛上應(yīng)用研究主要集中在成年奶牛以及肉牛育肥階段，而發(fā)酵棗粉在高溫季節(jié)對(duì)4～9月齡荷斯坦公牛的生長(zhǎng)速度、行為、生長(zhǎng)性能和血清生化指標(biāo)等方面尚未研究。因此，本試驗(yàn)通過(guò)探究飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)高溫季節(jié)4～9月齡荷斯坦公牛的行為特征、生長(zhǎng)性能、免疫性能和抗氧化性能的影響，為后期發(fā)酵棗粉對(duì)這一階段奶公牛的健康狀態(tài)影響和生產(chǎn)中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

試驗(yàn)于2019年7月至2019年10月在滄州市中特牧業(yè)有限公司進(jìn)行。試驗(yàn)動(dòng)物、飼糧、場(chǎng)地均由滄州市中特牧業(yè)提供支持。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇同一批次、健康、體型和體重[(200.00±30.28) kg]相近的60頭4～6月齡左右荷斯坦公牛作為試驗(yàn)動(dòng)物，隨機(jī)分為4組，每組15頭。4組荷斯坦公牛分別飼喂含0(C組)、5%(L組)、10%(M組)、15%(H組)發(fā)酵棗粉的飼糧，發(fā)酵棗粉是干棗經(jīng)過(guò)粉碎后與其他優(yōu)質(zhì)谷物(玉米胚芽粕、豆粕等)混合后，每噸干料添加30%的水與菌液(2×1011CFU枯草芽孢桿菌、7×109CFU活酵母、2 g乳酸菌)后，密封袋貯，25 ℃發(fā)酵3 d，其中發(fā)酵棗粉蛋白質(zhì)含量為14.98%，脂肪含量為1.5%，鈣、磷含量分別為0.58%、0.21%，中性洗滌纖維(NDF)含量為45.82%，酸性洗滌纖維(ADF)含量為35.99%。4組飼糧粗蛋白質(zhì)、綜合凈能水平一致，基礎(chǔ)飼糧參考《肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 815—2004)配制，試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 ItemsC組 C groupL組 L groupM組 M groupH組 H group全株玉米青貯 Whole corn silage26.6226.6226.6226.62羊草 Chinese wildrye16.4816.4816.4816.48合計(jì) Total100.00100.00100.00100.00營(yíng)養(yǎng)水平 Nutrient levels2)綜合凈能 NEmf/(MJ/kg)5.445.445.445.44粗蛋白質(zhì) CP14.0014.0014.0014.00粗脂肪 EE2.372.372.382.39中性洗滌纖維 NDF 36.7736.9537.1337.31酸性洗滌纖維 ADF 20.5920.9321.2721.61酸性洗滌木質(zhì)素 ADL 3.283.503.674.14鈣 Ca 0.500.520.540.56磷 P 0.310.310.310.31

1.3 飼養(yǎng)管理

進(jìn)圈前7 d，對(duì)圈舍進(jìn)行消毒。預(yù)試期7 d，正試期91 d。每天于09:00飼喂1次，自由采食，自由飲水，每2 d清洗水槽，以保證水質(zhì)清潔和充足。每天巡視牛圈，觀察牛的采食與健康狀態(tài)以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題。

1.4 樣品的采集

1.4.1 飼糧樣、糞樣采集

在試驗(yàn)結(jié)束前，連續(xù)采集3 d上、下午各組全混合日糧，將每天每組采集飼糧混合均勻，于65 ℃烘干，粉碎備用，以測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)成分。從各試驗(yàn)組中隨機(jī)選擇5頭牛，連續(xù)3 d在06：00和16：00直腸采糞，每頭牛每天收集糞樣約600 g混勻(其中，300 g加50 mL 10%的硫酸用于固氮，測(cè)定糞中粗蛋白質(zhì)含量；一半不加酸，待測(cè)其他常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分含量)，采集的糞樣放入烘箱65 ℃ 76 h，室溫回潮24 h，粉碎備用。

1.4.2 血樣的采集

分別在正試期第1、30、90天，采用頸靜脈無(wú)菌采血法(使用促凝管和抗凝管),從每組選擇5頭牛在早晨飼喂前進(jìn)行血樣采集，血樣于37 ℃水浴30 min后3 000 r/min離心15 min，將上清液分裝到0.5 mL小離心管中，置于-20 ℃保存待測(cè)血清生化指標(biāo)。

1.5 指標(biāo)測(cè)定及計(jì)算

1.5.1 溫濕指數(shù)(THI)

將溫濕度表掛置距離地面1.5 m處，每個(gè)組分別掛1個(gè)。每天分別于08:00、14:00、18:00利用溫濕度表記錄溫度、濕度，計(jì)算THI。最后利用Excel繪制出THI的折線圖。

溫?zé)岘h(huán)境的評(píng)價(jià)采用國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的表示熱應(yīng)激的THI，計(jì)算公式如下：

THI=(1.8×AT+32)-0.55-0.55×
RH/100)×(1.8×AT-26)。

式中：THI為溫濕指數(shù)；AT為氣溫(℃)；RH為相對(duì)濕度(%)。

1.5.2 躺臥率和呼吸頻率指標(biāo)測(cè)定

每隔1 d在12:00—13：00，每隔15 min觀察1次躺臥率，并記錄躺臥的牛只數(shù)，計(jì)算躺臥率。在每組選取5頭牛，觀察并用秒表、記錄每分鐘的呼吸頻率，每頭牛觀察3 min，記錄呼吸頻率。

1.5.3 生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定

在試驗(yàn)期的第1天和第91天晨飼前，空腹稱量體重，測(cè)量荷斯坦公牛的體高、體斜長(zhǎng)、胸圍。記錄試驗(yàn)動(dòng)物的初始體重和末重，以計(jì)算平均日增重和體高增長(zhǎng)。每隔15 d進(jìn)行1次干物質(zhì)采食量(DMI)的測(cè)定。根據(jù)平均日增重和平均日采食量計(jì)算料重比(F/G)。

1.5.4 營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率測(cè)定

采集的飼糧樣品、糞便樣品參照張麗英[10]的常規(guī)分析方法進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分含量測(cè)定，利用鹽酸不溶灰分(AIA)作為指示劑，依據(jù)GB/T 23742—2009《飼料中鹽酸不溶灰分的測(cè)定》測(cè)定AIA含量。計(jì)算各營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率。計(jì)算公式如下：

某營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率(%)=[(a/c-
b/d)/(a/c)]×100。

式中：a為飼糧中該營(yíng)養(yǎng)成分含量；b為糞中該營(yíng)養(yǎng)成分含量；c為飼糧中指示劑含量；d為糞中指示劑含量。

1.5.5 血清生化指標(biāo)測(cè)定

血清葡萄糖(GLU)、尿素氮(UN)含量使用全自動(dòng)生化分析儀(BS-420，深圳邁瑞)測(cè)定?？偟鞍?TP)含量測(cè)定所用試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，使用酶標(biāo)儀DNM-9602進(jìn)行測(cè)定。白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)、熱休克因子-1(HSF-1)、皮質(zhì)醇(Cor)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)、丙二醛(MAD)含量，T-AOC及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性由北京華悅昌生物科技有限公司使用酶標(biāo)儀(MK3，芬蘭雷勃)測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)利用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，差異顯著用Duncan氏法進(jìn)行組間多重比較。試驗(yàn)結(jié)果用平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示，P<0.05為差異顯著，0.050.05為差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗(yàn)期間牛舍THI變化

根據(jù)圖1牛舍THI動(dòng)態(tài)變化圖，從7月15日到9月30日，THI一直處于75之上，直到10月份THI才低于75，說(shuō)明7、8、9、10月份肉牛一直處于熱應(yīng)激狀態(tài)，其中7月15日到8月底THI高于78，熱應(yīng)激最為嚴(yán)重，9月THI處于75～78。

圖1 牛舍溫?zé)岘h(huán)境的動(dòng)態(tài)變化

2.2 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛躺臥率與呼吸頻率的影響

如表2所示，試驗(yàn)期間，當(dāng)THI<72，與對(duì)照組相比，M組、H組呼吸頻率顯著低于C組(P<0.05)。當(dāng)720.05)。當(dāng)57

2.3 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛生長(zhǎng)性能的影響

如表3所示，4組荷斯坦公牛初始體重和終末體重?zé)o顯著差異(P>0.05)；隨著發(fā)酵棗粉添加量的增加，平均日增重呈顯著二次升高(P=0.008)。H組平均日增重顯著降低(P<0.05)，顯著提高料重比(P<0.01)；M組平均日增重達(dá)到最高，料重比降低不顯著(P>0.05)。與C組、H組相比，L組、M組體高增長(zhǎng)顯著提高(P<0.05)。

表2 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛躺臥率和呼吸頻率的影響

表3 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛生長(zhǎng)性能的影響

2.4 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛飼糧營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率的影響

如表4所示，鈣、磷、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、干物質(zhì)的表觀消化率4組之間均無(wú)顯著差異(P>0.05)。M組粗蛋白質(zhì)表觀消化率顯著高于其他組(P<0.05)。粗脂肪表觀消化率隨著發(fā)酵棗粉添加量增加呈線性增加(P<0.001)。

表4 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率的影響

2.5 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛血清生化指標(biāo)的影響

如表5所示，試驗(yàn)第1天，血清生化指標(biāo)各組之間無(wú)顯著差異(P>0.05)。試驗(yàn)第30天，H組血清T3的含量顯著高于C組(P<0.05),與L組、M組無(wú)顯著差異(P>0.05)；血清T3含量呈線性增加(P=0.017)；M組血清T4含量顯著高于C組、L組(P<0.05)，與H組無(wú)顯著差異(P>0.05)，血清T4含量呈線性增加(P=0.011)；M組血清TP含量顯著高于C組(P<0.05)，且呈二次升高趨勢(shì)(P=0.088)；血清UN含量呈二次下降變化(P=0.010)。試驗(yàn)第90天，各組血清T3含量無(wú)顯著差異(P>0.05)；M組、H組血清HSF-1含量顯著高于C組(P<0.05)；M組、H組血清Cor含量顯著低于C組、L組(P<0.05)。

表5 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛血清生化指標(biāo)的影響

2.6 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛血清免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)的影響

如表6所示，試驗(yàn)第1天，各組各血清免疫指標(biāo)無(wú)顯著差異(P>0.05)。試驗(yàn)第30天，M組血清IL-1含量顯著降低(P<0.05)；與C組、H組相比，M組血清IL-6含量顯著降低(P<0.05)，且呈顯著二次降低(P<0.001)；H組血清IgA含量顯著高于其他3組(P<0.05)；H組血清IgG含量顯著高于C組(P<0.05)，與其他2組無(wú)顯著差異(P>0.05)；試驗(yàn)第90天，M組和H組血清IL-1含量顯著低于C組(P<0.05)；隨著發(fā)酵棗粉添加量的增加，血清IgA含量呈線性升高(P=0.019)。試驗(yàn)第1天，各組血清中抗氧化酶活性無(wú)顯著差異(P>0.05)；試驗(yàn)第31天，隨著發(fā)酵棗粉添加量的增加，血清中T-AOC呈線性上升趨勢(shì)(P=0.137)；試驗(yàn)第90天，M組血清T-AOC顯著高于C組(P<0.05)。與C組比，添加發(fā)酵棗粉能夠顯著降低血清中MDA含量(P<0.05)。隨著發(fā)酵棗粉添加量的增加，各組血清SOD活性呈線性升高趨勢(shì)(P=0.023)。

表6 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛血清免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛躺臥率和呼吸頻率的影響

熱應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致牛體熱平衡、呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)的變化。廖曉霞等[11]指出，當(dāng)奶牛處于輕度熱應(yīng)激時(shí)，呼吸頻率為50～60次/min；中度熱應(yīng)激時(shí)呼吸頻率為80～120次/min；嚴(yán)重?zé)釕?yīng)激時(shí)，呼吸頻率可達(dá)120～160次/min。本試驗(yàn)THI在78以上，荷斯坦公牛呼吸頻率在80次/min以上，說(shuō)明牛群處于中度熱應(yīng)激。熱應(yīng)激嚴(yán)重時(shí)，牛群會(huì)焦躁不安，站立踱步、躺臥率會(huì)降低。紅棗中黃酮類，有鎮(zhèn)定安神[12]、抗氧化應(yīng)激的功效，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)72

3.2 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)高溫季節(jié)荷斯坦公牛生長(zhǎng)性能的影響

高溫季節(jié)動(dòng)物為了維持機(jī)體熱平衡通過(guò)降低采食量以減少食后體增熱，導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)攝入吸收減少，氧化損傷嚴(yán)重，從而降低生長(zhǎng)性能。經(jīng)發(fā)酵的棗粉味道香甜，能夠提高適口性，提高采食量，改善微生物區(qū)系，提高飼料的利用率[13-14]，所富含的皂苷、多糖、膳食纖維、酮類活性成分是天然的抗氧化劑[13]，能提高機(jī)體抗氧化能力降低氧化損傷；馮平等[15]研究發(fā)現(xiàn)，棗粉能提高白絨山羊的瘤胃降解率和生長(zhǎng)性能，其中添加15%、20%和25%組的干物質(zhì)消化率、平均日采食量和平均日增重均顯著高于對(duì)照組。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加10%發(fā)酵棗粉，平均日增重、體高增長(zhǎng)均高于對(duì)照組，與吝常華等[14]研究結(jié)果相似，當(dāng)發(fā)酵棗粉比例增加到15%時(shí)荷斯坦公牛的增重受阻。

有研究證明益生菌進(jìn)入消化道后，能夠通過(guò)調(diào)控腸道免疫反應(yīng)，最終影響骨骼代謝活動(dòng)，許多免疫因子參與調(diào)控成骨和破骨作用[16]。IL-1會(huì)降低骨保護(hù)素的形成，抑制骨形成，也可直接通過(guò)核因子-B受體活化因子配基(RANKL)影響破骨細(xì)胞的增殖分化成熟[17]。有研究表明，酸棗仁提取物能通過(guò)調(diào)控Gi/o蛋白表達(dá)從而抑制環(huán)磷酸腺苷-蛋白激酶(cAMP-PKA)通路實(shí)現(xiàn)的骨骼增長(zhǎng)的作用[18]，酸棗仁提取物增加生長(zhǎng)激素分泌[19]，促進(jìn)身高增長(zhǎng)。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)第30天，飼喂5%、10%發(fā)酵棗粉能降低血清中IL-1的含量從而抑制破骨細(xì)胞，促進(jìn)成骨細(xì)胞，促進(jìn)體高增長(zhǎng)，而當(dāng)發(fā)酵棗粉添加量達(dá)到15%時(shí)，血清IL-1含量增加抑制骨形成，減慢體高增長(zhǎng)，也是其平均日增重顯著降低的原因之一。本試驗(yàn)選擇4～6月齡公犢牛正處于骨骼生長(zhǎng)最快的關(guān)鍵的階段，而高溫季節(jié)會(huì)減弱甲狀腺功能，骨轉(zhuǎn)化減慢，骨礦化周期延長(zhǎng)[20]。本試驗(yàn)中，添加5%、10%發(fā)酵棗粉能夠促進(jìn)體尺增長(zhǎng)，其中體高增長(zhǎng)顯著高于對(duì)照組，然而15%組的體高增長(zhǎng)會(huì)受到抑制，可能是飼糧中添加高劑量發(fā)酵棗粉，造成瘤胃中乳酸菌大量增殖，而高水平乳酸菌(≥106CFU/mL)能抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和阻滯細(xì)胞周期[21]，造成體高增長(zhǎng)抑制，進(jìn)一步抑制犢牛平均日增重?？梢?jiàn)發(fā)酵棗粉的添加量尤為重要，添加10%發(fā)酵棗粉可以緩解熱應(yīng)激對(duì)荷斯坦公牛體尺生長(zhǎng)的不良影響。

3.3 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛飼糧營(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率的影響

動(dòng)物機(jī)體處于高溫環(huán)境中大量血液被分配到體表以增加散熱導(dǎo)致消化道血流量減少，機(jī)體長(zhǎng)時(shí)間缺血、缺氧,胃腸黏膜上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能都會(huì)受到嚴(yán)重?fù)p害[22-24]，飲水量增加會(huì)稀釋瘤胃內(nèi)容物，瘤胃菌群活動(dòng)減少[25]，導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分表觀消化率降低。姜義寶等[26]研究表明，黃酮類化合物可提高糖、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的相互轉(zhuǎn)化。黑沙蒿及其多糖可通過(guò)增加小腸絨毛、瘤胃乳頭長(zhǎng)度，提高對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收[27]。本試驗(yàn)研究中添加發(fā)酵棗粉提高了粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維、粗脂肪表觀消化率，10%組粗蛋白質(zhì)表觀消化率顯著高于對(duì)照組，主要原因是紅棗多糖、黃酮類化合物等活性成分通過(guò)緩解腸道損傷，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)成分消化吸收，提高營(yíng)養(yǎng)成分的利用率。

3.4 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛血清生化指標(biāo)的影響

動(dòng)物血液生化指標(biāo)的變化反映著機(jī)體健康狀況、營(yíng)養(yǎng)水平以及機(jī)體內(nèi)代謝狀態(tài)。肉牛熱應(yīng)激時(shí)甲狀腺機(jī)能降低，甲狀腺T3、T4分泌量減少，從而降低物質(zhì)代謝率，產(chǎn)熱減少，以提高機(jī)體對(duì)熱環(huán)境的適應(yīng)性[28]。本試驗(yàn)中，各試驗(yàn)組血清中T3含量在整個(gè)試驗(yàn)期是逐漸下降的，其中對(duì)照組血清T3、T4含量下降幅度最大，添加發(fā)酵棗粉的試驗(yàn)組不僅在熱應(yīng)激期間血清T3、T4含量呈現(xiàn)出優(yōu)于對(duì)照組的穩(wěn)定，在熱應(yīng)激到非熱應(yīng)激的過(guò)度也展現(xiàn)出優(yōu)于對(duì)照組的恢復(fù)能力。其中10%組血清T3、T4含量表現(xiàn)的穩(wěn)定和恢復(fù)力是最為突出的，在整個(gè)試驗(yàn)期10%組血清T4含量并沒(méi)有明顯下降。

Cor是評(píng)定荷斯坦公牛熱應(yīng)激狀態(tài)的黃金指標(biāo)[29]，夏季動(dòng)物血清中Cor含量顯著高于冬季[30]，當(dāng)機(jī)體處于高溫環(huán)境時(shí)，垂體-腎上腺皮質(zhì)軸活動(dòng)增強(qiáng)，皮質(zhì)醇分泌增加。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)第90天，與對(duì)照組、5%組相比，10%、15%組奶公牛血清Cor含量顯著降低，說(shuō)明添加10%、15%發(fā)酵棗粉對(duì)緩解高溫季節(jié)荷斯坦公牛應(yīng)激有一定效果。

血清TP含量可以反映人體的營(yíng)養(yǎng)狀況和蛋白質(zhì)代謝水平。一般來(lái)說(shuō)，人體的營(yíng)養(yǎng)狀況良好，蛋白質(zhì)合成增加，血清TP含量增加[29]。本試驗(yàn)中，第30天奶公牛10%組血清中TP含量顯著高于對(duì)照組。這說(shuō)明添加發(fā)酵棗粉提高了機(jī)體蛋白質(zhì)代謝，其中添加量為10%效果最佳。

3.5 飼糧添加發(fā)酵棗粉對(duì)荷斯坦公牛血清抗氧化指標(biāo)和免疫指標(biāo)的影響

高溫會(huì)引起線粒體底物氧化電子傳遞鏈活性加強(qiáng)，增加活性氧(ROS)和自由基的積累，加速動(dòng)物機(jī)體的過(guò)氧化[31]，當(dāng)氧化與抗氧化平衡被打破，引起氧化應(yīng)激從而損傷機(jī)體。機(jī)體通過(guò)酶促系統(tǒng)(谷胱甘肽、維生素A等)與非酶促系統(tǒng)(SOD、GSH-Px)清除有害的氧自由基[32]，其作用方式是通過(guò)清除自由基和活性氧或清除具有催化作用的相關(guān)金屬離子，降低過(guò)氧化反應(yīng)效率達(dá)到抗氧化的作用。發(fā)酵棗粉中多酚類化合物[33]的羥基能與具有催化作用的Cu+、Fe2+發(fā)生螯合反應(yīng)，降低氧化反應(yīng)速率；發(fā)酵棗粉中黃酮類酚羥基[34-35]可與自由基反應(yīng)形成穩(wěn)定的半醌式自由基結(jié)構(gòu)，減少自由基積累，從而提高抗氧化活性。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的終極產(chǎn)物，其含量可以間接說(shuō)明氧化程度，判斷機(jī)體損傷程度[35]。本試驗(yàn)添加發(fā)酵棗粉，血清中SOD、CAT、GSH-Px活性及T-AOC均有提高，荷斯坦公牛血清中MDA含量隨著發(fā)酵棗粉添加量的增加而降低。這說(shuō)明在發(fā)酵棗粉所富含的紅棗多糖、酚類、皂苷等多種活性成分共同作用下能夠增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力。

細(xì)胞因子是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要部分，具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫作用。IL-1是一種促炎性因子[36]，大量的IL-1可造成機(jī)體免疫系統(tǒng)紊亂；有研究表明紅棗多糖可通過(guò)下調(diào)髓樣分化因子88(MyD88)、核因子κB蛋白65(NF-κBp65)的表達(dá)，從而抑制白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)的分泌，進(jìn)而提高腸道免疫功能[7]。IL-2能促進(jìn)細(xì)胞因子的形成，具有廣泛的免疫功能。IL-6可以具有分泌抗體的功能，它可以刺激并活化B細(xì)胞[37]。在本試驗(yàn)第30、90天，添加10%發(fā)酵棗粉血清中IL-1含量顯著低于對(duì)照組。發(fā)酵棗粉中含有大量益生菌，可通過(guò)空間阻效應(yīng)，在腸道表面提前形成1層保護(hù)膜，從而阻斷病原菌的黏附，并刺激腸道黏膜中淋巴而產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫，增強(qiáng)機(jī)體的抵抗力[38]。發(fā)酵棗粉的添加量十分關(guān)鍵，發(fā)酵棗粉添加量過(guò)高會(huì)導(dǎo)致的乳酸菌產(chǎn)生克隆無(wú)能，T細(xì)胞不能被激活，甚至被誘導(dǎo)凋亡或進(jìn)入無(wú)能狀態(tài)，無(wú)能狀態(tài)的T細(xì)胞再接受抗原刺激時(shí)，即使有第二信號(hào)也不能再被激活，不能產(chǎn)生IL-2和IL-6[21]。因此高劑量的發(fā)酵飼料反而會(huì)降低機(jī)體免疫性能，起到促炎作用[39]，與本試驗(yàn)結(jié)果一致，試驗(yàn)第30、90天，飼喂含15%發(fā)酵棗粉飼糧血清中IL-2和IL-6的含量低于對(duì)照組，試驗(yàn)第90天，15%組血清IL-1含量顯著增加，可見(jiàn)添加過(guò)量發(fā)酵棗粉具有促炎作用，降低了免疫功能。飼喂10%發(fā)酵棗粉能提高血清IL-2和IL-6含量，降低血清IL-1含量，提高IgA和IgG含量，從而達(dá)到提高荷斯坦公牛的免疫性能的效果。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，從生長(zhǎng)性能指標(biāo)可以看出，飼糧添加10%發(fā)酵棗粉顯著提高了荷斯坦公牛的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪表觀消化率，同時(shí)其平均日增重提高了3.60%，胸圍增長(zhǎng)、體高增長(zhǎng)、體斜長(zhǎng)分別提高了11.81%、8.01%、9.17%。從免疫和抗氧化指標(biāo)分析，添加10%發(fā)酵棗粉提高了荷斯坦公牛血清中抗氧化酶活性和免疫球蛋白的含量，有效提高了機(jī)體免疫性能及抗氧化性能。綜上所述，添加10%發(fā)酵棗粉能夠達(dá)到緩解高溫對(duì)荷斯坦公牛機(jī)體氧化應(yīng)激損傷，減弱對(duì)其生長(zhǎng)性能的不良影響。