姚喜喜, 陳永瓏, 徐成體, 海存秀, 劉皓棟
(1. 青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院, 青海 西寧 810016;2. 青海東牧灣農(nóng)牧科技開發(fā)有限公司, 青海 海東 811600;3. 青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院, 青海 西寧 810016;4. 甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院, 甘肅 武威 733006)
牦牛(Bosgrunniens)最早起源于青藏高原,是我國高海拔地區(qū)繁衍的一種珍稀牛品種,也是青藏高原地區(qū)的牧民的最重要的生活生產(chǎn)資源[1]。長期以來,牦牛分布區(qū)青藏高原艱苦的生態(tài)環(huán)境和落后的生產(chǎn)方式,造成牦牛養(yǎng)殖和管理方式相對落后,主要依靠自然放牧,很少補(bǔ)充飼料。由于青藏高原植物生長季節(jié)較短(4~5個月),在漫長的冬季,傳統(tǒng)放牧制度下的成年牦牛通常會掉膘25%~30%[2]。高寒牧區(qū)冬春季節(jié)牧草缺乏,導(dǎo)致牦牛營養(yǎng)攝入不足,是牦?!暗舯臁钡闹饕竟?jié),牦牛營養(yǎng)供應(yīng)不足會影響其機(jī)體正常發(fā)育,嚴(yán)重時會造成骨骼和肌肉組織停止生長[3]。因此,自然放牧已不能滿足牧區(qū)經(jīng)濟(jì)社會發(fā)展的需要,隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,牦牛的飼養(yǎng)方式也在逐漸發(fā)生改變。
近年來,農(nóng)牧交錯帶推廣的牦牛冷季育肥技術(shù)是縮短牦牛養(yǎng)殖周期、提高牦牛生產(chǎn)性狀、改善肉品質(zhì)、加快出欄速率和提高牧民經(jīng)濟(jì)效益的重要舉措。轉(zhuǎn)變飼養(yǎng)方式和改善冷季營養(yǎng)補(bǔ)飼水平可顯著提高牦牛生產(chǎn)性能、肉品質(zhì)和養(yǎng)殖效益。已有研究通過對比冷季舍飼和放牧2種飼養(yǎng)方式,發(fā)現(xiàn)冬季補(bǔ)飼可顯著提高阿什旦牦牛、環(huán)湖牦牛和麥洼牦牛的生長性能、胴體性狀、肉品質(zhì)和經(jīng)濟(jì)效益[4-7]。日糧能量利用率是影響家畜生產(chǎn)性能的主要因素,家畜生產(chǎn)效率的高低主要取決于日糧的能量水平。據(jù)報道[8-9],增加日糧能量水平會顯著提高冷季舍飼育肥牦牛的生長性能和屠宰性能。由于牦牛生存環(huán)境無污染,牦牛肉品礦物質(zhì)營養(yǎng)均衡豐富,呈現(xiàn)低脂肪和高蛋白等特點(diǎn),深受廣大消費(fèi)者喜愛,是公眾肉品消費(fèi)的理想選擇。楊媛麗等[10]通過對比傳統(tǒng)放牧和育肥2種養(yǎng)殖模式發(fā)現(xiàn),育肥模式顯著改善了牦牛背最長肌中的脂肪酸組成和揮發(fā)性性風(fēng)味物質(zhì)組成。王斌星等[11]研究表明,適宜的日糧凈能水平能顯著提高牦牛肌肉組織中脂肪酸含量和改善肌肉中氨基酸組成。
瘤胃是反芻動物天然的日糧發(fā)酵罐,具有復(fù)雜的微環(huán)境,日糧經(jīng)瘤胃微生物發(fā)酵轉(zhuǎn)變?yōu)閾]發(fā)性脂肪酸被瘤胃上皮吸收,為動物機(jī)體提供能量[12]。韓旭峰[13]研究表明,瘤胃微生物受日糧結(jié)構(gòu)和營養(yǎng)水平的影響。因此,了解日糧能量水平如何通過影響牦牛瘤胃菌群發(fā)酵進(jìn)而改變牦牛的生產(chǎn)性能和肉品質(zhì),對于探討牦牛冷季補(bǔ)飼效果具有重要意義。綜上,參考國內(nèi)外研究現(xiàn)狀,本研究從農(nóng)牧交錯帶生產(chǎn)實(shí)際出發(fā),綜合分析不同日糧能量水平對牦牛生長性能、屠宰性能、肉品質(zhì)和瘤胃菌群的影響,以期為高寒牧區(qū)牦牛冷季補(bǔ)飼育肥和牦牛產(chǎn)業(yè)提質(zhì)增效提供理論參考。
本試驗(yàn)在青海省西寧市湟中縣家源養(yǎng)殖專業(yè)合作社開展,采用單因素完全隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計,選取30頭體重相近((269.75±35.46)kg)、健康狀況良好的2歲大通公牦牛,試驗(yàn)設(shè)置3個處理組(n=10),在飼喂定量粗飼料的基礎(chǔ)上,分別飼喂低、中、高3個綜合凈能水平的精料補(bǔ)充料,15天試驗(yàn)預(yù)飼期,90天試驗(yàn)正飼期。試驗(yàn)日糧參考《肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》[14]進(jìn)行配制。粗飼料以80%全貯玉米和20%小麥秸稈作為基礎(chǔ)日糧,精飼料以玉米、麩皮、菜粕、小蘇打、鹽、預(yù)混料為主,分別配制3個綜合凈能水平[低能量組日糧(5.51 MJ·kg-1)、(中能量組日糧6.22 MJ·kg-1)、高能量組日糧(6.94 MJ·kg-1)]的試驗(yàn)日糧。試驗(yàn)分08∶00和17∶00兩次飼喂,在飼喂基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上,分別飼喂3個凈能水平的日糧,日糧配方組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 牦?;A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) of yak
試驗(yàn)開始前,對牛舍進(jìn)行全面消毒,試驗(yàn)開始時對牛只進(jìn)行全面消毒、驅(qū)蟲、免疫和登記耳標(biāo)。試驗(yàn)過程中,每日做好試驗(yàn)牛只的采食、飲水、反芻行為和排便等的觀察和記錄工作。試驗(yàn)牦牛飼喂全混合日糧(Total mixed ration,TMR),TMR制作按照每頭牦牛每日4 kg全株青貯玉米、1 kg小麥秸稈和2 kg精飼料配制,每日分08∶00和17∶00兩次進(jìn)行飼喂,試驗(yàn)期間保證牛只自由飲水,且做好牛舍衛(wèi)生防疫。
1.3.1生長性能、屠宰性能和肉品質(zhì)樣品采集與測定 對試驗(yàn)牦牛的初始體重和試驗(yàn)?zāi)┲剡M(jìn)行測量,根據(jù)測量的數(shù)據(jù)計算出平均日增重(Average daily gain,ADG)。每一組的全混合日糧的剩料重和投料重需要每隔30 d連續(xù)記錄3 d,同時記錄干物質(zhì)采食量(Dry matter intake,DMI)。至試驗(yàn)結(jié)束后,在每個試驗(yàn)組隨機(jī)選取6頭牦牛屠宰(空腹24 h),并記錄胴體重和宰前活重,對眼肌面積和屠宰率進(jìn)行測定[10]。選取第12~13根肋間背最長肌測定0 h和24 h的pH值、蒸煮損失、肉色和失水率[15]。
1.3.2瘤胃液樣品采集與測定 瘤胃液采集:屠宰后,每頭牦牛采集75 mL瘤胃液,混勻后過濾,立即檢測瘤胃液的pH值,取其中20 mL進(jìn)行測序分析和提取DNA。采集的瘤胃液馬上放入液氮罐,運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室于—80℃保存,用于相關(guān)指標(biāo)檢測。
瘤胃發(fā)酵參數(shù)測定:利用王鴻澤[15]的方法測定NH3-N濃度;利用pHSJ-3F儀測定瘤胃液的pH值;利用安捷倫氣相色譜儀Agilent 7890A GC System(Agilent,Hewlett Packard,美國)測定瘤胃乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸、異戊酸濃度。
瘤胃細(xì)菌多樣性高通量測序:根據(jù)說明書提取瘤胃液基因組DNA,測定DNA純度和濃度。以提取的DNA作為模板,PCR擴(kuò)增16S rRNA的V3—V4區(qū),擴(kuò)增引物(V3—V4),338F:5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3′,806R:5′-GGACTACHVGGGTWTCT-AAT-3′。建立測序文庫,用Illumina Miseq PE300對文庫進(jìn)行了測序[13]。測序結(jié)束后,為了得到有用的數(shù)據(jù)對原始數(shù)據(jù)進(jìn)行剪切、拼接和過濾。16S rDNA測序由上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司完成,瘤胃細(xì)菌ACE,Chao1,Simpson,Shannon的指數(shù)和物種覆蓋度利用R software 4.0.0軟件計算,最后進(jìn)行OTU聚類分析微生物群落的組成與差異。
利用單因素方差分析3個日糧能量水平的牦牛生長性能、肉品質(zhì)、屠宰性能及瘤胃發(fā)酵參數(shù),并且采用鄧肯法對分析的結(jié)果進(jìn)行多重比較,統(tǒng)計結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,以P<0.05作為差異性顯著分析依據(jù)。
由表2可知,日糧能量水平對牦牛初始體重?zé)o顯著影響,高能量組牦牛試驗(yàn)?zāi)┲仫@著高于中、低能量組,中能量組顯著高于低能量組(P<0.05);高、中能量組牦牛平均日增重?zé)o顯著差異,但均高于低能量組(P<0.05);高能量組牦牛干物質(zhì)采食量顯著高于中、低能量組,中能量組顯著高于低能量組(P<0.05)。
表2 不同能量水平日糧對牦牛生長性能的影響Table 2 Effects of diets with different energy levels on yak growth performance
由表3可知,高能量組牦牛的宰前活重、胴體重和屠宰率顯著高于中、低能量組(P<0.05);中能量組牦牛胴體重顯著高于低能量組(P<0.05);高、中能量組牦牛眼肌面積沒有顯著差異但均顯著高于低能量組(P<0.05);高、中、低3個能量組牦牛背最長肌、肉色a*、肉色b*、蒸煮損失以及失水率組間無顯著差異。
表3 不同能量水平日糧對牦牛肉品質(zhì)和屠宰性能的影響Table 3 Effects of different energy levels on meat quality and slaughter performance of yak
由表4可知,高、中、低3個能量組牦牛瘤胃pH值無顯著差異;低、中能量組牦牛瘤胃NH3-N濃度顯著高于高能量組牦牛(P<0.05);低能量組牦牛瘤胃中乙酸濃度顯著高于中能量組,中能量組顯著高于高能量組(P<0.05);中能量組牦牛瘤胃中丙酸濃度顯著高于高能量組,高能量組顯著高于低能量組(P<0.05);高能量組牦牛瘤胃中異丁酸、丁酸、戊酸濃度和乙丙比顯著高于中能量組,中能量組異丁酸、丁酸濃度和乙丙比顯著高于低能量組(P<0.05);高能量組牦牛瘤胃中異戊酸濃度顯著高于低能量組(P<0.05)。
表4 日糧能量水平對牦牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響Table 4 Effects of dietary energy levels on the rumen fermentation of yak
由表5可知,低能量組牦牛瘤胃細(xì)菌Chao1指數(shù)顯著高于中能量組,中能量組顯著高于高能量組(P<0.05);低、中能量組牦牛瘤胃細(xì)菌ACE指數(shù)之間無顯著差異,但均顯著高于高能量組(P<0.05);高、中、低3個能量組牦牛瘤胃中細(xì)菌Simpson指數(shù)、Coverage和Shannon指數(shù)無顯著差異。
表5 日糧能量水平對牦牛瘤胃細(xì)菌菌群Alaph多樣性的影響Table 5 Effects of dietary energy levels on Alaph diversity of bacterial flora of the yak rumen
由表6可知,在門水平上,高能量組牦牛瘤胃細(xì)菌門水平中擬桿菌門(Bacteroidetes)的相對豐度顯著高于中能量組,中能量組顯著高于低能量組(P<0.05);高能量組厚壁菌門(Firmicutes)的相對豐度顯著高于中、低能量組(P<0.05),中、低能量組間無顯著差異。
表6 日糧能量水平對牦牛瘤胃細(xì)菌門水平多樣性的影響Table 6 Effect of dietary energy levels on diversity of rumen bacteria in yak
由表7可知,在屬水平上,高能量組牦牛瘤胃細(xì)菌屬水平中普雷沃菌屬(Prevotella)的相對豐度顯著高于中能量組,中能量組顯著高于低能量組(P<0.05);中、低能量組理研菌科RC9菌屬(Rikenellaceae_RC9)的相對豐度無顯著差異,但均高于高能量組(P<0.05)。
表7 日糧能量水平對牦牛瘤胃細(xì)菌屬水平多樣性的影響Table 7 Effects of dietary energy levels on rumen bacterial diversity in yaks
動物機(jī)體的生長發(fā)育其實(shí)是營養(yǎng)物質(zhì)在體內(nèi)消化、吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和沉積的過程,機(jī)體發(fā)育易受采食日糧結(jié)構(gòu)和營養(yǎng)水平的影響,合理的日糧配比和營養(yǎng)水平對動物機(jī)體發(fā)育至關(guān)重要。前人有關(guān)日糧營養(yǎng)水平對不同品牛生長發(fā)育的研究較多,結(jié)果不盡一致。Brown等[16]比較不同蛋白質(zhì)能量比日糧對奶牛生長性能的影響研究結(jié)果顯示,隨日糧蛋白質(zhì)能量比的增加,奶牛平均干物質(zhì)采食量和日增重顯著增加。李亞茹等[17]報道指出冬季舍飼牦牛生長性能受到日糧能量水平的影響,牦牛平均日增重表現(xiàn)出隨日糧能量變化而變化的規(guī)律。這與本研究結(jié)果一致,當(dāng)飼喂6.94 MJ·kg-1高能量組日糧時,牦牛的干物質(zhì)采食量最大、日增重增重最快,且顯著高于6.22 MJ·kg-1中等能量組和5.51 MJ·kg-1低能量組。李萬棟等[18]研究發(fā)現(xiàn),舍飼條件下通過對生長期牦牛飼喂低營養(yǎng)組(代謝能8.27 MJ·kg-1)、中營養(yǎng)組(代謝能10.22 MJ·kg-1)和高營養(yǎng)組(代謝能11.92 MJ·kg-1)3種不同營養(yǎng)水平的日糧時,日糧能量水平為10.22 MJ·kg-1時牦牛增重效果最好。此外,也有研究表明,日糧能量水平對育肥牦牛生長性能的影響可能還與品種有關(guān),品種之間的差異也會對此造成影響[15],為此還需進(jìn)行深入研究。
研究表明,日糧能量水平的高低會顯著影響育肥肉牛宰前活重、胴體質(zhì)量、凈肉質(zhì)量和眼肌面積[19]。本研究中,飼喂6.94 MJ·kg-1高能量組牦牛宰前活重、胴體重、屠宰率和眼肌面積均顯著高于飼喂6.22 MJ·kg-1中等能量組和5.51 MJ·kg-1低能量組牦牛。郭亮等[20]高能量組荷斯坦奶牛的屠宰性能均顯著高于低能量組,田生花等[21]研究結(jié)果表明低能精料組肉牛的屠宰率、胴體質(zhì)量以及凈肉率顯著低于高能精料組,王星凌等[22]研究也發(fā)現(xiàn)低精料日糧組肉牛的屠宰性能顯著低于高精料日糧組,這與本研究的結(jié)果一致。
能夠體現(xiàn)動物機(jī)體糖原降解的速率的重要依據(jù)就是宰后肉pH值,肉色是反映肌肉色、香、味、質(zhì)幾大要素中最直觀的指標(biāo),肉色的深淺和色度主要受肌肉色素的含量確定,本研究中飼喂6.94 MJ·kg-1高能量組牦牛背最長肌pH值顯著高于飼喂6.22 MJ·kg-1中能量組和5.51 MJ·kg-1低能量組牦牛,而肉色的L*值則與pH值相反,與岳康寧等[23]報道的結(jié)果一致。
日糧精粗比和營養(yǎng)水平是影響瘤胃pH值的主要因素,能夠體現(xiàn)反芻動物瘤胃發(fā)酵水平的重要依據(jù)就是瘤胃的pH值,瘤胃內(nèi)pH值的穩(wěn)定可以使瘤胃微生物能夠正常活動,并且時刻保持健康,反芻動物正常瘤胃pH值維持在6~7的適宜范圍[24-25]。據(jù)報道[25],將牦牛日糧營養(yǎng)水平由5.32 MJ·kg-1降低到3.72 MJ·kg-1,pH值則由6.75降低到6.67。徐俊等[26]通過體外消化試驗(yàn)的研究表明,增加日糧NDF水平會顯著增加瘤胃pH值。本研究中高、中、低3個能量水平日糧瘤胃發(fā)酵pH值維持在6.40~6.78的范圍,且隨日糧能量水平的升高呈下降趨勢,結(jié)果與上述研究報道一致,原因可能與高能量水平日糧的低NDF水平導(dǎo)致的瘤胃pH值較低有關(guān)。
研究表明,當(dāng)NH3-N濃度為6~30 mg·dL-1時,瘤胃內(nèi)含氮物質(zhì)的吸收和利用處于動態(tài)平衡[27],NH3-N濃度對瘤胃中含氮化合物的代謝十分重要[28]。據(jù)報道[29],利木贊牛與本地黃牛雜交一代生長肥育牛瘤胃中的NH3-N濃度受到日糧能量水平的影響,且與日糧能量水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。王斌星等[30]研究表明飼喂粗蛋白質(zhì)(CP)水平為14.81%的中、高凈能水平日糧的舍飼育肥牦牛瘤胃NH3-N濃度顯著低于飼喂低水平日糧組牦牛,這與本研究結(jié)果飼喂6.94 MJ·kg-1高能量組和6.22 MJ·kg-1中等能量組牦牛瘤胃NH3-N濃度顯著低于5.51 MJ·kg-1低能量組的研究結(jié)果一致,說明飼喂中、高能量水平日糧有利于瘤胃NH3-N濃度的增加、瘤胃微生物菌體蛋白的合成和瘤胃氮素的利用。
反芻動物瘤胃微生物發(fā)酵能夠?qū)⑷占Z中的纖維飼料分解為容易消化吸收并且可為機(jī)體提供大部分能量的微生物蛋白、揮發(fā)性脂肪酸和氨等物質(zhì)。丙酸是糖異生代謝過程中的重要物質(zhì),所有代謝反應(yīng)均有丙酸參與,乙酸占機(jī)體總氧化代謝的25%~40%[31]。據(jù)Li等[32]研究報道,高能量日糧在瘤胃發(fā)酵時,丙酸比例會顯著升高,而乙酸比例會顯著降低。這與本研究隨日糧能量水平升高,丙酸濃度相應(yīng)升高的結(jié)論一致,這是由于低能量組日糧NDF水平較高,非可溶性碳水化合物含量相對較多,經(jīng)瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生的乙酸較多,而高能量組日糧淀粉含量較多,經(jīng)瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生的丙酸較多,糖異生作用的主要物質(zhì)來源就是丙酸,說明反芻動物為了自身更好地生長和發(fā)育,必須保證瘤胃中含有較高濃度的丙酸,因此本研究中飼喂6.94 MJ·kg-1高能量組日糧的牦牛育肥效果最佳。
瘤胃中不同揮發(fā)性脂肪酸濃度與微生物群落組成有關(guān)[33]。本試驗(yàn)采用Illumina-Hiseq測序平臺,研究不同日糧能量水平對牦牛瘤胃微生物多樣性的影響。試驗(yàn)從瘤胃液中共檢測到3 109個OTUs,比以往研究多[34]。可能的原因是技術(shù)的不斷進(jìn)步,更多的細(xì)菌可以被分類和鑒定。ACE和Chao1指標(biāo)反映了瘤胃微生物的相對豐度。本試驗(yàn)中,隨著日糧能量水平的升高,瘤胃細(xì)菌的的ACE和Chao1指數(shù)均顯著降低。由此可見,日糧能量水平會顯著影響牦牛瘤胃細(xì)菌的豐度,且隨日糧能量水平的升高,瘤胃細(xì)菌豐度顯著降低,這與前人的研究結(jié)果一致[35]。但Shannon指數(shù)、Simpson指數(shù)和物種覆蓋度無顯著變化,說明日糧能量水平的差異不會影響牦牛瘤胃細(xì)菌的多樣性[36]。
本研究中共鑒定出24個細(xì)菌門,其中以Bacteroidetes門和Firmicutes門相對豐度較高,這兩個門被認(rèn)為是評價反芻動物對能量需求的重要微生物菌門,在其它反芻動物中也有類似報道[37-38]。已有研究表明Bacteroidetes門在水解低聚糖、生產(chǎn)乙酸和丙酸中發(fā)揮著重要作用,F(xiàn)irmicutes門參與了各種纖維素和淀粉的降解,以及醋酸、丙酸和丁酸的生產(chǎn)[38]。Liu等[39]通過向牦牛飼喂粗纖維含量為30%的粗飼料日糧和粗纖維含量為15%的精飼料日糧時發(fā)現(xiàn),飼喂2種不同的精粗日糧,瘤胃細(xì)菌均表現(xiàn)為Bacteroidetes和Firmicutes相對豐度較高,精飼料組日糧Bacteroidetes和Firmicutes的相對豐度顯著高于飼料組,這與本研究結(jié)果高能量組日糧瘤胃Bacteroidetes和Firmicutes的相對豐度顯著高于中、低能量組日糧的結(jié)論一致。Bacteroidetes的主要作用是與復(fù)雜大分子結(jié)合,將復(fù)雜的大分子有機(jī)物,如碳水化合物降解為單糖[39]。玉米是一種重要的能量飼料,其主要成分淀粉是一種可溶性碳水化合物,為Bacteroidetes將碳水化合物降解為單糖提供了充足的能量來源。因此,Bacteroidetes在高能量組日糧中的相對豐度顯著高于其它2種低能量日糧。
本研究中共鑒定出377個細(xì)菌屬,Prevotella和Rikenellaceae_RC9是牦牛瘤胃中最豐富的細(xì)菌屬。Prevotella在其他反芻動物中也有優(yōu)勢[40]。Prevotella具有很強(qiáng)的功能多樣性,在瘤胃內(nèi)廣泛參與淀粉、蛋白質(zhì)、肽和半纖維素的降解[41]。Prevotella產(chǎn)生丙酸,通過糖異生作用在宿主動物維持葡萄糖穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[42]。Rikenellaceae_RC9,Christensenellaceae_R-7,norank_UCG-011和Prevotellaceae_UCG-001在每個樣品中也有相對較高的豐度。Rikenellaceae_RC9與動物健康和人類肥胖有關(guān),也可作為生產(chǎn)醋酸和丙酸發(fā)酵的底物[43-44]。本試驗(yàn)中,高能量組日糧中Prevotella和Rikenellaceae_RC9相對豐度顯著高于中、低能量組日糧。這是因?yàn)楦吣芰拷M日糧瘤胃中較高的淀粉含量,為Prevotella產(chǎn)生更多丙酸,通過糖異生作用維持宿主動物葡萄糖穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮了著更大的作用,同時,Rikenellaceae_RC9也改善了高能量組牦牛對能量的攝入,使得更多的營養(yǎng)物質(zhì)被機(jī)體吸收利用,所以高能量組日糧表現(xiàn)出更好的育肥效果。
日糧能量水平對牦牛生長性能、屠宰性能、肉品質(zhì)和瘤胃菌群會產(chǎn)生顯著影響。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,適宜的冷季牦牛育肥最佳日糧凈能水平為6.94 MJ·kg-1,該研究可為冷季牦牛育肥提供數(shù)據(jù)參考和示范指導(dǎo)。