誘導(dǎo)自噬對(duì)朊病毒病治療、作用機(jī)制的研究進(jìn)展

黃雨妍，李睿涵，李佳津，韋文君，緱夢(mèng)蘭，汪寧

1.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110001；2.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110122

朊病毒病是由于異常折疊的朊蛋白——朊病毒蛋白（prion protein,PrPSc）的大量聚集引起的神經(jīng)退行性疾病。而自噬作為體內(nèi)清除錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)或抑制聚集的主要方式，通過(guò)多種途徑如轉(zhuǎn)錄因子EB（transcription factor EB,TFEB）調(diào)控的自噬溶酶體途徑（autophagy-lysosome pathway,ALP）、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamy‐cin,mTOR）介導(dǎo)的自噬抑制途徑和AMP 活化激酶（adenosine 5’-monophosphate-activated protein ki‐nase,AMPK）介導(dǎo)的ALP 途徑等參與朊病毒病的發(fā)生，并成為在研究疾病的進(jìn)展與治療中不可忽視的存在，得到了廣泛的研究。自噬在朊病毒病中的作用及作用機(jī)制并不明確，此外，過(guò)度自噬會(huì)加重朊病毒病的進(jìn)展，這一觀點(diǎn)引起了科學(xué)界的廣泛關(guān)注。近年來(lái)，越來(lái)越多的科研工作者針對(duì)自噬在朊病毒病中的作用機(jī)制進(jìn)行了大量研究，研究表明許多基于誘導(dǎo)自噬的藥物在小鼠試驗(yàn)階段甚至臨床試驗(yàn)階段都呈現(xiàn)出良好的治療效果。文章總結(jié)了自噬在朊病毒病中的作用機(jī)制，詳細(xì)闡明了誘導(dǎo)自噬對(duì)朊病毒病所產(chǎn)生的積極影響，這對(duì)探索朊病毒病的治療具有重要意義。本文對(duì)臨床常用藥物如雷帕霉素、甲磺酸伊馬替尼、白藜蘆醇等進(jìn)行了簡(jiǎn)單介紹，并簡(jiǎn)述了相關(guān)作用機(jī)制?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 朊病毒病

朊病毒病也稱為傳染性海綿狀腦?。╰ransmis‐sible spongiform encephalopathy,TES），是一種能夠感染人類(lèi)和動(dòng)物的致命性神經(jīng)退行性疾病[1]。人類(lèi)朊病毒病根據(jù)發(fā)病形式可以分為：①散發(fā)性人類(lèi)朊病毒疾病，包括克魯茨費(fèi)爾特-雅各布?。╟reutzfeldtjakob disease,CJD）、致死性失眠和可變蛋白酶敏感性朊病毒??；②遺傳性或家族性朊病毒病，一般是由相關(guān)編碼基因突變所引起，包括家族性或遺傳性克雅氏病、致命性家族性失眠癥和格斯特曼綜合征（gerstmann-str?ussler-scheinker,GSS）；③獲得性人類(lèi)朊病毒病，包括庫(kù)魯病、醫(yī)源性克雅氏病和一種新的克雅氏病變異形式，僅占人類(lèi)朊病毒病病例的5%[2]。在朊病毒病中，人體內(nèi)與朊病毒病相關(guān)的正常蛋白（PrPC）的構(gòu)象發(fā)生轉(zhuǎn)變，形成一種錯(cuò)誤折疊、富含β-折疊且易于聚集的病理形式，可稱為朊病毒蛋白（PrPSc）[3]。在未感染的細(xì)胞中，PrPC通過(guò)內(nèi)吞途徑降解，然而對(duì)比PrPC易于被溶酶體水解酶降解，PrPSc對(duì)蛋白水解更具抵抗性，PrPSc的聚集能有效阻止朊病毒蛋白的降解[4]。體內(nèi)錯(cuò)誤折疊的毒性蛋白大量聚集[5]，通過(guò)細(xì)胞凋亡使神經(jīng)元丟失[6]，造成嚴(yán)重的神經(jīng)退行性變。

2 自噬

自噬指將細(xì)胞質(zhì)貨物輸送到溶酶體的細(xì)胞降解途徑，即細(xì)胞“吃掉自己”的過(guò)程，其不僅參與胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸，還起到清除細(xì)胞內(nèi)受損的細(xì)胞器或錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)等廢物并循環(huán)利用相關(guān)降解產(chǎn)物的作用，對(duì)維持人體正常的生理功能以及內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。自噬通常根據(jù)其特定的生理功能、物質(zhì)運(yùn)輸方式和途徑分為3 類(lèi)，分別為巨自噬、微自噬和分子伴侶介導(dǎo)自噬[7]。其中巨自噬最為普遍與典型，在此過(guò)程中，細(xì)胞接受自噬誘導(dǎo)信號(hào)后產(chǎn)生具有雙層膜的吞噬泡，吞噬泡包裹受損的細(xì)胞器和蛋白形成自噬體，自噬體內(nèi)的物質(zhì)被轉(zhuǎn)運(yùn)到溶酶體并在酶的作用下進(jìn)行降解，產(chǎn)生的大分子被釋放回細(xì)胞質(zhì)中以供再利用[8]。

3 自噬針對(duì)朊病毒蛋白的作用機(jī)制

在朊病毒病中，自噬具有降解聚集蛋白、減少聚集蛋白數(shù)量和降低其毒性的作用。上調(diào)自噬可以有效防止神經(jīng)變性，從而減緩疾病的發(fā)展。ALP降解是細(xì)胞清除異常蛋白的主要方式。ALP 的缺陷會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)聚集、有毒蛋白種類(lèi)的產(chǎn)生和積累以及細(xì)胞器的功能失調(diào)。ALP 途徑的作用機(jī)制主要概括為T(mén)FEB 調(diào)控的ALP 途徑、mTOR 介導(dǎo)的自噬抑制途徑、AMPK 介導(dǎo)的ALP 途徑，這3 個(gè)途徑既相互獨(dú)立，又彼此聯(lián)系。

3.1 TFEB 調(diào)控的ALP 途徑

TFEB 是一種與溶酶體調(diào)控基因或協(xié)調(diào)溶酶體表達(dá)和調(diào)控（coordinated lysosomal expression and regulation,CLEAR）元件表達(dá)的啟動(dòng)子結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子[9]，通過(guò)驅(qū)動(dòng)自噬和溶酶體基因的轉(zhuǎn)錄，來(lái)促進(jìn)自噬體溶酶體的形成[10]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，TFEB增強(qiáng)了溶酶體蛋白的穩(wěn)態(tài)，這些蛋白大多是發(fā)生了突變或錯(cuò)誤折疊，同時(shí)TFEB 可以促進(jìn)自噬體與溶酶體的融合[11]。TFEB 的亞細(xì)胞定位和活性受磷酸化水平的控制[12]，激活后的TFEB 可迅速由細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核與靶序列基因結(jié)合，參與自噬的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，誘導(dǎo)自噬[10]。在營(yíng)養(yǎng)豐富的條件下mTOR 復(fù)合物1（mammalian target of rapamycin 1,mTORC1）可通過(guò)PI3K-Akt 途徑被激活并使TFEB 磷酸化，磷酸化的TFEB 與14-3-3 蛋白結(jié)合，留在胞質(zhì)，無(wú)法進(jìn)入細(xì)胞核而失去驅(qū)動(dòng)功能。壓力條件下，mTORC1通過(guò)AMPK 途徑失活，去磷酸化的TFEB 發(fā)生質(zhì)核轉(zhuǎn)位[13]，發(fā)揮轉(zhuǎn)錄因子的功能。此外，Ca2+依賴的鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶的激活也可使TFEB 去磷酸化進(jìn)入細(xì)胞核（圖1）[14]。最新研究表明，microRNA（miRNA）可以控制TFEB 的表達(dá)和激活，調(diào)節(jié)TFEB 誘導(dǎo)的CLEAR 基因的轉(zhuǎn)錄[15]。

圖1 TFEB 的激活途徑

3.2 mTOR 介導(dǎo)的自噬抑制途徑

mTOR 是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶，是哺乳動(dòng)物自噬中研究最好的自噬調(diào)節(jié)因子，也是mTOR 復(fù)合物的催化亞基。根據(jù)結(jié)構(gòu)差異，可以將mTOR 復(fù)合物分為mTORC1 和mTORC2[16]。

mTORC1 是營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子信號(hào)的主要傳感器，可以影響生長(zhǎng)因子、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和細(xì)胞能量狀態(tài)等多種輸入信號(hào)。mTORC1 由富含脯氨酸的40 kDa的Akt 底 物（PRAS40）、mTOR 相互作 用蛋白（DEPTOR）、mTOR 的調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白（Raptor）、G 蛋白β-亞基樣蛋白（GβL）和mTOR 構(gòu)成。當(dāng)營(yíng)養(yǎng)豐富的條件下，Akt 作用于PRAS40，使磷酸化的PRAS40 從Raptor 上解離后激活ULK1，抑制自噬溶酶體的形成。

mTORC2 由GβL、mTOR、mTOR 的雷帕霉素不敏感伴侶（Rictor）、應(yīng)激激活蛋白激酶相互作用蛋白（SIN）1 和與Rictor 觀察到的蛋白（protein ob‐served with Rictor,PROTOR）構(gòu)成。饑餓條件下，mTORC2 通過(guò)FoxO3 信號(hào)通路調(diào)控自噬。mTORC2磷酸化作用于Akt，Akt 使FoxO3 基因表達(dá)的蛋白質(zhì)（FoxO3）磷酸化，后者與14-3-3 蛋白結(jié)合，留在胞質(zhì)，無(wú)法進(jìn)入細(xì)胞核，抑制自噬基因轉(zhuǎn)錄的激活（圖2）[17]。最新研究表明，mTORC2 可能也存在其他介導(dǎo)途徑，多種途徑共同負(fù)調(diào)控自噬基因的轉(zhuǎn)錄。

圖2 mTOR 介導(dǎo)的自噬抑制途徑

3.3 AMPK 介導(dǎo)的ALP 途 徑

AMPK 可以響應(yīng)能量狀態(tài)與細(xì)胞質(zhì)鈣水平來(lái)進(jìn)行自噬的調(diào)節(jié)。在營(yíng)養(yǎng)充足時(shí)，三磷酸腺苷（ad‐enosine triphosphate,ATP）結(jié)合AMPK 的γ 亞基使其失活；在饑餓狀態(tài)下，一磷酸腺苷（adenosine mono‐phosphate,AMP）結(jié)合于AMPK 的γ 亞基，通過(guò)腫瘤抑制激 酶（liver kinase B1,LKB1）使α 亞基上 的Thr172 磷酸化，激活A(yù)MPK，激活后的AMPK 可通過(guò)磷酸化mTORC1 上的Raptor 與TSC1/2 復(fù)合物使mTORC1 失活，阻斷mTOR 介導(dǎo)的自噬抑制途徑[18]，達(dá)到誘導(dǎo)自噬的作用（圖3）[19]。

圖3 AMPK 激活的兩種途徑

AMPK 還可以以AMP 獨(dú)立的方式被激活，主要與細(xì)胞質(zhì)中鈣的含量有關(guān)。神經(jīng)退行性疾病模型中反復(fù)觀察到胞質(zhì)Ca2+水平異常升高[20]。究其原因?yàn)殁}蛋白酶介導(dǎo)的溶酶體膜完整性被破壞，從而導(dǎo)致溶酶體中大量組織蛋白酶泄漏，鈣蛋白酶在細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)中的致病性激活導(dǎo)致大腦中廣泛的退行性疾病[21]，特別是散發(fā)性克雅氏病，這是與朊病毒疾病相關(guān)的神經(jīng)毒性的關(guān)鍵決定因素之一。細(xì)胞質(zhì)鈣是AMPK 和通過(guò)鈣調(diào)蛋白/CaMKKβ 途徑自噬的激活劑。細(xì)胞內(nèi)鈣水平的增加可使鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶激酶2（recombinant calcium/calmodu‐lin dependent protein kinase kinase 2,CAMKK2）被激活，激活后的CaMKK 以AMP 獨(dú)立的方式磷酸化α亞基上Thr172，激活A(yù)MPK（圖4）[15]。AMPK 激活后，可使自噬通量大大增加。AMPK 誘導(dǎo)的自噬與TFEB 轉(zhuǎn)錄因子的核轉(zhuǎn)位有關(guān)。

圖4 AMPK 介導(dǎo)的自噬途徑

保持鈣的穩(wěn)態(tài)和鈣介導(dǎo)的AMPK 信號(hào)傳導(dǎo)、糾正不平衡的鈣蛋白酶-組織蛋白酶激活，可以更好地確保自噬功能的正常發(fā)揮，同時(shí)減輕鈣超載帶來(lái)的線粒體損傷等其他病理變化[22]。

4 利用自噬通路治療朊蛋白病的藥理學(xué)及病理學(xué)理論基礎(chǔ)

4.1 自噬的藥理誘導(dǎo)可減少朊病毒蛋白并減輕朊病毒病

各種體內(nèi)、體外研究表明，自噬誘導(dǎo)會(huì)干擾朊病毒感染[23]。在持續(xù)性朊病毒感染的細(xì)胞或小鼠中研究了幾種自噬的藥理學(xué)誘導(dǎo)劑。其中一些化合物通過(guò)抑制mTOR 誘導(dǎo)自噬，對(duì)自噬進(jìn)行負(fù)調(diào)節(jié)，其他化合物則在mTOR 非依賴性途徑中工作[24]。

4.2 p62-Keap1-NRF2-ARE 信號(hào)通路

主動(dòng)自噬可以從兩個(gè)方面對(duì)神經(jīng)元起到保護(hù)作用，降低氧化應(yīng)激水平。一方面通過(guò)減少錯(cuò)誤折疊的朊病毒數(shù)量，另一方面p62-Keap1-NRF2-ARE信號(hào)通路中NRF2 由磷酸化p62 觸發(fā)從Keap1 上脫離，促使NRF2 轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核并激活抗氧化防御機(jī)制[25]。

通過(guò)p62-Keap1-NRF2-ARE 信號(hào)通路誘導(dǎo)的自噬可能為治療常見(jiàn)神經(jīng)退行性疾病提供有顯著效果的新選擇。由于藥理學(xué)NRF2 激活對(duì)疾病的廣泛作用，作者推斷絕大多數(shù)神經(jīng)退行性疾病都將適合以此途徑進(jìn)行靶向治療。

5 各藥物對(duì)阮蛋白病的臨床調(diào)節(jié)作用

朊蛋白病是一類(lèi)具有傳染性的朊蛋白導(dǎo)致的散發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病。目前的醫(yī)療水平對(duì)朊病毒尚無(wú)有效的對(duì)因治療辦法，主要是進(jìn)行對(duì)癥的治療。病程遷延數(shù)年者很少見(jiàn)，在治療朊蛋白病過(guò)程中較常使用的藥物有如下幾種。

5.1 甲磺酸伊馬替尼（Gleevec,STI571）

甲磺酸伊馬替尼（Gleevec,STI571）是一種酪氨酸激酶c-Abl 的抑制劑[26]。該藥處于小鼠實(shí)驗(yàn)階段，感染早期可明顯降低PrPSc在小鼠脾臟中的負(fù)荷，主要在中樞神經(jīng)系統(tǒng)外發(fā)揮抗朊病毒蛋白的作用，從而延長(zhǎng)小鼠的存活時(shí)間。對(duì)于嚴(yán)重感染后期，該藥物是否能持續(xù)發(fā)揮顯著效果，以及如何確定最佳的給藥量仍然是需要探究的問(wèn)題。

5.2 AR-12（OSU-03012）

AR-12 屬于塞來(lái)昔布的一種衍生物，也被稱為OSU-03012，具有強(qiáng)大的抗朊病毒作用[27]。該藥處于細(xì)胞試驗(yàn)階段，治療2 周后，AR-12 在持續(xù)感染朊病毒的神經(jīng)元（ScN2a）和非神經(jīng)元（ScMEF）培養(yǎng)細(xì)胞中完全消除了朊病毒感染，然而AR-12 誘導(dǎo)自噬的具體機(jī)制尚不明確。

5.3 白藜蘆醇（3-4'-5-trihydroxystilbene）

葡萄中富含的天然酚和植物毒素可以治愈SMBs15 細(xì)胞中的朊病毒感染[28]。白藜蘆醇的抗朊病毒和神經(jīng)保護(hù)作用主要?dú)w因于通過(guò)激活Sirt1（Ⅲ類(lèi)組蛋白去乙?；福┱T導(dǎo)自噬[29]。

5.4 其他藥物

PPS、奎納克林通過(guò)穩(wěn)定PrPC并減少其向PrPSc的轉(zhuǎn)化來(lái)防止PrPSc聚合物的積累。姜黃素（Cur）具有抗淀粉樣蛋白特性和神經(jīng)保護(hù)作用，親脂性Cur可穿過(guò)血腦屏障在腦中抑制朊病毒蛋白的聚集[30]。其他的有抗朊病毒作用的藥物有剛果紅、馬來(lái)酸氟吡啶、硫磺素、鐵的四吡咯衍生物。

5.5 典型藥物的藥理機(jī)制與作用效果

5.5.1 自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素（Rapamycin）雷帕霉素是經(jīng)典的哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）抑制劑和被認(rèn)可的自噬誘導(dǎo)物，可延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間。相較于甲磺酸伊馬替尼，雷帕霉素可順利通過(guò)血腦屏障，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮作用。已經(jīng)確定自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素可應(yīng)用于臨床治療，可以通過(guò)靶向抑制mTOR 依賴的自噬抑制途徑來(lái)降低PrPSc的聚集水平。

雷帕霉素的靶標(biāo)（target of rapamycin,TOR）是一種進(jìn)化保守的絲氨酸/蘇氨酸激酶，可感知和整合來(lái)自環(huán)境的信號(hào)，以協(xié)調(diào)發(fā)育和代謝過(guò)程[31]。TOR在條件有利時(shí)感知營(yíng)養(yǎng)、激素、代謝物和壓力信號(hào)，以促進(jìn)細(xì)胞和器官的生長(zhǎng)。然而，當(dāng)條件不利時(shí)，TOR 會(huì)受到抑制，從而促進(jìn)自噬等分解代謝過(guò)程。

5.5.2 候選藥物二甲雙胍（Metformin）有研究表明，二甲雙胍對(duì)神經(jīng)退行性疾病有治療作用。二甲雙胍減少了朊病毒感染，并誘導(dǎo)持續(xù)感染22 L 朊病毒的N2a 細(xì)胞自噬。用二甲雙胍處理22 L-ScN2a 細(xì)胞7 d 可降低朊病毒載量。誘導(dǎo)自噬可能是二甲雙胍減輕N2a 細(xì)胞中朊病毒感染的機(jī)制之一。

此外，二甲雙胍誘導(dǎo)持續(xù)感染RML 朊病毒的ScCAD5 細(xì)胞自噬。朊病毒由具有不同構(gòu)象穩(wěn)定性和生化性質(zhì)的各種菌株組成。采用二甲雙胍治療RML 感染的ScCAD5 細(xì)胞，10 d 后可減少朊病毒感染，這表明二甲雙胍的體外抗朊病毒作用可能與菌株和細(xì)胞類(lèi)型無(wú)關(guān)，但抗病毒作用的效力在不同的菌株與細(xì)胞類(lèi)型之間有差異。

為測(cè)試二甲雙胍在體內(nèi)的治療效果，接種并使小鼠在腦脊髓內(nèi)感染22 L 朊病毒。從接種之日起，在飲用水（2 mg/mL）中用二甲雙胍對(duì)小鼠進(jìn)行治療110 d。與對(duì)照組相比，結(jié)果顯示二甲雙胍治療組的存活時(shí)間沒(méi)有增加，并且接受二甲雙胍的小鼠沒(méi)有表現(xiàn)出任何低血糖現(xiàn)象。多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)表明，二甲雙胍只能暫時(shí)降低朊病毒負(fù)荷，并不能根除朊病毒感染，長(zhǎng)期使用無(wú)法治愈感染細(xì)胞。短期使用對(duì)癥狀有改善作用，長(zhǎng)期使用對(duì)疾病轉(zhuǎn)歸的影響有待深入研究。

以上結(jié)果表明，自噬在朊病毒病中起到至關(guān)重要的作用，在患者和實(shí)驗(yàn)接種小鼠的大腦中也可以觀察到自噬體。然而，這種水平的自噬不足以解決朊病毒感染。使用化合物增強(qiáng)自噬已被證明可以增加PrPSc降解，限制其外泌體釋放，并具有神經(jīng)保護(hù)作用。雖然這些通過(guò)自噬干擾朊病毒繁殖的多種方式在體外是高效的，但只有少數(shù)化合物可以有效地提高朊病毒感染小鼠的存活率、延長(zhǎng)存活時(shí)間，臨床試驗(yàn)階段仍處于萌芽狀態(tài)。未來(lái)需要新的方法來(lái)發(fā)現(xiàn)更多有效的藥物，改善體內(nèi)抗朊病毒作用的一種可能方法是聯(lián)合治療，例如：與自噬誘導(dǎo)劑和抑制從頭朊病毒轉(zhuǎn)化的化合物聯(lián)合處理可協(xié)同抗朊病毒作用。某些單一藥物常存在缺陷，如甲磺酸伊馬替尼穿透血腦屏障的效果較差，因此，另一種策略可以是在現(xiàn)有的藥物基礎(chǔ)上對(duì)藥物進(jìn)行功能化修飾，促進(jìn)藥物通過(guò)血腦屏障，進(jìn)入到大腦中發(fā)揮作用。闡明自噬在朊病毒感染中的作用機(jī)制，將可行性方案應(yīng)用到臨床治療，挽救患者的生病、延長(zhǎng)患者的生存時(shí)間，是每一位醫(yī)療科研人員的共同目標(biāo)。

6 總結(jié)

朊病毒病是一種由毒性蛋白（PrPSc）異常大量聚集所導(dǎo)致的嚴(yán)重神經(jīng)退行性疾病，而PrPSc毒性蛋白多由中樞系統(tǒng)中正常的朊蛋白PrPC異常折疊形成。目前全球范圍內(nèi)治療手段有限，患者2 年生存率較低。朊病毒相關(guān)的自噬機(jī)制的研究對(duì)于探尋延緩疾病進(jìn)程及治療朊病毒病的新思路與有效方案具有重要意義。本文闡述了自噬在朊病毒病中通過(guò)TFEB 調(diào)控的ALP 途徑、mTOR 介導(dǎo)的自噬抑制途徑、AMPK 介導(dǎo)的ALP 途徑3 個(gè)主要機(jī)制來(lái)增加自噬通量、調(diào)節(jié)PrPSc在體內(nèi)的聚集。ALP的缺陷會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)聚集、有毒蛋白種類(lèi)的產(chǎn)生和積累以及細(xì)胞器的功能失調(diào)，維持ALP 途徑的穩(wěn)定可為治療帶來(lái)新希望。TFEB 在ALP 的3 種自噬途徑中起著至關(guān)重要的作用，如何調(diào)控TFEB 的表達(dá)或許可作為一個(gè)新的突破口。此外，靶向抑制mTOR 介導(dǎo)的自噬抑制途徑是誘導(dǎo)自噬、降低PrPSc聚合物的有效途徑?，F(xiàn)有藥物中雷帕霉素是經(jīng)典的mTOR 抑制劑，可有效延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間，相較于甲磺酸伊馬替尼來(lái)說(shuō)，雷帕霉素有可能順利通過(guò)血腦屏障，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)揮作用，彌補(bǔ)甲磺酸伊馬替尼只在中樞神經(jīng)系統(tǒng)外發(fā)揮作用的缺陷。目前在臨床階段，已經(jīng)確定使用自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素治療可以通過(guò)靶向抑制mTOR 依賴的自噬抑制途徑來(lái)降低PrPSc的聚集水平。在自噬通量的檢測(cè)方面，LC3-Ⅱ和p62 蛋白的表達(dá)量是良好的觀測(cè)指標(biāo)。LC3-Ⅱ下調(diào)、p62 蛋白上調(diào)均可說(shuō)明自噬通量的減低，此時(shí)提示或許可將誘導(dǎo)自噬作為有效的治療途徑，為朊病毒病的治療帶來(lái)希望。同時(shí)，在誘導(dǎo)自噬時(shí)保持鈣的穩(wěn)態(tài)和鈣介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)、糾正不平衡的鈣蛋白酶-組織蛋白酶激活，可以更好地確保自噬功能的正常發(fā)揮，減輕鈣超載帶來(lái)的線粒體損傷等其他病理變化。以上3 種自噬在朊病毒病中的機(jī)制為臨床靶向抗朊病毒病藥物的研發(fā)提供了新思路。從目前研究結(jié)果來(lái)看，雷帕霉素與二甲雙胍是較為有效的藥物，其他基于以上機(jī)制的藥物還包括甲磺酸伊馬替尼、AR-12、白藜蘆醇、PPS、奎納克林、多西環(huán)素、剛果紅、馬來(lái)酸氟吡啶、硫磺素、鐵的四吡咯衍生物等。然而，過(guò)度誘導(dǎo)自噬可能會(huì)造成嚴(yán)重的后果，如何尋找自噬通量調(diào)控點(diǎn)、解決過(guò)度自噬帶來(lái)的不良反應(yīng)，以及在嚴(yán)重感染后期藥物是否能持續(xù)發(fā)揮顯著效果、如何確定最佳的給藥量，都是未來(lái)科研工作者探索與努力的方向。