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    丹參對(duì)平菇生長(zhǎng)發(fā)育的影響

    2022-03-04 05:24:00劉姍姍趙佳浩忻龍祚
    現(xiàn)代農(nóng)村科技 2022年2期
    關(guān)鍵詞:平菇試管菌種

    劉姍姍 趙佳浩 忻龍祚*

    (河北北方學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院 河北 張家口 075000)

    平菇,原專(zhuān)指糙皮側(cè)耳,現(xiàn)在平菇是一種泛稱(chēng)[1],是擔(dān)子菌門(mén)下傘菌目側(cè)耳科一大種類(lèi)[2]。平菇肉質(zhì)飽滿(mǎn)、味道鮮美,是一種高蛋白、低脂肪的食物[3]??稍鰪?qiáng)人體免疫力,且具有預(yù)防癌癥的功效,極受消費(fèi)者喜愛(ài)[4]。平菇在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的酶,具有較強(qiáng)分解轉(zhuǎn)化的能力和極強(qiáng)的富集作用[5]。丹參,唇形科鼠尾草屬植物[6]。在我國(guó)擁有悠久的種植歷史,全國(guó)各地都有分布,在臨床也有悠久的入藥歷史?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,丹參對(duì)治療心血管病有一定的治療作用[7],是擴(kuò)張血管、活血化瘀、改善心臟血液循環(huán)的優(yōu)質(zhì)藥材[8]。

    平菇作為全國(guó)栽培量最大的食用菌之一,價(jià)格低廉、食用范圍廣泛,栽培技術(shù)已經(jīng)非常成熟[9]。然而隨著人們對(duì)健康食品需求的增加,怎樣研究出營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、具有保健作用的新型平菇產(chǎn)品成為眾多企業(yè)和研究機(jī)構(gòu)所面臨的新的挑戰(zhàn)[10]。本試驗(yàn)嘗試將中藥丹參添加到平菇栽培料中,觀(guān)察丹參對(duì)平菇生長(zhǎng)發(fā)育的影響,探究丹參的有效成分是否可以轉(zhuǎn)化到平菇子實(shí)體中,以期培育出品質(zhì)更高、具有保健作用的功能型平菇。

    1 材料與方法

    1.1 供試材料

    1.1.1 供試菌種。平菇8194菌種,來(lái)源于邢臺(tái)市威縣中沃食用菌公司。

    1.1.2 栽培基質(zhì)。原料:棉籽殼、玉米芯、麩皮、石灰、石膏、磷肥等由河北北方學(xué)院食用菌實(shí)驗(yàn)室提供。丹參片,購(gòu)買(mǎi)于石家莊市行唐縣。

    1.2 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)。試驗(yàn)時(shí)間:2020年9~12月;試驗(yàn)地點(diǎn):河北北方學(xué)院食用菌實(shí)驗(yàn)室。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 配方設(shè)計(jì)。將購(gòu)買(mǎi)的丹參片放入KC-500高速粉粹機(jī)打碎,過(guò)60目的篩子。將過(guò)篩后的丹參粉按照占栽培基質(zhì)總干料質(zhì)量的1%、2%、3%的比例添加至栽培基質(zhì)中。以不添加丹參粉的處理作為對(duì)照組,共設(shè)置4個(gè)處理,每個(gè)處理3次重復(fù)。各處理具體配方設(shè)置見(jiàn)表1。

    表1 平菇栽培料配比 (%)

    1.3.2 栽培基質(zhì)的制作。將葡萄枝、棉籽殼、玉米芯、麩皮、丹參粉、磷肥、石膏、石灰等提前24 h預(yù)濕,按配料比設(shè)計(jì)分別放入攪拌機(jī)中混勻。調(diào)節(jié)栽培料含水量在65%左右,調(diào)節(jié)pH值為7~8。攪拌均勻后,取50 g栽培料裝入內(nèi)徑20 mm、長(zhǎng)200 mm的大試管,裝至距離試管塞2~3 cm處即可。每個(gè)處理做兩個(gè)大試管,重復(fù)3次,用來(lái)測(cè)定平菇菌絲的生長(zhǎng)速度;然后,取混勻的等量栽培料裝入聚丙烯栽培袋中,每個(gè)處理制作20個(gè)菌棒,每個(gè)菌棒重700 g,3次重復(fù)。高壓滅菌2 h。

    1.3.3 觀(guān)測(cè)指標(biāo)。①菌絲生長(zhǎng)特性:形狀、色澤、長(zhǎng)勢(shì)、濃密度;②菌絲生長(zhǎng)速度:通過(guò)測(cè)量菌絲生長(zhǎng)的長(zhǎng)度(4 d測(cè)1次);③平菇子實(shí)體的單菇重:測(cè)量第一潮單菇的重量;④平菇多糖含量測(cè)定的方法:醇提法;⑤平菇蛋白含量測(cè)定的方法:三氯乙酸-丙酮法;⑥平菇中丹參的有效成分:紫外吸光度法。

    1.3.4 丹參對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)影響的測(cè)定。①接種:提前將接種室滅菌,將平菇8194的試管種和所制作的含平菇栽培料的大試管,用接菌針尖部劃切取出3~5 mm見(jiàn)方菌種塊,接種針挑上迅速轉(zhuǎn)移至大試管中,灼燒試管口,并將試管塞在火焰上迅速過(guò)一下,塞好試管口。菌種接完后,貼好標(biāo)簽,位置不影響對(duì)菌絲生長(zhǎng)的觀(guān)測(cè)即可。②培養(yǎng):放入恒溫的人工氣候箱中培養(yǎng)。③測(cè)量菌絲生長(zhǎng)特性:采用劃線(xiàn)法進(jìn)行測(cè)量,將每次測(cè)量時(shí)的菌絲生長(zhǎng)最前端進(jìn)行劃線(xiàn)標(biāo)記,最好測(cè)量劃線(xiàn)距離,計(jì)算菌絲生長(zhǎng)速度。同時(shí)觀(guān)察色澤、生長(zhǎng)趨勢(shì)、稀疏程度、形態(tài)特征。

    1.3.5 丹參對(duì)平菇產(chǎn)量的測(cè)定。①接種:提前將接種室滅菌,平菇枝條菌種接種需要兩個(gè)人合作,一人擰開(kāi)未接種的平菇菌棒的袋口,另一個(gè)人拿好枝條菌種頂部迅速平行放進(jìn)菌種孔,接種完一袋菌種再取菌種繼續(xù)接種。中間接種工作人員不得碰除枝條種之外的物品,如不小心碰到需用75%酒精消毒。②放入人工氣候培養(yǎng)室培養(yǎng),及時(shí)檢測(cè)是否污染。菌袋長(zhǎng)滿(mǎn)菌絲后移動(dòng)到大棚進(jìn)行管理,溫度應(yīng)控制在20℃左右,空氣相對(duì)濕度為80%左右,注意通風(fēng)以及二氧化碳濃度等。③單菇重測(cè)定:平菇邊緣即將翹起時(shí)采摘,這時(shí)并沒(méi)有孢子射出,采摘時(shí)不留小的平菇。稱(chēng)重記錄產(chǎn)量。④干菇制備:采下的子實(shí)體自然風(fēng)干保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.3.6 平菇多糖含量的測(cè)定。樣品烘干、稱(chēng)重、水浴、離心、旋蒸、乙醇溶解、沉淀過(guò)濾,得到粗多糖。

    1.3.7 平菇蛋白含量的測(cè)定。分別取CK、處理1、處理2、處理3的平菇樣品5 g,粉碎為細(xì)粉,加入濃度為8 mol/L的尿素溶液300 ml,回流30 min,4500r/min離心10min,取上清液,加入三氯乙酸15ml,離心,取沉淀,滴加丙酮,離心,取沉淀,烘干至恒重,即得CK、處理1、處理2、處理3蛋白質(zhì)的質(zhì)量。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 丹參對(duì)平菇菌絲體形態(tài)的影響。由表2可知,處理1、處理2較對(duì)照組菌絲形態(tài)無(wú)明顯變化,處理3較對(duì)照組相比菌絲較為稀疏。

    表2 添加不同比例的丹參對(duì)菌絲體形態(tài)的影響

    2.2 丹參對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)速度的影響。由表3可知,這四個(gè)處理中處理1生長(zhǎng)最快,但與CK比無(wú)顯著性差異,與處理2、處理3相比差異較為顯著;處理2最慢,與CK、處理1、處理3相比有顯著性差異。

    表3 添加不同比例的丹參對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)速度的影響

    2.3 丹參對(duì)平菇子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的影響。由表4可知,平菇單菇重由大到小依次為:CK>處理2>處理3>處理1。CK的單菇重為91.41g,高于試驗(yàn)組,與處理1、處理2、處理3相比有顯著性差異;處理1平均單菇重最輕,為71.05 g,與CK、處理2、處理3相比有差異顯著性。

    表4 添加不同比例的丹參對(duì)平菇單菇重的影響

    2.4 丹參對(duì)平菇子實(shí)體蛋白和多糖含量的影響。由表5可知,蛋白含量由大到小依次為:處理1>處理3>CK>處理2,其中處理1、處理2與CK相比有顯著性差異,而處理3與CK無(wú)顯著性差異;多糖含量由大到小依次為:處理2>處理1>CK>處理3,處理1、處理3與CK相比無(wú)顯著性差異,而處理2與CK相比差異顯著。

    表5 丹參對(duì)平菇蛋白和多糖含量的影響

    2.5 平菇中丹參的有效成分。經(jīng)檢驗(yàn),四個(gè)處理的蘑菇紫外吸收光譜沒(méi)有區(qū)別。由于紫外光吸收度是有加和性的,所以蘑菇提取液里沒(méi)有丹參素、丹酚酸和丹參酮等有效成分。

    3 結(jié)論與討論

    據(jù)試驗(yàn)結(jié)果得知,在平菇栽培料中添加丹參粉,會(huì)對(duì)平菇的生長(zhǎng)造成影響。在本試驗(yàn)的梯度范圍內(nèi)添加丹參粉,會(huì)對(duì)平菇菌絲的生長(zhǎng)產(chǎn)生一定的影響,至于影響的程度以及影響的利弊,還需后續(xù)更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑囼?yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。但添加丹參粉會(huì)對(duì)平菇子實(shí)體的單菇重產(chǎn)生一定程度的負(fù)面影響。同時(shí),對(duì)添加了丹參處理的平菇自然風(fēng)干后進(jìn)行蛋白、多糖和丹參有效成分含量的測(cè)定,發(fā)現(xiàn)添加丹參粉會(huì)提升平菇子實(shí)體的蛋白含量與多糖含量,而丹參的有效成分丹參素、丹酚酸和丹參酮均未檢測(cè)出,丹參酮IIa含量非常低。因此,為了更加全面的探究丹參對(duì)平菇子實(shí)體的的影響,還需進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)進(jìn)行論證。

    從物種分類(lèi)來(lái)看,平菇與丹參分屬兩大界,將二者結(jié)合轉(zhuǎn)化是有些困難的。本處理在栽培料中添加丹參,為國(guó)內(nèi)外學(xué)者將藥用植物應(yīng)用于誘導(dǎo)大型食用真菌次生代謝產(chǎn)物積累的研究與實(shí)踐提供了寶貴經(jīng)驗(yàn)。

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