基于標(biāo)準(zhǔn)煎液的忘憂安神口服液量值傳遞相關(guān)性研究△

汪莉，賈妙婷，孫天雄，馮慧敏，李玥，何軍剛，羅旭東，梁婷婷，強(qiáng)正澤，李成義

甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅 蘭州 730000

忘憂安神口服液是由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)李成義教授臨床經(jīng)典驗(yàn)方開(kāi)發(fā)而來(lái)的口服制劑，該方以經(jīng)典名方甘麥大棗湯為基礎(chǔ)方，由甘肅地產(chǎn)藥材黃花菜、甘草等多味藥食同源的中藥組方而成，具有清心安神、化濁調(diào)脂的功效，在治療情緒低落、失眠多夢(mèng)、食欲不振等亞健康癥狀上具有較好的臨床療效。

2017 年10 月，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局在《中藥經(jīng)典名方復(fù)方制劑標(biāo)準(zhǔn)煎液的申報(bào)資料要求（征求意見(jiàn)稿）》中，提出關(guān)于中藥材、中藥飲片與物質(zhì)基準(zhǔn)之間主要物質(zhì)群量值傳遞研究的概念。在研究過(guò)程中，應(yīng)以浸出物、含量測(cè)定、指紋圖譜或特征圖譜等為指標(biāo)，進(jìn)行中藥飲片及對(duì)應(yīng)實(shí)物間量值傳遞的分析[1]。近幾年，量值傳遞研究方法在經(jīng)典名方物質(zhì)基準(zhǔn)的研究及質(zhì)量控制方面得以廣泛應(yīng)用[2-5]，但并未與成品制劑制備過(guò)程中的技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)評(píng)價(jià)相結(jié)合。研究表明，常規(guī)的提取、醇沉、濃縮、配劑等工藝過(guò)程均會(huì)導(dǎo)致制劑中活性成分的損失[6]。本研究遵循經(jīng)典名方遵古溯源的研究思路[7]，以水為溶媒，采用水提醇沉法，制備10 批忘憂安神方標(biāo)準(zhǔn)煎液及口服液。對(duì)其指紋圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)、色譜峰指認(rèn)及歸屬分析，初步確定標(biāo)準(zhǔn)煎液及口服液的出膏率、指標(biāo)性成分含量及轉(zhuǎn)移率的質(zhì)量控制范圍，研究忘憂安神口服液制備工藝過(guò)程中主要物質(zhì)群量值傳遞相關(guān)性，探討活性成分的損失原因及減少其損失的方法，并結(jié)合口服液制備過(guò)程中的技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)，建立忘憂安神口服液制備工藝過(guò)程的評(píng)價(jià)方法，為忘憂安神口服液制備全過(guò)程的質(zhì)量控制及其他復(fù)方制劑生產(chǎn)工藝過(guò)程的實(shí)施提供參考。

1 材料

1.1 儀器

1260 型二極管陣列檢測(cè)器高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫科技有限公司）；CAV214C 型電子分析天平（美國(guó)奧豪斯公司）；TGL-20B-C型高速臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；YRE-301 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；101 型電熱鼓風(fēng)干燥箱（北京科偉永興儀器有限公司）；Milli-Q Century型超純水機(jī)（德國(guó)默克公司）。

1.2 試藥

對(duì)照品梔子苷、甘草苷、槲皮苷、甘草酸銨（上海源葉生物科技有限公司，批號(hào)分別為：Y25J9C53637、Z28M10X84164、P19D10F106420、P13A9L67602）純度均≥98%；甲醇、乙腈、磷酸均為色譜純（天津市大茂化學(xué)試劑廠）。

處方中黃花菜購(gòu)于各地藥材市場(chǎng)，其余飲片均采購(gòu)于各大零售藥店。黃花菜在《中華人民共和國(guó)藥典》（以下簡(jiǎn)稱《中國(guó)藥典》）2015 年版中未記載，經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院李成義教授鑒定為百合科萱草屬植物黃花菜Hemerocallis citrinaBaroni的干燥花蕾；其余飲片均符合《中國(guó)藥典》2015 年版規(guī)定，10 批標(biāo)準(zhǔn)煎液及10 批口服液均為實(shí)驗(yàn)室自制，各批標(biāo)準(zhǔn)煎液、口服液編號(hào)及其所對(duì)應(yīng)梔子、甘草、合歡花飲片信息見(jiàn)表1。

表1 忘憂安神方標(biāo)準(zhǔn)煎液、口服液及其對(duì)應(yīng)梔子、甘草、合歡花飲片信息

2 方法

2.1 指紋圖譜研究方法

2.1.1色譜條件 參照忘憂安神方前期研究[8]。

2.1.2供試品及對(duì)照品溶液的制備

2.1.2.1標(biāo)準(zhǔn)煎液樣品制備 分別稱取忘憂安神方處方飲片隨機(jī)組方，按忘憂安神方前期研究的最佳提取工藝提取并制備標(biāo)準(zhǔn)煎液（0.31 g·mL-1以生藥量計(jì)）T1～T10，冷藏備用。

2.1.2.2單味飲片制備 按照各單味藥在全方中的配比，分別稱取各單味藥，按2.1.2.1項(xiàng)下方法制備，備用。

2.1.2.3陰性對(duì)照制備 分別稱取除去各單味藥的其余飲片，按2.1.2.1項(xiàng)下方法制備缺失各單味藥的陰性對(duì)照溶液，備用。

2.1.2.4成品口服液樣品制備 分別稱取忘憂安神方處方飲片，10 批飲片隨機(jī)組方，按口服液制備工藝制備得10批成品口服液S1～S10，精密量取成品口服液0.62 mL，加水定容至10 mL（0.31 g·mL-1以生藥量計(jì)），備用。

2.1.2.5混合對(duì)照品溶液制備 分別精密稱取對(duì)照品梔子苷、甘草苷、槲皮苷、甘草酸銨適量，加甲醇配制成分別含梔子苷614 μg·mL-1、甘草苷92 μg·mL-1、槲皮苷195 μg·mL-1、甘草酸銨210 μg·mL-1的混合對(duì)照品母液。吸取對(duì)照品母液1 mL，加甲醇定容至5 mL，制成分別含梔子苷122.8 μg·mL-1、甘草苷18.4 μg·mL-1、槲皮苷39 μg·mL-1、甘草酸銨46.4 μg·mL-1的混合對(duì)照品溶液，即得。

2.1.2.6供試品溶液制備 依次精密吸取2.1.2.1項(xiàng)下的10批標(biāo)準(zhǔn)煎液樣品溶液、2.1.2.2項(xiàng)下的8個(gè)單味藥材樣品溶液，2.1.2.3項(xiàng)下的8 個(gè)陰性對(duì)照溶液，2.1.2.4項(xiàng)下的10 批成品口服液樣品溶液，各2 mL，置于10 mL量瓶中，加入水定容至刻度，搖勻，5000 r·min-1離心10 min（離心半徑為8 cm），取上清液，過(guò)0.45 μm 濾膜，即得標(biāo)準(zhǔn)煎液供試品溶液T1～T10、各單味藥供試品溶液、缺各單味藥的陰性對(duì)照溶液和成品口服液供試品溶液S1～S10。

2.1.3方法學(xué)考察

2.1.3.1精密度試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液（S1），按2.1.1項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6 次，記錄色譜圖，導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”（2012年版），計(jì)算指紋圖譜相似度。

2.1.3.2穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液（S1），按2.1.1下色譜條件分別于0、2、4、8、12、24 h 進(jìn)樣，記錄色譜圖，導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”（2012 年版），計(jì)算指紋圖譜相似度。

2.1.3.3重復(fù)性試驗(yàn) 精密吸取6 份S1 的樣品溶液，按2.1.2.6項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份，再按2.1.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”（2012 年版），計(jì)算指紋圖譜相似度。

2.1.4指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)、色譜峰歸屬及指認(rèn) 分別精密吸取10 批全方標(biāo)準(zhǔn)煎液、10 批成品口服液、各單味藥、各陰性樣品和對(duì)照品供試品溶液，按照2.1.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄圖譜。測(cè)定結(jié)果以AIA 格式依次導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”（2012年版）。分別以T1、S1為參照?qǐng)D譜，時(shí)間窗寬度為0.2 s，通過(guò)多點(diǎn)校正后，采用平均數(shù)相關(guān)系數(shù)法進(jìn)行圖譜自動(dòng)匹配，根據(jù)峰匹配結(jié)果，以峰面積和保留時(shí)間為參數(shù)，分別計(jì)算出10 批標(biāo)準(zhǔn)煎液、10 批口服液及口服液與標(biāo)準(zhǔn)煎液的相似度；將各單味藥、陰性對(duì)照、全方共有模式色譜峰進(jìn)行匹配，同時(shí)比對(duì)各共有峰保留時(shí)間及紫外光譜圖，確定各共有峰歸屬；對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)煎液、口服液、混合對(duì)照品指紋圖譜的出峰信息，進(jìn)行色譜峰的指認(rèn)。

2.2 指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率研究方法

2.2.1忘憂安神方含量測(cè)定色譜條件 參照前期文獻(xiàn)研究忘憂安神方含量測(cè)定色譜條件[8]。

2.2.2供試品及對(duì)照品溶液制備

2.2.2.1供試品溶液制備 依次精密吸取2.1.2.1項(xiàng)下的10 批標(biāo)準(zhǔn)煎液樣品溶液、2.1.2.4項(xiàng)下的10批成品口服液樣品溶液各2 mL，置于10 mL 量瓶中，加入70%甲醇溶解并定容至刻度，超聲處理（180 W，35 kHz）30 min，冷卻至室溫；70%甲醇再定容至刻度，搖勻，5000 r·min-1離心10 min（離心半徑為8 cm），取上清液，過(guò)0.45 μm 濾膜，即得標(biāo)準(zhǔn)煎液含量測(cè)定供試品溶液T1～T10、成品口服液含量測(cè)定供試品溶液S1～S10。

2.2.2.2對(duì)照品溶液制備 精密量取2.1.2.5項(xiàng)下混合對(duì)照品母液適量，逐級(jí)稀釋成質(zhì)量濃度分別為30.7、61.4、12.8、245.6、491.2、614.0 μg·mL-1的梔子苷；4.6、9.2、18.4、36.8、73.6、92.0 μg·mL-1的甘草苷；11.6、23.2、46.4、92.8、185.6、232.0 μg·mL-1的甘草酸銨；9.75、19.50、39.00、78.00、156.00、195.00 μg·mL-1的槲皮苷的混合對(duì)照品溶液。

2.2.3方法學(xué)考察

2.2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 取2.2.2.2項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液，按2.2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定梔子苷、甘草苷、甘草酸、槲皮苷色譜峰面積，進(jìn)行線性回歸。

2.2.3.2精密度試驗(yàn) 取S1 供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6 次，按2.2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，考察精密度。

2.2.3.3穩(wěn)定性試驗(yàn) 取S1 供試品溶液，分別在0、4、8、12、24、36 h，按2.1.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，考察穩(wěn)定性。

2.2.3.4重復(fù)性試驗(yàn) 取S1 供試品溶液6 份，按2.2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，考察重復(fù)性。

2.2.3.5加樣回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量的S1 標(biāo)準(zhǔn)煎液2 mL，加入適量的各對(duì)照品溶液，按2.2.2.1項(xiàng)下方法制備，按2.2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，計(jì)算4種指標(biāo)成分的加樣回收率。

2.2.4指標(biāo)成分含量測(cè)定方法 按照《中國(guó)藥典》2015 年版（一部）梔子、甘草、合歡花的含量測(cè)定方法測(cè)定其對(duì)應(yīng)飲片中梔子苷、甘草苷、甘草酸、槲皮苷的含量[9]。根據(jù)2.2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)煎液及口服液樣品中梔子苷、甘草苷、槲皮苷、甘草酸含量。

2.2.5指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率 根據(jù)2.2.4項(xiàng)下測(cè)定結(jié)果，計(jì)算各指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率。

其中，A為飲片中指標(biāo)成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)；B為全方標(biāo)準(zhǔn)煎液中指標(biāo)成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)；C為全方口服液中指標(biāo)成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

2.3 出膏率及傳遞率研究方法

取2.1.2.1 項(xiàng)下的10 批標(biāo)準(zhǔn)煎液樣品溶液，2.1.2.4項(xiàng)下的10 批成品口服液樣品溶液測(cè)定出膏率。

其中，Y為飲片投料量（g），V為全方標(biāo)準(zhǔn)煎液、口服液總體積，v為取樣體積，W為所得干膏量；傳遞率為口服液出膏率與標(biāo)準(zhǔn)煎液出膏率的比值。

3 結(jié)果與討論

3.1 指紋圖譜研究

3.1.1方法學(xué)考察 精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)中，得到的指紋圖譜的相似度均在0.9以上，表明儀器精密度、樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定性、方法重復(fù)性均良好。

3.1.2相似度評(píng)價(jià) 生成10 批標(biāo)準(zhǔn)煎液的高效液相色譜法（HPLC）指紋圖譜及其共有模式圖譜（R1，圖1），10 批口服液的HPLC 指紋圖譜及其共有模式圖譜（R2，圖2），進(jìn)行相似度計(jì)算（表2～3）。結(jié)果顯示，10 批標(biāo)準(zhǔn)煎液、10 批次口服液供試品色譜圖與各自對(duì)照指紋圖譜相似度分別為0.943～0.995、0.952～0.994，說(shuō)明本品的各工序樣品質(zhì)量穩(wěn)定性較好。以標(biāo)準(zhǔn)煎液的共有模式作為10批口服液S1～S10的參照?qǐng)D譜，10 批口服液指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)煎液共有模式圖譜R1 相似度為0.760～0.889，兩者之間的相似度差異主要由25號(hào)峰引起。經(jīng)核對(duì)，口服液中25號(hào)峰為制劑成型過(guò)程中加入的防腐劑苯甲酸鈉，即成品口服液中的苯甲酸鈉，若在兩者相似度評(píng)價(jià)時(shí)屏蔽25 號(hào)峰，則兩者的相似度可達(dá)到0.9 以上，表明標(biāo)準(zhǔn)煎液主要藥效物質(zhì)群基本傳遞到了成品口服液中，成型工藝穩(wěn)定可靠，可用于口服液生產(chǎn)。

表2 10批忘憂安神標(biāo)準(zhǔn)煎液與其共有模式的相似度

圖1 10批忘憂安神方標(biāo)準(zhǔn)煎液指紋圖譜及對(duì)照?qǐng)D譜

圖2 10批忘憂安神口服液指紋圖譜及對(duì)照?qǐng)D譜

表3 10批忘憂安神口服液與其共有模式及標(biāo)準(zhǔn)煎液共有模式的相似度

3.1.3共有峰確立及指標(biāo)成分標(biāo)定 將標(biāo)準(zhǔn)煎液的共有模式、口服液共有模式圖譜以及混合對(duì)照品圖譜進(jìn)行比較，見(jiàn)圖3。通過(guò)與混合對(duì)照品圖譜比對(duì)，確定17號(hào)峰對(duì)應(yīng)梔子苷、24號(hào)峰對(duì)應(yīng)甘草苷、26號(hào)峰為槲皮苷、35 號(hào)峰對(duì)應(yīng)甘草酸。10 批標(biāo)準(zhǔn)煎液確定了36 個(gè)共有峰，10 批成品口服液確定了36 個(gè)共有峰，標(biāo)準(zhǔn)煎液中的各峰在口服液指紋圖譜中均有體現(xiàn)，表明忘憂安神口服液成型工藝未造成標(biāo)準(zhǔn)煎液主要物質(zhì)群丟失，標(biāo)準(zhǔn)煎液中各物質(zhì)基本傳遞到口服液。同一批口服液中除25 號(hào)峰外，其他峰的峰面積整體＜標(biāo)準(zhǔn)煎液，原因可能是口服液成型過(guò)程中濃縮純化、pH 的改變等導(dǎo)致部分成分含量有一定損失。后期研究中可進(jìn)一步對(duì)濃縮、純化、pH 等關(guān)鍵工藝參數(shù)進(jìn)行考察，通過(guò)優(yōu)化調(diào)整工藝參數(shù)減少藥效成分的損失，提高忘憂安神口服液有效成分含量與穩(wěn)定性。

圖3 忘憂安神方標(biāo)準(zhǔn)煎液、口服液與混合對(duì)照品HPLC 圖

3.1.4色譜峰歸屬分析 各單味藥對(duì)共有峰的貢獻(xiàn)程度有所差異，其中君藥黃花菜及梔子、甘草、合歡花4 味中藥對(duì)共有峰貢獻(xiàn)較大，共有峰中13、14號(hào)單獨(dú)來(lái)源于黃花菜，16、23、24、30～36 號(hào)單獨(dú)來(lái)源于甘草，11、15、17、28、29 號(hào)單獨(dú)來(lái)源于梔子，26 號(hào)單獨(dú)來(lái)源于合歡花，其他各味藥雖然對(duì)共有峰貢獻(xiàn)不大，但在標(biāo)準(zhǔn)煎液及口服液中也均有體現(xiàn)，提示忘憂安神口服液主要藥效物質(zhì)群從飲片-標(biāo)準(zhǔn)煎液-口服液能逐級(jí)完整傳遞。

3.2 指標(biāo)成分含量及轉(zhuǎn)移率

3.2.1含量測(cè)定方法學(xué)考察 方法學(xué)考察內(nèi)容及結(jié)果見(jiàn)表4。結(jié)果顯示，忘憂安神方中梔子苷、甘草苷、槲皮苷、甘草酸含量測(cè)定方法線性、儀器精密度、方法重復(fù)性、樣品穩(wěn)定性及方法加樣回收率均良好。

表4 忘憂安神方中指標(biāo)成分含量測(cè)定方法學(xué)考察結(jié)果

3.2.2含量測(cè)定 飲片、標(biāo)準(zhǔn)煎液、口服液含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表5～9，結(jié)果顯示，不同批次梔子、合歡花飲片中梔子苷、槲皮苷平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為59.74、20.29 mg·g-1，RSD 分別為13.85%、25.58%，表明不同批次梔子、合歡花飲片質(zhì)量存在差異；不同批次甘草飲片中甘草苷、甘草酸平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為7.44、32.87 mg·g-1，RSD 分別為3.82%、3.87%，表明不同批次的甘草飲片質(zhì)量差異較小。10 批標(biāo)準(zhǔn)煎液中4 種指標(biāo)成分的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為45.90、5.16、19.01、9.96 mg·g-1，RSD 分別為14.61%、16.16%、7.90%、30.00%，10 批口服液中4 種指標(biāo)成分的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為38.47、3.86、14.24、9.18 mg·g-1，RSD 分別為19.41%、14.41%、10.13%、34.55%。

表5 10批梔子飲片中梔子苷含量測(cè)定結(jié)果（， n=3）mg·g-1

表5 10批梔子飲片中梔子苷含量測(cè)定結(jié)果（， n=3）mg·g-1

根據(jù)《古代經(jīng)典名方復(fù)方制劑物質(zhì)基準(zhǔn)申報(bào)資料要求（征求意見(jiàn)稿）》，不同批次標(biāo)準(zhǔn)煎液及口服液的指標(biāo)性成分含量及轉(zhuǎn)移率應(yīng)控制在其均值的70%～130%[10]，在進(jìn)行指標(biāo)性成分的含量及轉(zhuǎn)移率研究的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，部分批次標(biāo)準(zhǔn)煎液及成品口服液中槲皮苷的含量不在要求范圍內(nèi)（70%～130%），表明不同批次合歡花飲片質(zhì)量差異較大，這與10 批合歡花飲片含量測(cè)定結(jié)果相符，建議在后續(xù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)煎液及成品口服液的制備時(shí)，采取不同批次飲片混批投料的方式，以減小成品制劑批次間差異，確保忘憂安神口服液質(zhì)量的穩(wěn)定。

表6 10批甘草飲片中甘草苷、甘草酸含量測(cè)定結(jié)果（，n=3）mg·g-1

表6 10批甘草飲片中甘草苷、甘草酸含量測(cè)定結(jié)果（，n=3）mg·g-1

表7 10批合歡花飲片中槲皮苷含量測(cè)定結(jié)果（， n=3）mg·g-1

表7 10批合歡花飲片中槲皮苷含量測(cè)定結(jié)果（， n=3）mg·g-1

表8 10批忘憂安神方標(biāo)準(zhǔn)煎液4種成分含量測(cè)定結(jié)果（， n=3）mg·g-1

表8 10批忘憂安神方標(biāo)準(zhǔn)煎液4種成分含量測(cè)定結(jié)果（， n=3）mg·g-1

表9 10批忘憂安神口服液4種成分含量測(cè)定結(jié)果（， n=3）mg·g-1

表9 10批忘憂安神口服液4種成分含量測(cè)定結(jié)果（， n=3）mg·g-1

3.2.3指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率 口服液生產(chǎn)過(guò)程中，飲片-標(biāo)準(zhǔn)煎液-口服液指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率結(jié)果見(jiàn)表10。結(jié)果顯示，各生產(chǎn)環(huán)節(jié)間梔子苷、甘草苷、甘草酸、槲皮苷的平均轉(zhuǎn)移率分別為飲片-標(biāo)準(zhǔn)煎液：77.35%、69.45%、57.95%、48.67%；標(biāo)準(zhǔn)煎液-口服液：83.60%、75.92%、75.08%、91.69%；飲片-口服液：64.30%、51.82%、43.48%、44.43%，其中，除了合歡花飲片-標(biāo)準(zhǔn)煎液槲皮苷的轉(zhuǎn)移率偏低外，其他各成分在各產(chǎn)環(huán)節(jié)間的轉(zhuǎn)移率均較高。有研究表明，槲皮苷在70%的甲醇或乙醇中具有較好的溶解性[11]。本研究為了盡可能保持傳統(tǒng)工藝的完整性，在融合現(xiàn)代制備工藝特點(diǎn)的基礎(chǔ)上，按照古代醫(yī)籍記載方法，以水為溶媒制備標(biāo)準(zhǔn)煎液，這是導(dǎo)致槲皮苷從飲片至標(biāo)準(zhǔn)煎液的轉(zhuǎn)移率偏低的主要原因，后期可考慮對(duì)提取工藝進(jìn)一步優(yōu)化，以提高槲皮苷轉(zhuǎn)移率。而不同批次標(biāo)準(zhǔn)煎液及成品口服液中的梔子苷、甘草苷、甘草酸、槲皮苷的轉(zhuǎn)移率均在要求范圍內(nèi)（70%～130%），說(shuō)明實(shí)驗(yàn)前期標(biāo)準(zhǔn)煎液制備工藝及口服液的成型工藝可以實(shí)現(xiàn)梔子苷、甘草苷、甘草酸、槲皮苷含量的穩(wěn)定傳遞。因此，暫定飲片-標(biāo)準(zhǔn)煎液4 種成分的轉(zhuǎn)移率分別為61.65%～90.75%、49.99%～85.33%、51.35%～67.22%、40.26%～56.76%，標(biāo)準(zhǔn)煎液-口服液轉(zhuǎn)移率分別為68.08%～93.58%、58.61%～95.81%、67.00%～89.75%、81.15%～111.20%。

表10 飲片-標(biāo)準(zhǔn)煎液-口服液4種成分轉(zhuǎn)移率%

3.3 出膏率及傳遞率

飲片-標(biāo)準(zhǔn)煎液-口服液出膏率及傳遞率結(jié)果見(jiàn)表11，10 批標(biāo)準(zhǔn)煎液、口服液的平均出膏率分別為31.56%、20.04%，RSD 分別為7.99%、7.94%；標(biāo)準(zhǔn)煎液-口服液出膏平均傳遞率為63.54%，RSD 為4.49%，均未出現(xiàn)離散數(shù)據(jù)（平均值的70%～130%以外）。說(shuō)明忘憂安神方標(biāo)準(zhǔn)煎液及口服液制備過(guò)程的出膏率波動(dòng)不大，出膏傳遞穩(wěn)定，暫定標(biāo)準(zhǔn)煎液及口服液出膏率分別為28.79%～37.45%、18.30%～23.18%。

表11 飲片-標(biāo)準(zhǔn)煎液-口服液出膏率及傳遞率（， n=3）%

表11 飲片-標(biāo)準(zhǔn)煎液-口服液出膏率及傳遞率（， n=3）%

4 結(jié)論

忘憂安神口服液制劑處方由多種中藥組成，化學(xué)成分復(fù)雜，要同時(shí)建立其指標(biāo)成分含量測(cè)定方法及指紋圖譜難度較大，為了最大程度反映其轉(zhuǎn)移率高低及其藥效物質(zhì)群，本課題組前期研究反復(fù)考察了提取溶劑、檢測(cè)波長(zhǎng)、流動(dòng)相系統(tǒng)，分別建立了其指標(biāo)成分含量測(cè)定方法與指紋圖譜研究方法，采用“出膏率+指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率+指紋圖譜”與制備過(guò)程中技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)相結(jié)合的模式，實(shí)現(xiàn)了指標(biāo)成分及其他未知成分的全面控制。本研究對(duì)口服液生產(chǎn)的原料飲片-中間體-成品口服液的一系列生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行量值傳遞規(guī)律分析及標(biāo)準(zhǔn)煎液和成品口服液的質(zhì)量一致性評(píng)價(jià)，實(shí)時(shí)、全面地監(jiān)控口服液生產(chǎn)過(guò)程中各成分的變化特征，明確了關(guān)鍵生產(chǎn)環(huán)節(jié)，保證了成品制劑的質(zhì)量均一性及可溯源性，實(shí)現(xiàn)了口服液生產(chǎn)工藝的全過(guò)程質(zhì)量控制，整體說(shuō)明了忘憂安神口服液制備工藝具備較好的科學(xué)性與合理性，為口服液生產(chǎn)工藝過(guò)程的實(shí)施、成品口服液的質(zhì)量控制及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究提供了參考。后期研究可進(jìn)一步對(duì)提取、醇沉、濃縮等影響活性成分轉(zhuǎn)移率的工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化調(diào)整，減少活性成分的損失，提高忘憂安神口服液有效成分含量與穩(wěn)定性。