口腔清潔護理用品 牙膏功效評價 去除外源性色斑效果實驗室評價方法(T/ COCIA 7-2020)

前言

本文件按照《標準化工作導(dǎo)則 第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則(GB/T1.1-2020)》的規(guī)定起草。

本文件由口腔清潔護理用品工業(yè)協(xié)會提出。

本文件由全國口腔護理用品標準化技術(shù)委員會牙膏分技術(shù)委員會(SAC/TC 492/SC1)歸口。

本文件主要起草單位：國家輕工業(yè)牙膏蠟制品質(zhì)量監(jiān)督檢測中心、廣州質(zhì)量監(jiān)督檢測研究院、廣州薇美姿實業(yè)有限公司、好來(中山)化工有限公司、納愛斯集團有限公司。

本文件主要起草人：孫東方、謝宇、吳謙、郭長虹、賴海珍、鄭偉、陳敏珊、何琪瑩、徐項亮、劉文玉。

本文件為首次發(fā)布。

1 范圍

本文件規(guī)定了牙膏去除外源性色斑效果的實驗室評價方法。

本文件適用于牙膏去除外源性色斑效果能力的測定。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文件中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB 19342 牙刷

3 原理

牙齒表面存在一層附著力強的獲得性膜，細菌在牙齒分解食物或日常飲食中帶有深色的食物或飲料，如紅茶、醬油、巧克力、咖啡等會使獲得性膜著色，逐漸積累形成較難去除的外源性色斑。本方法采用牛牙作為底物，經(jīng)切割、樹脂鑲嵌、拋光制成規(guī)則磨塊，將其人工染色獲得外源性色斑，通過模擬刷牙過程，利用色差計測量牙齒顏色差異，評價牙膏去除外源性色斑效果能力。

4 試劑與材料

4.1 除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純，實驗用水均為GB/T 6682中規(guī)定的一級水。

4.2 胃粘蛋白：CAS號84082-64-4。

4.3 鹽酸。

4.4 無水碳酸鈉(Na2CO3)：純度≥99.8%。

4.5 植酸(C6H18O24P6)：(CAS號83-86-3)純度≥70.0%。

4.6 六水合三氯化鐵(FeCl3·6H2O)：純度≥90.0%。

4.7 義齒基托樹脂：Ⅱ型，Ⅰ類(自凝型，液)。

4.8 義齒基托樹脂：Ⅱ型，Ⅰ類(自凝型，粉)。

4.9 標準磨液。

4.10 牙膏漿液配制：稱取樣品牙膏600g(精確至0.01g)于2000mL的燒杯中，用960g的水溶解并攪拌至牙膏分散均勻。牙膏與水的質(zhì)量比為1∶1.6。

4.11 標準牙刷：質(zhì)量符合GB 19342的平毛牙刷，牙刷頭應(yīng)由約10mm長的尼龍絲制成，公稱絲徑0.2mm，尼龍絲末端全部處于同一個平面。

5 儀器和設(shè)備

5.1 刷磨儀：V8或L8刷磨儀或其他等效產(chǎn)品。刷磨儀機位至少8個，刷磨載荷及次數(shù)可調(diào)，刷磨載荷可控(精度0.1g)。

5.2 分析天平：精確至0.0001g。

5.3 染色儀：具有與電動機相連的轉(zhuǎn)輪，轉(zhuǎn)輪上有可以容納牙磨塊的載具，轉(zhuǎn)輪下方配有一定容量的水槽。

5.4 恒溫箱。

5.5 色差計：具有符合牙釉質(zhì)塊規(guī)格的孔徑。

5.6 自動攪拌器。

5.7 低速精密切割機。

5.8 磨拋機：具有連續(xù)型號的碳化硅研磨盤(最小600目)。

6 處理步驟

6.1 牙磨塊的制備

6.1.1 篩選及保存

挑選牛上頜恒切牙若干顆，要求根部無齲壞，頰側(cè)無白堊色斑塊、氟斑及肉眼可見缺陷、裂縫，牙齒至少14mm長，2mm寬，刮除所有軟組織殘留物，貯存于0.1%麝香草酚溶液或其他具有消毒作用但不改變牙齒物理性質(zhì)的中性溶液。

6.1.2 牙釉質(zhì)塊制備和鑲嵌

切除牛牙根部后，將牛牙釉質(zhì)部分切成5mm寬若干段，最終切割成5mm×5mm×2mm的牙釉質(zhì)塊(牙釉質(zhì)塊的規(guī)格可根據(jù)刷磨儀樣品裝載臺規(guī)格而定)。

根據(jù)所使用刷磨儀的樣品裝載臺規(guī)格，訂制合適的模具，將牙釉質(zhì)塊放入模具中，釉質(zhì)面朝外，倒入自凝樹脂(使用方法參照所購自凝樹脂說明書)使牙釉質(zhì)塊被完全包埋，且液面與模具厚度相平，待樹脂完全凝固后即制成牙磨塊。

6.1.3 牙磨塊拋光和酸蝕

水冷條件下，在磨拋機上使用P180砂輪將牙磨塊釉質(zhì)面打磨至完全露出，且牙磨塊表面水平，接著使用P600砂輪拋光(需注意避免過度磨蝕露出牙本質(zhì))。制備好的牙磨塊保存于去離子水中備用。

牙磨塊應(yīng)經(jīng)過輕微酸蝕以加快染色過程。取若干拋光后的牙磨塊，浸入1%鹽酸溶液中，攪拌60s，清水沖洗干凈；然后浸入飽和碳酸鈉溶液中，攪拌60s，清水沖洗干凈；最后浸入1%植酸溶液中，攪拌60s，清水沖洗干凈。

每次酸蝕需在染色前進行，酸蝕后即放入染色儀中進行染色。

6.2 染色

6.2.1 染色液的配制

首先用熱水將胃粘蛋白溶解，隨后加入咖啡、醬油、紅茶和氯化鐵，攪拌均勻，2℃～8℃保存?zhèn)溆?。染色液保質(zhì)期為3天。其他組分可按實際需求添加。

配制染色液體積按染色儀實際需要量確定，各組分最終濃度：胃粘蛋白2.5g/L、咖啡4.0g/L、醬油4.0g/L、紅茶4.0g/L、氯化鐵20mg/L。

6.2.2 牙磨塊染色

將酸蝕后的牙磨塊放入染色機中染色，染色過程環(huán)境保持37℃以模擬口腔環(huán)境，調(diào)節(jié)染色機轉(zhuǎn)速為2r/min使牙磨塊在染色液與空氣中循環(huán)交替，染色液應(yīng)每天更換。

染色后未開展試驗的牙磨塊保存于去離子水中備用。

6.3 刷磨處理

將標準牙刷頭和牙磨塊裝上刷磨儀后，設(shè)定刷磨儀往返頻率為100r/min，調(diào)節(jié)牙刷頭和桿總重量為(150±2)g，往各個漿料杯加入適量牙膏漿，使其浸沒牙磨塊。樣品組使用對應(yīng)樣品牙膏漿刷磨，標準磨液組使用標準磨液刷磨。啟動機器，往返刷牙800次。

7 計算結(jié)果與統(tǒng)計分析

刷牙前后牙釉質(zhì)白度值差值(ΔL*)按式(1)計算：

(1)

式中：ΔL*——刷牙前后牙釉質(zhì)白度值差值；

若樣品組與標準磨液組的差值(ΔL*)均符合正態(tài)分布，采用獨立樣本t檢驗分析顯著性差異，雙尾檢驗，檢驗水平α=0.05。若樣品組與標準磨液組的差值(ΔL*)不符合正態(tài)分布，采用兩獨立樣本秩和檢驗分析顯著性差異，雙尾檢驗，檢驗水平α=0.05。

8 評價結(jié)果

樣品組ΔL*小于標準磨液組ΔL*，但樣品組與標準磨液組差值(ΔL*)比較沒有顯著性差異(P>0.05)，或樣品組ΔL*大于標準磨液組ΔL*，可認為樣品牙膏具有去除外源性色斑效果。