非天然宿主感染偽狂犬病毒研究進展

陸瑩梅 ， 郭敏紅 ， 楊濤濤

(宜春學(xué)院生命科學(xué)與資源環(huán)境學(xué)院 ， 江西 宜春 336000)

偽狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)是導(dǎo)致偽狂犬病(Peudorabies或Aujeszky's disease)發(fā)生的病原。該病毒最早于1902年發(fā)現(xiàn)，因感染PRV的家兔表現(xiàn)出類似狂犬病的臨床癥狀(狂怒、奇癢)，被命名為偽狂犬病[1]。偽狂犬病現(xiàn)已成為對生豬健康及生豬產(chǎn)業(yè)具有重大危害的傳染病之一[2]。

豬(包括野豬)是PRV的天然宿主、貯存者和傳染源。通常情況下，野豬源性PRV毒株的毒力比家豬源性的毒力小，這可能是PRV高度適應(yīng)野豬群后與之共存的結(jié)果[3]。因此，臨床上PRV對野豬的致病性較低，感染后的癥狀不典型[4]。家豬感染PRV后的癥狀因日齡而異，哺乳仔豬和斷奶仔豬感染后死亡率可達100%；妊娠母豬感染后可致流產(chǎn)，產(chǎn)木乃伊胎和死胎；成年豬(除妊娠母豬外)一般為隱性感染，不表現(xiàn)臨床癥狀，但感染豬可長期攜帶病毒[2]。我國自20世紀(jì)70年代引進PRV弱毒疫苗Bartha-K61株后，養(yǎng)殖場開始普遍使用該疫苗，偽狂犬病在豬群中的危害才逐漸下降[5]。但從2011年開始，該病又嚴(yán)重反彈，后被證實為PRV變異株流行所致[6]。

除天然宿主豬之外，PRV的易感動物非常廣泛，能夠跨種傳播感染多種脊椎動物，其中包括常見的家畜(如牛、綿羊、山羊、狗、貓和馬等)及不常見的野生動物(野兔、野豬、雪貂、老虎、狐貍、浣熊、臭鼬和貂等)，非天然宿主感染PRV通常都是致死性的[7]。通常認為包括人類在內(nèi)的高級靈長類動物對PRV并不易感，但該觀點在2017年被人感染PRV的確切病例報道所打破[8-9]。

1 家畜感染PRV

1.1 反芻動物 家畜中反芻動物的偽狂犬病病例在牛、羊、馬上曾有報道。牛感染PRV后臨床上以發(fā)熱、瘙癢、不安、腦脊髓炎及急性死亡為主要特征。此外，病牛還會出現(xiàn)一系列神經(jīng)癥狀，包括嚎叫、共濟失調(diào)、循環(huán)運動、步態(tài)不穩(wěn)、流口水等。臨床病理變化局限于軟腦膜下充血，肺葉發(fā)生實變，其他臟器損傷不明顯。組織病理學(xué)變化包括典型的非化膿性腦膜腦炎，具體表現(xiàn)為單核細胞的圍管現(xiàn)象，神經(jīng)元壞死，神經(jīng)元周圍聚集小膠質(zhì)細胞和大腦的噬神經(jīng)元現(xiàn)象[10]。犢牛感染PRV后會對鼻孔或眼眶周圍組織造成損傷，并發(fā)展為以腦干為主的非化膿性腦膜腦炎，生發(fā)中心的無化膿性神經(jīng)節(jié)炎和急性淋巴性壞死[11]。

羊感染PRV后的臨床特征則包括發(fā)熱(一般達41～42 ℃)，精神沉郁，食欲廢絕，奇癢(摩擦或撕咬發(fā)癢部位)，出現(xiàn)一系列神經(jīng)癥狀(大量流涎、轉(zhuǎn)圈運動、運動失調(diào)、肌肉痙攣等)及急性死亡。妊娠母羊患病后容易發(fā)生流產(chǎn)或者產(chǎn)死胎。臨床病理變化可見病死羊口唇至臉部存在漿液性或漿液出血性浸潤，眼結(jié)膜充血，消化道黏膜發(fā)生充血、出血，肝臟、脾臟和淋巴結(jié)都有不同程度的腫大，且心外膜以及肺、胃黏膜上存在出血點或者出血斑，腎臟質(zhì)地較軟、瘀血，腦組織水腫，腦血管高度充血，腦膜、腦實質(zhì)充血，腦積液增多[12]。

馬感染PRV后臨床表現(xiàn)為出汗過多和明顯的神經(jīng)癥狀(肌肉顫抖和狂躁)，病理檢查主要為非化膿性腦膜腦炎[13]。將PRV接種小馬的結(jié)膜和鼻孔，7 d后小馬開始發(fā)燒，第9天出現(xiàn)嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀[13]。

研究表明，牛、羊感染PRV后可以向外排毒，但是不會引起其在畜群間發(fā)生水平傳播[11,14]。牛、羊的PRV感染主要是由豬的水平傳播所致，多個國家的偽狂犬病疫情都是由于豬、牛、羊在同一(或鄰近)農(nóng)場飼養(yǎng)引起的[15]。值得注意的是，鼠是PRV的重要攜帶者，在PRV的跨物種傳播過程中可能起到重要作用，鼠可以通過污染的飼料、飲水和用具散播病毒，在同時存在家豬、牛和羊的農(nóng)場內(nèi)起到連接豬和牛、羊的作用。此外，致弱的PRV毒株(如Bartha-K16株)同樣能造成偽狂犬病在牛、羊群中的暴發(fā)[16]。因此，在畜群發(fā)生偽狂犬病疫情之后緊急接種現(xiàn)有豬用PRV疫苗可能存在一定的風(fēng)險。

1.2 伴侶動物 伴侶動物的偽狂犬病病例在犬、貓上有過報道。犬感染PRV后的典型臨床癥狀有發(fā)熱、面部瘙癢伴面部擦傷、抑郁、嘔吐、唾液大量分泌、呼吸困難、腹瀉、癲癇、共濟失調(diào)、肌肉僵硬和死亡等。臨床病理變化為多臟器的廣泛充血和出血，心臟二尖瓣的血栓以及脾的不完全收縮。組織病理學(xué)變化包括腦干的非化膿性腦炎(軟腦膜，蛛網(wǎng)膜下腔和神經(jīng)纖維網(wǎng)有單核細胞浸潤，神經(jīng)細胞和星形膠質(zhì)細胞周圍有單核細胞聚焦，中心區(qū)域膠質(zhì)增生，神經(jīng)元變性，嗜酸性核內(nèi)包涵體的形成)，心臟、肺臟、胸腺和淋巴結(jié)的出血，肺水腫，肝臟的脂肪變性，胸腺和淋巴結(jié)淋巴細胞的排空以及急性腎炎[17-19]。貓感染PRV的臨床癥狀和病理變化與犬相似[20]。

犬感染PRV通常發(fā)生于打獵過程被野豬咬傷后，犬、貓食用生豬骨或生豬肉也有可能感染PRV[18-19,21]。此外，在暴發(fā)偽狂犬病的農(nóng)場(飼養(yǎng)豬、牛、羊等動物)內(nèi)也有過犬、貓感染PRV后死亡的案例[15]。

2 野生動物感染PRV

PRV能夠感染多種野生動物，但部分野生動物感染PRV的報道年代較遠，相關(guān)信息記錄不詳。浣熊感染PRV的臨床癥狀包括沉郁、局部皮膚強烈瘙癢、咳嗽、喘息、出現(xiàn)大量的口鼻分泌物以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂(包括驚厥、迷失方向、運動不協(xié)調(diào))。浣熊感染PRV后的病理表現(xiàn)不明顯，但能從死亡動物內(nèi)臟組織中分離到PRV[22]。

猞猁感染PRV后發(fā)病的主要臨床癥狀包括頸部脫毛(可能是由于瘙癢抓撓自身所致)和死亡。臨床病理變化包括大腦、胃和腸道的充血。組織病理學(xué)顯示有中度非化膿性腦膜炎、壞死性胃炎和小腸腸炎[23]。

狐貍感染PRV后會出現(xiàn)皮膚奇癢、發(fā)熱、厭食、嘔吐、流涎、呼吸困難、四肢麻痹、運動不協(xié)調(diào)、抽搐等癥狀，并呈致死性感染。臨床病理損傷局限于頭部，主要為皮下水腫及多處皮膚刮擦傷[24-25]。此外，有研究表明PRV減毒疫苗株同樣能夠感染狐貍，使其表現(xiàn)出致命的神經(jīng)損傷，伴隨有出血性胃炎和腸炎；組織病理學(xué)檢查表現(xiàn)為病毒性血管炎，腎小球毛細血管和小、中腎小動脈出現(xiàn)纖維素樣壞死[26]。

水貂感染PRV后發(fā)病的主要臨床癥狀有發(fā)熱、流涎、嘔吐、對外界刺激反應(yīng)增強、狂躁不安、食欲不振、呼吸急促、后肢癱瘓，繼而全身麻痹，后期出現(xiàn)嚴(yán)重的四肢癱瘓，發(fā)病1～2 d后死亡。臨床損傷包括肺臟、心臟、腎臟、脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、胸腺、胰腺、胃和腸道壁的腫大和出血。組織病理學(xué)變化包括腦干的非化膿性腦炎；在心肌、腦、腸壁或偶爾在身體的其他部位有透明蛋白和纖維蛋白樣變性和血管壁壞死，出現(xiàn)與血管病變相關(guān)的出血、血漿蛋白滲出和壞死；心臟和腦部均有微血栓；肺臟、肝臟淤血和出血；淋巴細胞壞死和血紅蛋白尿腎病[27]。

雖然多種野生動物均能感染PRV，但并不常見，且沒有證據(jù)表明PRV能在野生動物間傳播，因此野生動物一般被認為是PRV的“死胡同”宿主。到目前為止，大部分報道的野生動物偽狂犬病自然感染病例均與密切接觸感染了PRV的家豬或野豬相關(guān)，豬是野生動物感染PRV的源頭[22-26]。

此外，部分野生動物(如狐貍、水貂)常作為皮毛動物進行規(guī)?；曫B(yǎng)，有案例報道喂食含有PRV的生豬肉或內(nèi)臟會導(dǎo)致水貂偽狂犬病的暴發(fā)，其他潛在傳播途徑(包括直接接觸PRV感染豬、飲用PRV污染的水和喂食嚙齒動物)同樣可能引起皮毛動物感染PRV[28]。另外，豬用PRV弱毒疫苗對多種野生動物均具有致病性，在野生動物飼養(yǎng)過程中應(yīng)當(dāng)慎重使用[26]。

3 人感染PRV

長期以來，由于報道的由PRV感染引起的公共衛(wèi)生事件案例較少，且相關(guān)流行病學(xué)證據(jù)不足，對于人是否為PRV的易感群體這一問題業(yè)內(nèi)一直存在爭議。其實最早在1914年就有2名實驗人員由于暴露在PRV的污染物下導(dǎo)致發(fā)病的案例報道，感染者臨床癥狀較輕，主要為皮膚瘙癢，經(jīng)治療后痊愈[29]；此后相似的案例在1940年亦有報道，值得注意的是，該案例中研究人員將其中1位病人的血液接種家兔后能夠?qū)е录彝冒l(fā)生偽狂犬病，表明PRV感染人后能夠?qū)е缕涑霈F(xiàn)病毒血癥，這也進一步證實了人感染PRV的診斷結(jié)果[30]。在此后的1963年和1992年，出現(xiàn)了豬場和養(yǎng)牛場的養(yǎng)殖人員(或獸醫(yī))疑似PRV感染的報道[31-32]。此外，在1983年和1986年，有報道游客因密切接觸感染PRV的貓后出現(xiàn)疑似感染PRV的病例，并在病人的血清中發(fā)現(xiàn)了高水平的PRV中和抗體[33]。由于這些案例發(fā)生的時間均比較久遠，加之有其他的相關(guān)研究表明PRV并不太容易造成人類的感染(一項對455名疑似PRV感染者或PRV高風(fēng)險暴露人群的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，PRV特異性中和抗體均為陰性；此外，一項研究發(fā)現(xiàn)在自我接種高滴度PRV后并不會引起任何的臨床癥狀)[34]。因此，偽狂犬病所引起的公共衛(wèi)生事件的受關(guān)注程度一直不高。

自2017年復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院張文宏醫(yī)生團隊報道我國首例人感染PRV導(dǎo)致眼內(nèi)炎的臨床病例[9]以后，國內(nèi)多項研究報道了人發(fā)生PRV腦炎的臨床病例[35-39]。這些臨床案例對病人的臨床癥狀、檢測、治療和預(yù)后均進行了詳細的描述，臨床及流行病學(xué)特點總結(jié)如下：(1)PRV感染后通常會從最初的發(fā)熱、頭痛迅速發(fā)展為重癥腦炎或眼內(nèi)炎，甚至導(dǎo)致死亡；(2)康復(fù)后的病人會留下嚴(yán)重的神經(jīng)性后遺癥；(3)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，患者主要為長期從事生豬生產(chǎn)、加工和售賣等工作的人員；(4)大多數(shù)病人在發(fā)病前都有開放性的傷口。

自此，由PRV感染引起的公共衛(wèi)生事件受到了關(guān)注。經(jīng)收集到的文獻報道統(tǒng)計，2017年以來人感染PRV腦炎的病例有10余例，這些病例的確診一方面要得益于現(xiàn)代分子檢測手段(尤其是二代測序)在臨床病原診斷上的應(yīng)用和發(fā)展，另一方面也在于人感染PRV相關(guān)疾病被重新關(guān)注。由此看來，由PRV感染引起的公共衛(wèi)生事件很可能并不是突發(fā)的，其在人類中長期存在的可能性極大，而在此之前，相關(guān)病例報道較少的原因可能是人偽狂犬病的受關(guān)注程度不夠或者診斷證據(jù)不足。

4 展望

綜上所述，豬(包括野豬)是PRV的天然宿主、貯存者和傳染源，非天然宿主感染PRV通常都是致死性的，即使是豬源PRV疫苗弱毒株，對非天然宿主同樣具有致病性。此外，至今所有報道的非天然宿主動物偽狂犬病自然感染病例均與密切接觸感染了PRV的家豬或野豬相關(guān)，豬是感染的源頭，尚無證據(jù)表明PRV能在非天然宿主間傳播。

但值得重視的是PRV能跨物種傳播感染人，并能給感染者造成不可逆的損傷，甚至導(dǎo)致死亡[35-39]。雖然研究表明PRV跨物種傳播給人類的能力并不強，且未曾有過人傳人的病例報道，但對由PRV感染所導(dǎo)致的公共衛(wèi)生事件也要足夠地重視，尤其是對于從事養(yǎng)豬相關(guān)行業(yè)的人員及具有高暴露風(fēng)險的實驗人員，需要加強自身的生物安全和自我保護意識，做好職業(yè)防護，避免在有開放性傷口的情況下接觸潛在的PRV污染物。此外，從2011年開始，我國豬群暴發(fā)了由PRV變異毒株感染引起的偽狂犬病疫情[6]，這在一定程度上增加了相關(guān)行業(yè)人員的暴露風(fēng)險，有可能加劇PRV從豬到人的傳播。因此，加強豬場的生物安全防控，完善豬群的PRV疫苗免疫以及做好偽狂犬病的長期監(jiān)測和凈化，從而降低生豬PRV的感染風(fēng)險，對降低PRV由豬到其他宿主(包括人)的傳播風(fēng)險具有重要意義。