臍帶血IL-13水平與嬰兒濕疹的相關(guān)性分析

林裕慶，王文革，王丹丹，楊云月，譚漢旭

(1.中國(guó)人民解放軍空軍特色醫(yī)學(xué)中心兒科，北京 100142；2.河北北方學(xué)院研究生院，河北 張家口 075000)

嬰兒濕疹是比較常見(jiàn)的變態(tài)反應(yīng)性皮膚病。有研究認(rèn)為，在嬰兒時(shí)期發(fā)生濕疹的患兒后期發(fā)生過(guò)敏性鼻炎、哮喘等變態(tài)反應(yīng)性疾病的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)升高[1]。濕疹的發(fā)病機(jī)理尚未清晰，免疫學(xué)研究理論將輔助性T細(xì)胞(helper T cell，Th)1/Th2功能失衡視為其發(fā)病的關(guān)鍵機(jī)制，同時(shí)認(rèn)為白介素(interleukin，IL)-13是Th2細(xì)胞分泌的重要細(xì)胞因子，在濕疹等過(guò)敏性疾病的免疫反應(yīng)起中軸作用[2-3]。IL-13通過(guò)結(jié)合其受體后發(fā)揮免疫反應(yīng)，導(dǎo)致嬰兒濕疹等變態(tài)反應(yīng)性疾病的發(fā)生[3]。此外，胎兒的遺傳因素影響先天免疫功能，在母親宮內(nèi)時(shí)致敏抗原物質(zhì)刺激后，Th2細(xì)胞激活釋放IL-13等多種細(xì)胞因子介質(zhì)，誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)參與濕疹等過(guò)敏性疾病的發(fā)病過(guò)程[4-5]。有研究發(fā)現(xiàn)，剛出生新生兒的臍帶血中IL-13水平與臍帶血IgE水平呈顯著正相關(guān)，臍帶血IL-13水平的升高可能促進(jìn)了B淋巴細(xì)胞的活化及增值，促使淋巴細(xì)胞的同型轉(zhuǎn)化后，誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞分泌大量IgE，因此，臍帶血中IL-13與嬰兒濕疹的發(fā)生密切相關(guān)[6-7]。過(guò)敏性疾病早期常常表現(xiàn)為嬰兒濕疹，在生命早期進(jìn)行有效預(yù)測(cè)并做好相應(yīng)的預(yù)防措施可降低濕疹的患病率，進(jìn)而阻斷其過(guò)敏進(jìn)程，其為十分有意義的探索。然而，目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于臍帶血炎癥因子，如IL-13水平對(duì)嬰兒濕疹預(yù)測(cè)分析的相關(guān)報(bào)道較少。本研究通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay，ELSIA)法測(cè)定臍帶血IL-13水平，隨訪42天嬰兒并記錄濕疹的患病情況，分析臍帶血IL-13水平與嬰兒濕疹的關(guān)系，探討臍帶血IL-13水平對(duì)嬰兒濕疹的預(yù)測(cè)意義。

1資料與方法

1.1一般資料

2018年10月至2019年6月期間，中國(guó)人民解放軍空軍特色醫(yī)學(xué)中心婦產(chǎn)科共采集148例足月健康新生兒的臍帶血，在中心實(shí)驗(yàn)室用離心機(jī)以轉(zhuǎn)速為3 000r/min進(jìn)行5min離心后，用移液槍將臍帶血的上層血漿分離到編號(hào)的EP管，然后將EP管保存在-80℃的冰箱中。該研究已通過(guò)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審核。入選對(duì)象的監(jiān)護(hù)人均知曉并簽署知情同意書(shū)。

1.2研究方法

1.2.1基本信息的收集

在新生兒出生后，監(jiān)護(hù)人到婦產(chǎn)科登記信息，包括其出生日期、體重、身長(zhǎng)、性別、胎齡及分娩方式等；母親懷孕期間是否體健(有無(wú)妊娠合并貧血、妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓疾病、甲狀腺功能減退癥等疾病)、有無(wú)家族過(guò)敏史(有無(wú)濕疹，蕁麻疹、過(guò)敏性鼻炎、食物藥物過(guò)敏、哮喘等)等基本信息。

1.2.2新生兒臍帶血中IL-13水平的檢測(cè)

將保存在-80℃冰箱中的臍帶血取出，放置于常溫下，采用IL-13的ELSIA試劑盒檢測(cè)其水平(試劑盒產(chǎn)品批號(hào)：88-7439，Invitrogen公司)。

1.3隨訪42天嬰兒的內(nèi)容及分組

在嬰兒生后42天進(jìn)行隨訪，記錄濕疹的發(fā)生情況(有無(wú)濕疹，濕疹初次發(fā)生的時(shí)間、誘因、部位、程度、伴隨癥狀、治療情況)，詢問(wèn)家長(zhǎng)喂養(yǎng)方式、母親哺乳期是否進(jìn)食海鮮類食物及辛辣刺激性食物等)。診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《濕疹診療指南(2011年)》[8]。根據(jù)嬰兒是否患有濕疹將其分為濕疹組87例和無(wú)濕疹組61例。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1兩組一般情況的比較

在148例新生兒中，42天隨訪時(shí)有87例嬰兒發(fā)生濕疹，患病率為58.8%。兩組在家族過(guò)敏史、母親哺乳期進(jìn)食海鮮類食物、喂養(yǎng)方式方面比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，兩組在新生兒性別、出生身長(zhǎng)、出生體重、胎齡、分娩方式、母親孕期情況、母親年齡方面比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組一般情況的比較Table 1 Comparison results of general conditions between the two

2.2兩組臍帶血IL-13水平的比較

濕疹組的臍帶血IL-13水平明顯高于無(wú)濕疹組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.3影響嬰兒濕疹的危險(xiǎn)因素分析

將有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的家族過(guò)敏史、母親哺乳期進(jìn)食海鮮類食物、喂養(yǎng)方式和臍帶血IL-13水平作為自變量進(jìn)行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，有家族過(guò)敏史、母親哺乳期有進(jìn)食海鮮類食物、混合喂養(yǎng)、臍帶血IL-13高水平是影響濕疹發(fā)生的危險(xiǎn)因素，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表2 兩組臍帶血IL-13水平的比較[M(P25,P75)]Table 2 Comparison results of IL-13 levels in umbilical cord blood between the two groups[M(P25，P75)]

表3 嬰兒濕疹影響因素的Logistic回歸分析Table 3 Logistic regression analysis results of influencing factors of infantile eczema

2.4臍帶血IL-13水平對(duì)早期嬰兒濕疹的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC曲線結(jié)果顯示：臍帶血IL-13的曲線下面積(AUC)為0.712，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.045，95%CI：0.624～0.800，靈敏度為90.8%，特異度為49.2%，P<0.05，見(jiàn)圖1。

圖1 臍帶血IL-13水平與42天嬰兒濕疹的ROC曲線Fig.1 ROC curve of umbilical cord blood IL-13 and 42-day infant eczema

3討論

3.1嬰兒濕疹影響因素的分析

濕疹是嬰兒期最常見(jiàn)的皮膚病，為變態(tài)反應(yīng)性疾病的早期表現(xiàn)，且近些年來(lái)其發(fā)病率有不斷升高的態(tài)勢(shì)，影響著5%～20%的兒童[9]。中國(guó)疾病預(yù)防控制中心婦幼保健中心的研究顯示，我國(guó)0～2歲的嬰幼兒過(guò)敏性疾病患病率高達(dá)40.9%[10]。王召陽(yáng)等[11]隨訪了2011至2012年就診于北京市海淀婦幼保健院的2 177例42天嬰兒，有1 260例嬰兒發(fā)生濕疹，濕疹發(fā)病率為57.9%，不同地區(qū)濕疹發(fā)病率有著一定的差異。本研究入選148例嬰兒，42天隨訪發(fā)現(xiàn)有87例嬰兒患濕疹，濕疹患病率為58.8%。濕疹的發(fā)病原因復(fù)雜，由遺傳、免疫、飲食、環(huán)境等眾多因素相互作用，其中遺傳因素及免疫功能失衡被認(rèn)為是引起濕疹發(fā)病的關(guān)鍵因素[2，12]。大量研究證實(shí)濕疹有明顯的遺傳傾向，有家族過(guò)敏史其后代患有濕疹等過(guò)敏性疾病的風(fēng)險(xiǎn)也相應(yīng)升高[12]。本研究顯示家族過(guò)敏史在濕疹組與無(wú)濕疹組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；同時(shí)采用Logistic回歸分析家族過(guò)敏史與濕疹的關(guān)系，結(jié)果表明家族過(guò)敏史是影響濕疹發(fā)生的危險(xiǎn)因素。除遺傳因素外，近些年也有越來(lái)愈多的研究發(fā)現(xiàn)喂養(yǎng)方式、母親哺乳期飲食與嬰兒濕疹的發(fā)生有密切關(guān)系[13-14]。有文獻(xiàn)報(bào)道純母乳喂養(yǎng)的嬰兒濕疹發(fā)病率低于人工喂養(yǎng)或混合喂養(yǎng)的嬰兒[14]。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)母親哺乳期有進(jìn)食海鮮類食物的嬰兒濕疹發(fā)生率高于母親哺乳期未進(jìn)食海鮮類食物的嬰兒[13]。本研究顯示，母親哺乳期有進(jìn)食海鮮類食物、混合喂養(yǎng)的嬰兒濕疹發(fā)病率均高于母親哺乳期未進(jìn)食海鮮類食物及母乳喂養(yǎng)的嬰兒。經(jīng)Logistic回歸分析結(jié)果顯示，母親哺乳期有進(jìn)食海鮮類食物、混合喂養(yǎng)均是影響42天嬰兒濕疹發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素。因此，家族過(guò)敏史、母親哺乳期有進(jìn)食海鮮類食物、混合喂養(yǎng)均是影響濕疹發(fā)生的重要因素。

3.2嬰兒濕疹與IL-13的關(guān)系

濕疹發(fā)病原因復(fù)雜，有研究認(rèn)為Th1/Th2失衡在濕疹等過(guò)敏性疾病中起核心作用[2，15]。IL-13是Th2細(xì)胞激活后分泌的重要炎性細(xì)胞因子，在濕疹的發(fā)病中發(fā)揮中軸作用。IL-13與其受體相互結(jié)合后激活一系列免疫反應(yīng)，可使單核細(xì)胞表面主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex class Ⅱ，MHCIIB)及細(xì)胞膜CD23的水平升高，促使機(jī)體的B淋巴細(xì)胞被激活后生成肥大細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞，同時(shí)誘導(dǎo)機(jī)體內(nèi)生成IgE，IgE一旦與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞的Fcε段的受體結(jié)合后，可激活機(jī)體的初次免疫應(yīng)答，導(dǎo)致機(jī)體再次遇到類似的抗原刺激時(shí)，肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞迅速脫顆粒釋放多種活性物質(zhì)介導(dǎo)免疫炎癥反應(yīng)，從而引起濕疹等過(guò)敏性疾病的發(fā)生[2，5，16]。同時(shí)，機(jī)體IL-13水平升高可使淋巴細(xì)胞上皮Kazal相關(guān)抑制劑及人角質(zhì)形成細(xì)胞的絲聚合蛋白(filaggrin，F(xiàn)LG)水平下調(diào)，或FLG代謝有關(guān)的絲氨酸蛋白酶水平上調(diào)，使得FLG在機(jī)體內(nèi)表達(dá)減少，可破壞皮膚的屏障功能，從而促使機(jī)體的表皮增厚、皮膚纖維化，進(jìn)一步加重濕疹的進(jìn)展[17]。IL-13介導(dǎo)的免疫反應(yīng)引起機(jī)體皮膚的屏障功能損傷后，使得多種抗原物質(zhì)容易通過(guò)受損皮膚處進(jìn)入體內(nèi)，誘發(fā)一系列免疫炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步削弱皮膚屏障功能，加重了濕疹發(fā)展進(jìn)程[17-18]。因此，IL-13在濕疹的發(fā)病機(jī)理中有關(guān)鍵作用。臍帶血IL-13等炎性因子水平能反應(yīng)新生兒最早的免疫功能狀態(tài)，因此，研究臍帶血IL-13等免疫相關(guān)的炎性因子與嬰兒濕疹患病的關(guān)系，對(duì)嬰兒濕疹的早期防治具有重要的積極意義。

有研究表明，新生兒的臍帶血中Th1/Th2細(xì)胞水平失衡會(huì)增加?jì)雰簼裾畹幕疾★L(fēng)險(xiǎn)，臍帶血IL-13水平升高也與患有濕疹等過(guò)敏性疾病的危險(xiǎn)性有關(guān)[19]。樹(shù)葉等[7]和林榮軍等[20]應(yīng)用ELSIA法測(cè)定足月健康新生兒臍帶血IL-13水平，通過(guò)隨訪發(fā)現(xiàn)濕疹組的臍帶血IL-13水平高于無(wú)濕疹組，表明臍帶血IL-13水平與嬰兒濕疹的患病有關(guān)，這與本研究結(jié)果一致。臍帶血中IL-13等細(xì)胞因子水平反應(yīng)的是遺傳及環(huán)境等多種因素對(duì)母親體內(nèi)胎兒免疫功能的影響[6]。臍帶血IL-13水平升高表明胎兒在宮內(nèi)時(shí)已被母體的抗原物質(zhì)致敏，出生后的嬰兒遇到類似抗原物質(zhì)刺激后，易患有濕疹等變態(tài)反應(yīng)性疾病。所以有必要對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)的嬰兒進(jìn)行預(yù)測(cè)，并采取相應(yīng)的預(yù)防措施，有利于嬰兒的生長(zhǎng)發(fā)育，并對(duì)阻斷過(guò)敏進(jìn)程有重要意義。本研究發(fā)現(xiàn)，濕疹組臍帶血IL-13水平明顯高于無(wú)濕疹組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。采用Logistic回歸分析臍帶血IL-13對(duì)嬰兒濕疹發(fā)生的影響，結(jié)果表明臍帶血IL-13水平是影響嬰兒濕疹患病的重要因素。ROC曲線分析結(jié)果顯示，臍帶血IL-13的AUC為0.712、95%CI：0.624～0.800，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.045、靈敏度為90.8%，特異度為49.2%，說(shuō)明臍帶血IL-13水平與嬰兒濕疹的發(fā)生有關(guān)聯(lián)，且對(duì)嬰兒濕疹具有一定的預(yù)測(cè)作用。如果新生兒臍帶血的IL-13水平能作為過(guò)敏性標(biāo)志物，作為早期篩查指標(biāo)識(shí)別患有濕疹等過(guò)敏性高危兒，將對(duì)降低嬰兒濕疹的患病率、阻斷過(guò)敏進(jìn)程有重要意義。

綜上所述，臍帶血IL-13與嬰兒濕疹的發(fā)病有關(guān)，且臍帶血IL-13高水平是嬰兒患有濕疹的重要危險(xiǎn)因素。臍帶血IL-13水平對(duì)嬰兒濕疹的發(fā)生具有一定的預(yù)測(cè)作用，在預(yù)防、干預(yù)早期嬰兒濕疹等變態(tài)反應(yīng)性疾病方面具有積極意義。