KRTAP1-4基因多態(tài)性對(duì)隴東絨山羊羊絨性狀的影響

吳新苗，羅玉柱，趙孟麗，宋宜澤，沈繼源，喬莉蓉，胡麗妍，魯玉潔，王繼卿

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院/甘肅省草食動(dòng)物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/甘肅省牛羊基因改良工程實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州730070)

山羊皮膚毛囊由初級(jí)毛囊和次級(jí)毛囊構(gòu)成，其中次級(jí)毛囊產(chǎn)生羊絨纖維。山羊絨纖維纖細(xì)，手感輕柔，光澤明亮，是昂貴的紡織材料，可用于制造各種柔美、輕薄的紡織品。山羊的產(chǎn)絨性能包括產(chǎn)絨量及羊絨纖維直徑、長度、凈絨率、彎曲度等，這些性狀受遺傳和非遺傳因素的共同調(diào)控。因此，若能鑒定出調(diào)控這些性狀的功能基因，則可以應(yīng)用分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)對(duì)羊絨性狀進(jìn)行遺傳改良。

角蛋白關(guān)聯(lián)蛋白(keratin-associated proteins,KAPs)和角蛋白(keratins,Ks)是羊絨纖維的主要結(jié)構(gòu)成分，共同決定著羊絨纖維的理化性質(zhì)。根據(jù)KAPs中甘氨酸、酪氨酸和半胱氨酸含量(物質(zhì)的量百分比)的差異，可將其分為3種類型：含有35%～60%甘氨酸和酪氨酸的高甘氨酸/酪氨酸KAPs、半胱氨酸含量≤30%的高硫KAPs、半胱氨酸含量>30%的超高硫KAPs[1]。目前，在哺乳動(dòng)物上已鑒別出100多個(gè)KRTAPs基因，其中在山羊基因組中鑒別出了16個(gè)KRTAPs基因[2]。由于KRTAPs基因序列在物種間有一定的保守性，這表明山羊中大量的KRTAPs基因尚未被鑒定和研究。KAP1家族屬于高硫KAPs家族，在羊上由KAP1-1[3-4]、KAP1-2[5-6]、KAP1-3[7-8]和KAP1-4[9-10]4個(gè)成員組成。前人已檢測(cè)了綿羊和山羊KRTAP1-4基因的核苷酸序列變異[9-10]。已有研究表明，部分KRTAPs基因的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)對(duì)絨山羊的羊絨性狀有顯著影響。例如，Zhang等[4]發(fā)現(xiàn)，KRTAP1-1基因的SNP(g.688T>C)可提高遼寧絨山羊的產(chǎn)絨量；索朗達(dá)等[11]研究表明，山羊KRTAP8-2基因上的2個(gè)SNPs(c.214A>G和c.216G>A)與西藏絨山羊的產(chǎn)絨量相關(guān)；Zhao等[12]在隴東絨山羊KRTAP15-1基因上發(fā)現(xiàn)，等位基因A可以顯著降低羊絨纖維的直徑。另有研究發(fā)現(xiàn)，KRTAP6-2[13]、KRTAP8-1[14]等基因的SNPs可顯著影響山羊的絨長度和產(chǎn)絨量等性狀。但目前尚未見KRTAP1-4基因核苷酸序列變異對(duì)動(dòng)物毛絨性狀影響的研究。本研究采用聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性(polymerase chain reaction-single stranded conformation polymorphism，PCR-SSCP)、測(cè)序和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-PCR，RT-PCR)等技術(shù)，研究了KRTAP1-4基因在隴東絨山羊皮膚、腎臟、脾臟、肝臟、肺臟和心臟等6個(gè)組織中的表達(dá)譜，檢測(cè)了該基因的核苷酸序列變異，并分析了序列變異對(duì)隴東絨山羊羊絨性狀的影響，以期為隴東絨山羊羊絨性狀的分子選育提供有效的遺傳標(biāo)記。

1 材料與方法

1.1 材 料

在甘肅省環(huán)縣永峰養(yǎng)殖專業(yè)合作社，選擇11只無親緣關(guān)系的隴東絨山羊公羊作為父本，用人工授精技術(shù)對(duì)隴東絨山羊母羊進(jìn)行配種，在后代中隨機(jī)選擇382只隴東絨山羊，待其生長至1歲(約4月份)時(shí)，測(cè)定產(chǎn)絨量和絨層高度，并采集體側(cè)部的羊絨樣本，帶回實(shí)驗(yàn)室測(cè)量羊絨的平均纖維直徑。同時(shí)，頸靜脈采集試羊血樣，加入酸性檸檬酸葡萄糖，放入-20 ℃冰箱保存。

另外，選擇3只健康、周歲的隴東絨山羊母羊，在次級(jí)毛囊生長期屠宰后采集皮膚、腎臟、脾臟、肝臟、肺臟和心臟組織，用于構(gòu)建KRTAP1-4基因的表達(dá)譜。

1.2 KRTAP1-4基因在山羊6個(gè)組織中的表達(dá)特異性

用TRIzol試劑(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)分別提取皮膚、腎臟、脾臟、肝臟、肺臟和心臟組織的總RNA，用2%瓊脂糖凝膠電泳和超微量分光光度計(jì)分別檢測(cè)RNA的質(zhì)量和濃度。將質(zhì)檢合格的RNA用EvoM-MLV反轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄得到cDNA。依據(jù)GenBank中公布的綿羊的KRTAP1-4基因序列(GenBank登錄號(hào)：GQ507741.1)，針對(duì)其編碼區(qū)，設(shè)計(jì)引物P1；以山羊β-肌動(dòng)蛋白基因(β-actin)作為內(nèi)參，設(shè)計(jì)其引物。P1和β-actin引物信息見表1。采用20 μL體系進(jìn)行RT-PCR分析，包括Taq預(yù)混酶(大連)10 μL，上游和下游引物(0.25 μmol/L)各0.8 μL，cDNA(約50 ng/μL) 0.8 μL，ddH2O 7.6 μL。PCR擴(kuò)增條件為：94 ℃預(yù)變性5 min； 94 ℃變性30 s，57 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，35個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸7 min。對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行1.0%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。

表1 PCR引物信息Table 1 Information of PCR primers

1.3 KRTAP1-4基因的PCR-SSCP分析

1.3.1 PCR分析 參照GenBank中綿羊的KRTAP1-4基因序列(GenBank登錄號(hào)：GQ507741.1)，設(shè)計(jì)引物P2，擴(kuò)增山羊KRTAP1-4基因，具體信息見表1。采用苯酚-氯仿抽提法提取血樣基因組DNA。PCR擴(kuò)增山羊的KRTAP1-4基因，反應(yīng)體系為20 μL：Taq預(yù)混酶(大連)10 μL，上游和下游引物(0.25 μmol/L)各0.8 μL，血液基因組DNA模板(約50 ng/μL)0.8 μL，ddH2O 7.6 μL。PCR擴(kuò)增條件為：94 ℃預(yù)變性5 min； 94 ℃變性30 s，57 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，35個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸7 min。用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR擴(kuò)增效果。

1.3.2 SSCP分析 取SSCP上樣緩沖液9 μL，加入PCR擴(kuò)增產(chǎn)物1 μL，105 ℃變性10 min后，立刻放入冰水混合物中，快速上樣于10%、丙烯酰胺與甲叉雙炳烯酰胺體積比為39∶1的非變性聚丙烯酰胺凝膠中，在180 V、25 ℃(經(jīng)控溫室和冷循環(huán)儀雙層控溫)電泳液中電泳23 h后，用Byun等[15]的方法對(duì)凝膠進(jìn)行銀染顯色。

1.4 KRTAP1-4等位基因序列測(cè)定與進(jìn)化分析

用SSCP方法判定個(gè)體基因型是純合子還是雜合子。若個(gè)體基因型全部為雜合子，用Gong等[16]的方法切膠測(cè)序；若個(gè)體基因型中有純合子存在，則用PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接測(cè)序。為保證測(cè)序結(jié)果的準(zhǔn)確性，每種基因型均選擇3個(gè)不同的個(gè)體進(jìn)行測(cè)序。

基于山羊、綿羊和人類上所有已鑒定的高硫KAPs序列，用MEGA V5.0構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，進(jìn)化樹的置信度以500次自展分析進(jìn)行重復(fù)檢驗(yàn)。用于構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹的高硫KAPs序列為：gKAP13-1(AY510115)、gKAP24-1(MG996011)、gKAP3-1 (NM_001285774)、gKAP11-1(NM_001285767.1)、sKAP13-3(JN377429)、sKAP24-1(JX112014)、sKAP1-2(HQ897973)、sKAP11-1(HQ595347)、sKAP1-1、sKAP1-4(X01610)、sKAP15-1(KX817979)、sKAP26-1(KX644903)、sKAP1-3(X02925)、sKAP2-1(P02443)、sKAP2-3(P02441)、sKAP3-1(P02446)、sKAP3-2(P02444)、sKAP3-3(P02445)、hKAP1-1(NM_030967.2)、hKAP2-1(NM_001123387.1)、hKAP3-1(NM_031958.1)、hKAP11-1(NM_175858.2)、hKAP13-1(NM_181599.2)、hKAP15-1(NM_181623.1)、hKAP16-1(NM_001146182.1)、hKAP23-1(NM_181624.1)、hKAP24-1(NM_001085455.2)、hKAP25-1(NM_001128598.1)、gKAP1-3(JQ772533)、hKAP1-3(NM_030966.1)、hKAP1-4(NM_001257305.1)、hKAP1-5(NM_031957.1)、hKAP2-2(NM_033032.2)、hKAP2-3(NM_001165252.1)、hKAP2-4(NM_033184.3)、hKAP3-2(NM_031959.2)、hKAP3-3(NM_033185.2)、hKAP13-2(NM_181621.3)、hKAP13-3(NM_181622.1)、hKAP13-4(NM_181600.1)、hKAP26-1(NM_203405.1)、gKAP27-1(MN934937)和hKAP27-1(NM_001077711.1)，括號(hào)中數(shù)據(jù)為序列的GenBank登錄號(hào)，序列名稱中的g、s和h分別表示該序列為山羊、綿羊和人類的KAPs序列。用MEGA V5.0比對(duì)山羊和綿羊KRTAP1-4基因間的核苷酸序列差異，并分析山羊KAP1-4多肽鏈的氨基酸組成。

1.5 山羊KRTAP1-4基因的多態(tài)性

用GenBank在線BLAST功能比對(duì)序列同源性，用Popgen V32.0計(jì)算382只隴東絨山羊中KRTAP1-4的等位基因頻率、基因型頻率、遺傳雜合度(He)和有效等位基因數(shù)(Ne)，用PIC V0.6軟件計(jì)算多態(tài)信息含量(PIC)。

1.6 相關(guān)性分析

用Excel整理382只隴東絨山羊的表型觀測(cè)數(shù)據(jù)，用SPSS V22.0軟件分析產(chǎn)絨量、絨層高度和羊絨纖維直徑3種表型性狀間的Pearson相關(guān)性，以及KRTAP1-4基因型與羊絨性狀的相關(guān)性。對(duì)KRTAP1-4的優(yōu)勢(shì)基因型(在382只隴東絨山羊中的頻率>5%)，用一般線性混合效應(yīng)模型(general linear mixed-effects models，GLMMs)分析基因型與羊絨性狀間的相關(guān)性。研究表明，出生等級(jí)對(duì)產(chǎn)絨量、絨層高度和纖維直徑3個(gè)羊絨性狀沒有影響(P>0.05)，而父本和性別極顯著影響著羊絨性狀(P<0.01)。因此在GLMMs模型中，將性別和基因型作為固定效應(yīng)，父本作為隨機(jī)效應(yīng)[17]。由于所有羊只年齡相同(1歲)，且均飼養(yǎng)于同一環(huán)境條件，因此模型中沒有考慮年齡和環(huán)境因素。具體的GLMMs模型為Y=μ+S+G1+G2+e，其中Y為表型值，μ為性狀群體均值，S為父本，G1為基因型，G2為性別，e為隨機(jī)誤差。

2 結(jié)果與分析

2.1 KRTAP1-4基因的表達(dá)譜

RT-PCR發(fā)現(xiàn)，KRTAP1-4基因只在隴東絨山羊的皮膚中表達(dá)，在心臟、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟中均不表達(dá)(圖1)。

2.2 KRTAP1-4基因的PCR-SSCP分析

在382只隴東絨山羊中均擴(kuò)增出1條668 bp的DNA片段。經(jīng)SSCP分析，在隴東絨山羊上檢測(cè)到4個(gè)等位基因(A、B、C、D)和5種基因型AA、AB、AC、AD和BB(圖2)。

2.3 KRTAP1-4基因的進(jìn)化和核苷酸序列分析

進(jìn)化分析結(jié)果(圖3)顯示，本研究得到的4個(gè)等位基因序列與綿羊的KRTAP1-4序列的相似性較高，表明這些序列就是山羊KRTAP1-4的4個(gè)等位基因。

測(cè)序分析結(jié)果(圖4)顯示，在382只隴東絨山羊的KRTAP1-4基因中存在1個(gè)插入/缺失位點(diǎn)和2個(gè)SNPs位點(diǎn)(c.333T>C和c.573C>T)，2個(gè)SNPs位于編碼區(qū)域，均為同義突變；等位基因D的序列長度與綿羊KRTAP1-4的相一致；與等位基因D相比，等位基因A、B和C發(fā)生了30 bp堿基(c.223_252insTGCCAACCGATCTCCATCCAGA-CCAGCTGC)的插入，導(dǎo)致其所編碼的多肽鏈中存在10個(gè)氨基酸(p.73_82insSCCQPISIQT)的插入。

圖4還顯示，在山羊KRTAP1-4基因中發(fā)現(xiàn)了1個(gè)Chi序列(c.14-c.21；5′-CCACCAGC-3′，反向互補(bǔ)序列為5′-GCTGGTGG-3′)和2個(gè)Chi-like序列，它們分別位于c.46-c.53(序列為5′-ACTGGTGG-3′，反向互補(bǔ)序列為5′-CCACCAGT-3′)和c.392-c.399(序列為5′-GCACCAGC-3′，反向互補(bǔ)序列為5′-GCTGGTGC-3′)。

2.4 山羊KAP1-4的氨基酸組成

隴東絨山羊KRTAP1-4的等位基因A、B和C都編碼192個(gè)氨基酸，但等位基因D編碼182個(gè)氨基酸。在這4條多肽鏈中，共出現(xiàn)17種氨基酸，其中半胱氨酸含量(物質(zhì)的量百分比)最高(21.35%～22.39%)，其次為絲氨酸(13.02%～14.06%)和蘇氨酸(12.50%～13.02%)。

2.5 山羊KRTAP1-4基因的多態(tài)性

在隴東絨山羊上檢測(cè)到的基因型中，AA、AB、AC和BB為優(yōu)勢(shì)基因型，其頻率分別為69.37%，18.32%，5.50%和5.76%；AD基因型的頻率為1.05%。在發(fā)現(xiàn)的等位基因里，A的頻率最高(81.81%)，其余3種等位基因B、C和D的頻率分別為14.92%，2.75%和0.52%。382只隴東絨山羊的He和Ne值分別為0.25和1.44，PIC值為0.28，說明該群體處于中度多態(tài)(0.25

2.6 羊絨性狀間的相關(guān)性

Pearson相關(guān)性分析中，r代表系數(shù)，若|r|≤0.3則定義為弱相關(guān)，0.3<|r|≤0.7則定義為中等相關(guān)，|r|>0.7則定義為強(qiáng)相關(guān)；r為負(fù)數(shù)表示負(fù)相關(guān)，r為正數(shù)表示正相關(guān)。本研究3個(gè)羊絨性狀中，產(chǎn)絨量與平均纖維直徑(r=0.324，P<0.001)和絨層高度(r=0.465，P<0.001)呈中等正相關(guān)，平均纖維直徑與絨層高度呈弱的正相關(guān)(r=0.201，P<0.001)。

2.7 KRTAP1-4基因型與隴東絨山羊羊絨性狀間的相關(guān)性

在382只隴東絨山羊中，由于基因型AD的頻率小于5%，所以將其排除在相關(guān)性分析之外。相關(guān)性分析結(jié)果(表2)表明，BB型山羊的產(chǎn)絨量分別較AA、AB和AC型個(gè)體高66，38和58 g/只，其絨層高度分別較上述基因型個(gè)體高0.3，0.2和0.4 cm；KRTAP1-4的基因型對(duì)隴東絨山羊的羊絨平均纖維直徑無顯著影響(P>0.05)。

表2 KRTAP1-4基因型與隴東絨山羊羊絨性狀間的相關(guān)性Table 2 Association of KRTAP1-4 genotypes with cashmere fiber traits in Longdong cashmere goats

3 討 論

本研究發(fā)現(xiàn)，在采集的隴東絨山羊6個(gè)組織中，KRTAP1-4基因只在皮膚中表達(dá)，這與前人對(duì)山羊KRTAP20-1[18]、KRTAP20-2[19]和KRTAP15-1[12]的研究結(jié)果一致，也與KAPs是羊絨纖維的主要結(jié)構(gòu)成分的研究結(jié)果相一致，表明大多數(shù)KRTAPs基因只在皮膚中特異性表達(dá)。然而，少數(shù)KRTAPs基因也在皮膚以外的其他組織中表達(dá)，如KRTAP8-1基因在小尾寒羊肝臟、脾臟和腎臟中表達(dá)[20]，KRTAP11-1基因在遼寧絨山羊心臟和肝臟中表達(dá)[21]，提示KRTAPs的組織表達(dá)特征不能一概而論，應(yīng)針對(duì)每一個(gè)KRTAP基因?qū)ｉT開展研究。

本研究中，經(jīng)PCR-SSCP分析，隴東絨山羊KRTAP1-4中有4個(gè)等位基因，其中等位基因D的序列長度與綿羊KRTAP1-4的相一致，而等位基因A、B和C的序列發(fā)生了30 bp的堿基插入，導(dǎo)致了10個(gè)氨基酸的插入，這與Shah等[10]對(duì)克沃爾山羊KRTAP1-4的研究結(jié)果一致。然而，由于隴東絨山羊中等位基因D和基因型AD的頻率很低(分別為0.52%和1.05%)，所以未能研究這種堿基插入對(duì)隴東絨山羊羊絨性狀的影響。大片段的堿基插入/缺失這種序列變異在KRTAPs基因中較為常見，例如，在陜北白絨山羊KRTAP6-2中存在24 bp(c.119_142delCAGGATACGGCTGTGGATAC-GGTT)的堿基插入/缺失[22]，在綿羊上也報(bào)道了這種現(xiàn)象[3]。另外，本研究在隴東絨山羊的KRTAP1-4中還發(fā)現(xiàn)了c.333T>C和c.573C>T 2個(gè)SNPs位點(diǎn)。雖然它們是同義突變，未引起編碼氨基酸的改變。但同義突變可以通過影響蛋白質(zhì)翻譯準(zhǔn)確性和折疊結(jié)構(gòu)等多種形式，改變蛋白質(zhì)功能，進(jìn)而對(duì)表型產(chǎn)生影響[23-24]。對(duì)于c.573C>T，等位基因A、C和D在此處的堿基均是胞嘧啶(C)，而等位基因B的堿基是胸腺嘧啶(T)。相關(guān)性分析表明，BB型山羊的產(chǎn)絨量和絨層高度均最大，說明此SNP位點(diǎn)影響了絨山羊的產(chǎn)絨量和絨層高度，但是這個(gè)SNP通過何種生物學(xué)途徑影響羊絨性狀還需進(jìn)一步研究。值得注意的是，本研究在隴東絨山羊KRTAP1-4中發(fā)現(xiàn)了1個(gè)Chi和2個(gè)Chi-like序列，前人在山羊KRTAP27-1[25]、KRTAP15-1[12]和綿羊KRTAP2-1[26]等KRTAPs基因上發(fā)現(xiàn)了類似現(xiàn)象。Chi序列是一個(gè)八聚體，它是大腸桿菌DNA重組的熱點(diǎn)序列，能促進(jìn)10 kb以內(nèi)的區(qū)域發(fā)生序列重組[27]。Chi序列中的一個(gè)堿基變異便形成了Chi-like序列，它并不會(huì)影響重組活性。由此推測(cè)，Chi和Chi-like序列可能是KRTAP1-4基因多態(tài)性形成的重要機(jī)制之一，但這還需要進(jìn)一步深入研究。

前人已在其他山羊品種中研究了KRTAP1-4基因的多態(tài)性。例如，譚遙[28]在西藏絨山羊KRTAP1-4上發(fā)現(xiàn)了c.209C>T和c.245C>T 2個(gè)SNPs，其中c.245C>T為非同義突變。Shah等[10]在克沃爾山羊、卡吉爾山羊和帕什米納山羊KRTAP1-4上發(fā)現(xiàn)了7個(gè)SNPs，其中5個(gè)是同義突變。但是上述研究中發(fā)現(xiàn)的SNPs，在本研究中均未發(fā)現(xiàn)，說明該基因有較豐富的多態(tài)性。同時(shí)，本研究發(fā)現(xiàn)，山羊KRTAP1-4的多態(tài)性程度低于綿羊的KRTAP1-4基因。Gong等[9]在美利奴羊、羅姆尼羊、庫普沃斯羊和雜種綿羊4個(gè)群體的KRTAP1-4基因上檢測(cè)到9個(gè)非同義突變的SNPs位點(diǎn)，這可能與該研究使用的綿羊品種較多且含有雜種綿羊有關(guān)。

本研究中，隴東絨山羊KRTAP1-4基因編碼的多肽鏈中，半胱氨酸的含量(物質(zhì)的量百分比，下同)最高，為21.35%～22.39%，這符合高硫KAPs的典型特征[1]；其次是絲氨酸，含量為13.02%～14.06%。本研究中，隴東絨山羊KAP1-4的半胱氨酸含量高于同屬于高硫KAPs類型的KAP15-1(7.4%)[12]和KAP24-1(8.6%～9.0%)[29]，但其絲氨酸含量低于KAP15-1(20.6%～21.3%)和KAP24-1(15.6%)。半胱氨酸作為角蛋白合成的限制性氨基酸之一，與羊毛纖維彈性和彎曲度有一定的相關(guān)性[30]。絲氨酸易于發(fā)生磷酸化，作為蛋白質(zhì)翻譯后修飾的方式之一[31]，它在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中起主要作用[32]。KAPs中的半胱氨酸和絲氨酸含量對(duì)其生物學(xué)作用有影響[12,8]。

本研究中，KRTAP1-4的基因型對(duì)隴東絨山羊的產(chǎn)絨量和絨層高度有影響，而對(duì)平均纖維直徑?jīng)]有顯著影響，這種影響可能與性狀間的表型相關(guān)性有關(guān)。因?yàn)楸狙芯堪l(fā)現(xiàn)山羊產(chǎn)絨量與絨層高度呈中等正相關(guān)，這與對(duì)隴東絨山羊KRTAP20-2中的研究結(jié)果相一致[19]。本研究中，BB型山羊的產(chǎn)絨量和絨層高度極顯著高于其他基因型絨山羊(P<0.01)。因此在今后的育種實(shí)踐中，要選留BB型個(gè)體，從而提高隴東絨山羊的產(chǎn)絨量和絨層高度。在已有KRTAP1家族的研究中，KRTAP1-4的作用與KRTAP1-1和KRTAP1-2一致，但與KRTAP1-3不同。例如，KRTAP1-1基因與遼寧絨山羊的產(chǎn)絨量相關(guān)[4]，KRTAP1-2基因與美利奴雜種羔羊的產(chǎn)毛量相關(guān)[33]，而Chen等[34]發(fā)現(xiàn)，KRTAP1-3的多態(tài)性影響了中國美利奴羊的羊毛纖維直徑。這可能與這4個(gè)KRTAP1家族基因在染色體上的位置有關(guān)，因?yàn)镵RTAP1-4在染色體上的位置與KRTAP1-1、KRTAP1-2較近，而與KRTAP1-3較遠(yuǎn)。