野生兜蘭菌根真菌對(duì)帶葉兜蘭生長和生理指標(biāo)的效應(yīng)

陳寶玲, 楊開太, 龔建英, 唐慶, 蘇莉花, 汪小玉, 龍定建

野生兜蘭菌根真菌對(duì)帶葉兜蘭生長和生理指標(biāo)的效應(yīng)

陳寶玲, 楊開太*, 龔建英, 唐慶, 蘇莉花, 汪小玉, 龍定建

(廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院，南寧 530002)

為探究蘭科菌根真菌對(duì)帶葉兜蘭()生長的影響，用4個(gè)分離自廣西野生兜蘭根部的蘭科菌根真菌(、、sp.和sp.)與帶葉兜蘭試管苗和營養(yǎng)缽苗進(jìn)行菌-苗共生試驗(yàn)，對(duì)其生長和生理指標(biāo)的變化進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，接菌處理具有明顯的促進(jìn)生長作用和生理效應(yīng)，和sp.對(duì)試管苗的接種效果最佳，鮮質(zhì)量增量、3種保護(hù)酶活性和葉綠素總量均與對(duì)照存在顯著或極顯著差異，鮮質(zhì)量增加了360%～380%。、sp.對(duì)營養(yǎng)缽苗的接種效果最佳，鮮質(zhì)量增量、葉面積及3種保護(hù)酶活性均與對(duì)照存在顯著或極顯著差異，鮮質(zhì)量增加了261%～330%。因此，實(shí)際生產(chǎn)中可在帶葉兜蘭不同生長階段接種適當(dāng)菌株，sp.對(duì)帶葉兜蘭表現(xiàn)出較好的促生效應(yīng)，可研發(fā)為帶葉兜蘭育苗期通用型有益菌劑。

帶葉兜蘭；蘭科菌根真菌；生理特性；保護(hù)酶

兜蘭屬()是蘭科(Orchidaceae)植物中瀕危程度最高的類群，野生種群小、個(gè)體數(shù)量少、分布區(qū)域有限，兜蘭屬所有種均被列入野生動(dòng)植物瀕危物種國際貿(mào)易公約(CITES)附錄I的保護(hù)范圍[1-2]。由于兜蘭的自然繁殖力極低，成苗緩慢，導(dǎo)致兜蘭產(chǎn)業(yè)發(fā)展進(jìn)程遲緩。幾乎所有的蘭科植物都與菌根真菌有著共生關(guān)系。已有的研究表明，菌根真菌對(duì)蘭科植物具有獨(dú)特的生態(tài)功能，如促進(jìn)種子萌發(fā)和幼苗的形態(tài)建成，幫助蘭科植物的生態(tài)入侵，影響生物群落組成及制備特定功效的生物誘導(dǎo)子，利于生態(tài)系統(tǒng)的保護(hù)、恢復(fù)或重建等方面[3]。究其機(jī)理，近年來的研究發(fā)現(xiàn)，菌根真菌通過消化菌絲為胚細(xì)胞提供必需的營養(yǎng)，刺激植物產(chǎn)生赤霉素、IAA等激素，煙酸和煙酰胺等維生素，此外, 菌根真菌可在植物體內(nèi)合成植保素，進(jìn)一步激發(fā)SOD、POD、CAT和PAL等的活性[4]，增強(qiáng)宿主植物的抗性[5-6]，同時(shí)，當(dāng)菌根真菌定殖成功并成為有益的優(yōu)勢(shì)菌群后，釋放的拮抗物質(zhì)將有效增強(qiáng)蘭科植物的抗病能力，對(duì)于提高幼苗的成活率和促進(jìn)植株的生長具有重要意義，蘭科菌根真菌成為新的研究熱點(diǎn)，特別是在園藝學(xué)和植物保護(hù)學(xué)中的應(yīng)用和功效引起高度重視[7-9]，利用蘭科菌根真菌提高珍稀種類組培苗的移栽成活率、促進(jìn)植株生長及保育等方面已有研究報(bào)道[10-14]，如石斛屬()、金線蓮屬()、兜蘭屬、蘭屬()、五唇蘭屬()等，將菌根化育苗技術(shù)引入人工栽培后，顯著提高了幼苗移栽成活率、鮮質(zhì)量增長率、干物質(zhì)積累和礦質(zhì)元素吸收[7,15-16]，部分菌根真菌的代謝產(chǎn)物可分泌赤霉素、IAA等植物生長調(diào)節(jié)劑[17]。目前，兜蘭屬植物有關(guān)菌根真菌的研究主要在內(nèi)生真菌的分離、鑒定[18-24]、共生萌發(fā)[25]、專一性和多樣性[26]等方面，而蘭科菌根真菌與兜蘭屬植物共生的生長和生理效應(yīng)等研究鮮有報(bào)道。本研究將分離篩選到的蘭科菌根真菌與帶葉兜蘭試管苗及營養(yǎng)缽苗分別進(jìn)行共生培養(yǎng)，探討菌根真菌對(duì)帶葉兜蘭各生長階段生長和生理指標(biāo)的影響，明確蘭科菌根真菌的促生機(jī)理，應(yīng)用于菌根化育苗實(shí)踐中，促進(jìn)兜蘭種苗的快速繁育, 并縮短成苗周期，為珍稀瀕危植物的保育提供理論基礎(chǔ)，并為促進(jìn)兜蘭產(chǎn)業(yè)的規(guī)模化發(fā)展提供技術(shù)支撐。

1 材料和方法

1.1 材料

試管苗共生培養(yǎng)采用帶葉兜蘭()壯苗期生長健壯在DE培養(yǎng)基[10]中培養(yǎng)的無菌組培苗，具有3～4條根和3～4片葉。營養(yǎng)缽苗共生培養(yǎng)采用生根期的試管苗，具有5～6條根和4～5片葉，營養(yǎng)缽苗移栽基質(zhì)為松樹皮∶火山巖∶木炭(體積比)=4∶2∶1。

菌株P(guān)F01、PF02、PF06和PF07，其中PF01、PF06和PF07分離自廣西天峨縣野生帶葉兜蘭新鮮營養(yǎng)根中，PF02分離自廣西那坡縣野生紫紋兜蘭()新鮮營養(yǎng)根中，經(jīng)篩選均為帶葉兜蘭幼苗的益生菌株，經(jīng)根部重分離驗(yàn)證為菌根真菌。經(jīng)16S rDNA序列測定和分析，PF01為、PF02為、PF06為sp.、PF07為sp.。

1.2 方法

菌株活化 將4個(gè)菌株接種到PDA培養(yǎng)基平板上，置入光照培養(yǎng)箱28 ℃暗培養(yǎng)5～7 d活化菌株。

液體菌劑制備 用直徑5 mm的打孔器于活化的4個(gè)菌株菌落邊緣打孔制作成菌餅，將菌餅移入到盛有150 mL PDA液體培養(yǎng)基的三角瓶中，每瓶接種菌餅2～3塊，置于28 ℃140 r/min的搖床上培養(yǎng)10 d，然后過濾菌絲體，無菌水沖洗3～5次后，添加無菌水定容至300 mL，用組織搗碎機(jī)破碎5 min，最后用無菌水稀釋5倍, 即制成菌懸液。

營養(yǎng)缽苗處理 將生根60 d的試管苗置于大棚內(nèi)煉苗7～10 d后，洗去根部附著的培養(yǎng)基, 并用稀釋1 000倍的50%多菌靈可濕性粉劑水溶液浸泡10 min，置于陰涼處攤開晾干表面的水分，移栽入1.5寸塑料透明軟杯(口徑×高×底徑=5 cm×5 cm× 3.5 cm)。

試管苗接種菌株 將活化菌株用直徑5 mm的打孔器于菌落邊緣打孔取菌餅，無菌條件下將菌餅接種到HT-220組培瓶(220 mL，口徑×胸徑×高5.6 cm×6.9 cm×9.1 cm)中心，在周邊接種幼苗。培養(yǎng)室溫度為(25±2)℃，光照強(qiáng)度為25mol/(m2·s), 光照時(shí)間為12 h/d。2株/瓶，每處理30瓶，3次重復(fù)。共生培養(yǎng)120 d后，以瓶為單位統(tǒng)計(jì)鮮質(zhì)量、葉長、葉寬和平均根長等生長指標(biāo)。

營養(yǎng)缽苗接種菌株 于試管苗移栽當(dāng)天澆施第1次菌液10 mL/杯，以澆施等量無菌水為對(duì)照，以后每隔20 d澆施1次菌液，共澆施3～4次，期間停止施肥及用農(nóng)藥。移栽后隔5～7 d淋1次無菌水，期間視空氣濕度情況適當(dāng)進(jìn)行葉面噴霧，保持溫度(26±2) ℃，相對(duì)濕度70%～85%，遮陰率70%～ 80%。2株/杯，每處理30杯，3次重復(fù)。共生培養(yǎng)120 d后，統(tǒng)計(jì)幼苗移栽成活率、鮮質(zhì)量、葉長、葉寬和新根數(shù)等生長指標(biāo)。

生理指標(biāo)的測定 共生培養(yǎng)120 d后，采集新鮮葉片測定保護(hù)酶活性。超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和過氧化物酶(POD)活性的測定采用李合生[26]的方法；葉綠素含量用丙酮提取法[26]測定。均設(shè)3次重復(fù)。

蘭科菌根真菌的重分離 分別取接種菌株和不接種的帶葉兜蘭試管苗和營養(yǎng)缽苗若干，挑選新生根系，用0.1%的HgCl2溶液表面消毒1 min后，用無菌水清洗4次，然后采用組織塊分離法進(jìn)行菌根真菌的重分離，置于含1L/mL慶大霉素的PDA培養(yǎng)基上，28 ℃暗培養(yǎng)7～10 d，觀察根段的菌落生長情況。

1.3 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并采用DPS 7.05軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行Duncan’s新極復(fù)差檢驗(yàn)。

單葉葉面積(cm2)采用長寬系數(shù)法測定，校正系數(shù)采用復(fù)印稱重法[27]測定, 葉面積=葉長×葉寬×校正系數(shù)(0.8317)。

2 結(jié)果和分析

2.1 共生關(guān)系的建立

共培養(yǎng)120 d后，從接種菌株的試管苗根部重分離出相應(yīng)的4個(gè)原接種菌株，分離率為83.0%～ 92.5%，且未分離出其他菌株，而試管苗對(duì)照則未分離出任何菌株。從接種菌株的營養(yǎng)缽苗根部也重分離出相應(yīng)的原接種菌株，分離率為50.0%～65.0%,接種PF02菌株的營養(yǎng)缽苗中還分離出少量的鐮刀菌菌株(5.5%)，而在對(duì)照植株中主要分離到鐮刀菌菌株()，分離率達(dá)37.5%。說明原接種菌株與帶葉兜蘭幼苗形成了共生關(guān)系，確定為帶葉兜蘭的蘭科菌根真菌。

2.2 對(duì)生長的影響

共生培養(yǎng)120 d后，不同處理的帶葉兜蘭試管苗長勢(shì)、葉片和根系的表現(xiàn)明顯不同，且接種菌株試管苗顯示出明顯優(yōu)勢(shì)，但不同菌株間的鮮質(zhì)量增加不存在顯著差異(圖1)，然而接種菌株試管苗鮮質(zhì)量與對(duì)照的差異極顯著(<0.01)，提高了320.0%～ 380.0%。植株長勢(shì)表現(xiàn)出明顯差異，接種菌株的試管苗生長旺盛，而對(duì)照植株矮小(圖2)。接種菌株試管苗的根系明顯發(fā)達(dá)，長且粗壯，黃褐色，接種不同菌株的根系長度存在顯著或極顯著差異(圖3)。其中，接種PF07試管苗根系最長，達(dá)2.8 cm，其次是PF01和PF06，分別為2.3和2.2 cm，與對(duì)照的差異極顯著，比對(duì)照分別提高了129.5%、88.5%和80.3%，對(duì)照的根系短細(xì)，黃綠色。接種菌株試管苗的葉面積差異不顯著(圖4)，但接種PF01的葉面積增長量最大，葉片油綠且舒展，達(dá)1.11 cm2，其次是PF06和PF02，分別比對(duì)照提高了37.0%、22.2%和12.3%，葉片油綠，略下垂，而CK處理的葉片黃綠色。接種菌株后，試管苗快速生長，鮮質(zhì)量、新根長度和葉面積增長極顯著，接種PF01、PF07和PF06對(duì)帶葉兜蘭試管苗生長促進(jìn)效果最佳，其中，PF01極大提高了試管苗對(duì)培養(yǎng)基中水分的吸收, PF07顯著促進(jìn)了新根的生長，PF06促進(jìn)了試管苗葉片和新根的生長。

試管苗移栽與菌株共培養(yǎng)120 d后，帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗的生長表現(xiàn)顯著差異。接種PF06的鮮質(zhì)量增長最多，達(dá)到1.90 g，比對(duì)照提高了360.3%, 差異極顯著，比接種PF01的提高了66.4%，差異顯著(<0.05)，植株生長旺盛，根系粗壯，葉片深綠色、斜立且舒展；而接種PF02、PF07間的鮮質(zhì)量增長差異不顯著，但與對(duì)照的差異極顯著，分別提高了330.1%和261.6%。對(duì)照植株弱小，部分葉片出現(xiàn)黑斑病和軟腐病，根系短，葉片黃綠色、略翻卷且細(xì)長(圖5)。接種菌株的營養(yǎng)缽苗根系長度差異較大, 接種PF02菌株的營養(yǎng)缽苗根系最長，達(dá)6.47 cm, 比PF01和對(duì)照分別提高了102.8%和71.6%, 差異極顯著，且根系粗壯，分支較多；接種PF06和PF07的根系長度與接種PF01和對(duì)照的差異不顯著，每株3～5條根，根較細(xì)，分支較少(圖6)。接種菌株的營養(yǎng)缽苗葉面積差異顯著，以接種PF06的葉片最大，深綠色且舒展，達(dá)5.72 cm2，比CK提高了52.1%，差異極顯著，比接種PF07的提高了37.2%,差異顯著；其次是接種PF07菌株的葉面積為5.41 cm2, 比對(duì)照提高了43.9%，差異顯著，葉片略外彎，細(xì)長(圖7)。由此可見，生根試管苗移栽后，通過多次澆施菌株可較好的建立菌-苗共生關(guān)系，營養(yǎng)缽苗快速生長(圖8)，鮮質(zhì)量顯著增加，抵抗力增強(qiáng)。PF02和PF06對(duì)帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗生長的促進(jìn)效果最佳，PF02可促進(jìn)新根的伸長生長，PF06菌株的菌絲有利于擴(kuò)大根系對(duì)水分的吸收范圍，促進(jìn)生物量積累。

圖1 野生兜蘭有益真菌對(duì)帶葉兜蘭試管苗鮮質(zhì)量增長量的影響。**: P< 0.01; *: P<0.05。

圖2 帶葉兜蘭試管菌根苗和非菌根苗(CK)

圖3 野生兜蘭有益真菌對(duì)帶葉兜蘭試管苗新根長度的影響。**: P<0.01; *: P<0.05.

圖4 野生兜蘭有益真菌對(duì)帶葉兜蘭試管苗葉面積的影響

2.3 對(duì)生理指標(biāo)的影響

帶葉兜蘭試管苗與菌株共生培養(yǎng)120 d后，葉片POD、CAT、SOD活性和葉綠素總量均顯著提高，與對(duì)照有差異顯著或極顯著(表1)。接種PF06植株葉片的POD、CAT、SOD活性和葉綠素總量增長較大, 分別為116.40 U/g、263.07 nmol/g、1748.70 U/g和0.76 mg/g, 分別比對(duì)照提高344.1%、472.8%、256.4%和68.9%；接種PF01植株葉片的POD、CAT、SOD活性和葉綠素總量分別為60.36 U/g、512.98 nmol/g、1452.91 U/g和0.73mg/g，比對(duì)照分別提高130.3%、1016.9%、196.1%和62.2%，說明接種菌株有利于提高植株葉片的保護(hù)酶活性和葉綠素含量?？梢? 帶葉兜蘭試管苗接種菌株后形成菌根，保護(hù)酶活性呈動(dòng)態(tài)變化，植株的免疫效應(yīng)和光合效率提高, PF01與PF06對(duì)帶葉兜蘭試管苗生理指標(biāo)的促進(jìn)效應(yīng)最佳，PF01提高了CAT和SOD活性，PF06菌株提高了POD和SOD活性，且在顯著促進(jìn)植株鮮質(zhì)量增加時(shí)，光合效率也提高，保證了植株基本代謝進(jìn)程的穩(wěn)定。

圖5 野生兜蘭有益真菌對(duì)帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗鮮質(zhì)量增長量的影響。**: P<0.01; *: P<0.05.

圖6 野生兜蘭有益真菌對(duì)帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗新根長度的影響。*: P<0.05.

圖7 野生兜蘭有益真菌對(duì)帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗葉面積的影響。**: P<0.01; *: P<0.05.

帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗與菌株共生培養(yǎng)120 d后, 各生理指標(biāo)也不同程度的提高，說明菌株處理營養(yǎng)缽苗可顯著或極顯著增強(qiáng)3種保護(hù)酶活性，尤其是POD活性，但葉綠素總量的差異不顯著(表2)。接種PF06菌株的營養(yǎng)缽苗葉片POD、CAT和SOD活性大幅提高，分別為365.04 U/g、132.63 nmol/g和252.34 U/g，分別比對(duì)照提高了263.5%、242.4%和170.4%，差異極顯著；接種PF02的葉片POD、CAT、SOD活性分別為349.52 U/g、71.25 nmol/g和172.81U/g，比對(duì)照分別提高了248.1%、83.9%和85.2%，差異顯著或極顯著。這表明，帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗在與菌根形成共生過程中，營養(yǎng)缽苗葉片保護(hù)酶活性激發(fā)，提高了植株的免疫效應(yīng)，PF02與PF06對(duì)帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗生理指標(biāo)的促進(jìn)效應(yīng)最佳, PF06優(yōu)于PF02。然而在自然遮陰條件下, 活菌對(duì)營養(yǎng)缽苗葉綠素含量的促進(jìn)作用不顯著。

圖8 帶葉兜蘭營養(yǎng)缽菌根苗與非菌根苗(CK)

表1 接種兜蘭有益真菌對(duì)帶葉兜蘭試管苗生理指標(biāo)的影響

**:<0.01; *:<0.05.

表2 接種兜蘭有益真菌對(duì)帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗生理指標(biāo)的影響

**:<0.01; *:<0.05.

3 結(jié)論和討論

在長期的協(xié)同進(jìn)化過程中，蘭科植物與蘭科菌根真菌形成特異的菌物體系，許多真菌能夠與植物形成菌根，相互共生，彼此依賴。菌根真菌從蘭科植物根部獲取所需的碳水化合物和其他營養(yǎng)元素, 同時(shí)也為蘭科植物的生長發(fā)育提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)、酶等。菌根的有益作用能否充分發(fā)揮，決定于菌根真菌能否對(duì)宿主植物進(jìn)行有效侵染、定殖，以及菌根真菌的作用效果[5]。研究表明，龐大的菌絲網(wǎng)絡(luò)增加了植物根系的吸收面積，菌根的代謝活動(dòng)提高了蘭科植物對(duì)難溶不易被作物吸收礦物元素的吸收，產(chǎn)生的植物激素、維生素、氨基酸等代謝產(chǎn)物既能促進(jìn)植株生長，又可作為誘導(dǎo)因子激活并增強(qiáng)植株體內(nèi)保護(hù)酶活性及抗性[27-34]。SOD、POD和CAT是植物體膜系統(tǒng)的3大保護(hù)酶，其活性是鑒定植物抗逆性強(qiáng)弱的主要指標(biāo)[5-6]。

在本試驗(yàn)中，DE培養(yǎng)基作為試管苗共生培養(yǎng)基，碳氮含量低，營養(yǎng)相對(duì)貧瘠，帶葉兜蘭試管苗接種菌株后，生長加快，尤其是提高了試管苗的水分吸收能力，鮮質(zhì)量增長極顯著，說明保持真菌和幼苗適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)平衡是兜蘭屬植物適應(yīng)自然生境的關(guān)鍵。PF01與PF06對(duì)帶葉兜蘭試管苗生長和生理指標(biāo)的促進(jìn)效應(yīng)最佳，PF01極大提高了試管苗對(duì)于培養(yǎng)基中水分的吸收，激發(fā)了葉片CAT和SOD活性；PF06菌株促進(jìn)了試管苗葉片和新根的生長，激發(fā)了葉片POD和SOD活性，且提高了試管苗葉綠素總量。

而試管苗出瓶移栽后，PF02與PF06對(duì)帶葉兜蘭營養(yǎng)缽苗的生長和生理指標(biāo)的促進(jìn)效應(yīng)最佳, PF02促進(jìn)營養(yǎng)缽苗新根的伸長生長，PF06擴(kuò)大了根系對(duì)水分的吸收范圍，促進(jìn)生物量的積累，且提高了POD、CAT和SOD活性。這說明不同菌根真菌雖然對(duì)帶葉兜蘭不同生長階段幼苗的生長和生理指標(biāo)的促進(jìn)作用存在差異，但均有效提高了幼苗的生物量增長，同時(shí)激發(fā)了葉片保護(hù)酶活性，并也提高了植株的光合作用。這與前人[7,14,35-37]的研究結(jié)果一致，即不同菌根真菌對(duì)蘭科植物的促生效果不同，基質(zhì)水分含量和光照強(qiáng)度也會(huì)影響植株的生長與生理代謝[34,36]。

此外，本研究結(jié)果表明，4個(gè)菌株對(duì)帶葉兜蘭均不致病，但不同菌株對(duì)其生長的影響存在差異, PF06為瓶霉屬菌株，在2個(gè)苗期均表現(xiàn)出較穩(wěn)定的促生效果，大部分生長指標(biāo)顯著高于對(duì)照，說明該菌株的促生作用較為穩(wěn)定。PF01對(duì)營養(yǎng)缽苗的促生效果不明顯，但對(duì)試管苗的促生效果顯著，說明各菌株有最適宜的生長環(huán)境，PF01更適宜干擾較少的瓶內(nèi)菌苗共生條件。此外，PF06對(duì)營養(yǎng)缽苗生長指標(biāo)的促進(jìn)效應(yīng)比試管苗的大，這可能與營養(yǎng)缽苗植株較大，正處于旺盛生長期，再加上受戶外環(huán)境影響，可更多地吸收空氣中的水分和養(yǎng)分。這與謝玲等[11]對(duì)鐵皮石斛()共生研究的結(jié)果一致，深色有隔內(nèi)生真菌24L-4對(duì)組培苗和盆栽苗均表現(xiàn)出顯著的促生作用，但盆栽苗表現(xiàn)更好。因此，生產(chǎn)中可優(yōu)選在試管苗移栽后接種蘭科菌根真菌，此階段開展規(guī)?；?，不僅可高效建立共生關(guān)系，而且可操作強(qiáng)，生產(chǎn)效率高。

在本研究中，對(duì)植株促生效果最佳的菌株也有較好的生理效應(yīng)，保護(hù)酶活性和光合色素含量均提高，呈正相關(guān)效應(yīng)，可能是共生關(guān)系的建立促進(jìn)了帶葉兜蘭根系對(duì)養(yǎng)分和水分的吸收，蘭科菌根真菌分泌的淀粉酶能夠提高帶葉兜蘭的碳水化合物利用水平，加快營養(yǎng)吸收，生物量增長迅速，進(jìn)一步提高葉片的光合作用和光合產(chǎn)物的同化能力，從而提高了兜蘭幼苗的光合性能，同時(shí)，蘭科菌根真菌的合成功能促使菌絲團(tuán)產(chǎn)生多種植物生長調(diào)節(jié)劑、酶前體等有利于兜蘭生長發(fā)育的活性物質(zhì)[38]，這些又極大的促進(jìn)了植株的茁壯生長。

帶葉兜蘭對(duì)生長環(huán)境要求嚴(yán)格，今后應(yīng)進(jìn)一步深入研究了解兜蘭菌根特點(diǎn)，篩選優(yōu)良的兜蘭菌根真菌資源，尤其是PF06有望開發(fā)為兜蘭幼苗生長的通用菌株，進(jìn)一步研究其生物學(xué)特性，開展微生物互作、抗性和不同生長階段的保護(hù)酶活性研究, 以及探明活菌與菌株發(fā)酵液活性成分對(duì)兜蘭生長的促生機(jī)理，研發(fā)兜蘭的微生物菌肥，可提高帶葉兜蘭的種苗質(zhì)量，增強(qiáng)環(huán)境適應(yīng)性，擴(kuò)大生產(chǎn)和栽培區(qū)域，開展高效種植，將極大促進(jìn)兜蘭產(chǎn)業(yè)的規(guī)?；l(fā)展，同時(shí)，可為兜蘭的保育研究提供技術(shù)支撐。

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Effects of Wild Paphiopedilum Mycorrhizal Fungi on Growth and Physiological Indexes ofSeedlings

CHEN Baoling, YANG Kaitai*, GONG Jianying, TANG Qing, SU Lihua, WANG Xiaoyu, LONG Dingjian

(Guangxi Zhuang Autonomous Region Forestry Research Institute,Nanning 530002, China)

To investigate the effects of mycorrhizal fungi on the growth of, four strains, such as,,sp.andsp., isolated from roots of wild, were inoculated to tissue-cultured and potting seedlings offor 120 days, and then the changes in growth and physiological characters were studied.The results showed that the biomass and physiological indexes of tissue-cultured seedlings increase inoculated withandsp., the fresh weight, activities of three protective enzymes, and total chlorophyll content had significant differences compared with the control.Especially the fresh weight was more than control for 360%-380%.Two strains,andsp.had the best effect for the potting seedlings, which the fresh weight, leaf area, and activities of three protective enzymes had significant difference compared with the control, and the fresh weight increased 261%-330% than control.Therefore, appropriate strains could be inoculated toat different growth stages in actual production.sp., which showed a good promoting effect on, could be developed as a universal beneficial bacterial agent in seedling stage.

; Mycorrhizal fungi; Physiological index; Protective enzyme

10.11926/jtsb.4411

2021-03-12

2021-06-03

廣西自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2020GXNSFAA259028); 廣西重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(桂科AB18221003)資助

This work was supported by the Project for Natural Science in Guangxi (Grant No.2020GXNSFAA259028); and the Project for Key Research & Development in Guangxi (Grant No.AB18221003).

陳寶玲(1981～ )，高級(jí)工程師，碩士，主要從事蘭科植物的保育與繁育研究工作。E-mail: cbl_033@163.com

通信作者Corresponding author.E-mail:459306606@qq.com