• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    改性生物填料載體強化厭氧氨氧化反應器脫氮研究

    2022-02-23 08:19:46黃嘉豪劉桂文
    生物加工過程 2022年1期
    關(guān)鍵詞:改性生物

    黃嘉豪,劉桂文,朱 杰,陳 勇

    (1.南京工業(yè)大學 生物與制藥工程學院 國家生化工程技術(shù)研究中心,江蘇 南京211800;2.南京高新工大生物技術(shù)研究院有限公司,江蘇 南京210032)

    厭氧氨氧化是指厭氧氨氧化菌在無機厭氧條件下,以亞硝基氮(-N)作為電子受體,以氨氮(-N)作為電子供體,生成N2和少量硝基氮(-N)的 過 程[1]。與 傳 統(tǒng) 的 生 物 脫 氮 工 藝(硝化 反硝化工藝)相比,厭氧氨氧化工藝更適合處理現(xiàn)階段普遍存在的高氨氮和低碳氮比廢水,具有運行成本低、脫氮效率高、不造成二次污染等優(yōu)點[2],因此,該工藝日益受到廣大研究者的青睞并加以開發(fā)應用[3-4]。然而,厭氧氨氧化菌自身倍增時間較長(約11~14 d),其生長及代謝狀況極易受到外界環(huán)境的影響,從而使得厭氧氨氧化工藝無法在實際應用中得到進一步推廣。

    微生物固定化技術(shù)能夠在保持微生物生物活性的同時提高微生物對外界環(huán)境不利因素的抗逆性能[5],該技術(shù)在厭氧氨氧化工藝中已經(jīng)得到一定程度的應用[6-10]。不同生物填料載體的材質(zhì)及親/疏水性往往具有差異,這使得其表面形成生物膜的性能可能不同,對反應器性能的影響也具有差異[11-12]。針對微生物的生理特征,對普通的生物填料載體進行改性有利于進一步提高反應器的性能。至目前為止,研究者主要集中考察普通生物填料載體對厭氧氨氧化反應器脫氮性能的影響,而有關(guān)改性生物填料載體對厭氧氨氧化反應器脫氮性能的影響報道較少,考察改性生物填料載體對厭氧氨氧化反應器脫氮性能的影響在一定程度上能使微生物固定化技術(shù)在厭氧氨氧化工藝中得到進一步推廣。

    本研究以3個上流式厭氧污泥床(up-flow anaerobic sludge bed,UASB)反應器作為研究對象,其中2個UASB反應器內(nèi)分別填充改性活性炭聚氨酯及改性聚乙烯塑料填料2種不同的生物填料載體,剩余的反應器則不添加任何生物填料載體;通過提高進水(influent,Inf)基質(zhì)濃度或縮短水力停留時間(hydraulic retention time,HRT)的方式來提高反應器的容積負荷(nitrogenloading rate,NLR)。通過比較3個反應器脫氮性能的變化,對比分析改性生物填料載體對厭氧氨氧化反應器脫氮性能的影響。同時,從微觀方面闡述影響差異的原因,以期為改性生物填料載體在厭氧氨氧化工藝中的應用推廣提供一定的理論基礎(chǔ)。

    1 材料及方法

    1.1 試驗裝置

    試驗采用3個結(jié)構(gòu)和尺寸完全相同的UASB反應器作為厭氧氨氧化反應器,反應器的結(jié)構(gòu)如圖1所示,并命名為R1、R2及R0。其中R1為填充了活性炭聚氨酯的反應器;R2為填充了改性聚乙烯塑料填料的反應器;R0作為對照組,不投加任何改性生物填料載體。3個UASB反應器由有機玻璃制成,有效容積為1.8 L。反應器外帶有水浴夾套,由恒溫槽控制反應器內(nèi)溫度。同時,為了防止光源對厭氧氨氧化菌的活性產(chǎn)生影響,采用黑色海綿對反應器進行遮光處理。實驗室模擬廢水由BT-100蠕動泵從底部進入反應器,從沉淀區(qū)上部流出,整個反應系統(tǒng)連續(xù)運行。

    圖1 反應器結(jié)構(gòu)示意Fig.1 System of up-flow anaerobic sludge bed reactor

    1.2 生物填料

    選取筆者所在實驗室改性的2種生物填料載體作為厭氧氨氧化菌的掛膜載體,分別為活性炭聚氨酯和改性聚乙烯塑料填料。這2種生物填料均具有比表面積大、強度高、不堵塞、易掛膜并且價廉易得的優(yōu)點。2種改性生物填料載體的性質(zhì)如表1所示。向R1中投入活性炭聚氨酯,向R2中投入改性聚乙烯塑料填料,填充率均為70%。

    表1 2種生物填料載體的性質(zhì)Table 1 Properties of two biofilm carrier

    1.3 運行條件

    在實驗進行前,向3個厭氧氨氧化反應器接入等量的厭氧氨氧化污泥,接種量為10%。實驗開始時,調(diào)節(jié)進水的濃度和質(zhì)量濃度約為100 mg/L,然后通過分階段逐步提高進水的和濃度或縮短水力停留時間的方式來提高3個反應器的容積負荷,并分析2種改性生物填料載體對厭氧氨氧化反應器脫氮性能的影響。在試驗結(jié)束時,取出R1、R2及R0反應器的底泥及R1、R2內(nèi)的改性生物填料載體,對其進行脫氫酶活性檢測,并對微生物菌群結(jié)構(gòu)進行高通量測序。同時,使用掃描電子顯微鏡(SEM)對2種改性生物填料表面生物膜進行觀察,從微觀的角度解釋影響差異的原因。在整個試驗的過程中,控制反應器的運行溫度為35℃,進水pH約為8.0,其他反應器運行條件如表2所示。

    表2 實驗運行條件Table 2 Strategy of experimental operation___________________________________

    1.4 實驗廢水

    實驗采用人工配制的模擬廢水,其主要成分如表3所示。

    表3 模擬廢水組成成分Table 3 Components of synthetic wastewater

    1.5 分析項目及其方法

    1.5.1 進出水水質(zhì)分析

    進出水水質(zhì)測定所用的分析方法均參照文獻[13]所記載的方法,分別測定、和總氮等水質(zhì)參數(shù),并根據(jù)各氮素基質(zhì)在反應器進水和反應器出水(effluent,Eff)的質(zhì)量濃度差來計算各氮素基質(zhì)的去除率及反應器的容積去除率(nitrogen removal efficiency,NRE)等實驗指標,具體計算見式(1)~(5)。

    1.5.2 SEM分析

    實驗結(jié)束后,從R1、R2這2個反應器內(nèi)取出若干個生物填料載體,首先使用適量2.5%、pH7.2的戊二醛溶液浸泡,并于4℃冰箱內(nèi)固定過夜;然后使用0.1 mol/L、pH7.2的磷酸鹽緩沖液清洗3次以去除生物填料表面殘余的戊二醛;其次使用不同濃度的乙醇溶液對生物填料載體進行脫水處理,并用乙酸異戊酯進行置換;再次將置換后的生物填料載體置于真空冷凍干燥機中進行干燥;最后在生物填料載體表面鍍上1 500 nm厚度的金屬膜,使用SEM進行觀察。

    1.5.3 脫氫酶活性檢測

    在細胞呼吸過程中,作為氫受體的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)在脫氫酶作用下接受氫以后,便被還原為顯色為紅色的三苯基甲(TF)[14],其在485 nm波長下具有吸光值,根據(jù)吸光值可以計算出TF的生成量,從而算出脫氫酶(TTC-DHA)的活性。測定步驟如下:

    ①于厭氧氨氧化反應器的污泥床中取適量的菌泥,置于37℃烘箱中烘干(生物填料載體表面微生物的提取則是于反應器中取5~10個生物填料載體,使用磷酸鹽緩沖液進行浸泡,然后將其置于適當頻率的超聲波下進行提取,再將提取液置于37℃烘箱中烘干)。

    ②將樣品過270~550 μm篩,然后根據(jù)土壤脫氫酶檢測盒(蘇州科銘生物技術(shù)有限公司)說明書對2個反應器的底泥及生物填料載體表面微生物的脫氫酶活性進行檢測。

    1.5.4 微生物菌群結(jié)構(gòu)分析

    實驗結(jié)束后,從3個反應器中取出若干個生物填料載體及反應器底泥;使用干冰進行保存后,將樣品送至廣州基迪奧生物科技有限公司進行高通量測序,以分析2種生物填料載體表面微生物菌群組成差異。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 不同改性生物填料載體對厭氧氨氧化反應器脫氮性能的影響

    添加生物填料載體后,反應器性能的變化能夠最直觀地反映生物填料載體投加的作用,因此通過比較3個厭氧氨氧化反應器在不同容積負荷條件下的脫氮性能,可以分析出不同改性生物填料載體對厭氧氨氧化反應器脫氮性能的影響。

    不同容積負荷條件下,3個厭氧氨氧化反應器脫氮性能的變化情況如圖2和圖3所示。

    圖2 不同厭氧氨氧化反應器進出水氮素及其去除率變化情況Fig.2 Changes of nitrogen concentration and removal rate in different anammox reactors

    圖3 不同厭氧氨氧化反應器容積負荷、容積去除量及去除效率變化情況Fig.3 Changes of NLR,NRR and NRE in different anammox reactors

    為進一步探究2種改性生物填料載體對厭氧氨氧化反應器脫氮性能的影響,在第16天通過縮短反應器的水力停留時間來提高反應器的容積負荷。從圖2可以看出:此階段R0、R1、R2的去除率及其去除率均有所下降,3個反應器的去除率依次下降至76.81%、77.12%和87.00%;而亞硝酸鹽去除率則依次降低至76.85%、78.55%和79.88%;同時,3個反應器的脫氮效率也有所下降,在第20天時R0、R1、R2的脫氮效率依次為71.31%、71.62%和72.76%;這可能是由于在進水基質(zhì)剛提高不久后直接縮短了反應器的水力停留時間,部分進水及未來得及被厭氧氨氧化菌代謝而直接被排放出反應器,從而導致反應器出水基質(zhì)濃度變高,反應器脫氮性能有所下降[15]。

    2.2 2種改性生物填料載體表面生物膜SEM分析

    實驗結(jié)束后,從R1和R22個反應器中取出若干個改性生物填料載體,對其進行掃描電鏡觀察,結(jié)果見圖4。從圖4可以看出:2種改性生物填料載體表面布滿大量的球狀菌,它們之間緊密排列,并呈現(xiàn)厭氧氨氧化富集物的典型結(jié)構(gòu)——“花椰菜”結(jié)構(gòu)[24]。該掛膜效果僅僅使用了40 d,這說明本實驗室改性的活性炭聚氨酯及聚乙烯塑料填料對厭氧氨氧化菌具有較好的吸附性能,高夢佳等[25]發(fā)現(xiàn)塑料填料載體掛膜需要105 d,并且塑料填料表面生物膜的厭氧氨氧化活性明顯低于海綿載體,造成結(jié)果差異性的原因主要是因為所用的填料的電荷性能、親疏水性及粗糙程度等影響填料性能的重要參數(shù)[26]已經(jīng)過優(yōu)化設(shè)計,加強了改性生物填料載體對厭氧氨氧化菌的富集效果。一般而言,生物填料載體粗糙程度越大,親水性越強,越有利于微生物在生物填料載體表面形成生物膜[27]。高大文等[28]發(fā)現(xiàn)普通的聚氨酯泡沫海綿由于其表面光滑、比表面積較小且粗糙程度較低,該性質(zhì)并不利于微生物在其表面附著生長;高夢佳等[25]發(fā)現(xiàn)普通的塑料填料并不利于厭氧氨氧化菌的掛膜,在其實驗進行到第60天仍無法在普通塑料填料表面檢測到厭氧氨氧化活性。改性后的活性炭聚氨酯及聚乙烯塑料填料在一定程度上有利于厭氧氨氧化菌的吸附,分析其原因可能是:①向普通的聚氨酯泡沫海綿表面加入生物活性炭[29],生物活性炭對微生物較強的吸附作用能夠有利于微生物在聚氨酯泡沫海綿表面形成生物膜[30];②對聚乙烯塑料填料進行改性,增加其粗糙程度及親水性,從而加速微生物在聚乙烯塑料填料表面的掛膜過程。

    圖4 2種改性生物填料載體上生物膜的掃描電子顯微鏡圖Fig.4 SEM images of biofilms on two modified biological filler carriers

    由圖4可見:在2種改性填料表面除了觀察到球形菌外,還明顯可以觀察到絲狀菌的存在,與Berg等[31]在厭氧氨氧化顆粒污泥及厭氧氨氧化生物膜表面觀察到厭氧氨氧化菌及絲狀菌共存在的現(xiàn)象一致。絲狀菌對于惰性載體有很強的吸附作用,其存在有利于微生物的聚集,從而增加生物填料載體上的生物量。

    2.3 脫氫酶(DHA)活性檢測結(jié)果

    厭氧氨氧化菌將N2H4氧化為N2的過程中,將形成4個電子,該4個電子會在厭氧氨氧化菌內(nèi)形成質(zhì)子梯度來促使菌體自身合成ATP[32-33],而這種磷酸化水平在厭氧微生物體內(nèi)能夠通過脫氫酶的活性來進行表征[34]。張正哲[35]研究發(fā)現(xiàn):在反應器運行的整個過程中,厭氧氨氧化菌的活性(SAA)、heme C含量、TTC -DHA(脫氫酶活性)三者之間具有明顯的正相關(guān)關(guān)系,而厭氧氨氧化菌的活性與反應器的脫氮性能在一定程度上也呈正相關(guān)關(guān)系,因此可以通過脫氫酶(DHA)活性來表征厭氧氨氧化反應菌的活性及反應器的脫氮性能。

    3個UASB反應器的底泥及2種改性生物填料表面微生物的脫氫酶(DHA)活性如圖5所示。由圖5可以發(fā)現(xiàn):R1和R22個反應器底泥的脫氫酶活性均高于對照組,說明改性生物填料載體的投加能夠提高反應器內(nèi)厭氧氨氧化菌的活性,這可能是由于改性生物填料的添加,部分微生物在生物填料表面形成生物膜而得以保留在反應器內(nèi),反應器內(nèi)微生物之間的交流得到進一步加強,從而增強了厭氧氨氧化菌的活性。

    圖5 3個厭氧氨氧化反應器底泥及改性生物填料表面生物膜脫氫酶活性比較Fig.5 Comparison of dehydrogenase activity on sludge and biofilm in three anammox reactor

    2種改性生物填料生物膜所含微生物的脫氫酶活性大小也有所差異,改性聚乙烯塑料填料表面生物膜的脫氫酶活性高于活性炭聚氨酯的。DHA的活性不僅與功能微生物自身的活性有關(guān),與所測樣品功能菌群豐度及菌群構(gòu)成也具有一定的關(guān)系。聚烯烴類均為生物惰性材料,其生物相容性較差且對微生物的活性不具有促進作用。所用的改性生物填料的表面粗糙程度被改變并引入其他物質(zhì)增加載體的親水性,加速厭氧氨氧化菌等功能微生物在其表面形成生物膜的同時促進其表面微生物的活性,這與郭志濤等[36]的研究結(jié)果相似。郭志濤等[36]與海景等[27]發(fā)現(xiàn)改性后的聚烯烴類載體與未改性前相比,載體表面所形成的生物膜量明顯增加,反應器對污染物的去除能力也得到進一步增強。然而,活性炭的引入雖然加強聚氨酯填料對微生物的吸附,但是在聚氨酯表面形成的生物膜一般較厚、容易老化、脫落,使得載體表面所吸附的功能微生物數(shù)量部分喪失,并且生物膜活性往往較低。以上差異均可導致改性聚乙烯塑料填料表面生物膜脫氫酶活性高于活性炭聚氨酯。

    2.4 反應器底泥及改性載體表面微生物在屬水平上的菌群分析

    厭氧氨氧化反應器的脫氮性能不僅與反應器內(nèi)微生物的生物活性有關(guān),微生物的菌群結(jié)構(gòu)及功能菌群的豐度對反應器的脫氮性能也影響甚遠。改性生物填料載體的投加能夠?qū)Ψ磻鲀?nèi)部分微生物進行富集,增加其在反應器內(nèi)的豐度,進而使得反應器內(nèi)的性能發(fā)生變化。因此,通過對底泥及改性生物填料載體表面微生物進行高通量測序,能夠在微觀角度解析改性生物填料載體的投加對反應器脫氮性能造成影響的原因;同時通過比較改性填料載體表面功能菌群的豐度,可進一步比較改性生物填料載體的性能優(yōu)劣。

    以3個厭氧氨氧化反應器底泥及2種改性生物填料載體表面生物膜微生物在屬水平上的含量為縱坐標、物種名稱為橫坐標作圖,結(jié)果如圖6所示。已知厭氧氨氧化菌可大致分為5種,分別為Candidatus kuenenia[37]、C.anammoxoglobus[38]、C.jettenia[39]、C.scalindua[40-41]及C.brocadia[42-43],其中C.jettenia及C.anammoxoglobus在3個UASB反應器中和2種改性生物填料載體表面均可被檢測到,并且無論是底泥亦或者改性生物填料載體上,C.jettenia為其中優(yōu)勢厭氧氨氧化菌(圖6)。

    圖6 反應器底泥及填料載體表面微生物菌群結(jié)構(gòu)屬水平上的比較Fig.6 Composition of biofilm microorganismson two modified carriers and sludge in three

    由圖6可以看出:活性炭聚氨酯反應器及對照組的厭氧氨氧化菌豐度差異主要體現(xiàn)在活性炭聚氨酯上富集了一定數(shù)量的厭氧氨氧化菌;而投加改性聚乙烯塑料填料的厭氧氨氧化反應器,無論是底泥還是填料表面,其厭氧氨氧化菌的豐度都較活性炭聚氨酯反應器及對照組要高;投加改性聚乙烯塑料填料的反應器的底泥厭氧氨氧化菌豐度較對照組約高出50%。因此,投加了改性聚乙烯塑料填料的反應器在相同容積負荷條件下,其脫氮性能往往是最高的,活性炭聚氨酯次之,而最差的則為對照組。上述結(jié)果也表明改性聚乙烯塑料填料的投加能夠更為有效促進厭氧氨氧化菌的富集。該結(jié)論與高夢佳等[25]的研究結(jié)果相反,可能是由于所用填料經(jīng)目的性地改性后,增加了其對厭氧氨氧化菌的富集效果。

    綜合3個厭氧氨氧化反應器的脫氮性能、脫氫酶活性及微生物菌群結(jié)構(gòu)分析結(jié)果可知:2種改性生物填料載體的投加對厭氧氨氧化反應器的脫氮性能均有一定的促進效果;并且相比于活性炭聚氨酯生物填料而言,無論是在對反應器脫氮性能的提高方面還是對厭氧氨氧化菌的富集方面,改性的聚乙烯塑料填料的效果明顯較好。

    3 結(jié)論

    1)向厭氧氨氧化反應器內(nèi)投加活性炭聚氨酯和改性的聚乙烯塑料填料均能在一定程度上提高厭氧氨氧化反應器的脫氮性能,并且相比于活性炭聚氨酯生物填料,改性聚乙烯塑料填料對厭氧氨氧化反應器脫氮性能的提高效果更為明顯。隨著反應器容積負荷的提高,3個反應器的脫氮性能開始出現(xiàn)差異,投加改性生物填料載體反應器的脫氮性能往往高于未投加改性填料載體的反應器;當反應器容積負荷提升至1.37 kg/(m3·d)時,添加活性炭聚氨酯及改性聚乙烯塑料填料的反應器,其總氮去除率仍分別為76.41%和82.89%,而未添加改性生物填料的反應器總氮去除率僅剩70.26%,改性聚乙烯塑料填料對厭氧氨氧化性能的強化最為顯著。

    2)通過掃描電子顯微鏡可在2種改性生物填料載體表面觀察到明顯的花椰菜結(jié)構(gòu),說明2種改性生物填料載體對厭氧氨氧化菌均具有良好的吸附效果。

    3)投加改性填料載體的反應器底泥的脫氫酶活性均高于對照組,說明改性生物填料載體的投加能夠提高反應器內(nèi)厭氧氨氧化菌的活性。然而相對于活性炭聚氨酯而言,改性聚乙烯塑料填料表面生物膜的脫氫酶活性明顯較高,脫氮效率最佳;反應器底泥及改性填料載體表面微生物脫氫酶活性差異導致3個厭氧氨氧化反應器脫氮性能不同。

    4)通過高通量測序?qū)?個反應器底泥及2種改性生物填料載體表面微生物進行菌群構(gòu)成分析,發(fā)現(xiàn)投加改性生物填料的反應器,其厭氧氨氧化菌的總豐度高于對照組,說明改性生物填料的投加能夠增加反應器對功能菌群的持留;并且投加改性聚乙烯塑料填料的反應器,底泥及填料表面厭氧氨氧化菌的豐度都明顯較高,說明改性聚乙烯塑料填料在促進反應器性能等各方面都具有較強的優(yōu)勢。

    猜你喜歡
    改性生物
    生物多樣性
    天天愛科學(2022年9期)2022-09-15 01:12:54
    生物多樣性
    天天愛科學(2022年4期)2022-05-23 12:41:48
    上上生物
    發(fā)現(xiàn)不明生物
    科學大眾(2021年9期)2021-07-16 07:02:54
    史上“最黑暗”的生物
    軍事文摘(2020年20期)2020-11-28 11:42:50
    第12話 完美生物
    航空世界(2020年10期)2020-01-19 14:36:20
    P(3,4HB)/PHBV共混改性及微生物降解研究
    中國塑料(2016年12期)2016-06-15 20:30:07
    我國改性塑料行業(yè)“十二·五”回顧與“十三·五”展望
    中國塑料(2016年5期)2016-04-16 05:25:36
    聚乳酸的阻燃改性研究進展
    中國塑料(2015年3期)2015-11-27 03:41:38
    ABS/改性高嶺土復合材料的制備與表征
    中國塑料(2015年11期)2015-10-14 01:14:14
    国产精品美女特级片免费视频播放器| 亚洲,欧美,日韩| 精品久久久噜噜| 99久久精品一区二区三区| 黄色配什么色好看| 看片在线看免费视频| 久久久精品大字幕| 午夜久久久久精精品| 男女那种视频在线观看| 免费看日本二区| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 99热这里只有是精品50| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲性久久影院| 国产精品综合久久久久久久免费| av天堂中文字幕网| 国产爱豆传媒在线观看| 国产精品无大码| 日本精品一区二区三区蜜桃| 一夜夜www| 最近中文字幕高清免费大全6 | 国产精品免费一区二区三区在线| 国产一区二区三区视频了| 午夜影院日韩av| 婷婷色综合大香蕉| 国产精品,欧美在线| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 欧美激情在线99| 午夜精品在线福利| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产大屁股一区二区在线视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 老司机深夜福利视频在线观看| 久久香蕉精品热| 日日啪夜夜撸| 天堂动漫精品| 91在线精品国自产拍蜜月| av视频在线观看入口| 午夜精品在线福利| 好男人在线观看高清免费视频| 国产成人影院久久av| 最近在线观看免费完整版| 亚洲一区高清亚洲精品| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 联通29元200g的流量卡| 尾随美女入室| 在线a可以看的网站| 男人舔奶头视频| 男人舔女人下体高潮全视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲国产欧美人成| 亚洲精品影视一区二区三区av| 久99久视频精品免费| 亚洲av电影不卡..在线观看| 看免费成人av毛片| avwww免费| 日日干狠狠操夜夜爽| 老司机福利观看| 日本熟妇午夜| 久久久久久久久大av| 午夜老司机福利剧场| 国产精品永久免费网站| 1000部很黄的大片| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 韩国av在线不卡| 国产亚洲精品av在线| 久久欧美精品欧美久久欧美| а√天堂www在线а√下载| 免费看日本二区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 国产精品久久久久久精品电影| 国产成人影院久久av| 亚洲人成网站高清观看| 在线观看av片永久免费下载| 一夜夜www| 成人亚洲精品av一区二区| 国产精品国产高清国产av| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 久久亚洲真实| 观看免费一级毛片| 97碰自拍视频| 成人午夜高清在线视频| 国产色爽女视频免费观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久人人爽人人爽人人片va| 熟女人妻精品中文字幕| 老司机深夜福利视频在线观看| 午夜福利欧美成人| 免费观看的影片在线观看| 亚洲在线自拍视频| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 免费在线观看成人毛片| 色综合色国产| 精品一区二区免费观看| 能在线免费观看的黄片| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 一本一本综合久久| 中国美白少妇内射xxxbb| 成人三级黄色视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 男女那种视频在线观看| 日本与韩国留学比较| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 白带黄色成豆腐渣| 天堂√8在线中文| 精品无人区乱码1区二区| 色5月婷婷丁香| 搡老岳熟女国产| 性插视频无遮挡在线免费观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 成年女人看的毛片在线观看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 免费看av在线观看网站| 亚洲专区国产一区二区| 丰满乱子伦码专区| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产极品精品免费视频能看的| 精品久久国产蜜桃| 校园春色视频在线观看| 欧美三级亚洲精品| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲第一电影网av| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 日本熟妇午夜| 免费高清视频大片| 中出人妻视频一区二区| 成人av一区二区三区在线看| 久久6这里有精品| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产一区二区三区视频了| 久久久久久大精品| 内地一区二区视频在线| 男女啪啪激烈高潮av片| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 精品人妻1区二区| 超碰av人人做人人爽久久| 色av中文字幕| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产精品日韩av在线免费观看| 日本黄色片子视频| 欧美日韩黄片免| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 久久99热6这里只有精品| 伦理电影大哥的女人| 国产精品久久久久久精品电影| 精品一区二区三区视频在线| 国产伦一二天堂av在线观看| 免费av毛片视频| 99在线视频只有这里精品首页| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 国产精华一区二区三区| 内射极品少妇av片p| www.色视频.com| 亚洲欧美日韩高清专用| 成人永久免费在线观看视频| 在线免费观看的www视频| 久久久国产成人免费| 久久久久久久久久成人| 国产男人的电影天堂91| 特大巨黑吊av在线直播| 老熟妇仑乱视频hdxx| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 日本在线视频免费播放| 亚洲精品一区av在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 联通29元200g的流量卡| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产亚洲精品久久久com| 久久久久久久久中文| avwww免费| 亚洲国产色片| 国产毛片a区久久久久| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产69精品久久久久777片| 精品福利观看| 18禁在线播放成人免费| 亚洲av成人精品一区久久| 免费看a级黄色片| 97热精品久久久久久| 免费观看精品视频网站| 国产免费av片在线观看野外av| 成人av在线播放网站| 搞女人的毛片| 成年女人永久免费观看视频| 免费黄网站久久成人精品| 国产高潮美女av| 一个人免费在线观看电影| 国产av一区在线观看免费| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 在线观看一区二区三区| 国产精品久久久久久av不卡| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产乱人伦免费视频| 免费在线观看影片大全网站| 少妇的逼好多水| 美女 人体艺术 gogo| 中文字幕高清在线视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲无线在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产精品99久久久久久久久| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国模一区二区三区四区视频| 男女那种视频在线观看| 国产精品一区二区性色av| www.色视频.com| 毛片一级片免费看久久久久 | 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 精品福利观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 欧美成人a在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 人人妻人人看人人澡| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产淫片久久久久久久久| 免费观看精品视频网站| 国产男靠女视频免费网站| 国产黄a三级三级三级人| 桃红色精品国产亚洲av| 国产中年淑女户外野战色| 99热这里只有精品一区| 久久久久久久久久久丰满 | 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲综合色惰| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 午夜激情欧美在线| 老司机深夜福利视频在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 99国产精品一区二区蜜桃av| xxxwww97欧美| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲中文字幕日韩| 免费av毛片视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产v大片淫在线免费观看| 色5月婷婷丁香| 日韩一本色道免费dvd| 日日撸夜夜添| 午夜精品在线福利| 成人综合一区亚洲| 一进一出抽搐gif免费好疼| 丰满的人妻完整版| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产 一区 欧美 日韩| 久久精品91蜜桃| 高清日韩中文字幕在线| 久久亚洲真实| 日韩大尺度精品在线看网址| 成人毛片a级毛片在线播放| 露出奶头的视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 尾随美女入室| 少妇丰满av| 国产精华一区二区三区| av在线老鸭窝| 国产亚洲精品av在线| 无遮挡黄片免费观看| 成人无遮挡网站| 国产成人a区在线观看| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲av.av天堂| 少妇人妻精品综合一区二区 | 久久精品国产鲁丝片午夜精品 | 欧美国产日韩亚洲一区| 99视频精品全部免费 在线| 国产黄a三级三级三级人| 日本黄色片子视频| 免费av不卡在线播放| 国产av不卡久久| 欧美3d第一页| 又紧又爽又黄一区二区| 麻豆国产97在线/欧美| 成年免费大片在线观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产亚洲欧美98| 在线观看66精品国产| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久香蕉精品热| 国产精品爽爽va在线观看网站| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产精品亚洲美女久久久| 欧美bdsm另类| 春色校园在线视频观看| 欧美高清成人免费视频www| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产欧美日韩一区二区精品| 午夜日韩欧美国产| 国产精品av视频在线免费观看| 精品欧美国产一区二区三| 色5月婷婷丁香| 亚洲av.av天堂| 一级黄片播放器| 欧美激情久久久久久爽电影| 波多野结衣高清作品| 干丝袜人妻中文字幕| 欧美最新免费一区二区三区| 国产av在哪里看| 久久6这里有精品| 黄色欧美视频在线观看| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 88av欧美| 欧美xxxx性猛交bbbb| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 亚洲精品色激情综合| 久久久久性生活片| .国产精品久久| 日本-黄色视频高清免费观看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 国产 一区 欧美 日韩| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲五月天丁香| 中文在线观看免费www的网站| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲av熟女| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲专区中文字幕在线| 俄罗斯特黄特色一大片| 久久精品国产亚洲网站| 中文字幕免费在线视频6| 两个人的视频大全免费| 国产高清有码在线观看视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 在线观看一区二区三区| 51国产日韩欧美| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 99热网站在线观看| 麻豆国产av国片精品| 国产精品亚洲美女久久久| 97超视频在线观看视频| 女人被狂操c到高潮| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产一区二区亚洲精品在线观看| x7x7x7水蜜桃| 九九在线视频观看精品| 精品久久国产蜜桃| 女的被弄到高潮叫床怎么办 | 在现免费观看毛片| 在线国产一区二区在线| www日本黄色视频网| 午夜免费激情av| 赤兔流量卡办理| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲精华国产精华精| 99热这里只有是精品50| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 在线免费观看的www视频| 亚洲av免费高清在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产精品一区二区三区四区久久| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲av二区三区四区| 国产91精品成人一区二区三区| 午夜激情欧美在线| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产免费av片在线观看野外av| 久久久国产成人免费| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | av在线天堂中文字幕| 成人鲁丝片一二三区免费| 91狼人影院| 国产精品一及| 国产精品一区www在线观看 | or卡值多少钱| 亚洲一区高清亚洲精品| 在线观看免费视频日本深夜| 久久这里只有精品中国| 热99re8久久精品国产| 国产成人一区二区在线| 在线观看一区二区三区| 在现免费观看毛片| 真人做人爱边吃奶动态| 国产精品福利在线免费观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 精品一区二区三区视频在线观看免费| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲专区中文字幕在线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 成年女人毛片免费观看观看9| 身体一侧抽搐| 一本久久中文字幕| 欧美日韩国产亚洲二区| 精品午夜福利在线看| 女人被狂操c到高潮| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 日本 欧美在线| 成人永久免费在线观看视频| 精品午夜福利在线看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲精华国产精华精| 久久精品国产鲁丝片午夜精品 | 国产成人aa在线观看| 亚洲经典国产精华液单| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 亚洲天堂国产精品一区在线| 日本五十路高清| 桃红色精品国产亚洲av| 黄色日韩在线| 国产精品精品国产色婷婷| 男女那种视频在线观看| eeuss影院久久| 日韩 亚洲 欧美在线| 中文亚洲av片在线观看爽| 精品免费久久久久久久清纯| 99热精品在线国产| 一a级毛片在线观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 在线免费观看的www视频| 内地一区二区视频在线| 亚洲专区中文字幕在线| 亚洲精品影视一区二区三区av| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 亚洲va在线va天堂va国产| 免费一级毛片在线播放高清视频| 他把我摸到了高潮在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 久久香蕉精品热| 99九九线精品视频在线观看视频| 日本一本二区三区精品| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 99精品久久久久人妻精品| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 两个人视频免费观看高清| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 午夜激情福利司机影院| 老熟妇仑乱视频hdxx| 日本欧美国产在线视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 色播亚洲综合网| a级一级毛片免费在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲美女搞黄在线观看 | 99国产极品粉嫩在线观看| 久久久久国内视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产av不卡久久| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 一区福利在线观看| 国产精品一区www在线观看 | 哪里可以看免费的av片| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 日本色播在线视频| 国内精品久久久久久久电影| 大型黄色视频在线免费观看| 午夜精品久久久久久毛片777| 免费无遮挡裸体视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 午夜久久久久精精品| 国产91精品成人一区二区三区| 91精品国产九色| 日韩一本色道免费dvd| 最近在线观看免费完整版| 22中文网久久字幕| 人妻少妇偷人精品九色| 精品一区二区三区人妻视频| 国产精华一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 欧美性猛交黑人性爽| 国产色婷婷99| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲人成网站高清观看| 久久久久久伊人网av| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 欧美激情国产日韩精品一区| 欧美激情在线99| 亚洲国产精品合色在线| 69人妻影院| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| av专区在线播放| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产在线男女| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 十八禁国产超污无遮挡网站| 草草在线视频免费看| 日本在线视频免费播放| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲欧美日韩无卡精品| 色av中文字幕| 精品人妻视频免费看| 一级av片app| 亚洲欧美日韩无卡精品| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲七黄色美女视频| 国产探花极品一区二区| 色5月婷婷丁香| 国产精品,欧美在线| 精品日产1卡2卡| 人人妻人人澡欧美一区二区| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产成年人精品一区二区| 日本在线视频免费播放| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 校园春色视频在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国产成人av教育| 嫩草影视91久久| 国产精品一区www在线观看 | 成人性生交大片免费视频hd| 成年女人看的毛片在线观看| 久久九九热精品免费| 亚洲国产高清在线一区二区三| 午夜老司机福利剧场| 波野结衣二区三区在线| 欧美黑人巨大hd| av福利片在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久6这里有精品| 亚洲色图av天堂| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产熟女欧美一区二区| 桃红色精品国产亚洲av| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 久久国产精品人妻蜜桃| 午夜亚洲福利在线播放| 人妻夜夜爽99麻豆av| 成熟少妇高潮喷水视频| 色哟哟·www| 在线观看午夜福利视频| 亚洲 国产 在线| 高清在线国产一区| 99九九线精品视频在线观看视频| 成年女人看的毛片在线观看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 天堂√8在线中文| 99久久九九国产精品国产免费| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 婷婷六月久久综合丁香| 国产精品不卡视频一区二区| 99久久精品国产国产毛片| 日本色播在线视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 欧美黑人巨大hd| 亚洲精品在线观看二区| 国产色爽女视频免费观看| 国产黄色小视频在线观看| 成年女人看的毛片在线观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产一区二区激情短视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国内精品久久久久久久电影| 日韩欧美三级三区| 日韩国内少妇激情av| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 免费人成在线观看视频色| 夜夜爽天天搞| 午夜福利在线在线| 精品久久久久久久久久免费视频| 成人午夜高清在线视频| 又粗又爽又猛毛片免费看| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品女同一区二区软件 | 久久久国产成人精品二区| 五月玫瑰六月丁香| 白带黄色成豆腐渣| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲精品色激情综合| 亚洲欧美日韩东京热| 国产麻豆成人av免费视频| 国产91精品成人一区二区三区| 国产探花极品一区二区| 国产美女午夜福利| 国产精品久久久久久精品电影| 欧美+日韩+精品| 1024手机看黄色片| 久久99热这里只有精品18| 色5月婷婷丁香| 亚洲国产色片| 丰满的人妻完整版| 搞女人的毛片| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 91麻豆精品激情在线观看国产| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产淫片久久久久久久久| 久久久成人免费电影| 老司机深夜福利视频在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 国产精品一及| 日韩精品中文字幕看吧| aaaaa片日本免费| АⅤ资源中文在线天堂| 国产高清不卡午夜福利| 中出人妻视频一区二区| a级毛片a级免费在线| 国产午夜福利久久久久久| 欧美高清性xxxxhd video| 在线观看美女被高潮喷水网站| 日本免费一区二区三区高清不卡| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美激情在线99|