荷斯坦牛細(xì)管凍精人工授精關(guān)鍵技術(shù)

王威程

(甘肅祁牧乳業(yè)有限責(zé)任公司，甘肅 嘉峪關(guān) 735100)

甘肅祁牧乳業(yè)有限責(zé)任公司位于嘉峪關(guān)市嘉東工業(yè)園區(qū)，是酒鋼集團(tuán)公司下屬的全資子公司，是甘肅省規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖、繁殖基地和乳品加工生產(chǎn)企業(yè)，產(chǎn)品形成了以巴氏消毒奶、低溫酸奶為主，純牛奶、調(diào)制乳為輔的祁牧專屬品牌。2016年祁牧公司乳制品獲得了HACCP和ISO9001雙重的認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)，乳制品獲得“嘉峪關(guān)名牌產(chǎn)品”、“甘肅省名牌產(chǎn)品”稱號。公司目前養(yǎng)殖純種荷斯坦奶牛15 000多頭。

奶牛凍精授配技術(shù)的應(yīng)用極大的提高了養(yǎng)殖企業(yè)和養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益，降低了養(yǎng)殖成本，更重要的是加快了奶牛、肉牛的繁殖改良進(jìn)度和育種工作進(jìn)程，同時牛人工授精技術(shù)推廣和應(yīng)用已得到大中小養(yǎng)殖企業(yè)和廣大養(yǎng)牛戶的認(rèn)可。所以掌握牛人工授精技術(shù)很有必要，尤其冷凍精液的貯存、母牛的發(fā)情鑒定、凍精解凍的方式方法、精液品質(zhì)的檢查、輸精操作等技術(shù)的正確操作與規(guī)范應(yīng)用直接影響細(xì)管凍精人工授精受胎率的高低，更需要畜牧技術(shù)人員熟練掌握，現(xiàn)將本人幾年來在甘肅祁牧乳業(yè)有限責(zé)任公司的工作經(jīng)驗(yàn)做一交流，以供參考。

1 冷凍精液的貯存技術(shù)

(1)精液冷凍后必須在液氮罐內(nèi)貯存，精液必須浸沒在液氮中，根據(jù)液氮罐的性能要求，定期添加液氮。以凍精提筒完全浸泡在液氮中為宜。(2)取放凍精時，在液氮罐的瓶頸段以下提取。脫離液氮時間不能超過10 s。(3)轉(zhuǎn)移凍精時，凍精盛放設(shè)備離開液氮不能超過5 s。(4)凍精提取后須及時蓋上罐塞，盡量減少蓋塞開啟的次數(shù)及時間，避免液氮消耗及異物進(jìn)入液氮罐內(nèi)。(5)不同品種凍精應(yīng)編號清楚，避免混雜。(6)液氮罐長期貯存凍精后應(yīng)進(jìn)行清洗。液氮消耗過快或罐外有凍霜時，要立即更換液氮和罐，避免碰撞。

2 母牛的發(fā)情鑒定

如何進(jìn)行荷斯坦母牛的初配期選擇。荷斯坦牛通常9～14月齡性成熟，16～18月齡進(jìn)行第一次配種(初配)。

荷斯坦牛四季發(fā)情，沒有嚴(yán)格的季節(jié)性，多在5～7月發(fā)情較多。

荷斯坦母牛一般18～24 d為一個性周期，平均21天。不過因品種不同、個體不同也會存在差異，工作中要根據(jù)企業(yè)和養(yǎng)殖戶的實(shí)際情況進(jìn)行確定。

荷斯坦母牛的發(fā)情分可為4個階段：發(fā)情初期、發(fā)情盛期、發(fā)情后期和間情期。

發(fā)情初期的荷斯坦母牛精神亢奮，行動次數(shù)多，食欲減少。有時發(fā)呆站立，有時環(huán)顧左右進(jìn)行哞叫，喜歡靠近公牛又不接受公牛爬跨，而自己又要爬跨其他母牛或公牛。

發(fā)情盛期的荷斯坦母牛性欲強(qiáng)烈，接受爬跨，公牛爬跨時站立不動，從陰門流出玻璃樣稀薄透明液體，牽縷性很強(qiáng)，懸掛于陰戶，俗稱“吊線”，很易黏在尾根臀端或飛節(jié)處的被毛上。子宮頸紅潤，松弛，開張。卵巢增大，并可觸摸到突出于卵巢表面的卵泡。

發(fā)情后期的荷斯坦母牛逐漸恢復(fù)正常，性欲已經(jīng)減退，不接受爬跨。

間情期也是荷斯坦牛的生理靜止期，此時母牛已恢復(fù)正常狀態(tài)。

適時配種對提高授胎率至關(guān)重要。通常依荷斯坦母牛的發(fā)情行為表現(xiàn)來判斷。一是根據(jù)母牛的外部表現(xiàn)觀察，如果站立不動、接受其它牛爬跨，過一段時間又開始拒絕其它牛爬跨，這時即可進(jìn)行配種；二是從流出的粘液進(jìn)行觀察，黏液開始變稠渾濁，用手感覺可拉長絲且不斷時，即可配種；三是直腸檢查觀察，用手摸到母牛卵泡增大，卵泡壁開始變薄，有明顯波動，泡壁很薄像要破裂一樣時可進(jìn)行配種，此時配種受胎率最高。一般情況下，上午發(fā)情的荷斯坦母牛在下午6～7時輸精為好，下午發(fā)情的荷斯坦母牛在第二天上午輸精為好。

3 細(xì)管凍精的解凍及精液品質(zhì)檢查技術(shù)

3.1 凍精解凍

按操作規(guī)程取出待用的細(xì)管凍精，放入37～41 ℃溫水中，水浴半分鐘左右使之解凍，并均勻升溫。(1)解凍恒溫杯中倒入三分之二量的水，打開恒溫杯開關(guān)，通過杯身數(shù)字顯示屏將溫度設(shè)為37 ℃，將恒溫時間設(shè)置為15 s。(2)等待溫度升到設(shè)定溫度，恒溫杯會自動恒溫保持在37 ℃。(3)將提筒取到液氫頸口的位置，將鑷子深入液氮冷卻，然后快速取出細(xì)管，將其投入解凍恒溫杯中。(4)點(diǎn)擊確認(rèn)按鈕，恒溫杯自動倒計時15 s，時間到后，恒溫杯會發(fā)出提示音。

3.2 精液品質(zhì)檢查

解凍后的精液立即鏡檢，將盛有少量精液的載玻片放在150倍顯微鏡下進(jìn)行活力檢查，活力0.35以上方為合格。(1)使用搭載恒溫載物臺的顯微鏡進(jìn)行觀測，精子對環(huán)境溫度非常敏感，搭載恒溫載物臺可保持精子活力。顯微鏡恒溫載物臺溫度應(yīng)保持 37～38 ℃，放大的倍數(shù)150～600倍為宜。(2)用于檢查精子活力的顯微鏡要保持在35～38 ℃。(3)在顯微鏡視野下觀察，用直線前進(jìn)的精子數(shù)占精子總數(shù)的比率判定精子活力。一般情況下細(xì)管凍精解凍后的精子活力要高于0.35，在37 ℃下存活時間大于4 h。(4)凍精必須按品種，批次進(jìn)行鏡檢，精子活率達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)后才能使用。

鏡檢合格的精液才可以使用。擦干細(xì)管凍精表面，檢查精液的外觀(包括型號和品種)，在封閉端剪去0.5 cm左右。解凍后應(yīng)立即進(jìn)行輸精，否則會影響受胎率，最好控制在凍精解凍后20 min內(nèi)輸精為最佳。冬季要對精液進(jìn)行保溫處理。

4 荷斯坦母牛輸精技術(shù)

輸精是整個工作過程中是最關(guān)鍵的一環(huán)，準(zhǔn)確適時正確輸精會提高母牛受胎率。現(xiàn)就直腸把握子宮頸輸精法進(jìn)行詳細(xì)解釋說明。首先，輸精員要清洗干凈雙手，修剪指甲，用肥皂擦手以起到潤滑作用，合攏左手五指呈錐形，緩慢插入母牛肛門掏凈糞便，然后可用清水沖洗干凈；其次，摸清并找到子宮頸，隔腸壁固定好子宮頸；最后操作員右手持輸精槍緩慢插入陰門，注意不能插入尿道口，小心使輸精器尖端抵達(dá)子宮頸外口，在左手的協(xié)調(diào)作用下，把輸精器徐徐深入子宮頸內(nèi)5 cm以上，注入精液，至少要達(dá)到子宮頸的一半或2/3的地方(5 cm以上)方可注入精液。應(yīng)盡量避免造成子宮頸口游離下垂，如果感覺不通暢，就要把子宮頸稍往前推動，拉直皺褶以免損傷生殖道；如果輸精器偏入子宮頭內(nèi)圍，就要退回輸精器，再用左手拇指定位引導(dǎo)。

5 小結(jié)

在生產(chǎn)實(shí)踐中影響母牛人工授精受胎率的因素主要有種公牛的精液品質(zhì)、母牛的發(fā)情排卵機(jī)能、操作人員的技術(shù)熟練程度、輸精時間等。

5.1 精液品質(zhì)

解凍后的細(xì)管凍精的精子活力不得低于0.35，所以種公牛場(站)經(jīng)常保持種公牛健康，精力旺盛非常重要，做到種公牛的飼料多樣化，堅(jiān)持用正規(guī)廠家生產(chǎn)的品質(zhì)優(yōu)良、營養(yǎng)全面豐富的飼料，同時對種公牛經(jīng)常運(yùn)動，定期進(jìn)行疾病篩查和體檢。

5.2 繁殖機(jī)能

授配母牛一定要健康、體況好、年齡適中、發(fā)情旺盛，健康、年輕、發(fā)情旺盛的母牛利用細(xì)管凍精人工授精技術(shù)受胎率較高。

5.3 授精技術(shù)

人工授精技術(shù)人員對人工授精技術(shù)的熟練程度也影響著受胎率的高低，同時人工授精技術(shù)人員的職業(yè)素質(zhì)也會影響受胎率的高低，人工授精前期準(zhǔn)備工作的到位與否與會影響受胎率，前期工作準(zhǔn)備充分細(xì)致會大大提高受胎率。

5.4 輸精時間

選擇最適宜的時間輸精也會提高受胎率，適時輸精能提高優(yōu)質(zhì)精子和優(yōu)秀卵子相遇的機(jī)會，從而可有效提高受胎率。如果過早輸精，使精子在母牛生殖道內(nèi)運(yùn)動時間過長從而導(dǎo)致受精能力減弱甚至導(dǎo)致精子死亡，最終不能受精;如果過遲輸精，即便再優(yōu)秀的精子錯過了排卵時間，導(dǎo)致卵子衰老或死亡也不能受精。正常的卵子為母牛排卵后20～24 h受精能力最強(qiáng)，精子在母牛生殖道中約能存活28～50 h，所以說多數(shù)母牛在剛發(fā)情初期就進(jìn)行輸精的話受胎率一般較低，在排卵前8 h或發(fā)情后12 h輸精最為合適。