硝苯地平緩釋片在中國(guó)健康受試者體內(nèi)的生物等效性研究*

余恒毅，區(qū)淑蘊(yùn)，劉東，梁標(biāo)志，高永堅(jiān)，任秀華

(1.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院藥學(xué)部，武漢 430030；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院Ⅰ期臨床試驗(yàn)研究室，武漢 430030；3.國(guó)藥集團(tuán)廣東環(huán)球制藥有限公司，佛山 528305)

硝苯地平是具有代表性的鈣拮抗劑藥物，為治療心絞痛和高血壓的首選藥物之一，臨床上通常使用緩控釋制劑[1]。前期研究以日本拜耳藥品株式會(huì)社生產(chǎn)的Adalat?-L10為參比制劑(R)，對(duì)國(guó)藥集團(tuán)廣東環(huán)球制藥有限公司已上市的硝苯地平緩釋片(Ⅰ)T1進(jìn)行質(zhì)量一致性評(píng)價(jià)，體外釋放度研究結(jié)果表明制劑T1與參比制劑R體外釋放行為不一致，修改處方工藝后的制劑T2與參比制劑R體外釋放曲線一致[2]。筆者在本文就該公司已上市的硝苯地平緩釋片(Ⅰ)T1、修改處方工藝后的制劑T2與參比制劑R在中國(guó)健康受試者體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)及生物等效性進(jìn)行研究。

1 材料與對(duì)象

1.1材料

1.1.1試藥 硝苯地平緩釋片(Ⅰ)(受試制劑T1，國(guó)藥集團(tuán)廣東環(huán)球制藥有限公司，批號(hào)：140101，規(guī)格：每片10 mg)；變更處方工藝后硝苯地平緩釋片(Ⅰ)(受試制劑T2，國(guó)藥集團(tuán)廣東環(huán)球制藥有限公司，批號(hào)：20140201，規(guī)格：每片10 mg)；硝苯地平緩釋片(參比制劑R，商品名：Adalat?-L10，日本拜耳藥品株式會(huì)社，批號(hào)：JPR4392，規(guī)格：每片10 mg)；硝苯地平對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100338-201404，含量：99.0%)；硝苯地平-d6對(duì)照品(內(nèi)標(biāo)，加拿大Toronto Research Chemicals公司，批號(hào)：457002，含量：98%)；HPLC級(jí)乙腈、甲醇購(gòu)于美國(guó)TEDIA公司，水為實(shí)驗(yàn)室制備超純水。

1.1.2儀器 LC-20AD型高效液相色譜儀(日本島津)。API4000 Plus三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀(美國(guó)愛博才思)。MS105DU型電子分析天平(瑞士梅特勒-托利多)。Vortex-2 GENIE混合器(美國(guó)Scientific Industries)。Neofuge 13R型高速冷凍離心機(jī)(香港力康)。Scientific Heraeus Multifuge X1低溫臺(tái)式離心機(jī)(德國(guó)賽默飛世爾)。Elga Purelab Felx 3型超純水機(jī)(英國(guó)ELGA)；DW-86L626型立式超低溫保存箱(青島海爾)。

1.2受試者選擇 本試驗(yàn)研究方案與知情同意書等研究文件獲得華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者自愿簽署知情同意書。

1.2.1入組標(biāo)準(zhǔn) ①男性；②年齡18～40歲；③體質(zhì)量≥50 kg，且體質(zhì)量指數(shù)在19～24 kg·(m2)-1；④試驗(yàn)前2周內(nèi)未服用其他任何藥物。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn) ①經(jīng)生命體征檢查、體格檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果異常且有臨床意義者；②既往有嚴(yán)重疾病史者；③篩選前3個(gè)月內(nèi)參加過其他藥物臨床試驗(yàn)者；④對(duì)研究藥物及同類藥物過敏者；⑤有藥物濫用史，嗜煙、嗜酒者；⑥試驗(yàn)前1個(gè)月內(nèi)獻(xiàn)血者；⑦研究者認(rèn)為不能入組的其他情況者。

1.3試驗(yàn)入組與完成情況 空腹試驗(yàn)共篩選104名男性受試者，30例合格入組。其中2例脫落(1例于第1周期給藥前主動(dòng)退出試驗(yàn)、1例于第2周期給藥前主動(dòng)退出試驗(yàn))，28例完成試驗(yàn)，年齡(23.86±2.79)歲，身高(172.14±6.07)cm，體質(zhì)量(63.96±7.13)kg，體質(zhì)量指數(shù)(19.30～23.77)kg·(m2)-1。

餐后試驗(yàn)共篩選124名男性受試者，30例合格入組。其中1例脫落(第2周期給藥前主動(dòng)退出試驗(yàn))，29例完成試驗(yàn)，年齡(24.07±2.98)歲，身高(172.83±6.87)cm，體質(zhì)量(64.69±7.28)kg，體質(zhì)量指數(shù)(19.05～23.99)kg·(m2)-1。

2 方法與結(jié)果

2.1給藥方案與血樣采集 本研究采用單中心、隨機(jī)、開放、三周期、三序列、三交叉單次給藥試驗(yàn)設(shè)計(jì)?？崭乖囼?yàn)和餐后試驗(yàn)各入組30名健康男性受試者。30名受試者隨機(jī)分成3組(R-T1-T2、T1-T2-R和T2-R-T1組)，每組10人，每周期分別在空腹或餐后狀態(tài)下服用硝苯地平緩釋片10 mg，清洗期為7 d。

受試者于每周期給藥前1 d入住I期病房，統(tǒng)一進(jìn)食晚餐后禁食過夜(空腹至少10 h)，服藥前2 h內(nèi)禁水?？崭乖囼?yàn)受試者在空腹?fàn)顟B(tài)下口服試驗(yàn)藥物10 mg，溫水200 mL送服。餐后組受試者在服藥前30 min內(nèi)完成高脂餐進(jìn)食[每份標(biāo)準(zhǔn)餐含能量3352～4190 J(1 cal=4.19 J)，其中蛋白質(zhì)約628.5J、碳水化合物1047.5 J、脂肪2095～2514 J]，在餐后狀態(tài)下口服試驗(yàn)藥物10 mg，溫水200 mL送服。在服藥后2 h內(nèi)受試者禁水，服藥后避免劇烈運(yùn)動(dòng)。服藥后4 h和10 h后進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)中餐和晚餐，試驗(yàn)期間受試者禁止吸煙、飲用酒類和咖啡類飲料。

研究人員在受試者服藥前1 h、服藥后2，4 h測(cè)量其生命體征(包括體溫、脈搏、呼吸、血壓)，并密切觀察可能出現(xiàn)的低血壓反應(yīng)(例如頭暈、頭痛、臉色蒼白、直立性眩暈、四肢冷、心悸等)及其他不良反應(yīng)，在出組時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查，心電圖檢查。

采血點(diǎn)設(shè)置為每周期的0 h(給藥前1 h)及給藥后0.5，1，1.5，2，2.5，3，4，5，6，9，12，24 h，研究護(hù)士于避光條件下采集受試者肘靜脈血約4 mL，將血樣置于含肝素鈉抗凝劑的真空采血管中輕柔顛倒混勻，置于低溫離心機(jī)中離心10 min(4 ℃、2260×g)。分離血漿于凍存管中，置于-80 ℃超低溫冰箱貯存待測(cè)。

2.2測(cè)定方法與樣品處理 采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)法。因硝苯地平光不穩(wěn)定[3]，溶液配制與血樣處理相關(guān)操作均在黃光燈下進(jìn)行(波長(zhǎng)570～580 nm)。

2.2.1色譜條件 色譜柱：Dikma Diamonsil C18(2.1 mm×150 mm，5 μm)；流動(dòng)相A：水；流動(dòng)相B：乙腈，梯度洗脫程序： 0～0.5 min，20%B；0.51～1.9 min，20%→90%B；1.91～3.0 min，90%B；3.01～3.1 min，90%→20%B；3.11～5.0 min，20%B；流速：0.36 mL·min-1；柱溫：40 ℃；自動(dòng)進(jìn)樣器溫度：4 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。

2.2.2質(zhì)譜條件 離子源為電噴霧離子化源(ESI)，正離子模式檢測(cè)，毛細(xì)管電壓5.5 kV，源溫度550 ℃；Curtain gas 25 L·min-1，Gas1 40 L·min-1，Gas2 40 L·min-1。掃描方式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè)：硝苯地平檢測(cè)離子對(duì)為m/z347.2→315.1(DP 55V，EP 10，CE 12 eV，CXP 15 V)；硝苯地平-d6(氘代內(nèi)標(biāo))檢測(cè)離子對(duì)m/z353.2→257.2(DP 55V，EP 10，CE 26 eV，CXP 10 V)。

2.2.3血漿樣品處理 于1.5 mL棕色EP管中加入血漿樣品200 μL、內(nèi)標(biāo)工作液20 μL(硝苯地平-d6：1200 ng·mL-1)和乙腈600 μL，渦旋混合1 min后，于4 ℃、12 000×g條件下離心10 min，取上清液200 μL進(jìn)樣分析。

2.3方法學(xué)考察與評(píng)價(jià)

2.3.1專屬性 取6例健康志愿者的空白血漿，每例受試者的空白血漿分別不加硝苯地平與內(nèi)標(biāo)、僅加定量下限(LLOQ)濃度的硝苯地平、僅加內(nèi)標(biāo)，按照“2.2.3”項(xiàng)進(jìn)行操作后進(jìn)樣、分析。結(jié)果見圖1。在硝苯地平及其內(nèi)標(biāo)的離子通道及保留時(shí)間窗中(均為3.78 min)，血漿內(nèi)源性物質(zhì)的峰面積均小于硝苯地平LLOQ峰面積的20%，小于內(nèi)標(biāo)峰面積的5%，顯示血漿內(nèi)源性物質(zhì)對(duì)樣品測(cè)定無干擾，方法專屬性好。

A.空白血漿樣本(不加內(nèi)標(biāo))；B.空白血漿樣本(加內(nèi)標(biāo))；C.定量下限(0.39 ng.mL-1)質(zhì)控樣本；D.健康受試者服藥后樣本；I為硝苯地平；II為硝苯地平-d6。圖1 血漿中硝苯地平及硝苯地平-d6的典型色譜圖A.blank plasma (without IS)；B.blank plasma with nifedipine-d6 (IS)；C.nifedipine at LLOQ (0.39 ng·mL-1) and IS；D.sample after administration of 10 mg nifedipine sustained-release tablet；I .nifedipine ； II nifedipine-d6.Fig.1 Typical multiple reaction monitoring chromatograms of nifedipine and nifedipine-d6

2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線與定量下限 標(biāo)準(zhǔn)曲線血漿樣品(0.39，1.56，3.90，7.80，39.00，78.00 ng·mL-1)按“2.2.3”項(xiàng)下處理后進(jìn)樣，以硝苯地平與內(nèi)標(biāo)峰面積之比為縱坐標(biāo)(Y)，以硝苯地平濃度為橫坐標(biāo)(X)，采用加權(quán)(ω=1/X2)最小二乘法進(jìn)行線性回歸得回歸方程為Y=0.039 4X-0.000 212(R2=0.997 3)。結(jié)果表明，硝苯地平在0.39～78.00 ng·mL-1范圍內(nèi)線性良好，定量下限為0.39 ng·mL-1。

2.3.3精密度及準(zhǔn)確度 質(zhì)控血漿樣品(0.78，6.24，62.40 ng·mL-1)及定量下限血漿樣品(0.39 ng·mL-1)按“2.2.3”項(xiàng)下處理后進(jìn)樣，于連續(xù)2 d內(nèi)完成3次檢測(cè)，每個(gè)濃度水平配制5個(gè)重復(fù)，使用隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各質(zhì)控樣品及定量下限的濃度，計(jì)算批內(nèi)、批間精密度及準(zhǔn)確度，結(jié)果顯示，定量下限及所有質(zhì)控樣品的批內(nèi)及批間準(zhǔn)確度均值在標(biāo)示值的±15%范圍內(nèi)，批內(nèi)及批間變異系數(shù)均在15%范圍內(nèi)[4]。

2.3.4提取回收率 質(zhì)控血漿樣品(0.78，6.24，62.40 ng·mL-1)按“2.2.3”項(xiàng)下處理后進(jìn)樣，每個(gè)濃度水平配制5個(gè)重復(fù)。配制含空白血漿樣品提取液的化合物溶液使其濃度與質(zhì)控樣品進(jìn)樣濃度相同，比較兩者峰面積比來評(píng)價(jià)化合物的提取回收率。結(jié)果顯示，低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度水平的提取回收率分別為(110.2±4.1)%、(91.9±3.0)%和(98.8±3.8)%，硝苯地平提取過程對(duì)真實(shí)結(jié)果影響較小。

2.3.5基質(zhì)效應(yīng) 分別配制同質(zhì)控樣品進(jìn)樣濃度相同的含空白血漿樣品提取液的化合物溶液及同質(zhì)控樣品進(jìn)樣濃度相同的化合物溶液，進(jìn)樣測(cè)定后以兩者經(jīng)內(nèi)標(biāo)校正后的比值來比較硝苯地平的基質(zhì)效應(yīng)。結(jié)果顯示，低、高濃度質(zhì)控樣品的校正后基質(zhì)效應(yīng)分別為99.9%和99.8%，變異系數(shù)在15%范圍內(nèi)，空白血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不影響硝苯地平的測(cè)定。

2.3.6穩(wěn)定性試驗(yàn) 取低、高質(zhì)控血漿樣品(0.78，62.40 ng·mL-1)，每個(gè)濃度水平設(shè)5個(gè)重復(fù)，分別考察質(zhì)控血漿室溫放置24 h，-70 ℃條件凍融循環(huán)3次，及在-70 ℃條件下放置30，60 d的穩(wěn)定性。質(zhì)控血漿樣品(0.78，62.40 ng·mL-1)按“2.2.3”項(xiàng)下處理后，置于儀器進(jìn)樣盤中24 h考察其穩(wěn)定性。結(jié)果顯示，每一濃度的均值與標(biāo)示濃度的偏差在±15%范圍內(nèi)，表明硝苯地平血漿樣品在室溫、冷凍保存、反復(fù)凍融條件下穩(wěn)定性良好。

2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用DAS 2.1軟件，以非房室數(shù)學(xué)模型分析方法估算受試制劑和參比制劑的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，主要參數(shù)包括出峰時(shí)間(tmax)(實(shí)測(cè)值)、峰濃度(Cmax)(實(shí)測(cè)值)、血漿濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC0-t)、AUC0-∞、和消除半衰期(t1/2)。

采用DAS 2.1軟件進(jìn)行生物等效性分析，對(duì)主要評(píng)價(jià)參數(shù)Cmax、AUC0-t、AUC0-∞進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析，然后用雙單側(cè)檢驗(yàn)并計(jì)算90%置信區(qū)間(CI)。當(dāng)受試制劑與參比制劑主要評(píng)價(jià)參數(shù)的幾何均值比的90%CI在80%～125%等效區(qū)間內(nèi)認(rèn)為兩制劑生物等效[5]。

2.5血藥濃度-時(shí)間曲線 健康受試者空腹/餐后狀態(tài)下單次口服硝苯地平緩釋片受試制劑T1、受試制劑T2和參比制劑10 mg后，血漿中硝苯地平的平均濃度-時(shí)間曲線見圖2所示。

圖2 空腹(A)和餐后(B)狀態(tài)下受試者單次口服硝苯地平緩釋片受試制劑T1、T2與參比制劑R后平均血藥濃度-時(shí)間曲線Fig.2 Mean plasma concentration-time curve of nifedipine after single oral test preparations T1，T2 and reference preparation R under fasting (A，n=28) or fed (B，n=29) state in healthy

2.6藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 受試者空腹/餐后狀態(tài)下單次口服硝苯地平緩釋片受試制劑T1、受試制劑T2和參比制劑10 mg的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見表1。

表1 空腹和餐后狀態(tài)下受試者單次口服硝苯地平緩釋片受試制劑T1、T2與參比制劑R的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)Tab.1 The main pharmacokinetic parameters of nifedipine in healthy volunteers after taking the tests T1，T2 and reference R preparations under fasting or fed state

2.7生物等效性評(píng)價(jià) 納入生物等效性集的57例受試者空腹/餐后給予硝苯地平緩釋片受試制劑T1、受試制劑T2和參比制劑10 mg的生物等效性評(píng)價(jià)結(jié)果見表2。如表2中所示， T1和參比制劑在空腹?fàn)顟B(tài)下的AUC0-t、Cmax生物不等效，在餐后狀態(tài)下Cmax生物不等效。而改良后受試制劑T2和參比制劑在空腹及餐后狀態(tài)下Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的90%CI均在80%～125%內(nèi)，符合生物等效性要求，判定為生物等效[5]。

表2 空腹和餐后狀態(tài)下受試者單次口服硝苯地平緩釋片受試制劑T1、T2與參比制劑R的生物等效性評(píng)價(jià)結(jié)果Tab.2 The parameter for the test preparations T1，T2 and reference preparation R of sustained-release tablets taken by healthy subjects under fasting and fed state

2.8安全性評(píng)價(jià) 整個(gè)試驗(yàn)期間未發(fā)生不良事件，給藥前后實(shí)驗(yàn)室檢查未見異常值，表明在中國(guó)健康受試者中硝苯地平緩釋片單次給藥10 mg后的耐受性和安全性良好。

3 討論

硝苯地平為第一個(gè)二氫吡啶類鈣離子拮抗劑，因其療效已得到充分肯定，且價(jià)格低廉，故在臨床廣泛用于高血壓和心絞痛等的治療，但其血藥濃度極易出現(xiàn)波動(dòng)，使得其在臨床應(yīng)用中的有效性和安全性存在個(gè)體差異。研究表明，制劑、種族、基因多態(tài)性、食物、合并用藥等因素均會(huì)對(duì)硝苯地平口服制劑的藥動(dòng)學(xué)產(chǎn)生影響，進(jìn)而可能導(dǎo)致降壓效果的改變及不良反應(yīng)的發(fā)生[6]。

雖然國(guó)內(nèi)外已有不少關(guān)于液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)法測(cè)定人血漿中硝苯地平濃度的方法學(xué)報(bào)道[7-9]，但關(guān)于中國(guó)人群服用硝苯地平緩釋片的藥動(dòng)學(xué)及生物等效性研究報(bào)道并不多見，且有限的報(bào)道均見于2016年我國(guó)開展仿制藥質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)工作前，而既往研究設(shè)計(jì)中所選取的參比制劑均為當(dāng)時(shí)上市的國(guó)產(chǎn)仿制制[10-13]，非原研制劑，對(duì)現(xiàn)今工作的指導(dǎo)意義有限。如2011年WANG等[14]報(bào)道20例中國(guó)健康男性受試者空腹單次服用某國(guó)產(chǎn)硝苯地平緩釋片10 mg藥動(dòng)學(xué)參數(shù)：Cmax(40.6±8.0)ng·mL-1、tmax(3.15±0.88)h、t1/2(7.53±2.10)h、AUC0-t(281.2±99.4)ng·h·mL-1、AUC0-∞(293.1±103.9)ng·h·mL-1，這與原研制劑Adalat?-L10說明書中公布6例日本健康受試者的部分藥動(dòng)學(xué)參數(shù)：Cmax(26.1±2.2)ng·mL-1和tmax(2.47±0.40)h存在一定差異[15]。

鑒于參比制劑在仿制藥一致性評(píng)價(jià)中的關(guān)鍵作用，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品評(píng)審中心于2016年起陸續(xù)發(fā)布仿制藥參比制劑目錄，并在第八批仿制藥參比制劑目錄中列出多種規(guī)格的硝苯地平緩釋片、控釋片、軟膠囊的一致性評(píng)價(jià)工作均應(yīng)選擇拜耳公司Adalat系列產(chǎn)品作為參比制劑[16]。本項(xiàng)研究選擇日本拜耳公司生產(chǎn)的10 mg硝苯地平緩釋片(Adalat?-L10)作為參比制劑，結(jié)果顯示受試制劑T1和參比制劑不等效，而改良后的受試制劑T2和參比制劑在空腹及餐后狀態(tài)下生物等效。本研究也首次報(bào)道中國(guó)健康男性受試者空腹?fàn)顟B(tài)下單次口服Adalat?-L10的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)， 結(jié)果顯示Cmax、tmax等參數(shù)較既往報(bào)道[14]與Adalat?-L10說明書中日本健康受試者報(bào)道的數(shù)據(jù)更加接近[15]，反映參比制劑選擇的重要性。

此外，進(jìn)食對(duì)不同劑型甚至同一劑型不同制劑的硝苯地平藥動(dòng)學(xué)可能產(chǎn)生不同的影響。CHALLENOR等[17]曾考察標(biāo)準(zhǔn)早餐(總能量約2800 J)對(duì)8例健康男性受試者單次服用10 mg硝苯地平膠囊的影響，結(jié)果顯示飲食會(huì)顯著延長(zhǎng)tmax和降低Cmax(P<0.05)，但對(duì)AUC0-t的降低差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HIRASAWA等[18]考察標(biāo)準(zhǔn)早餐(總能量2790 J)對(duì)10例患者單次服用硝苯地平膠囊10 mg的影響，結(jié)果顯示餐后狀態(tài)下Cmax較空腹時(shí)顯著降低(P<0.001)，但tmax的延長(zhǎng)和AUC0-t的降低差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。SCHUG等[19]通過四周期、四交叉試驗(yàn)考察高脂餐對(duì)24位健康男性受試者單次服用兩種60 mg硝苯地平緩釋片的影響，結(jié)果顯示餐后狀態(tài)下仿制制劑Nifedicron的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)Cmax、AUC0-t、AUC0-t較空腹?fàn)顟B(tài)下顯著提高(P<0.05)，但原研制劑Adalat OROS的相關(guān)參數(shù)并未發(fā)生顯著變化。在SCHUG開展的另一項(xiàng)納入24位健康男性受試者的類似研究中，11位受試者在餐后狀態(tài)下服用溶蝕骨架緩釋制劑CORAL?的Cmax為空腹?fàn)顟B(tài)下的3～4倍，而緩釋制劑Adalat OROS的藥動(dòng)學(xué)未發(fā)生顯著變化[20]。

李江峰等[21]將90名健康受試者分為空腹組和餐后組，單次服用90 mg硝苯地平緩釋片(未注明廠家)以考察高脂餐對(duì)其藥動(dòng)學(xué)的影響，結(jié)果顯示餐后組tmax、Cmax和AUC0-t較空腹?fàn)顟B(tài)下分別升高31.9%、77.4%和30.0%(P<0.05)，而t1/2、AUC0-∞僅略有升高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究中，餐后組受試者單次口服Adalat?-L10的Cmax和tmax與空腹組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但AUC0-t、AUC0-∞和t1/2較空腹組均有顯著降低。因本研究目的在于考察生物等效性而非飲食對(duì)硝苯地平緩釋片藥動(dòng)學(xué)的影響，故試驗(yàn)設(shè)計(jì)上無法判斷上述情況是否由受試者的個(gè)體差異造成。筆者認(rèn)為，食物對(duì)硝苯地平緩釋片生物利用度的影響較為復(fù)雜，未來有必要開展更多臨床研究。

美國(guó)食品藥品管理局(FDA)關(guān)于硝苯地平緩釋片生物等效性指導(dǎo)原則中未說明該藥物是高變異藥物，本研究采用三交叉設(shè)計(jì)，受試制劑T1、T2分別與參比制劑比較。據(jù)既往研究的藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)，個(gè)體內(nèi)變異≤20%。以藥動(dòng)學(xué)參數(shù)(AUC、Cmax)為主要分析指標(biāo)，假定單側(cè)α=0.05，β=0.1，Intra-CV=20%，受試制劑和參比制劑均值比值0.95，生物等效區(qū)間=80.00%～125.00%，采用SAS9.4軟件計(jì)算，樣本例數(shù)為26例。若以脫落率15%計(jì)，則空腹試驗(yàn)和餐后試驗(yàn)各入組30例受試者。

此外，體外溶出試驗(yàn)結(jié)果顯示，3種制劑在不同pH值溶出介質(zhì)中的釋放行為相對(duì)穩(wěn)定，但不同制劑間在溶解速率上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中，受試制劑T1在4 h的釋放率達(dá)到90%，而參比制劑和受試制劑T2在8～12 h后方達(dá)到90%的釋放率。體外溶出實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，T1的體外釋放比R和T2要快，與本文三制劑的體內(nèi)生物等效性試驗(yàn)結(jié)果一致。