循環(huán)腫瘤細(xì)胞在非小細(xì)胞肺癌患者中的水平及其與腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系研究

趙潔敏 左萬里 廖悅?cè)A

1江門市中心醫(yī)院（中山大學(xué)附屬江門醫(yī)院）呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，江門 529000；2江門市中心醫(yī)院（中山大學(xué)附屬江門醫(yī)院）病理科，江門 529000

非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）是一種常見的惡性腫瘤疾病，其主要是以呼吸困難、胸痛等癥狀為臨床表現(xiàn)，且具有起病隱匿、病情進(jìn)展性發(fā)展等特點(diǎn)，若患者未能予以及時(shí)有效的治療措施，則可隨著病情進(jìn)展發(fā)生轉(zhuǎn)移、浸潤，出現(xiàn)膿胸、病理性骨折等并發(fā)癥，進(jìn)而嚴(yán)重影響其生存質(zhì)量。NSCLC發(fā)病早期多無明顯癥狀，因此可導(dǎo)致大多數(shù)患者在臨床確診時(shí)病情已屬晚期，錯(cuò)失了最佳治療時(shí)間窗，同時(shí)患者5年生存率低于15%，故臨床早期診斷NSCLC疾病在患者后期治療中具有重要的指導(dǎo)意義。循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）是一種源于原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性腫瘤并脫落于循環(huán)系統(tǒng)的活細(xì)胞，且可在一定條件下轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)移灶，進(jìn)而出現(xiàn)侵犯和轉(zhuǎn)移，造成繼發(fā)性損害［1］。腫瘤標(biāo)志物主要源于惡性腫瘤細(xì)胞，其可包括糖類抗原（CA125）、癌胚抗原（CEA）、細(xì)胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）等物質(zhì)，且可用于反映腫瘤發(fā)生、發(fā)展等進(jìn)程［2］。本研究旨在探討CTCs在NSCLC患者中的水平及其與腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

資料與方法

1、基礎(chǔ)資料

回顧性選取2020年3月至2021年2月江門市中心醫(yī)院收治的NSCLC患者50例作為研究對象，并整理與分析其臨床資料，所有患者均進(jìn)行CTCs檢查，按照其水平將其分為陽性組（30例，≥4%）、陰性組（20例，＜4%）。診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照《非小細(xì)胞肺癌診療指南：循證醫(yī)學(xué)與治療學(xué)基礎(chǔ)》［3］中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合以上診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)病理學(xué)檢查確診者；臨床資料齊全者；入組前30 d未進(jìn)行相關(guān)治療（放化療及靶向治療）者等。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤者；有肝、腎功能障礙者；嚴(yán)重性感染性疾病者；入組前5年內(nèi)診斷有其他惡性疾病者；影像學(xué)已有其他器官轉(zhuǎn)移征象者；凝血功能障礙者等。此項(xiàng)研究經(jīng)江門市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過。

2、方法

于所有患者入院后，予以CTCs檢測。取患者肘正中靜脈血5 ml后，于24 d內(nèi)使用免疫磁珠陰性富集法進(jìn)行富集腫瘤細(xì)胞，而后應(yīng)用CTCs檢測系統(tǒng)［萊爾（北京）醫(yī)療器械有限公司］進(jìn)行檢測外周CTCs計(jì)數(shù)水平。

3、觀察指標(biāo)

①外周CTCs在不同性別、年齡、病理類型的NSCLC患者中陽性率情況，統(tǒng)計(jì)NSCLC患者的臨床資料，主要包括不同性別、年齡、病理類型等情況，并計(jì)算外周CTCs計(jì)數(shù)在不同性別、年齡、病理類型的NSCLC患者中陽性率。其中病理類型標(biāo)準(zhǔn)使用《WHO（2015）肺腫瘤組織學(xué)分類》［4］。②外周CTCs在不同分期的NSCLC患者中陽性率情況，統(tǒng)計(jì)NSCLC患者的不同分期資料，并計(jì)算外周CTCs在不同分期的NSCLC患者中陽性率。其中分期標(biāo)準(zhǔn)使用《國際肺癌研究協(xié)會第八版國際肺癌TNM分期修訂稿解讀》［5］。③血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的關(guān)系，于所有患者入院后，取其肘正中靜脈血5 ml后，以3 000 r/min離心10 min，離心半徑為15 cm，得血清，血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平檢測使用E2010全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（瑞士羅氏公司）。

4、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 22.0軟件分析數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）的形式表示，用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以［例（%）］表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，經(jīng)Spearman分析相關(guān)性，同時(shí)以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1、外周CTCs在不同性別、年齡、病理類型的NSCLC患者中陽性率情況

50例NSCLC患者的外周CTCs計(jì)數(shù)水平為（5.36±1.12）%，并按照其計(jì)數(shù)水平將所有患者分為陽性組（30例，≥4%）、陰性組（20例，＜4%）。在NSCLC患者，陽性組、陰性組的不同性別、年齡、病理類型占比經(jīng)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見表1。

表1 外周CTCs在不同性別、年齡、病理類型的NSCLC患者中的陽性情況[例（%）]

2、外周CTCs在不同分期的NSCLC患者中陽性率情況

在NSCLC患者，陽性組、陰性組的T、N、M分期經(jīng)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），而與陽性組相比，陰性組臨床Ⅲ期占比高于陽性組，臨床Ⅳ期低于陽性組（均P＜0.05）。見表2。

表2 外周CTCs在不同分期的NSCLC患者中陽性情況[例（%）]

3、血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的關(guān)系

在NSCLC患者，與陽性組相比，陰性組的血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平降低（均P＜0.05），見表3。

表3 NSCLC患者血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的關(guān)系（±s）

表3 NSCLC患者血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的關(guān)系（±s）

注：NSCLC為非小細(xì)胞肺癌，CEA為癌胚抗原，CA125為糖類抗原，CYFRA21-1為細(xì)胞角蛋白19片段，CTCs為循環(huán)腫瘤細(xì)胞

?

4、血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的相關(guān)性

經(jīng)Spearman相關(guān)性分析，外周CTCs水平與血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平均呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.445、0.436、0.423，均P＜0.05）。

討 論

NSCLC主要是因吸煙、職業(yè)因素等致病因素導(dǎo)致機(jī)體支氣管黏膜上皮或肺泡上皮細(xì)胞發(fā)生異常增長，進(jìn)而導(dǎo)致肺功能下降的一種疾病，近幾年，NSCLC的發(fā)病率呈逐年升高趨勢且趨向年輕化，現(xiàn)已對患者的身心健康及安全造成了不利影響。

外周CTCs是一種具有發(fā)展為轉(zhuǎn)移病變潛力腫瘤細(xì)胞，其可作為腫瘤轉(zhuǎn)移的主要途徑，且可真實(shí)反映腫瘤負(fù)荷，故其水平升高可提示患者的腫瘤病情惡化，同時(shí)其還可作為反映患者治療效果及預(yù)后的敏感指標(biāo)，進(jìn)而以有利于為患者合理個(gè)體化治療提供一定依據(jù)［6］。本研究結(jié)果顯示，在NSCLC患者，陽性組、陰性組的性別、年齡、病理類型及TNM分期經(jīng)比較無明顯差異，而與陽性組相比，陰性組Ⅲ期占比高于陽性組、Ⅳ期低于陽性組，表明在NSCLC患者中，外周CTCs計(jì)數(shù)與性別、年齡、病理類型、TNM分期無明顯關(guān)系，外周CTCs計(jì)數(shù)水平可隨著臨床分期進(jìn)展而升高，與呂曉偉和陸海軍［7］的研究結(jié)果相符。在NSCLC患者預(yù)后及評價(jià)治療效果中，血清CEA、CA125、CYFRA21-1可作為敏感的腫瘤標(biāo)志物，其水平越高表明患者的腫瘤病情越嚴(yán)重，預(yù)后及治療效果越差。相關(guān)研究表明，外周CTCs計(jì)數(shù)水平可用于早期診斷NSCLC，且具有較高的確診率，因此，血清腫瘤標(biāo)志物可與外周CTCs計(jì)數(shù)水平存在一定的關(guān)系［8］。本研究結(jié)果顯示，在NSCLC患者，與陽性組相比，陰性組的血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平降低，外周CTCs水平與血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平均呈正相關(guān)關(guān)系，表明NSCLC患者外周CTCs計(jì)數(shù)水平與血清腫瘤標(biāo)志物水平呈正相關(guān)關(guān)系，與費(fèi)小東［9］的研究結(jié)果相符。

綜上，在NSCLC患者，外周CTCs計(jì)數(shù)水平與性別、年齡、病理類型、TNM分期無明顯關(guān)系，而在臨床Ⅲ期患者中外周CTCs計(jì)數(shù)水平較低，Ⅳ期患者中外周CTCs計(jì)數(shù)水平較高，且外周CTCs水平與血清腫瘤標(biāo)志物水平均呈正相關(guān)關(guān)系。但因此項(xiàng)研究具有一定的缺點(diǎn)，如選取的樣本量較少，其可導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果發(fā)生一定的偏倚，進(jìn)而不能明確其間是否具有關(guān)聯(lián)性。因此臨床需采取大樣本量、多中心進(jìn)行深入研究，以便提高此項(xiàng)研究結(jié)果的準(zhǔn)確性。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突