龍勝香茶菜化學(xué)成分研究

王玎瑋，楊明珠，周星利，姜 北

（大理學(xué)院藥學(xué)院，云南大理 671000）

龍勝香茶菜化學(xué)成分研究

王玎瑋，楊明珠，周星利，姜 北*

（大理學(xué)院藥學(xué)院，云南大理 671000）

目的：研究龍勝香茶菜化學(xué)成分。方法：采用硅膠柱層析進(jìn)行分離純化化合物，依據(jù)理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果：從龍勝香茶菜葉乙醇提取物的石油醚部位分離出4個(gè)單體化合物，分別鑒定為龍勝香茶菜素E（1）、魯山冬凌草丙素（2）、β-谷甾醇（3）和十六烷酸（4）。結(jié)論：化合物4為首次從該植物中獲得；石油醚部位中活性成分β-谷甾醇含量近5%。

龍勝香茶菜；分離；二萜；β-谷甾醇

唇形科香茶菜屬（Isodon）植物全世界大約150種，我國(guó)分布有百余種，幾乎遍布全國(guó)，但以西南諸省區(qū)種類最多〔1〕。香茶菜屬植物在民間多作藥用，具有清熱解毒、活血破瘀、抗菌消炎、抗腫瘤和治療各種肝炎等功效〔2〕。龍勝香茶菜為多年生草本植物，該植物生長(zhǎng)地域狹小，僅分布于廣西桂林地區(qū)龍勝、臨桂等縣海拔500m以上的高寒地區(qū)〔1〕，為儲(chǔ)量極小的稀有植物，民間用全草入藥治療肝炎。前人曾對(duì)龍勝香茶菜進(jìn)行植化方面的分析研究工作，從中分離得到了十余個(gè)萜類化合物，其中大多數(shù)為二萜類化合物〔3-4〕。由龍勝香茶菜分離得到的二萜成分為對(duì)映-貝殼杉烷型二萜類化合物，其中多數(shù)為A-環(huán)被全取代類型，具有十分明顯的特點(diǎn)，此類成分目前僅在龍勝香茶菜中發(fā)現(xiàn)，部分成分具有很好的抗白血病腫瘤細(xì)胞活性〔4〕。為了全面細(xì)致地研究龍勝香茶菜的化學(xué)成分，為開發(fā)利用該植物資源創(chuàng)造條件，對(duì)龍勝香茶菜地上部分乙醇粗提物的石油醚部位進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，從中共分離得到4個(gè)化合物，本文報(bào)道這些成分的分離、鑒定工作。

圖1 化合物1-4的結(jié)構(gòu)

1 材料與方法

1.1 材料 本實(shí)驗(yàn)所用龍勝香茶菜（IsodonlungshengensisC.Y.Wu et H.W.Li）枝葉于1996年11月采自廣西壯族自治區(qū)龍勝縣花坪自然保護(hù)區(qū)，植物標(biāo)本由中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所林中文鑒定，標(biāo)本模式（KIB 96-11-08 Lin）存放于昆明植物研究所植化室。柱層析硅膠材料、薄層層析板硅膠G和GF254均為青島海洋化工廠生產(chǎn)。

1.2 儀器 質(zhì)譜由VG Auto Spec-3000質(zhì)譜儀測(cè)定，電離條件為70 eV；1H與13C-NMR由Bruker AM-400核磁共振波譜儀測(cè)定，四甲基硅烷（TMS）為內(nèi)標(biāo)。

1.3 提取分離 龍勝香茶菜樣品2.6 kg，粉碎后用乙醇回流提取，共提取3次，提取液蒸干后經(jīng)活性炭脫色，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等分配；石油醚部分除去溶劑后得浸膏50 g，密封后置于暗處干燥環(huán)境中保存至本實(shí)驗(yàn)開始。樣品以適量粗硅膠（100目）拌樣后用1 100 g 200-300目硅膠柱層析，氯仿-丙酮混合溶劑梯度洗脫（1∶0至0∶1），在TLC的檢測(cè)下合并相同組分得6個(gè)組分，顯色方法為10%硫酸甲醇溶液處理后烘烤顯色或碘蒸汽熏蒸顯色。

A組分（氯仿）：大量晶體析出，經(jīng)氯仿-丙酮重結(jié)晶后得化合物3（2.4 g）。

C組分（氯仿/丙酮9∶1）：經(jīng)硅膠柱層析（環(huán)己烷/異丙醇，石油醚/乙酸乙酯），結(jié)合重結(jié)晶等方法最終得到化合物2（14mg）和4（23mg）。

D組分（氯仿/丙酮8∶2-7∶3）：經(jīng)硅膠柱層析（石油醚/異丙醇，石油醚/乙酸乙酯），結(jié)合重結(jié)晶等方法最終得到化合物1（18mg）。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 討論

實(shí)驗(yàn)中共由該部位分離鑒定了4個(gè)化合物，其中4為首次從該植物中獲得。實(shí)驗(yàn)中未能從石油醚部位分離得到A-環(huán)全取代二萜類化合物，可能是由于全取代類型二萜C-1位均為連有OH的化合物，此類成分極性稍大，常難溶解于低極性溶劑中。

對(duì)于植物莖葉類樣品，其提取物中常含有大量的葉綠素等色素類物質(zhì)，往往使用石油醚分配的方法以除去這些小極性的成分對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的干擾；然而，從我們的研究結(jié)果來(lái)看，該部位含有大量的β-谷甾醇（約5%），由于該成分是許多植物中的有效成分之一，具有降低膽固醇、消炎、抗癌等生物活性〔7〕。因此，作為植物化學(xué)成分研究，使用該分配方法對(duì)研究結(jié)果影響不大；但是，若要進(jìn)行生物活性研究，則使用石油醚除色素有可能將部分活性成分帶出，使樣品中的活性成分分散，從而影響生物活性研究結(jié)果。

本實(shí)驗(yàn)部分工作由中科院昆明植物研究所孫漢董研究員研究組協(xié)助完成，在此表示感謝！

〔1〕中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志：第66卷〔M〕.北京：科學(xué)出版社，1977：512-532.

〔2〕孫漢董，許云龍，姜北.香茶菜屬植物二萜化合物〔M〕.北京：科學(xué)出版社，2001：93.

〔3〕羅炎，羅錦泰，林中文，等.龍勝香茶菜的成分-新二萜龍勝香茶菜素的結(jié)構(gòu)〔J〕.化學(xué)學(xué)報(bào)，1988，46：763-767.

〔4〕Jiang B，Lu ZQ，Hou AJ,etal.ent-kaurane Diterpenoids fromIsodonlungshengensis〔J〕.JNat Prod，1999，62（7）：49-53.

〔5〕盛漪，谷文英.β-谷甾醇異構(gòu)體的分離和初步鑒定〔J〕.無(wú)錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，21（6）：630-633.

〔6〕姚仲青，郭青.海州常山葉的化學(xué)成分研究〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16（6）：103-104.

〔7〕孫文基，繩金房.天然活性成分簡(jiǎn)明手冊(cè)〔M〕.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，1998：519-520.

（責(zé)任編輯 蔣 康）

Chem ical Constituents ofIsodonLungshengensis

WANGDingwei,YANGMingzhu,ZHOU Xingli,JIANG Bei*
（College of Pharmacy,DaliUniversity,Dali,Yunnan 671000,China）

Objective:To explore the chemical constituents ofIsodonlungshengensis.Methods:Compounds were separated and purified by silica gel column chromatography and their structures were elucidated on the basis of spectral data and chemical evidences.ResultsFour compounds were obtained from petroleum ether fraction of the extract from leaves ofI.lungshengensisand identified as lungshengenin E（1）,lushanrubescensin C（20）,β-sitosterol（3）,and palmitic acid（4）.ConclusionCompound 4 is isolated from this plant for the first time;there is very high amount ofβ-sitosterol in the petroleum ether fraction.

Isodonlungshengensis;isolation;diterpenoids;β-sitosterol

Q949.777.6

A

1672-2345（2011）02-0004-03

云南省中青年學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人后備人才基金資助項(xiàng)目（2008PY005）；教育部留學(xué)回國(guó)人員科研啟動(dòng)基金資助項(xiàng)目（〔2009〕1001）

2010-12-01

王玎瑋，碩士研究生，主要從事藥用植物化學(xué)研究.

*通信作者：姜北，教授，電話：13508726387.