寧立宏,譚占坤,杜 軍,雒 娜 ,孫鋒博,,宋天增*
(1.西藏自治區(qū)畜牧總站,西藏 拉薩 850002;2.西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,西藏 林芝 860000;3.那曲市畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣總站,西藏 那曲 852003;4.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,西藏 拉薩850009)
西藏是我國(guó)的五大牧區(qū)之一,綿羊存欄數(shù)多年來(lái)保持在1000萬(wàn)只左右,約占西藏牲畜總數(shù)的50%。綿羊養(yǎng)殖業(yè)是西藏經(jīng)濟(jì)與社會(huì)發(fā)展的重要驅(qū)動(dòng)引擎,同時(shí)也是農(nóng)牧民脫貧致富奔小康的重要產(chǎn)業(yè)“抓手”,其產(chǎn)業(yè)發(fā)展與提高農(nóng)牧民生活水平息息相關(guān)。
本課題組前期在羊的育肥生產(chǎn)試驗(yàn)中,通過(guò)對(duì)不適合留作種用的雌性羊進(jìn)行卵巢外科手術(shù)摘除式閹割去勢(shì),可避免因雌性羊發(fā)情期間的情緒躁動(dòng)而引起整個(gè)羊群的混亂,同時(shí)也避免了一些不適合育肥的偷配懷孕羊上市,而給生產(chǎn)管理帶來(lái)不必要的麻煩。然而,在同等飼養(yǎng)管理?xiàng)l件下,雌性西藏綿羊經(jīng)不同方法去勢(shì)后,有關(guān)其育肥效果的差異報(bào)道較少。為此,結(jié)合西藏的生產(chǎn)實(shí)際,對(duì)不適合留作種用的雌性藏綿羊進(jìn)行微創(chuàng)卵巢摘除和促性腺激素釋放激素(GnRH)免疫去勢(shì),比較其育肥效果和血清生長(zhǎng)激素(GH)的分泌水平,為GnRH免疫去勢(shì)的探索和去勢(shì)技術(shù)的應(yīng)用提供依據(jù)。
GnRH免疫去勢(shì)疫苗由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院曾憲垠教授提供。新鮮青苜蓿草和青貯飼料由安多縣強(qiáng)瑪鎮(zhèn)“萬(wàn)畝千只”基地提供。ELISA試劑盒購(gòu)于南京森貝伽生物科技有限公司,其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。精料顆粒料(表1)由拉薩新希望實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平
2021年7—10月,選擇75只1.5歲齡、體重相近且不適合留作種用的雌性藏綿羊,隨機(jī)分3組,每組25只,分別為對(duì)照組、GnRH免疫去勢(shì)組和卵巢摘除組。預(yù)試期7d,正試期112d。
試驗(yàn)期間對(duì)照組、GnRH免疫去勢(shì)組和卵巢摘除試驗(yàn)組均按當(dāng)?shù)啬撩穹拍亮?xí)慣白天自由放牧,每日10:30飼喂 1次,夜間補(bǔ)飼精料顆粒料 300g/(只·d)。各試驗(yàn)組采食和飲水自由。
1.4.1 去勢(shì)方法。GnRH免疫去勢(shì)法:于雌性藏綿羊頸部皮下注射1mLGnRH免疫去勢(shì)疫苗,8周后加免,注射方法及劑量同初次免疫。卵巢摘除法:參照陳傳友[1]的方法,在雌性藏綿羊腹中線左右兩側(cè)、離前端乳頭約2~3cm處的前緣,避開(kāi)可見(jiàn)血管,刮毛并用碘伏消毒,各縱切長(zhǎng)度2~3cm的創(chuàng)口,將腹腔鏡從一側(cè)創(chuàng)口插入腹腔,另一側(cè)創(chuàng)口插入子宮鉗,找到卵巢并拉至腹腔外將其摘除。手術(shù)創(chuàng)口撒160萬(wàn)單位的青霉素鉀后送回腹腔內(nèi),腹腔創(chuàng)口中間縫合1針,再撒80萬(wàn)單位青霉素鉀。
1.4.2 增重和屠宰性能。初免和卵巢摘除的當(dāng)天記為去勢(shì)后0周,以此類推。分別于0、4、8、12和16周采集3組試驗(yàn)羊的體重?cái)?shù)據(jù),16周時(shí)每組隨機(jī)屠宰10只試驗(yàn)羊。
育肥增重/kg=16周試驗(yàn)?zāi)┲兀?周試驗(yàn)始重;
屠宰率/%=胴體重量/畜禽活重×100。
1.4.3 血液指標(biāo)的采集與測(cè)定。分別于0、4、8、12和16周對(duì)3組試驗(yàn)羊進(jìn)行頸靜脈血樣5mL。所有血樣離心 15min(4℃,3000r/min)后分離血清,于-20℃保存?zhèn)溆茫瑓⒄誆LISA試劑盒購(gòu)說(shuō)明書(shū)測(cè)定血清GH水平。
所有數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件中的One-Way ANOVA進(jìn)行方差分析,結(jié)果用 “平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著。
圖1為不同去勢(shì)方法對(duì)雌性藏綿羊增重的影響。由圖1可知,試驗(yàn)前4周,對(duì)照組藏綿羊增重較快,卵巢摘除組育肥的藏綿羊增重較緩。4周后至試驗(yàn)結(jié)束,試驗(yàn)組藏綿羊增重較快,最終對(duì)照組、GnRH免疫去勢(shì)組和卵巢摘除組的藏綿羊末重分別為43.7、48.5和46.7kg。
圖1 不同去勢(shì)方法對(duì)雌性藏綿羊增重的影響
表2為不同去勢(shì)方法對(duì)齡雌性藏綿羊屠宰性能的影響。由表2可知,與對(duì)照組相比,GnRH免疫去勢(shì)組和卵巢摘除組顯著提高了藏綿羊的胴體重和屠宰率(P<0.05)。
表2 不同去勢(shì)對(duì)齡雌性藏綿羊屠宰性能的影響
表3為不同去勢(shì)方法對(duì)雌性藏綿羊血清GH水平的影響。由表3可知,在對(duì)雌性藏綿羊進(jìn)行免疫去勢(shì)的當(dāng)日,對(duì)照組與試驗(yàn)組藏綿羊血清中GH水平無(wú)顯著差異(P>0.05);試驗(yàn)期第4周時(shí),對(duì)照組和卵巢摘除組藏綿羊的血清GH水平差異不顯著(P>0.05),但GnRH免疫去勢(shì)組藏綿羊血清GH水平極顯著高于對(duì)照組(P<0.01);從第8周開(kāi)始至試驗(yàn)結(jié)束,試驗(yàn)組藏綿羊血清GH水平均極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。
表3 不同去勢(shì)對(duì)雌性藏綿羊血清GH水平的影響 μg/L
目前,關(guān)于GnRH免疫去勢(shì)和卵巢摘除對(duì)育肥藏綿羊血清GH水平影響的研究報(bào)道較少。其作用機(jī)理可能是去勢(shì)后,通過(guò)長(zhǎng)軸、短軸和超短軸反饋調(diào)節(jié)通路影響下丘腦活動(dòng)[2-4],進(jìn)而影響下丘腦—垂體—性腺軸(HPOA)對(duì)GH的分泌調(diào)節(jié)作用。本研究發(fā)現(xiàn),雌性藏綿羊在卵巢摘除后前幾周,可能是處于應(yīng)激和自身內(nèi)分泌調(diào)節(jié)適應(yīng)狀態(tài),體重增加較為緩慢,但GnRH免疫去勢(shì)組所受影響不明顯,增重快于卵巢摘除組。這與卵巢摘除后免疫機(jī)能下降的機(jī)理相反[5],可能是摘除卵巢后,卵巢內(nèi)存在的某種抑制素使雄性激素得以消除,降低了其對(duì)GH的負(fù)反饋,使得GH的質(zhì)量濃度得到提高,生長(zhǎng)期血清GH水平和組織中生長(zhǎng)激素受體(GHR)基因表達(dá)量增加有關(guān)[6-8],但具體原因有待進(jìn)一步探究。
本研究結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組的雌性藏綿羊血清GH水平呈顯著上升,胴體重和屠宰率均極顯著提高。這與之前的研究結(jié)論相一致,宋天增等[9]研究發(fā)現(xiàn),摘除2歲齡母山羊的卵巢能有效提高其血清GH水平,促進(jìn)肌肉組織生長(zhǎng)發(fā)育,經(jīng)過(guò)短期育肥后還可顯著提高山羊的屠宰率、凈肉重和凈肉率。王燕燕等[10]通過(guò)摘除山羊羔的卵巢,提高了山羊羔血清中GH水平,促進(jìn)了其日增重、胴體質(zhì)量和屠宰率。由此可見(jiàn),GH可有效促進(jìn)機(jī)體肌肉與骨骼的生長(zhǎng)發(fā)育,提高屠宰性能。
可通過(guò)去勢(shì)提高雌性藏綿羊血清GH水平,有效促進(jìn)其增重,提高胴體重和屠宰率,并且GnRH免疫去勢(shì)法效果更佳。