復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸生長性能、體組成、營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及氮磷排放的影響

■牛小天 THOBELA Louis Tyasi 陳秀梅 孔祎迪 鄒記興 彭 雷 王桂芹*

(1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林長春 130118；2. 林波波大學(xué)，林波波波羅克瓦尼0727；3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)海洋學(xué)院，廣東廣州 510642；4.遼寧省克達(dá)飼料有限公司，遼寧沈陽 110200)

大口黑鱸（Micropterus salmoides）又名加州鱸，是一種淡水兇猛肉食性魚類，原產(chǎn)于美國西部的加利福尼亞州[1]。在20 世紀(jì)60 年代美國開始集約化養(yǎng)殖[2]，80 年代被引進(jìn)中國大陸開始繁殖與養(yǎng)殖[3]，現(xiàn)已成為世界很多國家的飼養(yǎng)品種[4]。其具有肉質(zhì)肥美、營養(yǎng)價(jià)值高、適應(yīng)能力強(qiáng)、生長周期短、易起捕等優(yōu)點(diǎn)，深受養(yǎng)殖戶和消費(fèi)者青睞，已成為我國主要養(yǎng)殖的淡水名貴肉食性魚類之一。在集約化養(yǎng)殖過程中，配合飼料替代冰鮮魚投喂對(duì)大口黑鱸養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展做出了巨大的貢獻(xiàn)，但是隨著全球漁業(yè)資源逐漸的短缺以及肉食性魚類飼料主要原料魚粉的需求量不斷增加，導(dǎo)致魚粉價(jià)格居高不下，因此尋找合適的蛋白質(zhì)源替代蛋白質(zhì)含量高、氨基酸平衡的魚粉已成為研究的熱點(diǎn)。研究表明，植物蛋白源[5-6]、動(dòng)物蛋白源[7-8]、昆蟲蛋白源[9-10]及新型蛋白源[11]等均可被應(yīng)用到大口黑鱸配合飼料中，尤其復(fù)合動(dòng)植物蛋白[12]的應(yīng)用不僅解決了單一蛋白質(zhì)營養(yǎng)不均衡的缺點(diǎn)，也改善了魚的生長性能及飼料利用率[13]，但忽略了其在魚類生產(chǎn)中對(duì)水環(huán)境的影響。眾所周知，植酸是植物蛋白源中普遍存在的一種抗?fàn)I養(yǎng)因子，它不僅能夠降低飼料中磷的利用率，還會(huì)螯合某些蛋白質(zhì)和其他礦物元素，這些難以降解的螯合物隨著魚體的代謝過程最終被排泄到水環(huán)境中，進(jìn)而導(dǎo)致飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的流失和水體中氮、磷的負(fù)荷加重，使水體容易發(fā)生富營養(yǎng)化[13-14]。所以降低飼料成本，尋求適合替代魚粉的蛋白質(zhì)源，并開發(fā)出一種高效環(huán)保的配合飼料就成為了亟待解決的重要問題。

研究證實(shí)，植酸酶能夠有效水解植物蛋白源中的植酸，降低其抗?fàn)I養(yǎng)作用，改善魚的生長和飼料利用，減少氮、磷的排放，從而改善魚類賴以生存的水環(huán)境。飼料中添加1 500 U/kg 植酸酶可改善斑點(diǎn)叉尾鮰（Ictalurus punctatus）的生長性能，降低魚體的氮、磷排泄[14]。黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）稚魚飼料中添加植酸酶能夠提高消化道的消化酶活性和飼料營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率，并減少糞便中磷的排放[15]。在大豆?jié)饪s蛋白替代魚粉的真鯛（Pagrus major）飼料中添加植酸酶能夠提高魚體的粗蛋白含量和磷的沉積率[16]。雖然關(guān)于復(fù)合動(dòng)植物蛋白源在水產(chǎn)動(dòng)物上的研究頗多，但目前未見到大口黑鱸飼料中魚粉被復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代的同時(shí)補(bǔ)充植酸酶對(duì)魚體影響的報(bào)道。故本研究以大口黑鱸為試驗(yàn)對(duì)象，分析在復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉的飼料中添加植酸酶對(duì)魚體的生長性能、形體指標(biāo)、體組成、營養(yǎng)物質(zhì)的沉積率、表觀消化率及氮磷排放的影響，為開發(fā)大口黑鱸高效環(huán)保配合飼料提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

植酸酶（5 000 U/g）購于天津博菲德科技有限公司，其他原料均由遼寧省克達(dá)飼料有限公司提供。本試驗(yàn)采用2×3 雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，其中以三氧化二釔（Y2O3）作為內(nèi)源指示劑。以60%魚粉組作為對(duì)照組（T0 組），在T0 組基礎(chǔ)上利用復(fù)合動(dòng)植物蛋白（蝦粉、禽副產(chǎn)品粉、發(fā)酵豆粕、花生粕和谷朊粉）替代魚粉，替代水平分別為30%、40%和50%，再設(shè)置3個(gè)植酸酶添加水平，分別為0.01%、0.02%和0.03%，共配置9組（T0、T1、T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8 組和T9 組）等氮（47.50%）等能（19.33 MJ/kg）的試驗(yàn)飼料（見表1），并根據(jù)T0組必需氨基酸組成，添加晶體氨基酸（賴氨酸和蛋氨酸）使各組必需氨基酸趨于平衡（見表2）。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

表2 試驗(yàn)飼料氨基酸組成分析（%）

將各原料粉碎后，過60目篩網(wǎng)，按飼料配方稱重混勻后用絞肉機(jī)加工成粒徑1.2 mm 的顆粒飼料，風(fēng)干后保存于-20 ℃冰箱。

1.2 試驗(yàn)材料

大口黑鱸購自山東泰豐鴻基農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司，飼養(yǎng)在吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)的水產(chǎn)養(yǎng)殖試驗(yàn)室。選取魚體健壯、規(guī)格均一[（14.70±0.06）g]的大口黑鱸900尾，隨機(jī)分到30個(gè)水族箱中，每個(gè)水族箱30尾，并將30 個(gè)水族箱隨機(jī)分成10 組（每組3 重復(fù)）。暫養(yǎng)2 周后開始試驗(yàn)，暫養(yǎng)期投喂T0組飼料。

1.3 試驗(yàn)方法

養(yǎng)殖試驗(yàn)為期60 d，每天定時(shí)飽食投喂2次（8：30和17：00），投喂0.5 h后吸底清除殘餌，將殘餌置于烘箱中，65 ℃下烘干后稱重并記錄，待試驗(yàn)結(jié)束計(jì)算總攝食量時(shí)減掉殘餌重量。水中氨氮＜0.01 mg/L，溶解氧＞6.5 mg/kg，pH 6.3～7.2，水溫23～25 ℃，增氧泵24 h充氣。每天定時(shí)排污及換水，換水量為1/3。

1.4 樣品采集

養(yǎng)殖試驗(yàn)期間，每天利用虹吸法收集糞便，每次投喂飼料3 h后進(jìn)行收集，然后置于烘箱中65 ℃下烘干后，-20 ℃保存待測，收集糞便直到養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束為止。

為期60 d養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)試驗(yàn)大口黑鱸進(jìn)行24 h饑餓處理，統(tǒng)計(jì)每個(gè)試驗(yàn)水族箱中活魚尾數(shù)及飼料總投喂量。每個(gè)水族箱中隨機(jī)選取10 尾魚，用麻醉劑MS-222 處理后，紗布吸干魚體表面水分后稱重和測體長；其中5尾魚保存在-20 ℃冰箱，用于全魚體組成檢測；剩余5 尾魚進(jìn)行解剖，記錄內(nèi)臟重和肝臟重，計(jì)算其形體指標(biāo)。

1.5 指標(biāo)計(jì)算

1.5.1 生長性能、形體指數(shù)、沉積率、表觀消化率及總氮和總磷排放量指標(biāo)

魚體存活率、末均體重、增重率、特定生長率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率、臟體比、肝體比、肥滿度、營養(yǎng)物質(zhì)沉積率和表觀消化率及總氮、總磷排放量等指標(biāo)按照公式進(jìn)行計(jì)算。

存活率（SR，%）=100×試驗(yàn)?zāi)~尾數(shù)/試驗(yàn)初魚尾數(shù)

末均體重（FBM，g）=100×試驗(yàn)?zāi)~總體重/試驗(yàn)?zāi)~尾數(shù)

增重率（WGR，%）=100×（末均體重-初均體重）/初均體重

特定生長率（SGR，%/d）=100×（ln末均體重-ln初均體重）/試驗(yàn)天數(shù)

飼料系數(shù)（FCR）=飼料投喂量/（終末總體重-初始總體重）

蛋白質(zhì)效率（PER）=（終末總體重－初始總體重）/（飼料投喂量×飼料粗蛋白含量）

臟體比（VSI，%）=100×試驗(yàn)魚內(nèi)臟重/試驗(yàn)魚體重

肝體比（HIS，%）=100×試驗(yàn)魚肝臟重/試驗(yàn)魚體重

肥滿度（CF，g/cm3）=100×試驗(yàn)魚體重/試驗(yàn)魚體長3

營養(yǎng)物質(zhì)沉積率（NRE，%）=100×[（末均體重×終末魚體營養(yǎng)物質(zhì)含量）-（初均體重×初始魚體營養(yǎng)物質(zhì)含量）]/（飼料投喂量×飼料中營養(yǎng)物質(zhì)含量）

表觀消化率（ADC，%）=100×[1-（糞便中營養(yǎng)物質(zhì)含量×飼料中Y2O3含量）/（飼料中營養(yǎng)物質(zhì)含量×糞便中Y2O3含量）]

總氮排放量（TNW，g/kg）=1 000×（飼料投喂量×飼料粗蛋白含量）×（1-蛋白質(zhì)沉積率/100）/[（終末總體重－初始總體重）×6.25]

總磷排放量（TPW，g/kg）=1 000×（飼料投喂量×飼料磷含量）×（1-磷沉積率/100）/[（終末總體重－初始總體重）]

1.5.2 營養(yǎng)成分指標(biāo)

全魚、飼料和糞便的粗脂肪、粗灰分、水分、粗蛋白和磷的測定分別根據(jù)國標(biāo)法（GB/T 6433—2006、GB/T 6438—2007、GB/T 6435—2006、GB/T 6432—2018 和GB/T 6437—2018）進(jìn)行檢測；飼料中氨基酸含量采用華美辰L-3000 型全自動(dòng)氨基酸分析儀測定；飼料、糞便中Y2O3含量采用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（Expec 7000）測定。

1.6 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）”的形式來表示，利用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差和雙因素方差分析，若存在顯著差異性則進(jìn)行Duncan’s多重比較，顯著性水平為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸生長性能的影響（見表3）

表3 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸生長性能的影響

如表3 所示，大口黑鱸飼料中添加植酸酶水平（植酸酶水平）與復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉水平（替代水平）交互作用對(duì)各組的大口黑鱸初均體重、末均體重、增重率、特定生長率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率和存活率均無顯著影響。

植酸酶水平對(duì)各組之間的初均體重、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率和存活率均無顯著性影響（P＞0.05）；但對(duì)末均體重、增重率和特定生長率有顯著性影響（P＜0.05）。其中T4～T9 組的末均體重顯著高于T0～T3 組（P＜0.05），T0～T3 之 間 無 顯 著 性 差 異（P＞0.05）。T0～T3 組之間的增重率無顯著性差異（P＞0.05），T1、T2、T3、T6組和T7組之間的增重率無顯著性差異（P＞0.05），T1、T3、T4、T5、T6、T8 組和T9 組之間的增重率無顯著性差異（P＞0.05），但T4～T9組的增重率均顯著高于T0組（P＜0.05）。T4～T9組的特定生長率與T1組和T3組之間無顯著性差異（P＞0.05），T0～T3組之間的特定生長率無顯著性差異（P＞0.05），但T4～T9組的特定生長率顯著高于T0組和T2組（P＜0.05）。

替代水平對(duì)各組之間的初均體重、末均體重、增重率、特定生長率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率和存活率均無顯著性影響。

2.2 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸形體指標(biāo)的影響（見表4）

如表4所示，植酸酶水平及植酸酶水平與替代水平的交互作用對(duì)大口黑鱸的肝體比、肥滿度和臟體比均無顯著性影響（P＞0.05）。

表4 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸形體指標(biāo)的影響

替代水平對(duì)各組的肝體比和肥滿度均無顯著性影響，但對(duì)臟體比有顯著性影響。其中T3、T6組和T9組之間的臟體比無顯著性差異（P＞0.05），T0、T1、T2、T4、T5、T7 組和T8 組間的臟體比無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著低于T3、T6組和T9組（P＜0.05）。

2.3 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸全魚體組成的影響（見表5）

如表5所示，植酸酶水平與替代水平的交互作用對(duì)各組的水分、粗灰分、粗蛋白、粗脂肪和磷含量均無顯著性影響。但植酸酶水平和替代水平對(duì)各組的粗蛋白含量分別有顯著性影響，其中T6和T9的粗蛋白含量與T5組和T8組無顯著性差異（P＞0.05），T5組和T8組的粗蛋白含量與T3無顯著性差異（P＞0.05），T3組與T7組之間無顯著性差異（P＞0.05），T7組與T2、T4組之間無顯著差異（P＞0.05），T1組與T0組之間無顯著性差異（P＞0.05），但是T2～T9組各組間的粗蛋白含量均顯著高于T0組和T1組（P＜0.05）。

表5 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸全魚體組成的影響

植酸酶水平對(duì)各組的水分、粗灰分和粗脂肪均無顯著性影響，但對(duì)全魚的磷含量具有顯著性影響。T4～T9 組之間磷含量無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著高于T0～T3 組（P＜0.05）；T1、T2 組和T3 組之間磷含量無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著高于T0組（P＜0.05）。

替代水平對(duì)各組的水分、粗灰分、粗脂肪和磷含量均無顯著性影響（P＞0.05）。

2.4 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸營養(yǎng)物質(zhì)沉積率的影響（見表6）

如表6所示，替代水平及植酸酶水平與替代水平的交互作用對(duì)各組大口黑鱸粗蛋白沉積率、粗脂肪沉積率和磷沉積率均無顯著性影響。

表6 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸營養(yǎng)物質(zhì)沉積率的影響

植酸酶水平對(duì)各組大口黑鱸的粗脂肪沉積率無顯著性影響，但對(duì)粗蛋白沉積率和磷沉積率均有顯著性影響。其中T1～T9組之間的粗蛋白沉積率無顯著性差異（P＞0.05），T0、T1、T2、T3、T4組和T7組之間的粗蛋白沉積率無顯著性差異（P＞0.05），而T5、T6、T8組和T9組的粗蛋白沉積率均顯著高于T0組（P＜0.05）。T4～T9組之間磷沉積率無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著高于T0～T3組（P＜0.05）；T1、T2組和T3組之間磷沉積率無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著高于T0組（P＜0.05）。

2.5 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響（見表7）

表7 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

如表7所示，替代水平及植酸酶水平與替代水平的交互作用對(duì)各組大口黑鱸的粗蛋白表觀消化率、粗脂肪表觀消化率和磷表觀消化率均無顯著性影響（P＞0.05）。

植酸酶水平對(duì)各組大口黑鱸的粗蛋白表觀消化率、粗脂肪表觀消化率和磷表觀消化率均有顯著性影響。其中T4～T9 組之間粗蛋白表觀消化率均無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著高于T0～T3 組（P＜0.05）；T0～T3組之間粗蛋白表觀消化率均無顯著性差異（P＞0.05）。T4、T5 組和T6 組與T1、T2、T3、T7、T8 組和T9組之間粗脂肪表觀消化率均無顯著性差異（P＞0.05），T0～T3組之間粗脂肪表觀消化率均無顯著性差異（P＞0.05），T7、T8 組和T9 組之間粗脂肪表觀消化率均無顯著性差異（P＞0.05）；但T7、T8組和T9組的粗脂肪表觀消化率均顯著高于T0～T3 組（P＜0.05），T4、T5 組和T6 組的粗脂肪表觀消化率均顯著高于T0 組（P＜0.05）。T4～T9 組之間磷表觀消化率均無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著高于T0～T3組（P＜0.05）；T1、T2和T3組之間磷表觀消化率均無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著高于T0組（P＜0.05）。

2.6 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸的總氮、總磷排放量影響（見表8）

表8 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸的總氮、總磷排放量影響

如表8所示，替代水平及植酸酶水平與替代水平的交互作用對(duì)各組大口黑鱸的總氮和總磷排放量均無顯著性影響（P＞0.05）。

植酸酶水平對(duì)各組大口黑鱸的總氮排放量和總磷排放量均有顯著性影響。其中T1～T9 組之間的總氮排放量無顯著性差異（P＞0.05），T0、T1、T2、T3、T4組和T7 組之間的總氮排放量無顯著性差異（P＞0.05），T5、T6、T8 組和T9組之間的總氮排放量無顯著性差異（P＞0.05），但T5、T6、T8組和T9組的總氮排放量均顯著低于T0組（P＜0.05）。T4～T9組之間的總磷排放量均無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著低于T0～T3組（P＜0.05）；T1、T2組和T3組之間總磷排放量無顯著性差異（P＞0.05），但均顯著低于T0組（P＜0.05）。

3 討論

3.1 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸生長性能和形體指標(biāo)的影響

近幾年，隨著水產(chǎn)配合飼料的開發(fā)，蛋白源替代魚粉的研究越來越熱，但研究結(jié)果不完全一致，這可能是水產(chǎn)動(dòng)物的種類、發(fā)育階段、生長環(huán)境、投喂方法、蛋白質(zhì)源及其配比不同等因素造成的。試驗(yàn)在基礎(chǔ)飼料中利用復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉并添加植酸酶投喂大口黑鱸，發(fā)現(xiàn)植酸酶水平與復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代水平交互作用對(duì)大口黑鱸的生長性能和形體指標(biāo)沒有影響。

研究發(fā)現(xiàn)，利用復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉降低了大口黑鱸肝體比，但對(duì)其肥滿度、臟體比及生長性能沒有影響[17]。大口黑鱸配合飼料中利用5%～30%復(fù)合蛋白源等量替代魚粉后導(dǎo)致飼料系數(shù)升高，但對(duì)其他生長性能指標(biāo)和形體指標(biāo)沒有影響[18]。分別利用動(dòng)物蛋白、植物蛋白和復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼喂虹鱒（Oncorhynchus mykiss）發(fā)現(xiàn)，復(fù)合蛋白源替代魚粉后導(dǎo)致飼料轉(zhuǎn)化率下降，蛋白質(zhì)效率降低，而對(duì)肝體比沒有影響[19]。陸生復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉后對(duì)卵形鯧鲹（Trachinotus ovatus）的生長性能、肥滿度、肝體比和臟體比均沒影響[20]。本試驗(yàn)復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代水平對(duì)大口黑鱸的生長性能、肥滿度和肝體比均沒有影響，但提高了魚體的臟體比，這與上述報(bào)道結(jié)果不完全一致，可能是復(fù)合動(dòng)植物蛋白種類、配比或是替代水平不同導(dǎo)致的。

植酸酶能夠有效水解植物蛋白源中的抗?fàn)I養(yǎng)因子植酸，從而促進(jìn)魚類的生長和飼料利用。研究發(fā)現(xiàn)，鯽魚（Carassius auratus）飼糧中添加中性植酸酶能夠提高其生長性能、粗蛋白利用率和磷沉積率，降低糞磷的排放量，而對(duì)臟體比沒有影響[13]。飼料中20%的紅花粉替代魚粉并添加2 000 U/kg 植酸酶能夠提高虹鱒的生長性能，降低磷的排放量[21]。豆粕替代魚粉飼料中添加500～2 000 U/kg 的植酸酶能夠提高紅鰭東方鲀（Takifugu rubripes）幼魚的生長性能，對(duì)形體指標(biāo)沒有影響[22]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，植酸酶水平改善了大口黑鱸的生長性能，但對(duì)形體指標(biāo)沒有影響，這與上述報(bào)道相一致，表明在復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉的飼料中添加植酸酶能夠改善大口黑鱸的生長性能。

3.2 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸全魚體組成的影響

試驗(yàn)對(duì)大口黑鱸全魚的營養(yǎng)成分分析發(fā)現(xiàn)，植酸酶水平與復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代水平的交互作用對(duì)全魚的水分、粗灰分、粗脂肪、粗蛋白和磷的含量均沒有影響，但植酸酶水平和替代水平均對(duì)魚體的粗蛋白質(zhì)含量有顯著性影響。當(dāng)植酸酶水平和替代水平分別為0.02%～0.03%和40%～50%時(shí)能夠改善大口黑鱸的魚體粗蛋白含量；同時(shí)飼料中植酸酶水平對(duì)全魚的水分、粗灰分和粗脂肪含量均沒有明顯的改善，但當(dāng)植酸酶添加水平在0.02%～0.03%時(shí)，全魚的磷含量顯著改善。Ma 等[23]利用家禽副產(chǎn)品粉和豆粕替代魚粉的研究中發(fā)現(xiàn)，復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代水平對(duì)卵形鯧鲹全魚的水分、粗灰分、粗蛋白和粗脂肪含量均沒有影響，卻降低了磷的含量。有研究發(fā)現(xiàn)復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉投喂卵形鯧鲹，能夠降低全魚粗蛋白和磷的含量[20]。謝帝芝等[17]利用復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉的研究發(fā)現(xiàn)大口黑鱸的全魚粗蛋白含量升高，但對(duì)磷、粗脂肪、水分和粗灰分沒有影響。南亞野鯪（Labeo rohita）飼料中添加植酸酶和檸檬酸能夠提高全魚粗蛋白的含量[24]。豆?jié){濃縮蛋白替代魚粉的飼料中添加不同水平植酸酶研究發(fā)現(xiàn)，植酸酶水平對(duì)真鯛的魚體組成沒有影響[16]。飼料中添加植酸酶能夠提高草魚（Ctenopharyngodon idella）魚體的粗蛋白和磷的含量[25]。上述報(bào)道與本試驗(yàn)結(jié)果不完全一致，可能是魚的種類、食性及消化系統(tǒng)的差異造成的，但是本試驗(yàn)結(jié)果表明復(fù)合動(dòng)植物蛋白飼料中添加植酸酶能夠改善大口黑鱸的體組成。

3.3 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸營養(yǎng)物質(zhì)沉積率的影響

營養(yǎng)物質(zhì)的沉積率能夠反映出魚體的營養(yǎng)水平及健康狀態(tài)[26]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代水平及植酸酶水平與替代水平的交互作用對(duì)各組大口黑鱸粗蛋白沉積率、粗脂肪沉積率和磷沉積率均沒有影響。有研究發(fā)現(xiàn)復(fù)合動(dòng)植物蛋白飼料對(duì)大口黑鱸的氮和磷沉積率均沒有影響[17]。利用家禽副產(chǎn)品粉和豆粕替代魚粉發(fā)現(xiàn)隨著替代水平的升高大口黑鱸粗蛋白沉積率降低，磷沉積率升高，脂肪沉積率沒有影響[27]。牙鲆（Paralichthys olivaceus）飼料中復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代0～32%魚粉時(shí)不影響粗蛋白沉積率和粗脂肪沉積率，當(dāng)替代水平達(dá)到48%時(shí)，降低了粗蛋白沉積率[28]。魚粉分別被兩種復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代，發(fā)現(xiàn)低替代水平對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的沉積率沒有影響，而高替代水平能夠提高卵形鯧鲹內(nèi)氮的沉積率，而磷的沉積率沒有影響[20]。這與本試驗(yàn)替代水平的研究結(jié)果不完全一致，分析可能是復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉的水平不同及復(fù)合蛋白種類不同導(dǎo)致的結(jié)果。

本試驗(yàn)植酸酶水平對(duì)各組大口黑鱸的粗脂肪沉積率沒有影響，但能夠提高粗蛋白沉積率和磷沉積率，即當(dāng)復(fù)合動(dòng)植物蛋白飼料中添加植酸酶0.02%～0.03%時(shí)能夠提高大口黑鱸的粗蛋白沉積率和磷沉積率。有研究發(fā)現(xiàn)豆?jié){濃縮蛋白替代魚粉的飼料中添加0.04%植酸酶能夠提高真鯛的粗蛋白沉積率、粗脂肪沉積率和磷沉積率[16]。Norag 等[29]對(duì)尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）研究發(fā)現(xiàn)，低磷飼料中添加植酸酶能夠提高粗蛋白沉積率、粗脂肪沉積率和磷沉積率。這與本試驗(yàn)的結(jié)果相類似，表明大口黑鱸的復(fù)合動(dòng)植物蛋白飼料中添加植酸酶能夠提高其營養(yǎng)物質(zhì)的沉積率。

3.4 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率能夠反映出魚體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化程度，從而間接表明魚類消化酶活性的強(qiáng)弱[30]。有研究發(fā)現(xiàn)復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代75%的魚粉對(duì)虹鱒的粗蛋白表觀消化率沒有影響[19]。劉運(yùn)正等[31]利用酶解動(dòng)物軟骨蛋白粉和植物蛋白替代魚粉的研究發(fā)現(xiàn)，隨著替代水平的升高大菱鲆（Scophthalmus maximus）的粗蛋白表觀消化率降低。而本試驗(yàn)結(jié)果顯示，復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代水平對(duì)大口黑鱸的營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率沒有影響，這與上述報(bào)道中不完全一致，可能是魚的種類不同導(dǎo)致的結(jié)果，且本試驗(yàn)的植酸酶水平和蛋白替代水平對(duì)大口黑鱸的營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率沒有交互作用。

在真鯛的飼料中添加植酸酶發(fā)現(xiàn)，隨著添加水平的升高粗蛋白表觀消化率沒有顯著變化[16]。在鯽魚的研究中發(fā)現(xiàn)，在含有0.8%磷酸二氫鈣的飼料中添加植酸酶能夠提高粗蛋白表觀消化率、粗脂肪表觀消化率和磷表觀消化率[13]。南亞野鯪飼料中添加植酸酶能夠提高粗蛋白表觀消化率、粗脂肪表觀消化率和磷表觀消化率[24]。這與本試驗(yàn)的結(jié)果相一致，這表明在大口黑鱸復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶能夠改善營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率。

3.5 復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉飼料中添加植酸酶對(duì)大口黑鱸魚體總氮、總磷排放量的影響

近年來，隨著大口黑鱸集約化養(yǎng)殖的發(fā)展，魚體健康不僅受到疾病的威脅，還面臨著水環(huán)境逐漸惡化的影響，其中氮磷是導(dǎo)致水質(zhì)污染的重要因素之一[32]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代水平及植酸酶水平與替代水平的交互作用對(duì)大口黑鱸的總氮排放量和總磷排放量均沒有影響。大口黑鱸的配合飼料中魚粉被復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代后，對(duì)總氮排放量沒有影響，但是降低了總磷的排放量[17]。隨著卵形鯧鲹飼料中復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉水平的升高，能夠提高其總氮排放量，但是對(duì)總磷排放量沒有影響[23]。利用復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉后，能夠降低虹鱒的總氮排放量和總磷排放量[20]。上述報(bào)道與本試驗(yàn)結(jié)果不完全一致，這可能是動(dòng)植物蛋白源種類不同、比例不同或魚的種類不同導(dǎo)致的。

研究發(fā)現(xiàn)，在鯽魚的飼料中添加植酸酶能夠降低其總磷排放量[13]。斑點(diǎn)叉尾鮰飼料中添加植酸酶能夠降低總氮排放量和總磷排放量[14，33]。本試驗(yàn)結(jié)果與上述報(bào)道一致，表明在復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代魚粉的飼料中添加植酸酶能夠降低大口黑鱸的總氮排放量和總磷排放量，減輕水環(huán)境的富營養(yǎng)化及污染。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，配合飼料中復(fù)合動(dòng)植物蛋白替代40%的魚粉并添加0.02%～0.03%的植酸酶能夠改善大口黑鱸的生長性能、形體指標(biāo)、體組成、營養(yǎng)物質(zhì)沉積率、表觀消化率和氮磷排放量，對(duì)蛋白質(zhì)的節(jié)約與水環(huán)境的保護(hù)起到重要作用。