雪峰山區(qū)域不同產(chǎn)地天麻化學(xué)成分含量比較研究

薛華麗 田玉橋 邱小燕 謝美鳳 林承雄 陳三春 楊珊

天麻（Gastrodia elata Blume）是我國(guó)四大名貴藥材之一，藥用歷史久遠(yuǎn)，具有祛風(fēng)止痛，化瘀通絡(luò)，平肝潛陽(yáng)，平息肝風(fēng)，制止痙攣的功效[1～3]。目前我國(guó)天麻主要有五種變型[4]，即松天麻（Gastrodia elata Bl.f.alba S.Chow）、紅天麻（Gastrodia elata Bl.f.elata）、綠天麻（Gastrodia elata Bl.f.viridis）、烏天麻（Gastrodia elata Bl.f.glauca S.Chow）和黃天麻（Gastrodia elata Bl.f.flavida S.Chow）。天麻素和天麻多糖是天麻的重要化學(xué)成分，天麻素具有保護(hù)人體神經(jīng)元細(xì)胞、緩解疼痛、提高免疫力、抗氧化、鎮(zhèn)靜安定、促進(jìn)睡眠和抗炎等作用，天麻多糖具有增強(qiáng)免疫力、抑制細(xì)菌生長(zhǎng)、清除自由基、降低血壓的功效[5，6]。

本研究以雪峰山區(qū)域的紅天麻、烏天麻、烏紅雜交天麻和綠天麻四種不同變型天麻為研究對(duì)象，比較紅天麻、烏天麻、綠天麻、烏紅雜交天麻中的浸出物、天麻多糖、天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量，為本區(qū)域的天麻含量評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料從湖南、貴州、湖北等地采集了12份不同變型天麻的新鮮塊莖，洗凈，蒸制15min，置于55℃烘箱中烘干，粉碎后過(guò)100 目藥典篩，備用。所采樣品由同一名專家鑒定，樣品信息見(jiàn)表1。

表1 樣品信息表

1.2 儀器與試劑DGG-9123A 型電熱鼓風(fēng)干燥箱（森信儀器有限公司）；AL204 型電子天平（梅特勒-托利多有限公司）；UV-1800 型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（島津儀器有限公司）；Agilent 液相色譜儀（俊奇儀器設(shè)備有限公司）。蒽酮、無(wú)水乙醇、過(guò)氧化氫、氫氧化鈉、稀乙醇、鹽酸、濃硫酸（懷化科之源儀器有限公司）；天麻素標(biāo)準(zhǔn)品、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)羥基苯甲醇標(biāo)準(zhǔn)品（上海詩(shī)丹德標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)有限公司）；乙腈、磷酸（北京索萊寶科技有限公司）。

1.3 指標(biāo)測(cè)定方法

1.3.1 浸出物含量測(cè)定 取天麻樣品2～4g，并記錄數(shù)據(jù)，加入到錐形瓶里，并加入75ml 稀乙醇，蓋好瓶塞并稱定其總重量，靜置1h，連接冷凝管后，打開(kāi)電熱爐加熱錐形瓶，直到溶液沸騰，并保持微沸的狀態(tài)1h。等溶液冷卻后，將錐形瓶拿下并塞好瓶塞，再次稱定并記錄其總重量，加入稀乙醇，并使其總重量與第一次稱的總重量相等，混合均勻，過(guò)濾，將蒸發(fā)皿烘干，并使之達(dá)到恒重的狀態(tài)，蒸發(fā)皿中再加入25ml 濾液，轉(zhuǎn)移到水浴鍋上進(jìn)行蒸干，調(diào)節(jié)干燥箱溫度為105℃，并將蒸發(fā)皿放入干燥箱中烘干3h，再放到干燥器中冷卻30min，然后快速地進(jìn)行稱重。再計(jì)算出天麻樣品中浸出物的含量（%）。進(jìn)行平行試驗(yàn)。

1.3.2 天麻多糖含量測(cè)定 采用蒽酮-硫酸法測(cè)定天麻多糖[7]，在檢測(cè)波長(zhǎng)為620nm 的情況下，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=0.6848X+0.0132，R2=0.9987，測(cè)定天麻樣品溶液的吸光度，再計(jì)算天麻多糖的含量。

1.3.3 天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量測(cè)定 采用液相色譜法測(cè)定天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量[8]，系統(tǒng)條件：固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸溶液（3:97）；檢測(cè)條件的波長(zhǎng)為220nm。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010 整理分析。運(yùn)用單因素方差分析比較不同產(chǎn)地天麻的浸出物、多糖、天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量的差異；采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行顯著性分析；采用OriginPro 2021 進(jìn)行相關(guān)性分析。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同產(chǎn)地天麻浸出物含量比較12 個(gè)不同產(chǎn)地的天麻浸出物平均含量為21.497%，變異系數(shù)為0.175%，變幅在15.673%～28.975%，極差為13.302%，標(biāo)準(zhǔn)差為3.770%。表明浸出物含量相對(duì)穩(wěn)定。根據(jù)《中國(guó)藥典》規(guī)定[9]，天麻浸出物含量不得少于15.0%，本研究中不同變型天麻均符合要求，其中貴州畢節(jié)和大方的烏天麻浸出物含量顯著高于其他產(chǎn)地的天麻（P<0.05）。湖南綏寧的烏紅雜交天麻和湖北英山的綠天麻浸出物含量較低，顯著低于其他變型天麻的浸出物含量（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.2 不同產(chǎn)地天麻多糖含量比較12 個(gè)不同產(chǎn)地的天麻多糖平均含量為19.371%，變異系數(shù)為0.249%，變幅在12.926%～27.681%，極差為14.755%，標(biāo)準(zhǔn)差為4.825%。湖南洪江的紅天麻和湖北羅田的紅天麻多糖含量顯著高于其他產(chǎn)地的天麻（P<0.05）。湖南會(huì)同的綠天麻多糖含量較低，且顯著低于其他變型天麻的多糖含量（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 不同產(chǎn)地天麻的天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量比較12 個(gè)不同產(chǎn)地的天麻素及對(duì)羥基苯甲醇的平均含量為0.389%，變異系數(shù)為0.293%，變幅在0.235%～0.603%，極差為0.368%，標(biāo)準(zhǔn)差為0.114%，表明天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量在產(chǎn)地之間差異較大。貴州畢節(jié)和德江烏天麻的天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量最高，顯著高于其他產(chǎn)地天麻（P<0.05）。湖北羅田的紅天麻、湖北宜昌的烏紅雜交天麻和湖南會(huì)同的綠天麻的天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量較低，顯著低于其他產(chǎn)地天麻（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同產(chǎn)地天麻的浸出物、天麻多糖、天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量比較（）

表2 不同產(chǎn)地天麻的浸出物、天麻多糖、天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量比較（）

2.4 相關(guān)性分析采用OriginPro 2021 軟件對(duì)12 個(gè)不同產(chǎn)地天麻的浸出物、多糖、天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量進(jìn)行相關(guān)性分析，浸出物含量與天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量呈極顯著正相關(guān)（r=0.652，P<0.01）；浸出物含量與多糖、多糖與天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量無(wú)顯著相關(guān)性（r=0.023、r=-0.061，P>0.05）。

2.5 聚類分析采用SPSS 27.0 軟件以“組件聯(lián)接”和“平方歐式距離”聚類方法對(duì)不同產(chǎn)地的天麻進(jìn)行聚類分析，當(dāng)歐式距離約為10.0 時(shí)，12 個(gè)天麻產(chǎn)地可分為三類。第一類包括湖南洪江、湖南溆浦、湖北羅田的紅天麻和湖北恩施的烏紅雜交天麻，該類產(chǎn)地的天麻多糖含量較高；第二類包括貴州大方和貴州畢節(jié)的烏天麻，該類產(chǎn)地天麻的浸出物含量較高；第三類包括貴州德江、畢節(jié)的烏天麻，湖南綏寧、湖北宜昌的烏紅雜交天麻，湖南新寧、湖南會(huì)同、湖北英山的綠天麻，該類產(chǎn)地天麻多糖含量相對(duì)較低。見(jiàn)圖1。

圖1 聚類分析

3 討論

不同產(chǎn)地及變型的天麻隨栽培土壤、氣候環(huán)境變化，其有效成分含量均有較大差異，隨著種植技術(shù)的突破和大健康產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，天麻種植區(qū)域不斷擴(kuò)大，本研究對(duì)雪峰山區(qū)域12 個(gè)不同產(chǎn)地的天麻浸出物、天麻多糖、天麻素及對(duì)羥基苯甲醇成分含量進(jìn)行了比較分析?！吨袊?guó)藥典》2020 版規(guī)定天麻浸出物含量不得少于15.0%，本研究中的12 個(gè)不同產(chǎn)地、不同變型天麻浸出物含量均高于15.0%，其中貴州畢節(jié)的烏天麻的浸出物含量最高（28.975%），其次是貴州大方的烏天麻（26.754%）和湖南新寧的綠天麻（24.327%）。天麻多糖是天麻中重要的有效成分，也是一種衡量天麻品質(zhì)質(zhì)量的指標(biāo)，不同變型和不同的環(huán)境因素造成天麻中多糖含量有所差異，本試驗(yàn)中湖南洪江的紅天麻多糖含量最高（27.681%），其次是湖北羅田的紅天麻（26.337%）和湖南溆浦的紅天麻（24.983%），紅天麻的多糖含量高于烏天麻、綠天麻和烏紅雜交天麻，這與王銳等[10]的研究結(jié)果一致，產(chǎn)地相同時(shí)，紅天麻中天麻多糖含量與其他三個(gè)品種天麻中天麻多糖含量存在較大差異（P<0.05），而變型相同時(shí)，生長(zhǎng)產(chǎn)地為云南的紅天麻中天麻多糖含量超過(guò)了生長(zhǎng)產(chǎn)地為湖北和陜西的紅天麻。本研究中湖南洪江的紅天麻多糖含量最高，可能與其特殊的氣候環(huán)境因素有關(guān)，高海拔、晝夜溫差大使當(dāng)?shù)刂参镏刑欠值暮肯鄬?duì)于其他地區(qū)高。天麻素及對(duì)羥基苯甲醇總含量是評(píng)價(jià)天麻質(zhì)量的重要指標(biāo)，本研究中，烏天麻的天麻素其對(duì)羥基苯甲醇總含量相對(duì)較高，其中最高的是貴州畢節(jié)的烏天麻（0.603%），其次是貴州德江的烏天麻（0.575%）和貴州大方的烏天麻（0.489%）。王彩云等[11]研究表明，不同產(chǎn)地的天麻中天然活性成分對(duì)羥基苯甲醇和天麻素的含量有差異，可能是生長(zhǎng)條件等因素導(dǎo)致。

通過(guò)對(duì)不同產(chǎn)地的天麻進(jìn)行聚類分析，第一類包括湖南洪江、湖南溆浦、湖北羅田的紅天麻和湖北恩施的烏紅雜交天麻，該類產(chǎn)地的天麻多糖含量較高，第二類包括貴州大方和貴州畢節(jié)的烏天麻，該類產(chǎn)地天麻的浸出物含量較高，第三類包括貴州德江、畢節(jié)的烏天麻，湖南綏寧、湖北宜昌的烏紅雜交天麻，湖南新寧、湖南會(huì)同、湖北英山的綠天麻，該類產(chǎn)地天麻多糖含量相對(duì)較低。本研究為雪峰山區(qū)域不同變型天麻開(kāi)發(fā)利用和產(chǎn)業(yè)化推廣提供數(shù)據(jù)參考。