不同年齡群體上頜第一磨牙齦溝液中骨膜蛋白含量及咬合力的差異

焦嬌，張樞宏，張懷偉，俞慧婷

正畸治療是利用各種矯正裝置，對(duì)牙齒、牙槽骨及頜骨施加適當(dāng)?shù)摹吧锪Α?，使其產(chǎn)生生理性移動(dòng)，最終達(dá)到口頜系統(tǒng)的平衡、穩(wěn)定和美觀[1]。近年來研究指出多種蛋白質(zhì)與牙周健康或疾病相關(guān)[2]。骨膜蛋白是一種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，是維持結(jié)締組織完整性的重要調(diào)節(jié)劑。牙周膜中的骨膜蛋白多是由成纖維細(xì)胞和成骨細(xì)胞分泌而來，彌漫性分布于細(xì)胞外基質(zhì)及鄰近的膠原纖維中，起著重要的結(jié)構(gòu)介質(zhì)和黏附分子的作用，是牙周組織完整性必不可少的分泌性黏附分子，同時(shí)也是骨轉(zhuǎn)換的重要生物標(biāo)志物[3-4]。齦溝液是一種易于識(shí)別和測(cè)量的生物介質(zhì)，提取輕松且無創(chuàng)，齦溝液中的骨膜蛋白水平被認(rèn)為是評(píng)估牙周疾病易感性和活性的可靠指標(biāo)[5]。此外，咬合力及咬合接觸被認(rèn)為是評(píng)估牙齒主功能區(qū)健康狀況的重要指標(biāo)[6]?？谇徽淖罴褧r(shí)期是青少年階段，但這一時(shí)期患者正處于牙釉質(zhì)脫礦和牙齦炎的高發(fā)期[7]，最大限度保證正畸患者口腔健康相關(guān)生活質(zhì)量是患者的迫切需求。因此，本研究探討年齡因素對(duì)上頜第一磨牙齦溝液中骨膜蛋白含量及咬合力的影響，以期為臨床正畸治療提供參考。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2021 年1—3 月在浙江省嘉興市中醫(yī)醫(yī)院口腔科就診的年齡在13～18 歲（A組）和30～35 歲（B 組）的正畸患者各90 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）全牙列無先天缺失牙，均為天然牙；（2）無咬合、牙齦及牙周疾病，口腔衛(wèi)生佳；（3）上頜第一磨牙及與之有咬合接觸的鄰牙和對(duì)頜牙無補(bǔ)料及修復(fù)體；（4）無正畸治療史，以及影響咬合的修復(fù)史；（5）對(duì)本研究知情且簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）妊娠及哺乳期女性；（2）吸煙或有系統(tǒng)性疾病。A 組男42 例，女48例。B 組男43 例，女47 例。兩組性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究通過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，按臨床研究要求登記備案。

1.2 方法

1.2.1 齦溝液總蛋白和骨膜蛋白含量的測(cè)定 所有患者均于正畸治療前測(cè)定齦溝液總蛋白和骨膜蛋白含量。齦溝液樣本收集：棉卷隔濕后，使用通用型牙周刮治器去除周圍菌斑及軟垢，避免污染和阻塞微毛細(xì)提取管，輕輕吹干牙齦表面，在齦溝中放入10 l 微毛細(xì)管，排除混有血液或唾液的齦溝液樣本。每個(gè)齦溝液樣本僅保留2 l，連同微毛細(xì)管一起放入無菌管中，—80℃保藏待測(cè)?？偟鞍缀凸悄さ鞍缀繙y(cè)定：采用考馬斯亮藍(lán)法蛋白定量測(cè)試盒（南京建成，A045-2）檢測(cè)齦溝液總蛋白含量。齦溝液樣品用0.9%氯化鈉溶液以1∶49 稀釋，2 500 r/min 離心10 min（離心半徑10cm），取上清加染色液混勻待測(cè)；于595 nm 處分別檢測(cè)空白管、標(biāo)準(zhǔn)管及測(cè)定管吸光度（A）值，計(jì)算得出齦溝液總蛋白量；其中蛋白濃度（g/L）=[（A測(cè)定—A空白）/（A 標(biāo)準(zhǔn)— A 空白）]×標(biāo)準(zhǔn)品濃度（0.563 g/L）。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)齦溝液中的骨膜蛋白，人骨膜蛋白ELISA試劑盒（Bio-swamp）由武漢貝茵萊生物科技有限公司生產(chǎn)，具體操作參見試劑盒說明書操作方法。

1.2.2 咬合力的測(cè)定方法 使用 TSCAN III 系統(tǒng)檢測(cè)患者上頜第一磨牙的咬合力。將大小合適的傳感片放入患者口中并將緊貼于上頜牙列使其位于正中，囑患者自然咬住傳感片至牙尖交錯(cuò)位（上下牙列接觸時(shí)，前牙正常覆頜覆蓋，后牙頜面間呈尖窩交錯(cuò)關(guān)系），囑患者控制咬合至最廣泛接觸，并無不適感，如此重復(fù)3 次，記錄均值，單位為牛頓（N）。

1.3 觀察指標(biāo)（1）比較患者的菌斑指數(shù)（PI）、牙齦指數(shù)（GI）、牙周探診深度（PD）和臨床附著水平（GAL）；（2）比較兩組齦溝液中總蛋白和骨膜蛋白含量；（3）比較兩組咬合力的大小。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組PI、GI、PD 和GAL 比較 兩組PI、GI、PD 和GAL 差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見表1。

表1 兩組PI、GI、PD 和GAL 比較

2.2 兩組齦溝液總蛋白和骨膜蛋白含量比較 兩組齦溝液總蛋白含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但A組齦溝液中骨膜蛋白濃度高于B組（P＜0.05），見表2。

表2 兩組齦溝液總蛋白和骨膜蛋白含量比較

2.3 兩組咬合力比較 A組咬合力（341.31±18.62）N，大于B組的（327.13±20.34）N，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.878，P＜0.05）。

3 討論

臨床醫(yī)生一直致力于通過誘導(dǎo)、重建良好的咬合關(guān)系來幫助牙齒不齊患者恢復(fù)有效的咀嚼功能，以及獲得協(xié)調(diào)的顏面外觀，維持良好的咀嚼系統(tǒng)功能狀態(tài)[8]。齦溝液是牙齦組織的滲出液，其成分主要來源于血清和局部牙齦結(jié)締組織[9]。由于齦溝液取樣簡(jiǎn)單無創(chuàng)，可重復(fù)取樣，通常容易被患者接受。因此，齦溝液相關(guān)檢查已與咬合力及咬合接觸檢查一樣，成為評(píng)估牙周組織損傷及正畸治療療效的重要檢查手段。骨膜蛋白是臨床常用的炎癥性疾病生物標(biāo)志物，在腫瘤疾病和心血管疾病的診療方面，應(yīng)用廣泛[10]。骨膜蛋白與口腔疾病關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)，骨膜蛋白在正常牙齦的上皮-結(jié)締組織連接處高表達(dá)，而在炎癥牙齦組織中弱表達(dá)，可作為評(píng)估慢性牙周炎等疾病患者牙齦組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的可靠指標(biāo)[11]。以往大多研究主要探討正常牙和牙周炎患牙齦溝液中骨膜蛋白含量，有關(guān)年齡對(duì)骨膜蛋白含量的影響研究報(bào)道較少。本研究通過檢測(cè)不同年齡患者齦溝液中骨膜蛋白含量及咬合力的大小，期望為進(jìn)一步的矯正治療提供更好的個(gè)性化治療方案。

本研究結(jié)果顯示矯正前青少年牙齒咬合力大于成年人。既往研究表明處于13～18 歲的青少年，其牙齒基本替換完成，但骨骼仍處于生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期；而成年人相較于青少年，有著成型的面部和骨骼，一般認(rèn)為牙齒咬合問題發(fā)生的主要原因是不良的上下頜骨發(fā)育導(dǎo)致[12]，因此在青少年中的咬合力要大于成年人。一項(xiàng)有關(guān)不同年齡人群上頜第一磨牙咬合主功能區(qū)分布的研究發(fā)現(xiàn)，17～23 歲的青少年上頜第一磨牙咬合點(diǎn)較多，且主功能區(qū)分布較為分散，隨著年齡增長(zhǎng)咬合點(diǎn)數(shù)目下降，主功能區(qū)分布趨于集中[13]，這進(jìn)一步表明青少年牙齒咬合情況與成年人存在明顯差異。本研究結(jié)果顯示A 組齦溝液中的骨膜蛋白水平高于B 組（P＜0.05），但兩組齦溝液總蛋白水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），這提示青少年患者齦溝液中的骨膜蛋白水平與成年人存在明顯差異。牙周膜將牙齒錨定在牙槽骨中，吸收和分散應(yīng)力，并在外力作用下適應(yīng)性改建，牙周膜中的骨膜蛋白作為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子1的下游因子，主要通過刺激TGF-1 信號(hào)系統(tǒng)與反饋機(jī)制，促進(jìn)膠原合成和成熟，發(fā)揮形成穩(wěn)定膠原網(wǎng)絡(luò)及參與膠原重塑的作用[14]。相關(guān)研究表明，機(jī)械應(yīng)力可誘導(dǎo)骨膜蛋白的表達(dá)增強(qiáng)及活化，具有時(shí)間依賴性，在富含膠原蛋白和不斷受到機(jī)械應(yīng)力的組織中，骨膜蛋白的表達(dá)水平隨著機(jī)械應(yīng)力的增加而增加[15]。由于青少年咬合力大于成年人，故所受到的機(jī)械力也大于成年人，因此檢測(cè)青少年齦溝液中的骨膜蛋白水平高于成年人。不過，本研究也存在一定的不足，本研究所選患者年齡范圍較小，病例相對(duì)較集中，關(guān)于年齡對(duì)牙齒咬合力及其齦溝液中骨膜蛋白含量的水平的深層影響，還需進(jìn)行更深入研究。

綜上所述，青少年上頜第一磨牙不僅咬合力高于成年人，而且其齦溝液中骨膜蛋白含量也顯著高于成年人，這進(jìn)一步說明在青少年時(shí)期進(jìn)行牙齒矯正效果更好，其恢復(fù)速度更快，并且效果也更穩(wěn)定。