復(fù)方中藥緩解產(chǎn)蛋雞熱應(yīng)激研究

于文會(huì)，金銀珠，姜曉文，劉 斯，孫夢(mèng)晴，鄒任杰，任燕龍，葛 銘，王海彬

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，哈爾濱 150030；2.黑龍江省普通高校動(dòng)物普通疾病防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱 150030；3.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)中獸醫(yī)研究所，哈爾濱 150030）

熱應(yīng)激是機(jī)體在高溫環(huán)境下因溫度過(guò)高產(chǎn)生的非特異性應(yīng)答反應(yīng)[1]。熱應(yīng)激時(shí)，動(dòng)物機(jī)體生理狀態(tài)和生產(chǎn)性能產(chǎn)生明顯變化，造成養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重。雞皮膚無(wú)汗腺且被覆較厚羽毛，散熱性差，在夏季高溫天氣時(shí)，易產(chǎn)生熱應(yīng)激反應(yīng)，影響?zhàn)B雞業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。成年蛋雞生產(chǎn)最佳環(huán)境溫度為19～22℃[2]，此時(shí)蛋雞生長(zhǎng)性能和免疫功能最佳。23～28.2℃通過(guò)加快呼吸頻率散熱，溫度高于28℃時(shí)蛋雞易發(fā)生熱應(yīng)激反應(yīng)[3]。Dantzer等研究證明，熱應(yīng)激引發(fā)炎癥性細(xì)胞因子（Ⅰnterlukin-1等）過(guò)度表達(dá)而影響雞免疫反應(yīng)[4]。當(dāng)環(huán)境溫度高于30℃時(shí)，產(chǎn)蛋雞卵黃成熟率降低導(dǎo)致產(chǎn)蛋率下降，其發(fā)生機(jī)制可能是由于下丘腦分泌的促性腺激素水平降低，血液中孕酮、睪酮、雌激素含量均降低，影響卵巢功能和卵泡發(fā)育[5]。已有試驗(yàn)證明通過(guò)改變氣候使卵泡大小、雌二醇濃度及促黃體生成素（Luteinizing hormone，LH）受體表達(dá)時(shí)間發(fā)生改變，延長(zhǎng)排卵過(guò)程[6]。熱應(yīng)激增加蛋雞體內(nèi)活性氧（Reactive oxygen species，ROS），通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化降低蛋黃質(zhì)量[7]。當(dāng)環(huán)境溫度在21～25℃時(shí)，蛋雞產(chǎn)蛋率降低0.5%，25℃以上時(shí)，產(chǎn)蛋率下降更快[8]。不僅蛋雞產(chǎn)蛋量下降，蛋品質(zhì)也降低。熱應(yīng)激也造成雞采食量減少，Kala等試驗(yàn)證明，在炎熱和潮濕天氣中，蛋雞采食量減少20%[9]。Sohail等研究表明，42日齡肉仔雞在慢性熱應(yīng)激下采食量降低16.4%，體重降低32.6%，料耗比提高25.6%[10]。環(huán)境溫度升高至耐受溫度時(shí)，雞腸道內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，例如盲腸細(xì)菌種類和含量降低，菌群平衡[11]。熱應(yīng)激還導(dǎo)致空腸致病菌生長(zhǎng)速度增加，致病菌對(duì)腸道產(chǎn)生不良刺激[12]，導(dǎo)致腸道內(nèi)菌群失衡，增加細(xì)菌易位和炎癥反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)[13]，主要體現(xiàn)在小腸絨毛區(qū)域發(fā)生水腫，絨毛斷裂，絨毛高度降低，致腸絨毛表面積減少[14]。因此，熱應(yīng)激還可引起腸道菌群失調(diào)，影響日糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收。

中藥防控畜禽熱應(yīng)激是利用中獸醫(yī)健脾利濕，解暑散熱理論，改善脾胃功能，促進(jìn)日糧消化吸收。熱應(yīng)激導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)動(dòng)物生產(chǎn)性能下降。黃芪作為補(bǔ)氣藥，廣泛用于畜禽養(yǎng)殖。Zeng等研究表明，黃芪多糖防控奶牛熱應(yīng)激試驗(yàn)中，能夠下調(diào)皮質(zhì)酮，上調(diào)三碘甲狀腺和甲狀腺素，降低應(yīng)激反應(yīng)[15]。周鴻緣等研究發(fā)現(xiàn)，黃芪提取物可以降低熱應(yīng)激環(huán)境下肉雞空腸中ⅠL-1、ⅠL-6和TNF-α的mRNA表達(dá)，增加含錳超氧化物歧化酶（MnSOD）和CAT活性[16]。王天元發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖還可增加腸道絨毛高度，降低不同腸段隱窩深度，提高絨窩比[17]。刺五加是抗氧化良藥，可以緩解熱應(yīng)激引起的氧化應(yīng)激損傷。Yokozawa等研究發(fā)現(xiàn)，刺五加提取物可降低NO和脂質(zhì)過(guò)氧化水平，增加過(guò)氧化氫酶和GSH-Px的活性[18]。在奶牛熱應(yīng)激試驗(yàn)中，刺五加緩解熱應(yīng)激導(dǎo)致的奶牛采食量下降，提高乳脂肪、乳蛋白、乳密度等關(guān)鍵性能指標(biāo)[19]。祁延澤研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加刺五加、黃芪、延胡索組成的復(fù)方中藥，對(duì)慢性熱應(yīng)激肉雞的肝臟具有保護(hù)作用，可減輕肉雞肝臟細(xì)胞空泡化和細(xì)胞腫脹，降低肉雞血清中MDA含量，提高SOD含量[20]。

本研究以中獸醫(yī)理氣寬腸，利濕健脾理論為組方原則，通過(guò)測(cè)定蛋雞產(chǎn)蛋率、采食量、粉料比、腸道排空及HSP70、抗氧化應(yīng)激、抗炎等指標(biāo)，評(píng)價(jià)復(fù)方中藥緩解熱應(yīng)激效果，為今后中藥在畜禽養(yǎng)殖熱應(yīng)激中應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)藥品

中藥（刺五加、黃芪、枳殼、山藥、茯苓）購(gòu)自哈爾濱中藥材市場(chǎng)；SOD試劑盒、GSH-Px試劑盒、MDA試劑盒，以上試劑盒均購(gòu)自南京建成科技有限公司；HSP70 ELⅠSA試劑盒、TNF-αELⅠSA試劑盒、ⅠL-6 ELⅠSA試劑盒，以上試劑盒均購(gòu)自江蘇酶免實(shí)業(yè)有限公司。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組與飼養(yǎng)管理

85周齡海蘭褐殼蛋雞45只，體重為（1 780±50）g，購(gòu)自哈爾濱市香坊區(qū)幸福養(yǎng)雞場(chǎng)。在動(dòng)物房適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后，隨機(jī)分為3組，每組15只，分別為正常對(duì)照組、熱應(yīng)激對(duì)照組和復(fù)方中藥組。復(fù)方中藥組和熱應(yīng)激對(duì)照組飼養(yǎng)條件為溫度30～37℃，濕度55%～60%；正常對(duì)照組飼養(yǎng)條件為25～28℃，濕度40%。復(fù)方中藥按1‰添加在日糧中，熱應(yīng)激對(duì)照組和正常對(duì)照組給予正常日糧；自由采食飲水，試驗(yàn)周期為21 d。動(dòng)物使用符合東北農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利與倫理委員會(huì)章程的管理和規(guī)定。

1.3 蛋雞采食測(cè)定

每日8:00～9:00稱量體重和剩余料重，記錄給料量，計(jì)算日均采食量和日增重，日均采食量=（給料量-剩余料量）/每組只數(shù)。

在7、14和21 d前1 d 22:00禁食，第2天8:00飼喂記錄給料量，停止采食后斷食斷水并記錄剩余料量，報(bào)紙接取收集糞便并記錄各組每次排糞時(shí)間點(diǎn)，報(bào)紙?zhí)崆昂娓煞Q重，排空后糞便和報(bào)紙一起烘干稱重，排空標(biāo)準(zhǔn)為當(dāng)前排糞時(shí)間點(diǎn)后1 h不再排便，計(jì)算糞料比與排空時(shí)間。糞料比=排糞量/采食量，排空時(shí)間=各排糞時(shí)間點(diǎn)距給料時(shí)間點(diǎn)時(shí)間平均數(shù)。每日記錄各組產(chǎn)蛋數(shù)。

1.4 抗氧化能力測(cè)定

采集血液后，置于37℃溫箱2 h后，取出置于離心機(jī)，以3 000 r·min-1離心5 min，分離血清，保存于-80℃冰箱中。利用生化試劑盒測(cè)定血清中SOD活性、MDA含量和GSH-Px活性，測(cè)定步驟均按照說(shuō)明書操作。

1.5 血清IL-6、TNF-α和HSP70測(cè)定

通過(guò)ELⅠSA試劑盒測(cè)定雞血清，ELⅠSA試劑盒在2～8℃條件下保存，取出后在室溫下平衡30 min后使用。每個(gè)樣品3個(gè)復(fù)孔，每板作1次標(biāo)準(zhǔn)曲線。ⅠL-6、TNF-α、HSP70標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：0、2.5、5、10、20、40 ng·L-1；0、4、8、16、32、64 ng·L-1；0、25、50、100、200、400 ng·L-1。按說(shuō)明書操作后在酶標(biāo)儀中讀取OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各孔濃度，保存數(shù)據(jù)并分析。

1.6 腸道菌群16S r DNA檢測(cè)

在試驗(yàn)21 d時(shí)取雞盲腸內(nèi)容物，分裝后于-80℃冰箱中保存，用于16S rDNA擴(kuò)增子測(cè)序。

1.7 數(shù)據(jù)處理與分析

利用SPSS24.0（San Diego，CA，USA）對(duì)數(shù)據(jù)作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并表示為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤平均值（SEM）”。組間統(tǒng)計(jì)學(xué)差異通過(guò)單向或雙向ANOVA確定，并作鄧肯檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異顯著。利用GraphPad 7.0繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 日均采食量

在試驗(yàn)1～7 d，與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組和復(fù)方中藥組日均采食量均極顯著升高（P＜0.01）。在試驗(yàn)8～14 d，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組日均采食量極顯著降低（P＜0.01），復(fù)方中藥組顯著降低（P＜0.05）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組和復(fù)方中藥組日均采食量極顯著升高（P＜0.01）。在試驗(yàn)15～21 d，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組日均采食量極顯著降低（P＜0.01）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組和復(fù)方中藥組日均采食量極顯著升高（P＜0.01）。

結(jié)果可見，復(fù)方中藥對(duì)熱應(yīng)激下蛋雞日均采食量均有提升作用，可改善熱應(yīng)激對(duì)蛋雞食欲降低的影響，結(jié)果見圖1。

圖1 復(fù)方中藥對(duì)蛋雞日均采食量的影響Fig.1 Effects of compound Chinese medicine on average daily feed intake of laying hens

2.2 糞料比

在21 d試驗(yàn)期中，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組糞料比極顯著升高（P＜0.01）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，復(fù)方中藥組糞料比極顯著降低（P＜0.01）。結(jié)果可見，復(fù)方中藥對(duì)熱應(yīng)激下蛋雞糞料比有降低作用，證明其可提高日糧消化吸收率，且與正常對(duì)照組較為接近，結(jié)果見圖2。

圖2 復(fù)方中藥對(duì)蛋雞糞料比的影響Fig.2 Effects of compound Chinese medicine on the ratio of manure to feed

2.3 消化道排空時(shí)間

在21 d試驗(yàn)期中，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組排空時(shí)間極顯著升高（P＜0.01）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組、復(fù)方中藥組排空時(shí)間極顯著降低（P＜0.01）。結(jié)果可見，復(fù)方中藥有減少熱應(yīng)激下蛋雞排空時(shí)間的作用，結(jié)果見圖3。

圖3 復(fù)方中藥對(duì)蛋雞排空時(shí)間的影響Fig.3 Effects of compound Chinese medicine on the emptying time of laying hens

2.4 脾指數(shù)測(cè)定

在21 d試驗(yàn)期中，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組脾指數(shù)極顯著降低（P＜0.01），而復(fù)方中藥組脾指數(shù)降低不顯著（P＞0.05）。與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，復(fù)方中藥組脾指數(shù)顯著升高（P＜0.05）。結(jié)果可見，復(fù)方中藥對(duì)熱應(yīng)激引起的水濕困脾具有改善作用，結(jié)果見圖4。

圖4 復(fù)方中藥對(duì)蛋雞脾臟指數(shù)的影響Fig.4 Effects of compound Chinese medicine on the spleen index of laying hens

2.5 產(chǎn)蛋率

在試驗(yàn)1～7 d，與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組和復(fù)方中藥組產(chǎn)蛋率均極顯著升高（P＜0.01）。在試驗(yàn)8～14 d，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組產(chǎn)蛋率極顯著降低（P＜0.01），復(fù)方中藥組顯著降低（P＜0.05）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組產(chǎn)蛋率極顯著升高（P＜0.01），復(fù)方中藥組顯著升高（P＜0.05）。在試驗(yàn)15～21 d，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組產(chǎn)蛋率極顯著降低（P＜0.01）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組產(chǎn)蛋率極顯著升高（P＜0.01），復(fù)方中藥組顯著升高（P＜0.05）。結(jié)果表明，復(fù)方中藥可緩解因熱應(yīng)激引起的蛋雞產(chǎn)蛋率下降作用，結(jié)果見圖5。

圖5 復(fù)方中藥對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率的影響Fig.5 Effects of compound Chinese medicine on egg production rate of laying hens

2.6 主要氧化反應(yīng)指標(biāo)

在21 d試驗(yàn)期中，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組GSH-Px活力極顯著降低（P＜0.01），復(fù)方中藥組GSH-Px活力極顯著升高（P＜0.01）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組和復(fù)方中藥組GSH-Px活力極顯著升高（P＜0.01，見圖6a）。

與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組、復(fù)方中藥組T-SOD活力差異不顯著（P＞0.05）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，復(fù)方中藥組T-SOD活力極顯著升高（P＜0.01，見圖6b）。

與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組MDA含量極顯著升高（P＜0.01），復(fù)方中藥組MDA含量顯著降低（P＜0.05）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組、復(fù)方中藥組MDA含量極顯著降低（P＜0.01，見圖6c）。

圖6 復(fù)方中藥對(duì)蛋雞血清中GSH-Px活力、T-SOD活力、MDA含量的影響Fig.6 Effect of compound Chinese medicine on GSH-Px activity,T-SOD activity and MDA content in serum of laying hens

結(jié)果可見，復(fù)方中藥對(duì)熱應(yīng)激下蛋雞提升抗氧化能力作用明顯，復(fù)方中藥組抗氧化能力超過(guò)正常對(duì)照組。

2.7 血液中IL-6、TNF-α含量

在21 d試驗(yàn)期中，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組ⅠL-6含量極顯著升高（P＜0.01）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組、復(fù)方中藥組含量極顯著降低（P＜0.01）。與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組TNF-α含量極顯著升高（P＜0.01）；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組和復(fù)方中藥組TNF-α含量極顯著降低（P＜0.01）。結(jié)果表明，復(fù)方中藥對(duì)熱應(yīng)激下蛋雞炎癥因子增加均有緩解作用，結(jié)果見圖7。

圖7 復(fù)方中藥對(duì)蛋雞血清中IL-6、TNF-α含量的影響Fig.7 Effects of compound Chinese medicine on the contents of IL-6 and TNF-αin the serum of laying hen

2.8 血液中HSP70含量

在21 d試驗(yàn)期中，與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，正常對(duì)照組和復(fù)方中藥組HSP70含量極顯著降低（P＜0.01，見圖8）。結(jié)果表明，在復(fù)方中藥作用下蛋雞熱應(yīng)激反應(yīng)明顯降低。

圖8 復(fù)方中藥對(duì)蛋雞血清中HSP70含量的影響Fig.8 Effects of compound Chinese medicine on the content of HSP70 in the serum of laying hens

2.9 腸道菌群16S r DNA測(cè)定

2.9.1 腸道菌群Alpha多樣性分析

測(cè)序深度較小時(shí)，OTU數(shù)目變化斜率較大，當(dāng)深度達(dá)40 000 reads時(shí)OTU數(shù)目變化斜率較小，曲線趨于平緩，表明試驗(yàn)中40 000 reads測(cè)序深度量可開展微生物多樣性分析（見圖9）。

圖9 Alpha多樣性分析結(jié)果Fig.9 Results of Alpha diversity analysis

2.9.2 腸道菌群組成

根據(jù)物種注釋結(jié)果，選取每組樣品在各級(jí)分類學(xué)門水平（Phylum）相對(duì)豐度生成的柱狀圖。在門水平上，擬桿菌門（Bacteroides）、厚壁菌門（Firmicutes）和變形菌門（Proteobacteria）為3個(gè)占比優(yōu)勢(shì)菌門。復(fù)方中藥組與正常對(duì)照組相對(duì)豐度差異較小（見圖10）。

圖10 腸道菌群門水平相對(duì)豐度測(cè)定結(jié)果Fig.10 Results of gut microbiota phylum level relative abundance determination

3 討 論

熱應(yīng)激時(shí)機(jī)體產(chǎn)生大量ROS，包括超氧陰離子（O2-·）、羥自由基（OH·）和過(guò)氧化氫（H2O2）。ROS在體內(nèi)逐漸蓄積，當(dāng)機(jī)體抗氧化能力不足以清除大量ROS，內(nèi)環(huán)境平衡破壞，過(guò)多ROS導(dǎo)致DNA損傷、脂質(zhì)過(guò)氧化、蛋白質(zhì)羰基化等，影響機(jī)體正常生理功能[21]。機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生大量ROS引起線粒體氧化磷酸化反應(yīng)速率加快，線粒體電子轉(zhuǎn)移效率降低并導(dǎo)致電子泄露，產(chǎn)生大量超氧根離子（O2-·）[22]。O2-·生成速率加快，降低SOD-1的mRNA水平[23]。破壞機(jī)體抗氧化系統(tǒng)平衡，最終導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生損傷。當(dāng)發(fā)生熱應(yīng)激時(shí)，雞生產(chǎn)性能如日增重、產(chǎn)蛋率及料重比均受影響[24]。因此，緩解熱應(yīng)激對(duì)雞生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的負(fù)面作用，可降低養(yǎng)殖戶經(jīng)濟(jì)損失。有關(guān)緩解熱應(yīng)激降低畜禽生產(chǎn)性能下降研究較多，有物理降溫、中藥、調(diào)節(jié)機(jī)體電解質(zhì)平衡等多種方法，其中中藥通過(guò)調(diào)節(jié)五臟功能緩解熱應(yīng)激廣受關(guān)注[25]。單安山等研究在飼料中添加0.5%～1%中草藥飼料添加劑，可緩解熱應(yīng)激[26]。本研究依據(jù)中獸醫(yī)暑濕邪氣理論，暑濕困脾，可致脾運(yùn)化水谷功能減弱，采食量下降，導(dǎo)致畜禽生產(chǎn)性能下降。本研究以理氣寬腸，利濕健脾為組方原則，理氣寬腸選用枳殼；利濕健脾，選用茯苓、山藥。結(jié)果顯示試驗(yàn)1～7 d、8～14 d、15～21 d，復(fù)方中藥組采食量、糞料比、腸道排空、產(chǎn)蛋率等指標(biāo)均高于熱應(yīng)激對(duì)照組，表明復(fù)方中藥通過(guò)健脾胃，促進(jìn)消化，緩解熱應(yīng)激引起生產(chǎn)性能下降。

當(dāng)發(fā)生熱應(yīng)激時(shí)，家禽機(jī)體處于高溫環(huán)境下，造成抗氧化功能的一系列酶活性下降，活性氧積蓄增加，機(jī)體氧化-抗氧化失衡，引起機(jī)體氧化損傷。熱應(yīng)激時(shí)血液中GSH-Px活性和SOD活性降低，而MDA含量顯著增加。本研究發(fā)現(xiàn)，熱應(yīng)激對(duì)照組GSH-Px活性和SOD含量低于正常對(duì)照組，而熱應(yīng)激對(duì)照組MDA含量顯著高于正常對(duì)照組。

熱休克反應(yīng)是一種保護(hù)細(xì)胞、組織和機(jī)體免受環(huán)境應(yīng)激因素有害影響的一種穩(wěn)態(tài)機(jī)制。在發(fā)生熱應(yīng)激時(shí)，HSP70表達(dá)上調(diào)抵抗應(yīng)激反應(yīng)[27]，常用來(lái)作為熱應(yīng)激重要分子標(biāo)記蛋白。叢霞等研究表明中藥活性成分燈盞乙素通過(guò)調(diào)控HSP70緩解熱應(yīng)激[28]。本研究中，發(fā)生熱應(yīng)激時(shí)，熱應(yīng)激對(duì)照組血清中HSP70含量顯著高于正常對(duì)照組，在飼料中添加復(fù)方中藥后，血清中HSP70含量明顯降低，在復(fù)方中藥作用下，恢復(fù)至正常對(duì)照組水平。結(jié)果表明，復(fù)方中藥可明顯緩解熱應(yīng)激，降低血清中HSP70表達(dá)。當(dāng)發(fā)生熱應(yīng)激時(shí)，機(jī)體為維持穩(wěn)態(tài)，免疫系統(tǒng)緊急激活，出現(xiàn)炎癥反應(yīng)，其中TNF-α、ⅠL-6是機(jī)體內(nèi)重要炎癥因子。本研究結(jié)果表明，與正常對(duì)照組相比，熱應(yīng)激對(duì)照組TNF-α、ⅠL-6含量極顯著升高，說(shuō)明熱應(yīng)激引起雞血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放ⅠL-6和TNF-α，發(fā)生炎癥反應(yīng)；與熱應(yīng)激對(duì)照組相比，復(fù)方中藥組ⅠL-6、TNF-α含量極顯著降低（P＜0.01），表明復(fù)方中藥通過(guò)抗炎作用緩解熱應(yīng)激。

腸道菌群在受高溫等異常環(huán)境刺激后，組分發(fā)生改變，導(dǎo)致腸道健康受損，營(yíng)養(yǎng)吸收減少，腸壁完整性遭到破壞并引發(fā)免疫系統(tǒng)功能障礙。腸道菌群檢測(cè)結(jié)果表明，根據(jù)物種注釋結(jié)果，分析每組樣品在門水平的差異可知，擬桿菌門（Bacteroides）、厚壁菌門（Firmicutes）、變形菌門（Proteobacteria）為腸道優(yōu)勢(shì)菌門，與前人研究結(jié)果一致[29-30]。結(jié)果顯示熱應(yīng)激增加擬桿菌門相對(duì)豐度，減少厚壁菌門、變形菌門相對(duì)豐度，復(fù)方中藥組一定程度上可緩解這種變化。但有關(guān)復(fù)方中藥通過(guò)調(diào)控腸道菌群緩解產(chǎn)蛋雞熱應(yīng)激相關(guān)機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

復(fù)方中藥干預(yù)產(chǎn)蛋雞熱應(yīng)激，通過(guò)加快產(chǎn)蛋雞胃腸排空時(shí)間，緩解由熱應(yīng)激導(dǎo)致的蛋雞采食量下降；通過(guò)抗炎、抗應(yīng)激作用，緩解熱應(yīng)激導(dǎo)致的產(chǎn)蛋雞生殖系統(tǒng)損傷；通過(guò)提高擬桿菌、厚壁菌等優(yōu)勢(shì)菌群占比，改善因熱應(yīng)激導(dǎo)致的腸道益生菌群豐度失衡。