三種市售洗手液的抑菌效果比較

侯曉陽

（廈門市產(chǎn)品質量監(jiān)督檢驗院，福建廈門 361000）

隨著人們生活水平的不斷提高，洗手液已經(jīng)成為家庭必備的洗手產(chǎn)品。與傳統(tǒng)的香皂和肥皂相比，洗手液具有很明顯的優(yōu)勢。首先，和香皂、肥皂一類的產(chǎn)品相比，洗手液配備的擠壓泵頭可以有效地避免交叉污染，即使多人使用也可以保證內部產(chǎn)品的衛(wèi)生，而且擠壓泵頭使產(chǎn)品相對密封，與環(huán)境和空氣隔絕，可以長時間的保證產(chǎn)品中的有效成分的活性；再次，傳統(tǒng)的香皂、肥皂產(chǎn)品基本都是單一的皂基成分，對皮膚的刺激性較強，長期使用會造成皮膚的干燥、皸裂、脫皮等現(xiàn)象，而洗手液中添加了各種椰油、甘油等溫和成分，pH值呈弱酸性，可以有效地保護手部皮膚，防止皮膚干裂。

目前市售的洗手液主要有以下2種類型：一種是主打去污、除垢、護膚等功能的洗手液，這種洗手液一般標有“衛(wèi)妝準字”的標識，其功能就和一般和洗發(fā)露、洗面奶的功能一樣，只能達到去污、清潔的目的。另外一種是主打消毒、抑菌、殺菌功效的洗手液，這種洗手液一般帶有“衛(wèi)消證字”，屬于消毒產(chǎn)品，比如日常生活中可能接觸到的金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、致病性腸桿菌等，通過洗手液中的有效成分即可達到殺滅和抑制病菌生長的目的。這兩類產(chǎn)品雖然都是洗手液，但是批準文號卻是不同單位頒發(fā)的，“衛(wèi)妝準字”是衛(wèi)生部化妝品檢測部門針對化妝品頒發(fā)的，屬于化妝品范疇，而“衛(wèi)消證字”則屬于消毒產(chǎn)品，需要省市衛(wèi)生廳局核發(fā)生產(chǎn)許可證。2020年的新冠病毒的大爆發(fā)，讓人們更加重視消毒、殺菌、抑菌功效洗手液的重要性。而且由于手部與外界環(huán)境接觸的頻繁性，很多便攜的、免水洗的消毒、殺菌洗手液受到了很多消費者的青睞。這種洗手液不僅方便攜帶，而且擺脫了對水源的依賴，可以隨時保障人們的健康安全。

為了驗證洗手液產(chǎn)品的抑菌效果，本次實驗選擇了市面上常見的3種抑菌型洗手液，分別選擇了具有代表性的2種致病菌：革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌ATCC 6538和革蘭氏陰性菌大腸埃希氏菌ATCC 25922，通過QB/T 2738-2012 《日化產(chǎn)品抗菌抑菌效果的評價方法》對其抑菌效果進行了檢測，為消費者選擇洗手液產(chǎn)品時提供一些消費建議。

1.材料與方法

1.1 材料

3種市售品牌洗手液，分別為趣凈泡沫洗手液、屈臣氏牌抑菌泡沫洗手液和藍月亮抑菌洗手液。

1.2 供試菌株

金黃色葡萄球菌ATCC 6538，大腸埃希氏菌ATCC 25922，均保種于廈門市產(chǎn)品質量監(jiān)督檢驗院。

1.3 儀器與試劑

電子分析天平（梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司）、移液槍（Eppendorf ）、高壓蒸汽滅菌鍋（HIRAYAMA）、恒溫培養(yǎng)箱（上海精宏實驗設備有限公司）、冰箱（海爾）、正倒置一體化熒光顯微鏡（ECHO）、恒溫干燥箱（上海愛朗儀器有限公司）、生物安全柜（The baker company）。

營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基（陸橋）：稱取18.0g于1L蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解，分裝，115℃高壓滅菌30min備用。

營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（陸橋）：稱取33.0g于1L蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解，121℃高壓滅菌15min，冷卻至46℃左右備用。

0.03mol/L磷酸鹽緩沖液 (PBS)：稱取無水磷酸氫二鈉2.83g、磷酸二氫鉀1.36g，加蒸餾水1000mL，待完全溶解后，調pH至7.2～7.4，經(jīng)121℃壓力蒸汽滅菌20min后備用。

標準硬水（硬度342mg/L）：稱取氯化鈣（CaCl2）0.034g、氯化鎂（MgCl2·6H2O）0.139g，加蒸餾水1000mL，經(jīng)121℃壓力蒸汽滅菌20min后備用。

1.4 實驗方法[1]

（參照QB/T 2738-2012日化產(chǎn)品抗菌抑菌效果的評價方法7.3抑菌型日化產(chǎn)品的抑菌效果檢驗方法：懸液定量法）

1.4.1 細菌繁殖體懸液的制備

（1）從-80℃冰箱中取出凍干金黃色葡萄球菌ATCC 6538和大腸埃希氏菌ATCC 25922菌株管，在生物安全柜內打開，取少量加至5.0mL營養(yǎng)肉湯，輕柔吹吸數(shù)次，使菌種融化分散，置37℃培養(yǎng)24h。

（2）取一環(huán)第1代培養(yǎng)的菌懸液，劃線接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，于37℃培養(yǎng)24h。挑取上述第2代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，于37℃培養(yǎng)24h，即為第3代培養(yǎng)物。

（3）取菌種第3代營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物（24h），用5.0mL吸管吸取3.0mL稀釋液加入斜面試管內，反復吹吸，洗下菌苔，隨后，用5.0mL吸管將洗液移至另一無菌試管中，用電動混合器混合（振蕩）20s，使細菌懸浮均勻。

1.4.2 菌液稀釋

用PBS將1.4.1制備的菌懸液稀釋至濃度為105CFU/mL左右的工作濃度。

1.4.3 樣品稀釋

取原液和用無菌標準硬水稀釋至50%和10%濃度的樣品，各5.0mL放入滅菌試管中，20℃恒溫5min。

1.4.4 菌液與樣品混合

吸取試驗菌液0.1mL加入含5.0mL樣品的試管中，迅速混勻，并立即計時20min。

1.4.5 傾倒平板

取0.5mL混合液加入4.5mL滅菌的PBS試管中，充分混勻。放置10min后，吸取樣液1mL置于滅菌平皿內，每個稀釋度接種兩個平皿。傾注15mL左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，轉動平皿使其混合均勻，待培養(yǎng)基凝固后翻轉平皿并置于37℃培養(yǎng)48h。以PBS代替試驗樣品，同時按上述步驟操作，作為對照樣品。

1.4.6 抑菌效果評價

記錄菌落總數(shù)并求平均值，按照公式：

抑菌率（%）=(Ⅰ-Ⅱ)/Ⅰ×100 計算抑菌率。

式中：Ⅰ—對照樣品平均菌落數(shù)；

Ⅱ—試驗樣品平均菌落數(shù)。

2.結果與分析

3種洗手液的實驗結果如表1所示，其中樣品1為趣凈泡沫洗手液，樣品2為屈臣氏牌抑菌泡沫洗手液，樣品3為藍月亮抑菌洗手液。

表1 3種洗手液的實驗結果

從實驗結果來看，3種洗手液的抑菌效果都很不錯，而且即使在濃度為10%的情況下，3種洗手液都有明顯的抑菌效果。對照有效成分說明，發(fā)現(xiàn)3種洗手液的有效成分不同。樣品1趣凈泡沫洗手液的有效成分為0.05%～0.1%的O-傘花烴-5-醇。這種物質又叫作3-甲基-4-異丙基苯酚或者1-羥基-3-甲基-4-異丙基苯，目前常作為防腐劑和抗氧化劑用于牙膏、化妝品中，也用于一些治療皮膚病的藥品中。這種成分可以幫助清潔皮膚，也可以破壞和抑制微生物的生長，尤其是當它和鋅聯(lián)用時，可以穿透牙菌斑深處，并迅速作用細菌的細胞膜，達到很好的殺菌作用，所以這種成分在牙膏中的應用最多。而且該成分風險系數(shù)低，無毒、無刺激，孕婦適用[2]。樣品2屈臣氏牌抑菌泡沫洗手液的有效成分為0.08%～0.1%的芐索氯銨。芐索氯銨屬于季銨鹽類化合物，又4個乙基基團連接到一個中央氮原子上，這種成分由于具有很好的表面活性，常用于日化產(chǎn)品中的防腐劑和殺菌劑，也廣泛用于醫(yī)院環(huán)境的消毒[3]。但是芐索氯銨具有比較強烈的刺激性，只能限于一些淋洗類的產(chǎn)品中使用，比如牙膏等這類口腔產(chǎn)品就不允許使用。樣品3藍月亮抑菌洗手液的有效成分為0.32%～0.38%的水楊酸。水楊酸是一種脂溶性的有機酸，對很多細菌、真菌都有很好的殺滅和抑制作用，可以用于很多蔬菜、水果、鮮花的保鮮劑[4-8]。而且作為藥物成分的水楊酸也可以祛除汗臭、止癢消炎。我國化妝品衛(wèi)生規(guī)范中對洗化產(chǎn)品中有效成分的規(guī)定添加量是不能超過一定濃度的，比如O-傘花烴-5-醇和芐索氯銨不可以超過0.1%，水楊酸不能超過0.5%[9]。此外不同品牌的產(chǎn)品還有一些其他的有效成分，比如乙醇、對氯間二甲苯酚、三氯生、三氯卡班、聚六甲基胍、氯扎苯胺等。近年來，還發(fā)展研制出一些植物提取物，比如從牡丹皮、甘草、茶果、艾葉中提取的抑菌成分。這些抑菌成分大致分為生物堿類、有機酸類、揮發(fā)油類、黃酮類、多酚類、多糖類、皂苷類和單寧類等[10-15]。

由于我們的皮膚有吸收滲透的功能，建議消費者在使用洗手液洗手時，除了要保證充分的時間搓洗徹底，更要保證洗手液沖洗干凈，避免其中的化學成分殘留在手上。尤其要注意很多免水洗洗手液，雖然基本要求要選擇可以全部揮發(fā)的有效成分，但是頻繁使用有可能造成皮膚表層成分的累積，部分成分殘留在皮膚上，長期也會造成對皮膚的刺激和傷害。除非外界條件實在不允許，比如流行病大爆發(fā)，戶外缺水，作為應急可以使用免水洗洗手液，非必要的情況下還是使用流水配合普通洗手液清潔更徹底。

此外，液體型洗手液和泡沫型洗手液也有一些差別。在液體型洗手液的泵頭上增加一些特殊的裝置可以立刻得到豐富的泡沫，這種設計可以增強趣味性，調動小朋友的吸收積極性，不過泡沫對污漬的吸附能力較弱，需要足夠覆蓋整只手的量才可以達到清潔效果，而液體型洗手液的有效成分則需要慢慢搓洗出泡沫之后才能有效釋放，需要足夠的時間并配合大量的流水才可以達到清潔效果，所以不同的產(chǎn)品要注意不同的使用方法。