豬腸道大腸桿菌病的診斷及抗生素治療

賈博/甘肅省莊浪縣朱店鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 744699

大腸桿菌是一種可引起多種豬病的病原體，包括新生仔豬腹瀉和斷奶后仔豬腹瀉（post-weaning diarrhoea，PWD），是造成全世界哺乳期仔豬和斷奶仔豬死亡的重要病因。產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）是豬腸道大腸桿菌病的主要致病菌。由于ETEC 感染引起新生仔豬和斷奶仔豬腹瀉暴發(fā)，通常發(fā)病率較高，并在發(fā)病的豬群中反復發(fā)生，因此造成高額的治療和防控費用。豬腸道大腸桿菌病可應其造成豬較高的死亡率、體重增加減少、治療費用增加、疫苗接種和飼料浪費等造成重大的經(jīng)濟損失。據(jù)統(tǒng)計，根據(jù)豬腸道大腸桿菌病的嚴重程度，PWD 造成的經(jīng)濟損失為每頭40 至314 歐元。預防和控制新生仔豬大腸桿菌病的常用措施包括減少環(huán)境中致病性大腸桿菌的數(shù)量、實施養(yǎng)殖場衛(wèi)生措施、保障場內(nèi)外的生物安全、維持適宜仔豬生長的環(huán)境條件、通過母豬接種疫苗保障仔豬獲得較高水平的被動免疫力、提高仔豬的免疫水平等。除上述預防方法外，口服或注射途徑用應用抗生素仍僅用于治療豬腸道大腸桿菌病。此外，控制豬腸道大腸桿菌病需要對大腸桿菌有足夠的了解，尤其是其致病機制，以便實施適當?shù)脑\斷、預防和治療措施?？煽繙蚀_的診斷方法是應對豬大腸桿菌病暴發(fā)診斷的關鍵因素。

1 豬腸道大腸桿菌病的診斷

在診斷豬腸道大腸桿菌病時有多種診斷方法，從臨床觀察患病豬的臨床癥狀和大體病變開始，再到大腸桿菌的細菌性分離鑒定及流行病學調(diào)查等存在不同的診斷程序組合。

ETEC 引起的新生仔豬腹瀉常見于0～4 日齡的仔豬，一般情況下，在流行病學調(diào)查中，由于第一胎母豬所產(chǎn)仔豬缺乏被動免疫保護從而更容易患腸道大腸桿菌病。ETEC 所致的PWD 通常在斷奶后的2～3 周可觀察到，但有報道在6～8 周也可發(fā)生。ETEC 所致的新生仔豬腹瀉可觀察到大量水樣或乳樣的腹瀉物，具有獨特的氣味，顏色通常為白色或黃色。ETEC 引起斷奶后仔豬大腸桿菌病的臨床表現(xiàn)為淡黃色、灰色或略帶粉紅色的水樣腹瀉，具有特征性的氣味，一般臨床癥狀可持續(xù)1 周。發(fā)病豬通常會出現(xiàn)食欲下降、被毛粗糙和精神沉郁?；疾∝i可出現(xiàn)突然性死亡，特別是在暴發(fā)初期，病豬通常會出現(xiàn)脫水癥狀和眼睛凹陷。剖檢病豬可見小腸擴張、輕微水腫和充血。在新生仔豬或斷奶仔豬患大腸桿菌病后，胃通常擴張并充滿凝結(jié)的乳塊或飼料，眼底充血，腸系淋巴結(jié)腫大充血。但應注意的是這些病變不具有特征性，應結(jié)合其他檢測結(jié)果進行判斷或進行實驗室診斷。

經(jīng)臨床觀察和大體病變判斷為豬大腸桿菌病時，可采集樣品送至實驗室進行細菌學或分子生物學檢測。采樣時可選取3～5 頭未治療的仔豬，采樣豬腹瀉時間在12～24h。對其進行安樂死并尸檢，評估患病豬的各消化器官病變并收集樣品。將小腸段和大腸段末端打結(jié)，用于病理組織學試驗需用10%的福爾馬林固定，而細菌學檢測則保證樣品的新鮮度因此需在4℃溫度下儲存并在24h 內(nèi)迅速送至實驗室。自然死亡的動物也可采樣，但應注意的是在動物死亡后尸體會發(fā)生自溶而影響結(jié)果，因此應在動物死后立即進行剖檢和樣品采集。如果無組織樣品可收集，也可收集3～5 頭豬的糞便或直腸拭子作為檢測樣品，但應注意糞便不能被環(huán)境中的其他污染物污染。

采集的樣品可以接種至血瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基或其他腸桿菌科選擇或鑒定培養(yǎng)基進行大腸桿菌的分離和初步鑒定。新生仔豬腹瀉或PWD樣品中分離的菌株在血瓊脂培養(yǎng)基上菌落的溶血性常用作診斷ETEC 的常用指標。一般來說，從患有大腸桿菌病的新生仔豬腹瀉樣品中分離菌株在血瓊脂培養(yǎng)基上溶血和非溶血的菌落均存在，但從PWD 樣品中分離的ETEC 具有溶血性的菌株占比較大。但致病菌株的檢測結(jié)果并不總能證明仔豬出現(xiàn)大腸桿菌病，還要結(jié)合大腸桿菌的致病性、患病豬的臨床癥狀等方面因素綜合判斷。此外對用抗生素治療后的病豬檢測ETEC 結(jié)果為陰性并不能證明豬群未發(fā)生豬大腸桿菌病，還需對未治療的豬進行重復檢測。在實驗室診斷中，采用PCR 的方法對ETEC 編碼的特征性毒力基因?qū)Ψ蛛x株進行分型驗證以區(qū)分致病菌株已成為一種常用方法，該方法能快速的診斷出ETEC，但由于其他腸桿菌科可能存在類似的毒力基因也可能影響檢測結(jié)果。熒光定量PCR檢測方法已發(fā)展為單獨或與其他細菌學診斷方法結(jié)合的ETEC 檢測方法之一。該方法對大腸桿菌進行了量化顯示，是一種很有前景的腸道大腸桿菌病的診斷方法。此外，部分致病性大腸桿菌也可通過O 抗原血清型分型來識別，因為少數(shù)特定的O 血清型大腸桿菌與豬大腸桿菌病有關。豬大腸桿菌病的病理學檢測也常用于該病的診斷。在患有新生仔豬大腸桿菌病的仔豬可觀察到ETEC 黏附于大部分小腸細胞刷狀緣膜表面，其他病理變化可包括血管充血出血和炎性細胞數(shù)量增加。PWD的微觀病變特征是在回腸絨毛上皮細胞頂端表面的斑塊中可觀察到細菌層。

由于豬腸道疾病的發(fā)生通常是由多種病原和因素共同作用的結(jié)果，因此單一考慮某種病原和因素可導致臨床治療效果欠佳。此外，ETEC 引起的腹瀉與其他病原引起的仔豬腹瀉具有一定的相似性，如冠狀病毒、輪狀病毒、沙門氏菌和胞內(nèi)勞森菌等，因此在臨床大體病變、剖檢組織病變以及實驗室診斷過程中應注意區(qū)分并進行針對性的治療。

2 抗生素與豬腸道大腸桿菌的治療

在治療豬大腸桿菌病時，抗菌治療是公認的首要目標。在許多豬腸道大腸桿菌病的診治病例中常應用抗生素來避免致病菌傳播和緩解臨床癥狀。在應用抗生素治療豬大腸桿菌病時，在藥物選擇和制定給藥計劃時應首選確定致病菌株對抗生素的敏感性，選擇對致病菌具有最佳殺菌或抑菌效果的抗生素是有效治療的基礎。另外，還應考慮用藥的劑量和頻率，以確保用于治療的抗生素在主要感染部分達到足夠的抗菌濃度。最后，經(jīng)驗性治療是對畜群體有足夠的了解和致病菌抗性模式數(shù)據(jù)充分分析下進行的快速用藥方法。大腸桿菌病的暴發(fā)通常需要采取迅速的措施，因此抗生素的使用總是先于耐藥模式檢測。因此在大多數(shù)情況下，正確選擇抗生素治療豬大腸桿菌病是該病防治和緩解致病菌耐藥性的產(chǎn)生壓力的基礎。實驗室可通過藥物敏感性試驗、最小抑菌濃度等試驗精準分析病原體對抗生素的敏感程度。

在歐洲的一些國家，如荷蘭將所有抗生素分為三類，并根據(jù)致病菌株耐藥和敏感情況、流行病學調(diào)查數(shù)據(jù)等更新該分類。一般而言，在臨床診斷后進行經(jīng)驗性治療可先使用首選抗生素治療，在臨床治療或藥物敏感性試驗驗證首選藥物無效后選用第二類抗生素，而第三類抗生素則是在前兩類抗生素無效的情況下作為最后的選擇。在抗生素治療豬大腸桿菌病相關的腸道疾病時，由于病豬很少進食和飲水，所以應以腸胃外給藥方式進行治療。在日常養(yǎng)殖時，在畜群中出現(xiàn)因大腸桿菌感染所致死亡時應及時處理患病動物和死亡動物，對同畜群的豬可進行預防性治療。

抗菌治療取決于病原體對抗菌治療的敏感度、引起靶向微生物所需的藥物結(jié)合特征以及在感染部位所能達到的藥物濃度。正常使用抗生素，優(yōu)化抗生素治療劑量可增加治療有效性，減少藥物毒性和病原體的耐藥性。適當劑量的抗生素是控制或清除抗感染部位細菌的關鍵，也是限制抗生素耐藥性的關鍵，在對劑量優(yōu)化的同事，也許對治療的頻率和時間等進行優(yōu)化已達到最佳的臨床結(jié)果和最低對致病菌的藥物選擇壓力。

近年的研究發(fā)現(xiàn)，引起PWD 的ETEC 菌株對越來越多的抗生素表現(xiàn)耐藥，耐藥譜日益擴大，耐藥程度日益加重。對多種抗生素耐藥的ETEC 發(fā)現(xiàn)，以及ETEC 對用于治療豬大腸桿菌病的抗生素的耐藥趨勢是一個令人擔憂的現(xiàn)象。豬ETEC 的耐藥性在不同的國家和豬群中的情況各不相同，這與各國和各養(yǎng)殖場優(yōu)選使用抗生素藥物的不同有關。

3 結(jié)語

豬腸道大腸桿菌病的防控關鍵在于準確的診斷和適當?shù)念A防治療措施。其中，應提高診斷方法的敏感度和準確性，此外，經(jīng)濟成本也是影響診斷方法應用范圍的關鍵因素，同時也應在養(yǎng)殖場或獸醫(yī)診所等建立起標準化的診斷流程。抗生素在治療新生仔豬和斷奶仔豬大腸桿菌病中被廣泛應用，在許多國家應用抗生素進行預防性和治療性使用仍十分普遍。隨著從腹瀉豬樣品中分離的大腸桿菌菌株多重耐藥情況越來越流行，人們越來越關注致病性大腸桿菌菌株的抗生素耐藥性，并且抗生素替代的治療和預防方法的研究得到更多的關注，如疫苗、益生菌、中草藥、化學藥物和飼養(yǎng)管理方式等。即使某些預防方法顯示出一定的效果，但目前使用抗生素治療和控制豬腸道大腸桿菌病的首選方法。如今人們更加關注從養(yǎng)殖動物分離的細菌的抗生素耐藥性增加，這迫使相關工作人員更加理性和理智的使用抗生素。

[1]楊天寧,劉偉,涂攀,等 .產(chǎn)腸毒素大腸桿菌病商用疫苗的研究進展[J].豬業(yè)科學,2021,38(03):54-55.

[2]張丁華,王艷豐,陳海燕,等 .瀉痢康對人工誘發(fā)豬大腸桿菌病的療效及血清蛋白含量的影響[J].中國獸醫(yī)雜志,2020,56(09):52-56.

[3]黃炳辰,陸澤寧,林榮連,等 .一起豬大腸桿菌病的診治[J].廣西畜牧獸醫(yī),2019,35(05):221-222.

[4]陳明亮,蔣勇軍,丁雪燕,等 .益生菌對豬大腸桿菌病防治作用的研究進展[J].畜牧與獸醫(yī),2019,51(04):131-135.