血清免疫因子與多囊卵巢綜合征的關(guān)系研究

張小玲，梁艷莉，陶春燕，姜彥

重慶市高新區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，重慶 400039

多囊卵巢綜合征 （polycystic ovarian syndrome，PCOS）是一種至今病因尚不明確性的代謝性疾病，發(fā)病率在育齡期婦女中高達5%～ 10%[1]。 PCOS 的發(fā)病病程較長，可發(fā)生于青春期，一直持續(xù)到絕經(jīng)期，會影響機體正常內(nèi)分泌與生長代謝功能，是造成育齡期婦女不孕不育的主要原因之一[2]。 根據(jù)鹿特丹標準，PCOS 主要是根據(jù)臨床癥狀來診斷（雄激素血癥，稀發(fā)或無排卵和卵巢多囊性改變）， 符合以上3 項中至少兩項并排除其他代謝性疾病時即可診斷為PCOS。 目前PCOS 的發(fā)病原因不明，臨床癥狀和病理生理的表現(xiàn)呈高度異質(zhì)，常出現(xiàn)漏診與誤診。因此，探索PCOS 的診斷標志物和實驗室診斷模型，對POCS 的臨床診斷與預(yù)后分析具有重要的意義。 在PCOS 患者中，體內(nèi)免疫因子的變化情況與調(diào)節(jié)機制目前尚不明確， 然而PCOS 患者氧化應(yīng)激和炎性的標志物與血液循環(huán)中的雄激素濃度高度相關(guān)[4-5]。 因此，該文選取2020 年1—9 月該院收治的57 例PCOS 患者和25 名健康女性，旨在分析患者免疫因子的變化情況及其與疾病的關(guān)系，探索免疫因子在PCOS 中潛在的診斷價值。 現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集該院PCOS 患者共57 例（P 組），年齡22～40歲，平均（30.25±5.15）歲，均經(jīng)過病史詢問、性激素與超聲檢測，符合2013 年歐洲人類生殖和胚胎學(xué)會與美國生殖醫(yī)學(xué)學(xué)會的專家會議推薦的鹿特丹標準，確診為PCOS 患者， 并排除先天性腎上腺皮質(zhì)增生、庫欣綜合征、分泌雄激素的腫瘤等其他致雄激素水平升高的疾病，排除高泌乳素血癥、卵巢早衰和垂體或下丘腦性閉經(jīng)、甲狀腺功能異常等其他引起排卵障礙的疾病。同時選擇25 名育齡期女性志愿者（N 組），年齡23～40 歲，平均（30.54±5.33）歲，均經(jīng)臨床和（或）實驗室檢測結(jié)果證實志愿者體健，無器質(zhì)性、內(nèi)分泌及風(fēng)濕免疫系統(tǒng)疾病。 兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。 兩組樣本均來自重慶市高新區(qū)人民醫(yī)院。該研究獲得重慶市高新區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會的批準和受試者的知情同意。

1.2 儀器與試劑

貝克曼Au5800 全自動生化分析儀，豐華AutoTRFIA-4 型自動熒光分析儀，免疫因子測定試劑盒（北京九強）。

1.3 方法

P 組患者在采樣前停用抗感染藥物和其他影響免疫功能的藥物，N 組無特殊處理。 抽取受試者空腹12 h 采集4 mL 靜脈血于惰性分離膠管中, 待血液靜止凝固后以3 000 r/min 離心10 min 分離血清， 使用生化分析儀 （免疫凝集法） 檢測免疫球蛋白與補體（lgE、lgM、lgA、lgG、C3、C4 與CRP）。 檢測均由專人專機統(tǒng)一檢測，用同一批試劑盒，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料采用（±s）表示，進行t 檢驗，兩連續(xù)變量的相關(guān)性分析采用Pearson 相關(guān)分析， 用Logistic 回歸分析探討疾病的危險因素。 使用ROC 曲線分析檢測標志物的診斷效能，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組免疫因子水平比較

P 組lgA、lgE、C3、C4、CRP 水平高于N 組， 差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。 見表1。

表1 兩組血清補體與抗體濃度對比（±s）

表1 兩組血清補體與抗體濃度對比（±s）

指標P 組(n=57)N 組(n=25)t 值P 值lgG（g/L）lgM（g/L）lgA（g/L）lgE（g/L）C3（g/L）C4（g/L）CRP（mg/L）7.68±2.88 1.01±0.47 1.49±0.58 43.6±28.8 1.48±0.32 0.22±0.09 3.75±2.53 6.76±2.76 0.89±0.49 1.20±0.40 30.8±22.6 1.25±0.43 0.17±0.07 2.44±1.35 1.346 1.085 2.354 2.062 2.580 2.543 2.372 0.182 0.281 0.021 0.042 0.012 0.013 0.020

2.2 血清免疫因子與代謝指標的相關(guān)性

血清lgG 與雄激素 （T）、LDL-C 呈負相關(guān) （r=-0.619, P=0.004；r=-0.540, P=0.014）， 與餐后1 h 胰島素呈正相關(guān)（r=0.452, P=0.045）。血清lgA 與T 呈負相關(guān)（r=-0.633, P=0.003），與TBA 呈正相關(guān)（r=0.6759,P= 0.001）。 C3 與LH、餐后1 h 血糖、餐后2 h 血糖、AST 呈正相關(guān)（r=0.486, P=0.003；r=0.633, P=0.003；r=0.493, P=0.027；r=0.532, P=0.047）。 C4 與餐后1 h 血糖、餐后2 h 血糖、餐后2 h 胰島素呈正相關(guān)（r=0.452,P=0.047；r=0.672, P=0.001；r=0.463, P=0.004）。CRP 與BMI 呈正相關(guān)（r=0.527, P=0.028）。

2.3 血清免疫因子的診斷效率

采用受試者工作特征曲線 （receiver operating characteristic curve, ROC curve）分別評價血清免疫因子對PCOS 的診斷效能并尋找最優(yōu)診斷閾值（Cut-off值），血清C4 的診斷價值較高，AUC 為0.676，靈敏度和特異度分別為63.2%和68.0%， 其診斷效率高于T的診斷效率。 見表2。

表2 PCOS 血清免疫因子的ROC 曲線分析

3 討論

PCOS 是一種由雄性激素過剩、 排卵功能障礙和多囊卵巢為臨床特征的異質(zhì)性綜合征[6]。 大部分患者除性激素代謝障礙，常伴隨2 型糖尿病（T2DM）和心血管疾?。–VD）功能障礙。目前，PCOS 發(fā)病原因與機制尚不明確， 但一般認為該病是一種多基因遺傳病，涉及甾體激素生成酶基因、與胰島素分泌和活動有關(guān)的基因、 因子基因等， 同時不健康的飲食習(xí)慣也對PCOS 有重要影響[7-9]。雖然，肥胖是PCOS 患者常見的代謝紊亂癥狀之一，約2/3 的PCOS 患者超重或肥胖，但肥胖并不是PCOS 特征之一。 而因胰島素抵抗而導(dǎo)致的肥胖確實與PCOS 有不可分割的聯(lián)系。 一般認為，PCOS 患者促炎細胞因子的高表達，造成胰島素介導(dǎo)的葡萄糖轉(zhuǎn)運通路、與胰島素及腎上腺素調(diào)節(jié)脂肪細胞內(nèi)脂代謝活動異常，同時影響肝臟分泌調(diào)節(jié)蛋白與儲存糖原的能力， 導(dǎo)致PCOS 出現(xiàn)胰島素抵抗與肥胖。

慢性低級別炎癥是PCOS 病理生理的基礎(chǔ)，特別是卵巢局部組織的炎癥反應(yīng)被認為在PCOS 的發(fā)生與發(fā)展中起重要作用[10-12]。一方面，卵巢組織局部炎癥會引起炎性因子的釋放，促進卵巢顆粒細胞內(nèi)CYP17 酶表達上調(diào)， 和卵巢膜細胞類固醇生成酶類活性增加，促進了雄性激素的生成與釋放；另一方面，血液中炎性因子會直接導(dǎo)致機體發(fā)生胰島素抵抗，進一步惡化卵巢正常的分泌功能，抑制了卵泡的生長[12-13]。 據(jù)報道，編碼促炎細胞因子TNF-a 和白細胞介素-6（IL-6）的基因變異在多囊卵巢綜合征人群中更為常見[11]。

目前，PCOS 的診斷主要依靠臨床表現(xiàn)，影像學(xué)檢查，以及高雄激素血癥的癥狀與指標，缺乏特異性強、靈敏度高的實驗室診斷標志物[6]。 卵巢組織的炎癥反應(yīng)會影響卵泡的發(fā)育，導(dǎo)致PCOS 的發(fā)生，其中CRP是PCOS 患者炎癥反應(yīng)最可信的循環(huán)標志物，meta 分析顯示PCOS 患者血清中高水平的CRP 濃度與肥胖無關(guān)，一般是健康人群的2 倍[10,14-15]。 PCOS 患者的免疫系統(tǒng)常處于紊亂狀態(tài)， 外周血中的CD4+淋巴細胞升高， CD3+和CD8+細胞顯著降低， 并且PCOS 患者免疫細胞表面活化分子CD69 表達明顯下降[16-18]。PCOS患者免疫性抗體異常升高，其中以抗組蛋白抗體和抗甲狀腺抗體升高最為顯著[19-20]。

補體是具有酶活性的一組免疫蛋白，該研究結(jié)果顯示：P 組患者中C3 水平為（1.48±0.32）g/L，高于N組（1.25±0.43）g/L（P<0.05），這與何文雯等[21]的研究結(jié)果一致：患者組為（1.33±0.34）g/L，高于正常組（1.10±0.22）g/L（P<0.05）。該文進一步研究發(fā)現(xiàn)，C3 和C4 作為PCOS 潛在的診斷因子，診斷效能優(yōu)于單一的雄激素指標。

綜上所述，對PCOS 高發(fā)人群進行免疫因子的檢測，對PCOS 的診斷與預(yù)防有不可取代的價值。