血常規(guī)標(biāo)本臨檢前混勻靜置時(shí)間對(duì)結(jié)果的影響

易春梅

仙桃市疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科，湖北仙桃 433000

血常規(guī)檢測作為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中最常用到的檢測項(xiàng)目，可以通過對(duì)各類血細(xì)胞（包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、血紅蛋白等）的數(shù)量、形態(tài)測定，來對(duì)血液狀態(tài)進(jìn)行判斷，并結(jié)合其水平變化對(duì)組織結(jié)構(gòu)的病理改變情況進(jìn)行初步分析和評(píng)價(jià)[1]。血常規(guī)檢測結(jié)果不僅可以為疾病的診斷、治療效果的評(píng)估提供依據(jù)，而且可以為疾病復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行預(yù)測。但是血常規(guī)檢驗(yàn)所過程中受的影響因素較多，采血前受檢者的身體和情緒狀態(tài)、采血位置、采血時(shí)間、采血的方式、抗凝劑類型的選擇、混勻靜置時(shí)間、送檢時(shí)間、檢測儀器及試劑、檢測人員技術(shù)水平、標(biāo)本的核對(duì)等都可能對(duì)檢測結(jié)果造成影響?；靹蜢o置時(shí)間是這些因素中相對(duì)隱匿的一種[2]。由于血液被抽離機(jī)體后，隨著時(shí)間的延長，其中的一些成分也會(huì)發(fā)生相應(yīng)的改變，進(jìn)而導(dǎo)致檢測結(jié)果的變化， 影響血常規(guī)的參考價(jià)值。 該文隨機(jī)抽取2020 年1—12 月間在該中心接受體檢的500 名志愿者作為研究對(duì)象，旨在分析血常規(guī)標(biāo)本臨檢前，標(biāo)本與抗凝劑混勻后，不同靜置時(shí)間獲得的相關(guān)血細(xì)胞檢測結(jié)果的不同，判斷其對(duì)檢測結(jié)果的影響，并確定最佳靜置時(shí)間。 現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)抽取在該中心接受體檢的500 名志愿者作為研究對(duì)象，男247 名，女253 名，年齡18～60 歲，平均年齡（38.8±6.7）歲。受檢者不合并血液系統(tǒng)疾病、重要臟器結(jié)構(gòu)器質(zhì)性病變、傳染性疾病、遺傳性疾病，近期無外傷史。 該研究經(jīng)該院倫理委員會(huì)討論通過，且受檢者自愿參與，簽署知情同意書。

1.2 方法

采集受檢者的靜脈血標(biāo)本，要求在采血前要告知受檢者禁食10～12 h，保持空腹?fàn)顟B(tài)；檢查前1 d 停用可能影響檢查結(jié)果的各種藥物；檢查前半小時(shí)禁止劇烈運(yùn)動(dòng)；女性不得在經(jīng)期采血；保持情緒平靜。在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集受檢者的外周血液標(biāo)本（剔除脂血、溶血、黃疸血樣本），采血位置為肘靜脈，采血量2～3 mL，將采集到的血液置于含抗凝劑的真空采血管中，進(jìn)行抗凝處理，并將與抗凝劑混勻后的血液冷藏在2～9℃的環(huán)境下， 將血液樣本靜置， 分別在靜置10 min、0.5 h、1 h、2 h、3 h、5 h、7 h、9 h、11 h 的不同時(shí)間對(duì)其實(shí)施行血常規(guī)檢查，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢查3 次，并將3次測定值的平均值作為應(yīng)用值。 檢測采用BC-5380全自動(dòng)血液分析儀。

1.3 觀察指標(biāo)

比較不同靜置時(shí)間下測得的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）、血紅蛋白水平（Hb）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）及其分類指標(biāo)中的中性粒細(xì)胞（Neu）、淋巴細(xì)胞（Lym）比值之間的差異。

其中，RBC 的正常參考范圍是 （3.5～5.5）×1012/L；PLT 的正常參考范圍是（100～300）×109/L；Hb 的正常參考范圍是110～160 g/L；HCT 的正常參考范圍是40%～50%；WBC 的正常參考范圍是 （4～10）×109/L；Neu%的正常參考范圍是50%～70%；Lym 的正常參考范圍是20%～40%[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用（±s）表示，進(jìn)行t 檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)血常規(guī)標(biāo)本臨檢前不同混勻靜置時(shí)間下檢測得到的各項(xiàng)血細(xì)胞檢測結(jié)果進(jìn)行比較，可見混勻時(shí)間為10 min、0.5 h、1 h、2 h、3 h、5 h、7 h、9 h、11 h 時(shí)，受檢者的RBC、Hb、HCT、Lym 比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但隨著靜置時(shí)間的延長，PLT 和Neu%出現(xiàn)不斷降低的情況，而WBC 則出現(xiàn)不斷升高的情況，不同時(shí)間獲得的3 項(xiàng)指標(biāo)檢測結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 見表1。

表1 不同模式下檢測得到的血常規(guī)指標(biāo)檢測結(jié)果比較（±s）

表1 不同模式下檢測得到的血常規(guī)指標(biāo)檢測結(jié)果比較（±s）

混勻靜置時(shí)間10 min 0.5 h 1 h 2 h 3 h 5 h 7 h 9 h 11 h RBC（×1012/L）4.54±0.25 4.53±0.24 4.51±0.23 4.49±0.25 4.52±0.27 4.52±0.29 4.55±0.28 4.54±0.27 4.55±0.29 PLT（×109/L）Hb（g/L）HCT（%）WBC（×109/L）206.97±22.56 205.56±22.11 205.11±22.00 204.87±21.98 203.90±20.63 202.87±20.56 199.09±19.97 193.97±19.38 190.28±18.38 145.58±7.55 145.22±7.61 144.99±7.43 143.96±7.82 144.19±7.37 144.67±7.50 145.11±7.52 145.23±7.55 145.10±7.43 0.43±0.02 0.42±0.02 0.42±0.02 0.42±0.01 0.43±0.01 0.43±0.02 0.43±0.03 0.42±0.02 0.42±0.01 7.90±0.89 7.92±0.91 7.93±0.93 7.95±0.93 8.00±0.05 8.10±0.05 8.28±0.06 8.31±0.07 8.45±0.07 Neu（%）Lym（%）71.27±3.67 71.09±3.58 70.15±3.41 69.88±3.33 69.02±3.25 68.43±3.21 68.31±3.11 67.24±3.02 65.11±2.86 28.94±3.47 28.99±3.50 28.98±3.45 28.97±3.43 28.77±3.32 28.82±3.40 28.89±3.45 29.01±3.42 29.05±3.47

3 討論

在現(xiàn)代檢驗(yàn)技術(shù)不斷提高，檢驗(yàn)儀器更加先進(jìn)的情況下，臨床血常規(guī)檢驗(yàn)過程中，通過全自動(dòng)血液分析儀的應(yīng)用以及大大降低了人為因素對(duì)檢測準(zhǔn)確性的影響，檢測效率也得到顯著提升。除此之外，標(biāo)本在采集、處理、保存、運(yùn)送、檢驗(yàn)各過程中的相關(guān)影響因素也漸漸得到更多的重視程度，一些比較明顯的影響因素可以通過一些措施的實(shí)施來最大程度降低其對(duì)血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的影響。但有一些相對(duì)隱匿的影響因素則容易被忽略[4-5]。 比如血液采集過程中，靜脈血檢測是使用歷史最為悠久的一種，具有痛感低、采血量大的優(yōu)勢，對(duì)其的檢測已經(jīng)有一套的成熟的流程與標(biāo)準(zhǔn)，抗凝劑的應(yīng)用可以避免血液凝固對(duì)檢測結(jié)果造成的影響，而全自動(dòng)檢測儀器的使用也保證了檢測的可靠性。但是，血液標(biāo)本與抗凝劑混合之后，靜置時(shí)間的不同也會(huì)對(duì)血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性造成不同程度的影響[6-8]。 作為血液標(biāo)本采集后，血常規(guī)檢驗(yàn)實(shí)施前的第一個(gè)步驟， 在將血液與抗凝劑充分混合均勻后，常常選擇即刻送檢。但是這個(gè)混勻的過程很容易導(dǎo)致血液標(biāo)本中出現(xiàn)較多的氣泡，影響受檢血量[9-10]。 將其進(jìn)行20 s 左右的靜置處理后， 會(huì)逐漸出現(xiàn)上浮的氣泡，需要再進(jìn)行一段時(shí)間的靜置，促進(jìn)血液標(biāo)本的穩(wěn)定[11-12]。但靜置時(shí)間過長的情況下，會(huì)出現(xiàn)血細(xì)胞沉降的情況，導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差[13-15]。

該文選擇在將血液標(biāo)本混勻后靜置10 min、0.5 h、2 h、3 h、5 h、7 h、9 h、11 h 后的不同時(shí)間， 分別對(duì)其進(jìn)行血常規(guī)檢測，檢測的樣本量大、時(shí)間跨度大，可以更清晰地判斷靜置時(shí)間對(duì)不同血細(xì)胞檢測結(jié)果的影響。 從該文的檢測結(jié)果看，不同靜置時(shí)間下受檢者的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積、淋巴細(xì)胞比值比較均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示該變量對(duì)上述指標(biāo)的影響相對(duì)較小，可以忽略不計(jì)。 但是隨著靜置時(shí)間的延長，受檢者的血小板計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞比值都出現(xiàn)了比較明顯的變化， 靜置時(shí)間為10 min 時(shí)，PLT 為 （206.97±22.56）×109/L，Neu%為（71.27±3.67）%，WBC 為（7.90±0.89）×109/L，而當(dāng)靜置時(shí)間為11 h 時(shí)，3 項(xiàng)指標(biāo)分別為（190.28±18.38）×109/L、（65.11±2.86）%、（8.45±0.07）×109/L， 表現(xiàn)為血小板計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞比值隨時(shí)間延長，檢測值逐漸降低，而白細(xì)胞計(jì)數(shù)則隨時(shí)間延長而出現(xiàn)逐漸升高的情況。這與喬萬超[2]的研究結(jié)果一致，其比較的是靜置后1～11 h 各項(xiàng)血常規(guī)指標(biāo)的檢驗(yàn)結(jié)果，結(jié)果可見靜置時(shí)間為1 h 時(shí)，PLT 為 （205.7±25.4）×109/L，Neu%為 （61.3 ±9.8）%，WBC 為（7.48 ±2.33）×109/L，而當(dāng)靜置時(shí)間為11 h 時(shí)，3 項(xiàng)指標(biāo)分別變?yōu)椋?92.6±19.4）×109/L、（57.1±9.3）%、（8.49 ±2.02）×109/L，數(shù)據(jù)變化的整體規(guī)律一致。這可能是由于靜脈血液與抗凝試管中的抗凝劑結(jié)合的過程中，血小板的形態(tài)會(huì)環(huán)境溫度的變化而出現(xiàn)相應(yīng)的改變，外膜會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)槲⑿」苡坞x端的形式向外延伸，在其周圍形成絲狀偽足，彼此互相纏繞聚集，一定程度上使得血小板計(jì)數(shù)的降低， 隨靜置時(shí)間延長，這種表現(xiàn)更加明顯。中性粒細(xì)胞比值的降低則與其本身壽命短有關(guān)，血液標(biāo)本的靜置的時(shí)間越長，中性粒細(xì)胞的死亡量越多。白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平的改變與抗凝劑的應(yīng)用有關(guān)，抗凝劑可以跟血液中的鈣離子相結(jié)合并形成一種穩(wěn)定形態(tài)的螯合物，避免血液發(fā)生凝固，當(dāng)抗凝劑的抗凝效果在維持一段時(shí)間之后，血液中白細(xì)胞會(huì)因適應(yīng)性增加而導(dǎo)致本身成分的恢復(fù)，加上血小板絲狀偽足的聚合體產(chǎn)物被劃入WBC 的計(jì)數(shù)范疇，使白細(xì)胞計(jì)數(shù)會(huì)隨時(shí)間延遲表現(xiàn)出上升的趨勢[16-17]。

綜上所述，臨床實(shí)施血常規(guī)檢驗(yàn)的過程中，在臨檢前標(biāo)本的混勻靜置時(shí)間直接影響相關(guān)指標(biāo)的檢測結(jié)果，長時(shí)間靜置會(huì)導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差，在白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)以及中性粒細(xì)胞比值等指標(biāo)的變化上最為顯著。 因而要對(duì)檢驗(yàn)時(shí)間進(jìn)行有效控制，以提高檢測的準(zhǔn)確度。