川金絲猴腸道淋巴瘤病理學(xué)診斷

王運盛，戴春闊，楊勝記，國欣欣，陳 靖，李祥翔，普天春，范晰琳，盧 巖，張成林，

（1.北京動物園，北京 100044；2.圈養(yǎng)野生動物技術(shù)北京市重點實驗室，北京 100044；3.梵凈山國家級自然保護(hù)區(qū)管理局，貴州江口 5544002）

疾病防治是野生動物飼養(yǎng)管理工作中重要的組成部分，在眾多的致病因素中，腫瘤較為少見但不容忽視［1］。近年來，隨著國內(nèi)圈養(yǎng)野生動物數(shù)量的增加及野生動物診療工作的深入，野生動物腫瘤發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的跡象。而野生動物腫瘤疾病發(fā)生后如何快速確診成為了現(xiàn)階段需要關(guān)注的問題。金絲猴（Golden monkey），又名仰鼻猴（Snub.nosed monkey）、藍(lán)面猴、金線狨等，被列為國家I級重點保護(hù)動物，也被譽為我國的第二國寶［2-5］。北京動物園獸醫(yī)院于2019年收到1例梵凈山保護(hù)區(qū)川金絲猴死亡樣本，通過組織病理學(xué)方法對其進(jìn)行了病理學(xué)診斷，現(xiàn)報道如下，以期為今后野生動物腫瘤病理學(xué)診療提供思路和方案。

1 材料與方法

1.1 病例

川金絲猴，雌性，2005年出生于梵凈山保護(hù)站，臨床表現(xiàn)為腹部腫大，觸診疑似有腹水，聽診心律不齊，口色蒼白，精神狀態(tài)差，沒有食欲，死前2 d未見排便。

1.2 試驗方法

1.2.1 血樣化驗室診斷 金絲猴發(fā)病后進(jìn)行血樣采集，采血前1 d進(jìn)行隔離觀察，禁食16 h，采血后進(jìn)行外周血生化常規(guī)檢測。

1.2.2 病理樣本采集 金絲猴死后立即解剖，取材后將內(nèi)臟組織立即投入10%的福爾馬林液，進(jìn)行病理組織切片前處理。

1.2.3 HE染色 石蠟切片分別經(jīng)二甲苯I、II脫蠟5 min，之后在無水乙醇/二甲苯（1∶1）混合液中浸泡5 min，依次經(jīng)無水乙醇I、無水乙醇II、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度復(fù)水，下行至去離子水中，蘇木精染色10 min，1%鹽酸酒精分色數(shù)秒，水洗返藍(lán)15 min，再依次通過50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脫水后，伊紅染色1 min，95%乙醇洗滌3次，再經(jīng)無水乙醇I、II各5 min，二甲苯I、II各透明5 min，最后用中性樹膠封片。切片放置于37℃溫箱內(nèi)過夜烘干后鏡檢。光學(xué)顯微鏡下觀察金絲猴組織病理學(xué)變化情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 金絲猴血液生化指標(biāo)檢測結(jié)果與分析

經(jīng)化驗室診斷發(fā)現(xiàn)金絲猴堿性磷酸酶（598 U/L）、總蛋白（8 100.00 g/L）、白蛋白（52.00 g/L）、球蛋白（43.20 g/L）指標(biāo)均顯著高于參考范圍，其余指標(biāo)基本在參考范圍上下浮動。結(jié)合動物臨床癥狀，該金絲猴疑似出現(xiàn)淋巴瘤與慢性肝炎。

2.2 金絲猴臨床剖檢病理觀察

金絲猴尸重11 kg，皮下較濕潤，血凝正常。心臟橫徑較正常，心室塌陷，質(zhì)地較軟，心室內(nèi)血凝塊聚集。腎臟萎縮，色澤灰白，兩側(cè)腎大小不一。十二指腸、空腸段腸肉眼無明顯病理變化。結(jié)腸至盲腸段有大量斑塊、結(jié)節(jié)狀腫物（圖1A）。其余臟器肉眼無明顯病理變化。盲腸至結(jié)腸腫物經(jīng)固定后可見剖面呈深棕色，大小見圖1B。

圖1 川金絲猴腸道腫物

表1 川金絲猴生化指標(biāo)檢測

2.3 金絲猴腸道腫物病理變化

低倍鏡下可觀察到腸道腫物內(nèi)原有組織結(jié)構(gòu)被大量破壞，無正常結(jié)構(gòu)，大量淋巴樣細(xì)胞聚集使之呈現(xiàn)彌散樣藍(lán)染（圖2A），高倍鏡下可見大量淋巴樣細(xì)胞層層疊疊，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，藍(lán)色深染，細(xì)胞質(zhì)少。腫物內(nèi)除淋巴樣細(xì)胞外還充斥大量紅細(xì)胞（圖2B），油鏡下可見新生小淋巴樣細(xì)胞3～5個聚集到一起（圖2C、圖2D）。

圖2 川金絲猴腸道腫物病理學(xué)觀察

3 診斷

經(jīng)臨床特征觀察、化驗室分析以及組織病理學(xué)診斷，金絲猴腸道腫物為淋巴瘤（Intestinal lymphoma）。

4 小結(jié)與討論

腸道淋巴瘤是一種影響腸道淋巴結(jié)的腫瘤，很少與癌、平滑肌瘤共存。其也可以由胃、肝臟、脾臟、淋巴結(jié)或淋巴管等器官的腫瘤細(xì)胞經(jīng)淋巴系統(tǒng)蔓延到腸道而引發(fā)［7］。患病動物在臨床上常表現(xiàn)出食欲減退、嘔吐、腹瀉、貧血、精神萎頓、嗜睡、體重減輕等癥狀。此外，還會出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大、腹部腫大、糞便帶血等癥狀。

該金絲猴病例由于腸道淋巴瘤的持續(xù)作用，最終導(dǎo)致死亡。該病例生前的臨床表現(xiàn)（腹部腫脹、食欲降低）、化驗室診斷結(jié)果（堿性磷酸酶、總蛋白、白蛋白、球蛋白指標(biāo)的顯著升高）表明其可能患有腫瘤疾病，經(jīng)病理學(xué)診斷最終診斷為腸道淋巴瘤，除結(jié)腸外，其余組織器官未見淋巴瘤，表明該病例的淋巴瘤只發(fā)生于結(jié)腸，未出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。

腫瘤是人類的常發(fā)病，但動物領(lǐng)域此項工作起步較晚。而在圈養(yǎng)野生動物中，由于缺乏相應(yīng)的病理診斷平臺，嚴(yán)重制約了腫瘤診斷技術(shù)的完善。關(guān)于野生動物腫瘤疾病的研究報道極為少見。本研究采用病理學(xué)技術(shù)，結(jié)合臨床病理變化及系統(tǒng)病理學(xué)觀察，對川金絲猴腸道腫物進(jìn)行病理學(xué)診斷，分析得出此腫物為淋巴瘤，本報道為今后野生動物腫瘤的診斷以及治療工作提供了較為可靠的經(jīng)驗和方案。