新生兒膿毒血癥細(xì)菌分布與耐藥和腸道菌群紊亂的相關(guān)性研究

黃德秋，楊 巍，袁 鑫 (上饒市立醫(yī)院兒科，江西 上饒 334000)

新生兒膿毒血癥又稱為新生兒敗血癥，其主要是指致病菌入侵血液循環(huán)而引起的一種全身性感染疾病，嚴(yán)重可引起器官功能障礙，死亡率較高[1]。有研究指出，新生兒膿毒血癥根據(jù)感染時(shí)間的不同可以分為早發(fā)型(出生后7 d內(nèi)感染)與晚發(fā)型(出生7 d后感染)，而不同類型的疾病其致病菌類型、耐藥情況以及臨床表現(xiàn)均有所不同[2]。因此，臨床必須針對(duì)新生兒膿毒血癥發(fā)病類型深入探究患兒的致病菌類型和耐藥情況，針對(duì)性給予抗生素治療，以保證療效。同時(shí)，有學(xué)者指出，膿毒血癥屬于一種急性危重疾病，患者的腸道菌群成分組成會(huì)在短時(shí)間內(nèi)發(fā)生變化，大量正常共生微生物也會(huì)遭受嚴(yán)重?fù)p傷，繼而引起腸道菌群紊亂，并不利于患者的病情恢復(fù)[3-4]。基于此，本文旨在探究新生兒膿毒血癥細(xì)菌分布、耐藥、腸道菌群紊亂的情況，并從腸道微生態(tài)失衡角度助力其救治效果?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2019年1月～2020年1月我院治療的128例膿毒血癥新生兒作為研究對(duì)象，按發(fā)病時(shí)間分為早發(fā)型組與晚發(fā)型組各64例。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)血培養(yǎng)顯示為陽(yáng)性；溫度>38.5℃或者<36℃；白細(xì)胞總數(shù)>12×109/L或<4×109/L；二氧化碳分壓(PaCO2)<4.3 kPa；伴有呼吸、心率增快等現(xiàn)象，患兒符合上述其中兩項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)確診為膿毒血癥；患兒家屬均了解本次研究，同意參與；足月，日齡≤28 d的新生兒；意識(shí)、精神正常的患兒。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并先天性疾病的患兒；合并肝、腎功能不全的患兒；凝血功能障礙的患兒。早發(fā)型組男36例，女28例；日齡0～28 d，平均(12.25±5.47)d；孕齡37～42周，平均(39.20±0.47)周。晚發(fā)型組男34例，女30例；日齡0～27 d,平均(12.84±5.12)d；孕齡37～42周，平均(39.04±0.54)周。兩組基線資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，有可比性。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2方法：①采用法國(guó)生物梅里埃公司生產(chǎn)的全自動(dòng)血培養(yǎng)儀(Bact/ALERT3D型)為患兒進(jìn)行血培養(yǎng)，采用法國(guó)法國(guó)生物梅里埃公司生產(chǎn)的全自動(dòng)微生物鑒定儀(VITEK 2-compact型)鑒定菌株。藥敏試驗(yàn)質(zhì)控菌株為大腸埃希菌、金黃色葡萄菌、銅綠假單胞菌，肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌通過ESBLs紙片法篩選和確證試驗(yàn)的陰性、陽(yáng)性質(zhì)控菌株。收集兩組患兒的血液標(biāo)本完成真菌培養(yǎng)，之后采用全自動(dòng)培養(yǎng)儀增菌，按照相關(guān)操作進(jìn)行血培養(yǎng)，而其他標(biāo)本可通過改良沙氏培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)，對(duì)可疑的菌落進(jìn)行涂片制作和革蘭染色，確定真菌之后采用全自動(dòng)生物鑒定儀鑒定菌種。①采集新生兒治療前后新鮮糞便，選擇4種厭氧菌即雙歧桿菌、乳桿菌、擬桿菌和真桿菌的選擇性培養(yǎng)基及2種需氧菌即腸桿菌及腸球菌進(jìn)行定量培養(yǎng)。菌種鑒定：48 h后觀察每種培養(yǎng)基上菌落形態(tài)特征，并進(jìn)行涂片、染色、轉(zhuǎn)種及耐氧實(shí)驗(yàn)，耐氧實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性者按有關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行生化等鑒定。菌落計(jì)數(shù)：選擇合適的稀釋度做菌落計(jì)數(shù)，每種菌落總數(shù)/g(B/E值)=某稀釋度菌落數(shù)100稀釋倍數(shù)。B/E值>1表示腸道菌群正常，反之腸道菌群失調(diào)，B/E值與腸道菌群失調(diào)程度呈反比，數(shù)值越低則說明失調(diào)程度越嚴(yán)重。③收集患兒治療前后的3ml空腹靜脈血，靜置之后放入離心機(jī)分離，以2 000 r/min離心10 min，取上層血清，放入冷藏室保存(-80℃)待檢。使用免疫定量分析儀(生產(chǎn)廠家：南京基蛋生物科技有限公司，型號(hào)：FiA8000)以及配套試劑盒檢測(cè)降鈣素原(PCT)和C-反應(yīng)蛋白(CRP)含量，PCT檢測(cè)方法為化學(xué)發(fā)光法，CRP檢測(cè)方法為膠體金法。PCT<0.1 ng/ml、CRP<10 mg/L為正常。④治療方法：根據(jù)患兒實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)結(jié)果進(jìn)行早期目標(biāo)導(dǎo)向治療，并在此基礎(chǔ)上兩組均給予雙歧桿菌三聯(lián)活菌片(生產(chǎn)廠家：內(nèi)蒙古雙奇藥業(yè)股份有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字 S19980004，規(guī)格：0.5 g/片)治療，使用溫水溶解后鼻飼，1片/次，2次/d，以連續(xù)治療5d為1個(gè)療程，共治療2個(gè)療程。

1.3觀察指標(biāo)：①兩組患者均給予血培養(yǎng)和菌株鑒定，總結(jié)其菌群分布和耐藥情況。②對(duì)比兩組治療前后PCT和CRP水平和菌落計(jì)數(shù)。

2 結(jié)果

2.1總結(jié)兩組患兒菌群分布情況：早發(fā)型組共檢測(cè)出91株病原菌，其中革蘭陽(yáng)性菌58株，革蘭陰性菌23株，真菌10株；而晚發(fā)型組共檢測(cè)出73株病原菌，其中革蘭陽(yáng)性菌35株，革蘭陰性菌30株、真菌8株，兩組各菌株相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 總結(jié)兩組患兒菌群分布情況[例(%)]

2.2總結(jié)兩組患兒的主要革蘭陽(yáng)性菌耐藥情況：早發(fā)型組與晚發(fā)型組的金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、屎腸球菌耐藥率較高的均為青霉素、紅霉素，而無(wú)乳鏈球菌耐藥率較高的是紅霉素和四環(huán)素。見表2、表3。

表2 早發(fā)型組患兒的主要革蘭陽(yáng)性菌耐藥情況(例)

表3 晚發(fā)型組患兒的主要革蘭陽(yáng)性菌耐藥情況(例)

2.3對(duì)比兩組患兒治療前后的PCT、CRP水平和菌落計(jì)數(shù)：治療前，兩組的PCT、CRP水平和菌落計(jì)數(shù)相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組的PCT、CRP水平均低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；兩組的菌落計(jì)數(shù)高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；兩組治療后的PCT、CRP水平和菌落計(jì)數(shù)相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 對(duì)比兩組患兒治療前后的PCT、CRP水平和菌落計(jì)數(shù)

3 討論

新生兒免疫功能低下，一旦遭到致病菌侵襲，極易引起全身性炎性反應(yīng)，誘發(fā)膿毒血癥，而且患兒感染之后其臨床表現(xiàn)并無(wú)特異性，必須通過實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)評(píng)估疾病才能針對(duì)性合理使用抗生素治療[5]。本次研究結(jié)果顯示，早發(fā)型組的病原菌株檢出率高于晚發(fā)型組，且均以革蘭陽(yáng)性菌為主要病原菌?？梢?，革蘭陽(yáng)性菌仍是新生兒膿毒血癥感染的主要致病菌。晚發(fā)型組患兒出生后經(jīng)過喂養(yǎng)免疫功能會(huì)相較于早發(fā)型組患兒強(qiáng)，能有效抵御一部分致病菌，因此其檢測(cè)出的致病菌株更少，但二者的耐藥情況較為相似[6]。本次研究結(jié)果顯示，治療后兩組的PCT、CRP水平均低于治療前；兩組的菌落計(jì)數(shù)高于治療前，這說明通過雙歧桿菌三聯(lián)活菌片鼻飼治療新生兒膿毒血癥，能有效糾正患兒腸道菌群紊亂現(xiàn)象，在輔助疾病治療中有重要意義。CRP屬于一種急性蛋白，正常情況下人體中的CRP水平極低，一旦出現(xiàn)感染或者損傷時(shí)，CRP水平才會(huì)異常升高，其為一種炎性反應(yīng)標(biāo)志物[7]。PCT是一種蛋白質(zhì)，當(dāng)人體遭到寄生蟲、細(xì)菌、病菌感染時(shí)或者出現(xiàn)器官衰竭、膿毒血癥時(shí)，該水平會(huì)異常升高，其能良好反映出全身性炎性反應(yīng)的活躍程度[8]。有研究指出，菌血癥誘發(fā)的前提是腸道菌群嚴(yán)重失調(diào)[9]。因此，一旦患兒發(fā)生膿毒血癥之后，腸道中的上皮細(xì)胞便遭到嚴(yán)重破壞，引發(fā)腸道菌群紊亂，腸桿菌屬、腸球菌屬比例會(huì)異常升高[10]。腸道是人體最大的內(nèi)毒素庫(kù)與微生物庫(kù)，以往，大部分醫(yī)生在實(shí)施膿毒血癥救治時(shí)，往往容易忽略患者腸道菌群紊亂的治療，最終有可能會(huì)影響療效和患者預(yù)后。本次研究通過雙歧桿菌三聯(lián)活菌片鼻飼治療，能有效調(diào)整患兒腸道菌群平衡，直接為患兒補(bǔ)充人體所需的正常生理細(xì)菌，抑制和清除危害細(xì)菌，恢復(fù)患兒的胃腸道功能。通過腸道功能調(diào)理，也能提高患兒的腸道免疫力，增加營(yíng)養(yǎng)吸收，增強(qiáng)患兒的抗病能力，快速降低患兒的PCT、CRP水平，保證菌落計(jì)數(shù)，在新生兒膿毒血癥治療中起到輔助功效。

綜上所述，細(xì)菌分布、耐藥情況與新生兒膿毒血癥感染時(shí)間有一定的相關(guān)性，該病感染多以革蘭陽(yáng)性菌為主要病原菌，會(huì)引起患兒腸道菌群紊亂，臨床醫(yī)師應(yīng)及時(shí)了解患兒的細(xì)菌分布與耐藥情況，再給予腸道藥物輔助治療，以調(diào)節(jié)患兒腸道菌群平衡。