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    3 種梨果實發(fā)育過程中酚類物質(zhì)及其抗氧化能力分析

    2022-01-06 02:31:34唐章虎吳翠云蒲云峰
    食品科學 2021年23期
    關(guān)鍵詞:酥梨香梨花后

    姜 喜,唐章虎,吳翠云,*,王 鑫,蒲云峰,郭 麗

    (1.塔里木大學園藝與林學學院,新疆 阿拉爾 843300;2.南疆特色果樹高效優(yōu)質(zhì)栽培與深加工技術(shù)國家地方聯(lián)合工程實驗室,新疆 阿拉爾 843300;3.新疆農(nóng)業(yè)科學院輪臺果樹資源圃,新疆 輪臺 841600;4.塔里木大學生命科學學院,新疆 阿拉爾 843300)

    梨是我國是僅次于蘋果、柑橘的第三大水果[1]?!畮鞝柪障憷妗撬N薇科(Rosaceae)梨亞科(Pomoideae)梨屬(Pyrus)新疆梨(Pyrus sinkiangensisYu)植物,是西洋梨與白梨的雜交后代,栽培歷史有1 400多年,是我國品質(zhì)最優(yōu)的地方梨品種之一,也是新疆最重要的梨品種,被譽為“梨中珍品”“果中王子”[2],是培育新品種的重要資源[3]?!缢掷妗俏覈壳霸耘嘧顝V泛的早熟梨品種之一,具有優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、早熟、抗逆性強的特點[4]?!吕?號’是以‘庫爾勒香梨’為母本、‘早酥梨’為父本進行有性雜交培育的早熟梨新品種,具有早熟、優(yōu)質(zhì)、耐貯藏、貨架期長等優(yōu)點[5]。這些梨果實味甜多汁、清香爽口、酥脆少渣,且富含具有較強抗氧化活性的酚類物質(zhì),如綠原酸、蘆丁、表兒茶素、兒茶素等[6-8],深受廣大消費者的喜愛[3]。

    酚類物質(zhì)是植物重要的次生代謝產(chǎn)物之一[9],廣泛存在于果蔬中,參與果蔬風味、色澤等感官品質(zhì)的形成[10],還參與貯藏和加工過程中的褐變[11],具有清除機體內(nèi)自由基、抗脂質(zhì)氧化及延緩機體衰老等生物活性功能[12-13]。目前很多學者在刺梨[14-15]、龍眼[16]、棗[17]、葡萄[18]等果實中開展了酚類物質(zhì)及抗氧化活性的研究。而‘庫爾勒香梨’‘早酥梨’和‘新梨7號’果實發(fā)育過程中酚類物質(zhì)及其抗氧化能力的變化規(guī)律還并不清楚。因此,本實驗以生長發(fā)育期‘庫爾勒香梨’‘早酥梨’及其雜交后代‘新梨7號’果實為試材,通過研究梨果實發(fā)育期間總黃酮、總酚、酚類物質(zhì)和抗氧化能力(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力和2,2’-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)陽離子自由基清除能力)的變化,并對其相關(guān)性進行分析,為進一步了解梨果實品質(zhì)的形成提供理論依據(jù),也為梨品質(zhì)調(diào)控、貯藏及產(chǎn)品開發(fā)利用等提供科學依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    ‘庫爾勒香梨’‘早酥梨’和‘新梨7號’果實為塔里木大學校內(nèi)種植,采用完全隨機設計,各品種分別選取樹勢一致、生長良好的具代表性的3 株樹,植株行距為2 m×4 m。于花后50 d開始采樣,每隔15 d定期從梨樹東、西、南、北和中心5個方位采集梨果實,每株樹采集大小均一、無病蟲害的10個果實,共30個果實,直至梨果實完全成熟,‘新梨7號’采摘至125 d,‘早酥梨’及‘庫爾勒香梨’采摘至170 d。采摘后的果實迅速裝入自封袋內(nèi),放入保溫箱帶回實驗室備用。‘新梨7號’和‘早酥梨’的幼果期是果實坐果到花后50 d,而‘庫爾勒香梨’果實的幼果期到花后65 d;‘新梨7號’和‘早酥梨’果實成熟期在花后110 d,‘庫爾勒香梨’果實的成熟期在花后155 d。

    熊果苷、兒茶素、綠原酸、表兒茶素、山柰酚-己糖-雙脫氧己糖苷、蘆丁、山柰酚-3-O-蕓香糖苷、槲皮葡萄糖苷、槲皮素鼠李糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷、異鼠李素-3-O-葡萄糖苷(均為色譜純) 阿拉丁試劑(上海)有限公司;草酸、酚酞、碳酸氫鈉、碳酸鈉 天津市致遠化學試劑有限公司;Folin-Ciocalteu試劑 上海荔達生物科技有限公司;甲醇(分析純和色譜純)、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉 上海源葉生物技術(shù)有限公司。其余試劑均為分析純。

    1.2 儀器與設備

    2695-2489高效液相色譜儀、C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm) 美國Waters公司;LC-20A液相色譜(配有RID20A檢測器) 日本島津公司;SHZ-82數(shù)顯回旋式水浴恒溫振蕩器 金壇市金南儀器制造有限公司;SB25-12DTD超聲波清洗機 寧波新芝生物科技股份有限公司;TGL-16M超低溫冷凍離心機湖南長沙湘儀檢測設備有限公司;TD-5A臺式低速離心機 湖南凱達科學儀器有限公司;CP224S電子天平北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司;UV-6100紫外-可見分光光度計 上海元析儀器有限公司;PT-3502C全波長酶標儀 北京普天新橋技術(shù)有限公司;FD5-3真空凍干機美國GOLD-SIM公司。

    1.3 方法

    1.3.1 樣品處理

    供試梨果實洗凈控干水分,每個果實橫切成2~3 mm厚片,選取中間部位果實(包括果皮、果肉和果核),置于超低溫冰箱(-80 ℃)預凍24 h,用真空凍干機干燥72 h,得到凍干梨片,用組織破碎機粉碎,置于-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.3.2 抗氧化物的提取

    準確稱取1.0 g梨果實凍干粉,置于50 mL離心管中,加體積分數(shù)80%甲醇溶液25 mL,常溫超聲(500 W)輔助提取30 min,3 500 r/min離心10 min,收集上清液,重復提取2 次,定容至25 mL。提取液用于總酚含量、總黃酮含量、DPPH自由基和ABTS陽離子自由基清除能力及多酚類物質(zhì)含量的測定。

    1.3.3 活性成分含量測定

    總酚含量、總黃酮含量及多酚類物質(zhì)含量的測定均參考Pu Yunfeng等[19]的方法并稍作修改。

    1.3.3.1 總酚含量的測定

    吸取0.2 mL提取液,加入10 mL體積分數(shù)80%甲醇溶液和0.3 mL 2 mol/L的Folin-Ciocalteu試劑,混勻后放置5 min,加入質(zhì)量分數(shù)15% Na2CO3溶液1.0 mL,混勻。常溫暗反應2 h,以體積分數(shù)80%甲醇溶液作空白對照,于746 nm波長處測定吸光度。以沒食子酸為標準品繪制標準曲線,通過標準曲線計算梨果實中總酚含量,結(jié)果以每克梨果實(以干質(zhì)量計)中所含沒食子酸質(zhì)量表示(單位為mg/g)。

    1.3.3.2 總黃酮含量的測定

    將5 mL提取液和0.5 mL質(zhì)量分數(shù)5% NaNO3溶液加入離心管中,搖勻,常溫反應6 min,加入0.5 mL質(zhì)量分數(shù)10% Al(NO3)3溶液,混勻后常溫反應6 min,加入質(zhì)量分數(shù)4% NaOH溶液4 mL,混勻并常溫反應20 min,在502 nm波長處測定樣品的吸光度。以蘆丁為標準品繪制標準曲線,通過標準曲線計算梨果實中總黃酮含量,結(jié)果以每克梨果實(以干質(zhì)量計)中所含蘆丁質(zhì)量表示(單位為mg/g)。

    1.3.4 抗氧化能力測定

    DPPH自由基和ABTS陽離子自由基清除能力的測定均參考Pu Yunfeng等[19]的方法并稍作修改。

    1.3.4.1 DPPH自由基清除能力測定

    吸取20 μL的提取液和200 μL DPPH溶液,在恒溫振蕩器中勻速振蕩反應30 min,于510 nm波長處測定樣品的吸光度。以Trolox為標準品繪制標準曲線,通過標準曲線計算梨果實中DPPH自由基清除能力,結(jié)果以每克梨果實(以干質(zhì)量計)中所含Trolox的物質(zhì)的量表示(單位為μmol/g)。

    1.3.4.2 ABTS陽離子自由基清除能力測定

    吸取20 μL的提取液和200 μL ABTS溶液于96 孔板中,在恒溫振蕩器中勻速振蕩反應10 min,在734 nm波長處測定樣品的吸光度,以Trolox為標準品繪制標準曲線,通過標準曲線計算梨果實中ABTS陽離子自由基清除能力,結(jié)果以每克梨果實(以干質(zhì)量計)中所含Trolox的物質(zhì)的量表示(單位為μmol/g)。

    1.3.5 酚類物質(zhì)含量的測定

    酚類物質(zhì)含量的測定參考Pu Yunfeng等[19]的方法并稍作修改。將提取液用0.45 μm微濾膜過濾到1.0 mL進樣瓶中,利用高效液相色譜儀測定酚類物質(zhì)含量,每個樣品重復測定3 次。流動相A:體積分數(shù)0.5%甲醇溶液,流動相B:乙腈;洗脫條件:0~5 min 95% A,5~30 min 95%~85% A,30~44 min 85%~76% A,44~50 min 76%~30% A,50~70 min 30%~10% A,70~75 min 10%~95% A。流速1.0 mL/min,檢測波長280 nm,進樣量10 μL,柱溫30 ℃。標準曲線繪制:準確稱取10 mg混合標準品,溶解于80%甲醇溶液中,定容至10 mL作為母液。將母液根據(jù)需要稀釋成不同質(zhì)量濃度,繪制標準曲線。樣品中的酚類物質(zhì)含量以梨果實干質(zhì)量計。

    1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

    采用Excel 2019軟件統(tǒng)計分析數(shù)據(jù),結(jié)果以平均值±標準差表示,采用SPSS 25統(tǒng)計軟件進行顯著性(單因素方差分析、Duncan新復極差法)和相關(guān)性分析(Pearson相關(guān)性分析法)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 生長發(fā)育期梨果實總酚及總黃酮含量變化

    果實的抗氧化性能是酚類物質(zhì)共同作用的結(jié)果,其中總酚和總黃酮發(fā)揮著非常重要的作用。由圖1可以看出,3 種梨果實總酚含量在花后50~95 d急劇下降,隨后呈緩慢波動下降的趨勢,其變化趨勢與蘋果梨[20]相似?;ê?0 d不同品種梨幼果期果實總酚含量普遍較高,但不同品種總酚含量存在一定差異,‘早酥梨’中總酚含量明顯高于其他兩個品種,達23.10 mg/g,‘庫爾勒香梨’和‘新梨7號’總酚含量分別為16.49 mg/g和15.61 mg/g。隨著果實的生長,花后95 d‘新梨7號’總酚含量降至最低,為4.41 mg/g,花后155 d‘庫爾勒香梨’和‘早酥梨’總酚含量降至最低,分別為2.56 mg/g和2.54 mg/g,此后均保持在較低水平直至果實成熟。

    圖1 梨果實生長發(fā)育期間總酚含量變化Fig. 1 Changes in total phenol content in pear fruit during development

    由圖2可知,3 種梨果實總黃酮含量與總酚含量變化趨勢類似,即在花后50~95 d急劇下降,隨后呈緩慢波動下降的趨勢。幼果期果實內(nèi)總黃酮含量普遍較高,‘早酥梨’中總黃酮含量明顯高于其他兩個品種,達32.25 mg/g,‘庫爾勒香梨’和‘新梨7號’總酚含量分別為26.20 mg/g和24.82 mg/g。隨著果實的生長,‘庫爾勒香梨’花后95 d總黃酮含量降至最低,為2.87 mg/g,此后在2.95~4.74 mg/g范圍內(nèi)變化;‘新梨7號’花后125 d總黃酮含量降至最低,為3.69 mg/g;‘早酥梨’在花后95~170 d總黃酮含量在4.57~9.93 mg/g范圍內(nèi)變化,其花后155 d總黃酮含量降至最低,為2.87 mg/g。

    圖2 梨果實生長發(fā)育期間總黃酮含量變化Fig. 2 Changes in total flavonoid content in pear fruit during development

    從整體看,在果實整個生長發(fā)育過程中,總酚和總黃酮含量大小均為‘早酥梨’>‘新梨7號’和‘庫爾勒香梨’。研究表明,總酚和總黃酮含量在同品種梨果的不同部位也存在差異,果皮中含量最高,其次為果心,果肉中的含量最低[21]。此外,總酚和總黃酮的高含量并不總能帶來品質(zhì)優(yōu)勢,其與果肉的褐變程度也有密切關(guān)系,總酚含量越高越容易引起褐變,影響其商品價值[22]。而多酚氧化酶是催化多酚褐變反應最主要的酶,因此為了保持果實的總酚與總黃酮含量,可以適當抑制多酚氧化酶的活性[23],提高果實的營養(yǎng)與商品價值。

    2.2 生長發(fā)育期梨果實抗氧化能力變化

    抗氧化能力是多酚類化合物最重要的功能性質(zhì)[20]。DPPH自由基和ABTS陽離子自由基是兩種非常穩(wěn)定并且?guī)в蓄伾娜斯ず铣勺杂苫?,當有供氫能力的抗氧化劑(如酚類)存在時,自由基可與質(zhì)子結(jié)合形成無色的中間產(chǎn)物,使自由基溶液逐漸褪色[24-25],吸光度變小。因此,可根據(jù)吸光度的變化評價抗氧化劑的活性。由圖3可知,花后50 d幼果期果實DPPH自由基清除能力普遍較高,‘早酥梨’中DPPH自由基清除能力明顯高于其他兩個品種,達到29.12 μmol/g,而‘庫爾勒香梨’和‘新梨7號’DPPH自由基清除能力分別為27.96 μmol/g和26.64 μmol/g。隨著果實的生長,花后95~170 d‘庫爾勒香梨’果實DPPH自由基清除能力均在3.87~7.33 μmol/g范圍內(nèi)變化,且差異不顯著(P>0.05),花后125 d‘庫爾勒香梨’果實DPPH自由基清除能力降至最低,比花后50 d果實DPPH自由基清除能力降低了86.16%;‘早酥梨’果實在花后95~170 d DPPH自由基清除能力在5.77~8.65 μmol/g范圍內(nèi)變化,且差異總體不顯著(P>0.05),花后170 d‘早酥梨’果實DPPH自由基清除能力降至最低,為5.77 μmol/g;‘新梨7號’果實在花后80 d后DPPH自由基清除能力在5.66~6.74 μmol/g范圍內(nèi)變化,且差異不顯著(P>0.05)。進一步觀察數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)在50~95 d之間,梨果的DPPH自由基清除能力急劇下降,且在此之后緩慢下降,這與果實總酚與總黃酮含量的變化趨勢相吻合。這一結(jié)果與連翹葉的相關(guān)研究結(jié)果[26]一致,說明多酚類化合物和黃酮類成分具有良好的清除自由基效果,是重要的抗氧化成分。

    圖3 梨果實生長發(fā)育期間DPPH自由基清除能力變化Fig. 3 Changes in DPPH radical-scavenging capacity in pear fruit during development

    由圖4可知,梨果實ABTS陽離子自由基清除能力因品種和生長發(fā)育時期不同而異,隨著果實的生長呈現(xiàn)先降低后升高再降低的變化趨勢。3 種梨果實ABTS陽離子自由基清除能力的峰值均出現(xiàn)在花后80 d,‘早酥梨’果實ABTS陽離子自由基清除能力最高,達80.74 μmol/g,而‘庫爾勒香梨’和‘新梨7號’果實ABTS陽離子自由基清除能力分別為64.47 μmol/g和55.19 μmol/g。‘早酥梨’在花后110~140 d ABTS陽離子自由基清除能力在9.83~11.29 μmol/g范圍內(nèi)變化,且差異不顯著(P>0.05),花后155 d果實ABTS陽離子自由基清除能力為6.45 μmol/g;‘新梨7號’在花后110 d后ABTS陽離子自由基清除能力在7.99~9.40 μmol/g范圍內(nèi)變化,且差異不顯著(P>0.05);花后125 d后‘庫爾勒香梨’果實ABTS陽離子自由基清除能力在6.10~7.59 μmol/g范圍內(nèi)變化。在本研究中,ABTS陽離子自由基清除能力的總體變化趨勢與DPPH自由基一致,均是在果實幼果期較高,在成熟時達到最低水平。ABTS陽離子自由基清除能力在果實發(fā)育早期呈現(xiàn)較大的波動,在花后80 d時達到最高水平,但DPPH自由基清除能力在花后80 d后僅是波動上升,在觀賞海棠果的研究[27]中也得到類似結(jié)果。這可能是因為梨果中部分抗氧化物質(zhì)對ABTS陽離子自由基清除能力要強于DPPH自由基。

    圖4 梨果實生長發(fā)育期間ABTS陽離子自由基清除能力變化Fig. 4 Changes in ABTS cation radical-scavenging capacity in pear fruit during development

    綜上,果實整個生長發(fā)育過程中,DPPH自由基清除能力和ABTS陽離子自由基清除能力為‘早酥梨’高于‘新梨7號’和‘庫爾勒香梨’,而‘新梨7號’和‘庫爾勒香梨’差異不明顯。

    2.3 生長發(fā)育期梨果實酚類物質(zhì)組成與含量變化

    酚類物質(zhì)是梨果實中具有抗氧化活性的主要成分。由表1可知,3 種梨果實中均檢測出熊果苷、兒茶素、綠原酸、表兒茶素、山柰酚-雙脫氧己糖苷、蘆丁、山柰酚-3-O-蕓香糖苷、槲皮葡萄糖苷、槲皮素鼠李糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷和異鼠李素-3-O-葡萄糖苷11 種酚類物質(zhì),且同種梨不同生長發(fā)育階段的酚類物質(zhì)含量均存在差異。隨著果實的生長,‘庫爾勒香梨’‘早酥梨’和‘新梨7號’果實的熊果苷、兒茶素、綠原酸、表兒茶素、槲皮葡萄糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷含量總體逐漸降低,均在花后50 d含量最高。整個生長發(fā)育過程中,梨果實的11 種酚類物質(zhì)中,熊果苷含量最高,平均值為5 797.82 μg/g;其次是綠原酸含量,平均值為1 781.02 μg/g;最少的是異鼠李素-3-O-葡萄糖苷,平均值為11.46 μg/g?!畮鞝柪障憷妗缢掷妗汀吕?號’果實幼果期熊果苷含量和綠原酸含量分別是成熟期的10.41、6.94 倍,13.32、19.08 倍和5.09、6.59 倍。從結(jié)果可以看出,不同酚類物質(zhì)的變化規(guī)律與幅度因品種不同而略有差異,這說明酚類物質(zhì)在不同梨果品種的代謝積累過程存在差異,同時也伴隨著果實膨大而造成的含量差異。因此,可進一步研究品種間的多酚物質(zhì)積累規(guī)律,為梨果的育種提供理論依據(jù)。

    表1 生長季梨果實酚類物質(zhì)組成與含量變化Table 1 Changes in phenolic composition and contents in pear fruit during development μg/g

    ‘早酥梨’果實熊果苷、兒茶素、表兒茶素和槲皮素鼠李糖苷含量均比‘庫爾勒香梨’高,分別均高出36.81%、37.66%、63.53%和25.37%。3 種梨果實山柰酚-雙脫氧己糖苷、蘆丁、山柰酚-3-O-蕓香糖苷和槲皮素鼠李糖苷含量在整個生長發(fā)育期波動較大,不同品種之間存在差異。其中,‘庫爾勒香梨’果實中山柰酚-雙脫氧己糖苷、蘆丁和山柰酚3-O-葡萄糖苷含量明顯高于‘早酥梨’和‘新梨7號’,分別高出64.30%和34.66%、85.72%和80.43%、89.61%和87.44%。整個生長發(fā)育期,‘庫爾勒香梨’槲皮素鼠李糖苷和異鼠李素-3-O-葡萄糖苷在花后140 d和155 d均未測出。從表1可以看出,梨果中熊果苷與綠原酸的含量遠超其他的多酚類物質(zhì)。其中在幼果期,‘早酥梨’的熊果苷含量遠高于‘庫爾勒香梨’與‘新梨7號’。因此‘早酥梨’的幼果可作為熊果苷的優(yōu)質(zhì)天然來源,其提取物還可應用于化妝品[28]。

    2.4 梨果實生長發(fā)育期總黃酮、總酚、酚類物質(zhì)含量與抗氧化活性的相關(guān)分析

    由表2可知,3 種梨果實中總黃酮、總酚、熊果苷、綠原酸、表兒茶素、槲皮葡萄糖苷和異鼠李素-3-O-葡萄糖苷含量與抗氧化活性(DPPH自由基清除能力和ABTS陽離子自由基清除能力)呈極顯著正相關(guān)(P<0.01),其中總黃酮、總酚、綠原酸含量與DPPH自由基清除能力的相關(guān)系數(shù)均大于0.9,且相關(guān)系數(shù)由大到小為總黃酮含量>總酚含量>綠原酸含量,這與曾少敏等[6]的報道基本一致,說明總黃酮、總酚對果實抗氧化活性起到極其重要的作用,尤其是酚類物質(zhì)中的綠原酸。梨果實DPPH自由基清除能力與兒茶素含量呈極顯著正相關(guān)(P<0.01),與槲皮素鼠李糖苷含量呈顯著正相關(guān)(P<0.05);梨果實ABTS陽離子自由基清除能力與槲皮素鼠李糖苷含量呈極顯著正相關(guān)(P<0.01),與兒茶素含量呈顯著正相關(guān)(P<0.05),說明即便DPPH與ABTS陽離子清除能力皆為抗氧化活性指標,但是不同的酚類物質(zhì)起到的作用也不盡相同,因此對于抗氧化活力的評價需要綜合分析。除此之外,山柰酚-雙脫氧己糖苷、蘆丁、山柰酚-3-O-蕓香糖苷和山柰酚-3-O-葡萄糖苷含量與抗氧化能力(DPPH自由基清除能力和ABTS陽離子自由基清除能力)的相關(guān)性均不顯著,說明這些酚類并不是果實抗氧化活性的主要貢獻者。以上結(jié)果可以解釋DPPH自由基和ABTS陽離子自由基清除能力在不同發(fā)育時期變化趨勢的差異,今后可以進一步研究各類抗氧化物質(zhì)對自由基的清除能力,以提高梨果的品質(zhì)。

    表2 梨果實生長發(fā)育期總酚、總黃酮、酚類物質(zhì)含量與抗氧化能力的相關(guān)性分析Table 2 Correlation coefficients between contents of total phenolics,total flavonoids, individual phenolics and antioxidant capacity in pear fruit during development

    3 討 論

    果實的抗氧化性能是酚類物質(zhì)共同作用的結(jié)果,而其中總酚和總黃酮發(fā)揮著非常重要的作用。本研究通過對比分析‘庫爾勒香梨’‘早酥梨’和‘新梨7號’果實生長發(fā)育期間總黃酮、總酚、熊果苷、兒茶素、表兒茶素、綠原酸等酚類物質(zhì)含量及抗氧化能力的變化,發(fā)現(xiàn)梨果實總酚含量、總黃酮含量、DPPH自由基清除能力在整個生長發(fā)育過程中呈逐漸降低的變化趨勢,在幼果期果實含量較高。幼果中酚類物質(zhì)對DPPH自由基具有較好的清除作用,且幼果DPPH自由基清除能力顯著高于成熟果,趙金偉等[20]也得出相似的研究結(jié)果,這可能與梨果實成熟時的酚類物質(zhì)大量向種子運輸有關(guān)。本研究表明梨果實總酚含量、總黃酮含量、DPPH自由基清除能力和ABTS陽離子自由基清除能力大小均為‘早酥梨’>‘新梨7號’和‘庫爾勒香梨’,說明‘早酥梨’抗氧化能力最強,這與李麗梅等[29]的報道一致,有關(guān)具體的抗氧化作用機理還需進一步研究。

    本研究中‘庫爾勒香梨’‘早酥梨’和‘新梨7號’隨著果實的生長,果實的熊果苷、兒茶素、綠原酸、表兒茶素、槲皮葡萄糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷和異鼠李素-3-O-葡萄糖苷含量逐漸降低,與總酚、總黃酮含量的變化趨于一致,且熊果苷和綠原酸含量是梨果實酚類物質(zhì)的主要成分,在梨果實酚類物質(zhì)含量中占有較高的比例,這與Cui Tong[28]和Lee[30]等的報道一致。史國安等[31]以‘黑沙梨’和‘紅沙梨’為試材進行研究,結(jié)果表明2 種沙梨果實含有豐富的類黃酮和綠原酸,具有顯著的羥自由基清除能力和較強的抗氧化活性。熊果苷具有止咳、抗菌、治療泌尿生殖道感染、抑制人類黑色素的生物合成等作用,在藥品及食品的開發(fā)應用中越來越受到關(guān)注。張小雙等[32]發(fā)現(xiàn)在‘早酥梨’和‘南果梨’中,除果肉和果心外,其他部位含量最高的酚類物質(zhì)均為熊果苷。本實驗發(fā)現(xiàn)‘早酥梨’中熊果苷是含量最高的酚類物質(zhì),‘早酥梨’果實熊果苷的含量比綠原酸含量高,這與黃怡等[33]的報道基本類似,他們以‘蘋果梨’‘早酥梨’和‘皇冠梨’果皮為試材研究其酚類物質(zhì),結(jié)果顯示8 種主要酚類物質(zhì)中熊果苷含量最高,其中‘早酥梨’的熊果苷含量最高。

    果實中總黃酮、總酚、熊果苷、綠原酸、表兒茶素、槲皮葡萄糖苷和異鼠李素-3-O-葡萄糖苷含量與抗氧化能力(DPPH自由基清除能力和ABTS陽離子自由基清除能力)呈極顯著正相關(guān)(P<0.01),表明這些酚類物質(zhì)是梨果實抗氧化活力的主要貢獻者。

    綜上,3 種梨幼果期酚類物質(zhì)及抗氧化能力較高,且梨果實酚類物質(zhì)最主要的成分為熊果苷及綠原酸,本研究明確了‘庫爾勒香梨’‘早酥梨’和‘新梨7號’3 種梨酚類物質(zhì)含量及抗氧化能力的變化規(guī)律,可為梨品質(zhì)調(diào)控、貯藏及產(chǎn)品開發(fā)利用等提供一定理論依據(jù)。

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