血清IL- 32γ、IL- 6 水平與維持性血液透析患者骨密度的關(guān)系研究

張向前，王雪俠

（1.河南電力醫(yī)院檢驗(yàn)科；2.鄭州市婦幼保健院檢驗(yàn)科，河南 鄭州 450052）

慢性腎病以超過3 個(gè)月的腎功能不全為主要特征，大多最終發(fā)展成為終末期腎病（ESRD）[1]。 維持性血液透析（MHD）是ESRD 患者腎臟替代治療的常用方法，能夠除毒素和多余液體，改善患者的預(yù)期壽命[2]。 MHD 誘發(fā)骨質(zhì)疏松、血管鈣化等各類并發(fā)癥，影響患者預(yù)后[3]。MHD 增加內(nèi)毒素內(nèi)流、反復(fù)感染和免疫激活風(fēng)險(xiǎn),并最終導(dǎo)致慢性全身性炎癥[4]。 研究表明，免疫與骨量流失密切相關(guān)，炎癥性骨病患者骨組織中白細(xì)胞介素（IL）32γ、IL-6 水平發(fā)生改變[5,6]。 本研究探討MHD 患者血清IL-32γ、IL-6 水平與骨密度之間的相關(guān)性，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2018年3月-2019年3月在我院接受MHD 治療的168 例ESRD 患者作為MHD 組（n=168）。另選取45 例性別、年齡匹配的健康體檢者作為對(duì)照組（n=45）。 MHD 組男96 例，女72 例；平均年齡54.38±3.32歲。 對(duì)照組男23 例，女22 例；平均年齡54.79±3.14歲。 患者納入標(biāo)準(zhǔn)：符合ESRD 臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；年齡≥18歲；病情穩(wěn)定，營養(yǎng)狀況較好；接受持續(xù)性MHD 治療≥6 個(gè)月，且每周治療2～3 次，4 h/次，Kt/v≥1.2；患者簽署該項(xiàng)研究的知情同意書。 排除標(biāo)準(zhǔn)：合并結(jié)核疾病、結(jié)締組織疾病者；肺癌骨轉(zhuǎn)移、骨腫瘤、骨髓瘤者；嚴(yán)重心、肝、肺功能障礙或衰竭者；合并局部或全身感染性、免疫系統(tǒng)疾病者；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎者； 甲狀腺功能異常、 內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂者。 本研究獲得我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 ⑴臨床資料收集： 收集研究對(duì)象性別，年齡，身體質(zhì)量指數(shù)（BMI），原發(fā)病情況，血壓，血糖，肝功能，血常規(guī)，尿常規(guī)，MHD 治療時(shí)間等臨床資料。⑵血清IL-32γ、IL-6 水平檢測：透析前，采集MHD 組患者空腹靜脈血，對(duì)照組于體檢時(shí)采集靜脈血，置于EDTA 抗凝采血管中，3000 r/min，離心15 min，離心半徑10 cm，收集上層血清。 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血清IL-32γ、IL-6 水平，嚴(yán)格按照試劑盒（美國Abcam 公司產(chǎn)品）進(jìn)行操作。 酶標(biāo)儀（美國Thermo 公司產(chǎn)品）檢測在450 nm 處的光密度，以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，光密度值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算血清IL-32γ、IL-6水平。 ⑶骨密度測定： 采用雙能X 射線骨密度儀（韓國MEDIKORS 公司產(chǎn)品）檢測研究對(duì)象的右跟骨骨密度。 研究對(duì)象取端坐位，將超聲耦合劑均勻涂抹在右足根部，將右足跟部固定在儀器的凹槽中，足跟保持不動(dòng)，操作儀器配套軟件進(jìn)行測量，儀器給出T 值。

1.3 分組 T 值≥-1 為骨密度正常組（n=33），-2.5＜T 值＜-1 為骨密降低組（n=90），T 值≤-2.5 為骨質(zhì)疏松組（n=45）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較用t檢驗(yàn)，多組間比較用方差分析；計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。 多因素分析采用Logistic 回歸分析。 采用Pearson 檢驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)分析。 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MHD 組與對(duì)照組血清IL-32γ、IL-6 水 平、T值比較 MHD 組血清IL-32γ 水平、T 值低于對(duì)照組，IL-6 水平高于對(duì)照組（P＜0.05），見表1。

表1 MHD 組與對(duì)照組血清IL- 32γ、IL- 6 水平、T 值比較

2.2 不同骨密度組一般臨床資料及生化指標(biāo)比較三組年齡、MHD 治療時(shí)間、 甲狀旁腺激素、 血清IL-32γ、血清IL-6、T 值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且隨T值降低年齡、MHD 治療時(shí)間、甲狀旁腺激素、血清IL-6 水平升高，血清IL-32γ 水平降低（P＜0.05），見表2。

2.3 影響MHD 患者骨密度降低的多因素Logistic回歸分析 將表2 中差異顯著的因素賦值為連續(xù)變量，并以之為自變量，納入多因素logistic 分析，結(jié)果顯示：MHD 治療時(shí)間、血清IL-32γ 水平、血清IL-6 水平是影響MHD 患者骨密度降低的相關(guān)因素（OR=1.781，6.514，2.440，P＜0.05），見表3。

表2 不同骨密度組一般臨床資料及生化指標(biāo)比較

表3 影響MHD 患者骨密度降低的多因素Logistic 回歸分析結(jié)果

2.4 血清IL-32γ、IL-6 水平與T 值之間的相關(guān)性分析 血清IL-32γ 水平與T 值正相關(guān)（r=0.653，P＜0.05）；血清IL-6 水平與T 值負(fù)相關(guān)（r=-0.379，P＜0.05）。

3 討論

長期的鈣磷代謝紊亂刺激甲狀旁腺分泌甲狀旁腺激素增多，甲狀旁腺激素具有成骨和破骨雙向作用，與骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生密切相關(guān)[8]。 慢性腎病患者體內(nèi)骨代謝異常，骨密度降低，骨質(zhì)疏松癥發(fā)生率較高，骨折、殘疾、死亡風(fēng)險(xiǎn)增加[9]。 IL-32γ、IL-6 在炎癥性骨病的發(fā)展中的作用逐漸被闡述，但二者與MDH 患者骨密度降低之間的關(guān)系仍未見報(bào)道。

IL-32γ 是一種炎癥性細(xì)胞因子，參與感染、腫瘤、 慢性炎癥和自身免疫性疾病的發(fā)生與發(fā)展[10]。IL-6 通過調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞分化介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，激活黏附分子等其他炎癥因子，加劇體內(nèi)炎癥反應(yīng)[11]。MDH 患者機(jī)體處于微炎癥狀態(tài)，細(xì)胞炎癥因子水平發(fā)生明顯改變。 本研究發(fā)現(xiàn)MHD 組患者血清IL-32γ 水平、T 值低于對(duì)照組，血清IL-6 水平高于對(duì)照組，表明MHD 患者骨密度、炎癥水平發(fā)生明顯改變。 研究表明，IL-32γ 能夠抑制成骨細(xì)胞形成，但過度骨侵蝕又能促進(jìn)成骨細(xì)胞形成，IL-32γ對(duì)骨骼的生成具有雙向作用[5]。一些學(xué)者認(rèn)為，IL-6能夠反映MHD 患者體內(nèi)微炎癥水平，可作為診斷微炎癥的標(biāo)志物[12]。 MHD 患者腎功能衰減，腎小球?yàn)V過功能下降，礦物質(zhì)謝異常，導(dǎo)致骨量減少，骨質(zhì)流失，引起骨關(guān)節(jié)畸形、骨痛和骨質(zhì)疏松[13]。 本案研究結(jié)果顯示，不同骨密度組患者血清IL-32γ、血清IL-6 水平差異顯著，血清IL-32γ 水平與T 值正相關(guān)，血清IL-6 水平與T 值負(fù)相關(guān)，表明血清IL-32γ、IL-6 水平與MHD 患者骨密度降低可能有關(guān)。對(duì)可能影響骨密度降低的因素進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示MHD 治療時(shí)間、血清IL-32γ水平、 血清IL-6 水平是影響MHD 患者骨密度降低的相關(guān)因素。 MHD 治療時(shí)間越長, 血清中甲狀旁腺激素水平越高，活化破骨細(xì)胞，骨吸收增強(qiáng)，骨密度降低[14]。 較高水平的IL-32γ 促進(jìn)骨形成、增強(qiáng)成骨細(xì)胞的分化，IL-32γ 水平降低這種影響受到限制[15]。 IL-6 具有抑制成骨細(xì)胞分化的功能，其水平升高，成骨細(xì)胞數(shù)量減少，活性降低[16]。

綜上所述，MHD 患者骨密度降低，血清IL-32γ、IL-6 水平是MHD 患者骨密度降低的相關(guān)影響因素。 因此，對(duì)MHD 患者行骨密度和血清IL-32γ、IL-6 水平檢查，早期進(jìn)行干預(yù)和治療，能夠一定程度降低骨折發(fā)生率，改善患者生活質(zhì)量。